目的:研究钾双孔域通道亚家族K成员1(potassium two pore domain channel subfamily K member 1,KCNK1)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)中的表达、与患者临床病理参数的关系及促进PTC细胞转移能力的作用机制。方法:收...目的:研究钾双孔域通道亚家族K成员1(potassium two pore domain channel subfamily K member 1,KCNK1)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)中的表达、与患者临床病理参数的关系及促进PTC细胞转移能力的作用机制。方法:收集我院2019年1月至2020年12月从PTC患者切除的癌组织及癌旁组织85例。采用免疫组织化学(IHC)检测PTC癌和癌旁组织中KCNK1的表达,并分析其表达水平与患者临床病理参数及预后的关系。Western-blot检测KCNK1在PTC各细胞系(KTC-1,IHH-4,TPC-1)中的表达,选择KCNK1高表达的PTC细胞系TPC-1分为shNC组、shKCNK1-1组和shKCNK1-2组,Western-blot检测各组细胞中KCNK1的表达;Transwell实验和划痕实验检测各组细胞转移能力;Western-blot检测各组细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达;shNC组和shKCNK1-1组差异表达基因采用全转录组测序技术分析,并进行KEGG信号通路富集;Western-blot和功能实验检测KCNK1对PI3K/AKT信号通路的调控作用。结果:与癌旁组织相比,PTC组织中KCNK1阳性率增加(50.59%VS 21.18%;χ^(2)=15.98,P=0.000),KCNK1阳性率在淋巴结转移、癌浸润周围组织和TNM分期晚期的PTC患者中表达增加(P<0.05),KCNK1阳性表达的PTC患者预后较差(复发转移率34.88%VS 14.29%;χ^(2)=4.842,P=0.028)。与人正常的甲状腺滤泡上皮细胞系Nthyori3-1相比,KCNK1在PTC细胞系中表达增加,在TPC-1细胞中的表达最高(P<0.05)。TPC-1细胞转染KCNK1敲减慢病毒,与shNC组相比,shKCNK1-1组和shKCNK1-2组细胞中KCNK1蛋白表达降低(P<0.05),shKCNK1-1组和shKCNK1-2组细胞转移能力降低(P<0.05),KEGG信号通路富集分析显示shNC组和shKCNK1-1组差异表达基因富集在PI3K/AKT信号通路,与shNC组相比,shKCNK1-1组细胞中pPI3K,pAKT蛋白表达降低(P<0.05)。AKT激动剂SC79激活shKCNK1-1组细胞PI3K/AKT信号通路活性,可以减弱敲减KCNK1对PTC细胞转移能力的抑制作用(P<0.05)。结论:KCNK1在PTC中表达增加,与临床病理参数及不良预后相关,敲减KCNK1抑制PI3K/AKT信号通路抑制PTC细胞转移能力。展开更多
目的探讨钾双孔域通道亚家族K成员1(potassium two pore domain channel subfamily K member 1,KCNK1)在肺癌中的功能及其作用机制。方法利用TCGA数据分析KCNK1在肺癌组织中的表达水平,在H1299和H1975中用克隆形成实验检测KCNK1基因敲...目的探讨钾双孔域通道亚家族K成员1(potassium two pore domain channel subfamily K member 1,KCNK1)在肺癌中的功能及其作用机制。方法利用TCGA数据分析KCNK1在肺癌组织中的表达水平,在H1299和H1975中用克隆形成实验检测KCNK1基因敲减后对肺腺癌细胞增殖的影响,探讨KCNK1在肺腺癌细胞增殖中的作用,并用CCK8等细胞增殖、转移实验进一步验证其功能;将KCNK1干扰后,用Western blot和qPCR实验检测下游通路基因以分析KCNK1基因可能的作用机制。结果KCNK1基因在肺癌组织与癌旁组织相比表达显著升高(P<0.05),且KCNK1敲减后抑制细胞增殖和转移;干扰KCNK1可以抑制CREB3及靶基因的表达水平。结论KCNK1基因在肺癌的恶性进展中起重要的作用,该作用通过调控环磷酸腺苷反应元件结合蛋白3(CREB3)机制进行,KCNK1基因是肺癌新的潜在分子诊断指标及靶点。展开更多
文摘目的:研究钾双孔域通道亚家族K成员1(potassium two pore domain channel subfamily K member 1,KCNK1)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)中的表达、与患者临床病理参数的关系及促进PTC细胞转移能力的作用机制。方法:收集我院2019年1月至2020年12月从PTC患者切除的癌组织及癌旁组织85例。采用免疫组织化学(IHC)检测PTC癌和癌旁组织中KCNK1的表达,并分析其表达水平与患者临床病理参数及预后的关系。Western-blot检测KCNK1在PTC各细胞系(KTC-1,IHH-4,TPC-1)中的表达,选择KCNK1高表达的PTC细胞系TPC-1分为shNC组、shKCNK1-1组和shKCNK1-2组,Western-blot检测各组细胞中KCNK1的表达;Transwell实验和划痕实验检测各组细胞转移能力;Western-blot检测各组细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达;shNC组和shKCNK1-1组差异表达基因采用全转录组测序技术分析,并进行KEGG信号通路富集;Western-blot和功能实验检测KCNK1对PI3K/AKT信号通路的调控作用。结果:与癌旁组织相比,PTC组织中KCNK1阳性率增加(50.59%VS 21.18%;χ^(2)=15.98,P=0.000),KCNK1阳性率在淋巴结转移、癌浸润周围组织和TNM分期晚期的PTC患者中表达增加(P<0.05),KCNK1阳性表达的PTC患者预后较差(复发转移率34.88%VS 14.29%;χ^(2)=4.842,P=0.028)。与人正常的甲状腺滤泡上皮细胞系Nthyori3-1相比,KCNK1在PTC细胞系中表达增加,在TPC-1细胞中的表达最高(P<0.05)。TPC-1细胞转染KCNK1敲减慢病毒,与shNC组相比,shKCNK1-1组和shKCNK1-2组细胞中KCNK1蛋白表达降低(P<0.05),shKCNK1-1组和shKCNK1-2组细胞转移能力降低(P<0.05),KEGG信号通路富集分析显示shNC组和shKCNK1-1组差异表达基因富集在PI3K/AKT信号通路,与shNC组相比,shKCNK1-1组细胞中pPI3K,pAKT蛋白表达降低(P<0.05)。AKT激动剂SC79激活shKCNK1-1组细胞PI3K/AKT信号通路活性,可以减弱敲减KCNK1对PTC细胞转移能力的抑制作用(P<0.05)。结论:KCNK1在PTC中表达增加,与临床病理参数及不良预后相关,敲减KCNK1抑制PI3K/AKT信号通路抑制PTC细胞转移能力。
文摘目的探讨钾双孔域通道亚家族K成员1(potassium two pore domain channel subfamily K member 1,KCNK1)在肺癌中的功能及其作用机制。方法利用TCGA数据分析KCNK1在肺癌组织中的表达水平,在H1299和H1975中用克隆形成实验检测KCNK1基因敲减后对肺腺癌细胞增殖的影响,探讨KCNK1在肺腺癌细胞增殖中的作用,并用CCK8等细胞增殖、转移实验进一步验证其功能;将KCNK1干扰后,用Western blot和qPCR实验检测下游通路基因以分析KCNK1基因可能的作用机制。结果KCNK1基因在肺癌组织与癌旁组织相比表达显著升高(P<0.05),且KCNK1敲减后抑制细胞增殖和转移;干扰KCNK1可以抑制CREB3及靶基因的表达水平。结论KCNK1基因在肺癌的恶性进展中起重要的作用,该作用通过调控环磷酸腺苷反应元件结合蛋白3(CREB3)机制进行,KCNK1基因是肺癌新的潜在分子诊断指标及靶点。
