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Simultaneous determination of four active components in Alisma orientale (Sam.) Juz. by HPLC–DAD using a single reference standard 被引量:8
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作者 Yao-Wen Zhang Qing Li +3 位作者 Chun-Xiao Lv Xiu-Jia Liu Xiao-Hui Chen Kai-Shun Bi 《Journal of Pharmaceutical Analysis》 SCIE CAS 2015年第2期85-92,共8页
A rapid, simple and practical high-performance liquid chromatography method coupled with diode array detector(HPLC–DAD) was developed to evaluate the quality of Alisma orientale(Sam.) Juz.through a simultaneous d... A rapid, simple and practical high-performance liquid chromatography method coupled with diode array detector(HPLC–DAD) was developed to evaluate the quality of Alisma orientale(Sam.) Juz.through a simultaneous determination of four major active triterpenes using a single standard to determine the multi-components(SSDMCs). Alisol B 23-acetate was selected as the reference compound for calculating the relative response factors. All calibration curves showed good linearity(R240.9998) within test ranges. RSDs for intra- and inter-day of four analytes were less than 3.6% and 2.3%; the overall recovery was 92.1–110.2%(SSDMC). The proposed method was successfully applied to quantify the four components in 20 samples from different localities in China. Moreover, significant variations were demonstrated in the content of these compounds. In addition, hierarchical clustering analysis(HCA) and principal components analysis(PCA) were performed to differentiate and classify the samples based on the contents of Alisol C 23-acetate, Alisol A, Alisol A 24-acetate and Alisol B 23-acetate. This simple,rapid, low-cost and reliable HPLC–DAD method using SSDMC is suitable for routine quantitative analysis and quality control of A. orientale(Sam.) Juz. 展开更多
关键词 SSDMC Alisma orientale(Sam.) juz Quality control HCA PCA
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A UFLC/MS/MS method for simultaneous quantitation of alisol A and alisol B 23-acetate from Alisma orientale (Sam.) Juz. in rat plasma 被引量:2
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作者 Yaowen Zhang Qing Li +2 位作者 Chunxiao Lv Yidi Yin Kaishun Bi 《Asian Journal of Pharmaceutical Sciences》 SCIE CAS 2014年第5期279-285,共7页
A sensitive and reliable ultra fast liquid chromatography tandem mass spectrometry(UFLC-MS/MS)method has been developed and validated for simultaneous quantitation of alisol A and alisol B 23-acetate from Alisma orien... A sensitive and reliable ultra fast liquid chromatography tandem mass spectrometry(UFLC-MS/MS)method has been developed and validated for simultaneous quantitation of alisol A and alisol B 23-acetate from Alisma orientale(Sam.)Juz.in rat plasma using diazepam as an internal standard(IS).The plasma samples were extracted by liquideliquid extraction with methyl tert-butyl ether and separated on a Venusil MP C18 column(100 mm×2.1 mm,3.0 mm)(Venusil,China)using gradient elution with the mobile phase consisting of methanol and 0.1%acetic acid in water at a flow rate of 0.4 ml/min.The two analytes were monitored with positive electrospray ionization by multiple reaction monitoring mode(MRM).The lower limit of quantitation was 5.00 ng/ml for alisol A and 5.00 ng/ml for alisol B 23-acetate.The calibration curves were linear in the range of 5.00 e2500 ng/ml for alisol A and 5e2500 ng/ml for alisol B 23-acetate.The mean extraction recoveries were above 63.8%for alisol A and 68.0%for alisol B 23-acetate from biological matrixes.Both intra-day and inter-day precision and accuracy of analytes were well within acceptance criteria(15%).The validated method was successfully applied to the pharmacokinetic study of alisol A and alisol B 23-acetate in rat plasma after oral administration of alcohol extract of Alismatis Rhizoma. 展开更多
关键词 PHARMACOKINETICS Alisol A Alisol B 23-acetate UFLC-MS/MS Alisma orientale(Sam.)juz
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基于HPLC指纹图谱和多指标含量测定的白毛银露梅质量评价
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作者 崔小敏 张红 +3 位作者 任慧 鲁文静 胡静 陈志永 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第12期144-148,I0007,共6页
目的建立白毛银露梅的高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱并测定5种指标性成分(仙鹤草素、异槲皮苷、鞣花酸、槲皮苷和萹蓄苷)的含量。方法采用Agilent核壳色谱柱Poroshell 120 SB-C_(18)色谱柱(150 mm... 目的建立白毛银露梅的高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱并测定5种指标性成分(仙鹤草素、异槲皮苷、鞣花酸、槲皮苷和萹蓄苷)的含量。方法采用Agilent核壳色谱柱Poroshell 120 SB-C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,2.7μm)进行分离,以乙腈-甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为254 nm。结果建立了白毛银露梅的HPLC指纹图谱,共标定了16个共有峰。采用对照品逐一比对指认了其中6个共有峰,分别为木麻黄鞣亭、仙鹤草素、异槲皮苷、鞣花酸、槲皮苷和萹蓄苷;采用轨道阱高分辨质谱鉴定了另外3个共有峰,分别为槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷、鼠李素-木糖苷和鼠李素-鼠李糖苷。10批白毛银露梅的相似度为0.817~0.998。测定了仙鹤草素、异槲皮苷、鞣花酸、槲皮苷和萹蓄苷5种指标性成分的含量,其中仙鹤草素的平均含量高达99.91 mg/g。结论建立的指纹图谱和含量测定方法简便、可靠,可为白毛银露梅质量评价提供科学依据。 展开更多
关键词 白毛银露梅 指纹图谱 仙鹤草素 含量测定 质量评价
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基于化学成分-活性的白毛银露梅产地干燥加工方法研究
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作者 崔小敏 陈志永 +4 位作者 张红 鲁文静 任慧 胡静 陈娟 《中南药学》 2025年第8期2277-2282,共6页
目的考察不同干燥加工方法对白毛银露梅化学成分和体外降糖活性的影响,优选白毛银露梅适宜的干燥加工方法。方法分别采用自然阴干、炒干、晒干、不同温度(40、60、80℃)热风烘干、100℃蒸汽杀青处理后60℃热风烘干(杀青时长分别为60、12... 目的考察不同干燥加工方法对白毛银露梅化学成分和体外降糖活性的影响,优选白毛银露梅适宜的干燥加工方法。方法分别采用自然阴干、炒干、晒干、不同温度(40、60、80℃)热风烘干、100℃蒸汽杀青处理后60℃热风烘干(杀青时长分别为60、120、180 s)的方法对白毛银露梅鲜品进行干燥加工。以不同干燥方法处理的样品的感官审评分数、总黄酮和总酚含量、5种特征化学成分含量(仙鹤草素、异槲皮苷、鞣花酸、槲皮苷和萹蓄苷)以及α-葡萄糖苷酶抑制活性为评价指标,采用熵权-TOPSIS法综合评价白毛银露梅不同干燥加工方法的优劣。结果100℃蒸汽杀青180 s后60℃热风烘干的白毛银露梅综合品质最佳,其次是炒干,40℃热风直接烘干处理的样品综合品质相对最低。结论本研究为白毛银露梅资源的合理开发利用提供了科学依据。 展开更多
关键词 白毛银露梅 干燥方法 化学成分 α-葡萄糖苷酶抑制活性 熵权-TOPSIS
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新疆芳香和帕米尔新塔花精油组成及其抗氧化的研究(英文) 被引量:5
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作者 邢思雷 张丕鸿 +2 位作者 计巧灵 贾红丽 王雪华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第7期154-159,共6页
优化水蒸气蒸馏法提取新疆芳香和帕米尔两种新塔花挥发油的最佳条件,利用气相色谱-质谱联用技术分析两种新塔花挥发油的化学成分和组成,研究两种新塔花挥发油的抗氧化能力。从芳香新塔花的地上部分提取的挥发油中分离鉴定出10种成分,占... 优化水蒸气蒸馏法提取新疆芳香和帕米尔两种新塔花挥发油的最佳条件,利用气相色谱-质谱联用技术分析两种新塔花挥发油的化学成分和组成,研究两种新塔花挥发油的抗氧化能力。从芳香新塔花的地上部分提取的挥发油中分离鉴定出10种成分,占挥发油总量的99.7%以上。芳香新塔花的主要成分为长叶薄荷酮(80.7%)、薄荷酮(8.3%)、胡椒烯酮(4.9%)及异薄荷酮(2.6%)。从帕米尔新塔花的地上部分提取的挥发油中分离鉴定出29种成分,占挥发油总量的99.8%以上。帕米尔新塔花精油中主要含有长叶薄荷酮(45.9%)、异薄荷酮(24.1%)、(+)-新薄荷醇(10.1%)和百里香酚(9.4%)。通过与百里香酚,VC和BHT的对比,新塔花精油具有一定的抗氧化能力,能够有效清除DPPH·,超氧阴离子自由基和羟自由基;能够保护脂质体,抑制其过氧化;并且具有明显的清除亚硝酸盐的作用。结果表明,帕米尔新塔花精油的抗氧化效果优于芳香新塔花精油。 展开更多
关键词 芳香新塔花 帕米尔新塔花 精油 GC-MS分析 抗氧化活性
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黑三棱苯丙氨酸解氨酶基因克隆与序列分析 被引量:4
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作者 高杰 谷巍 +2 位作者 周娟娟 吴启南 巢建国 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期403-409,共7页
目的对连接黑三棱初生代谢及次生代谢途径的关键酶苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)进行基因全长的克隆和生物学信息分析。方法以黑三棱总RNA为模板,采用同源克隆法和RACE技术克隆黑三棱PAL基因的cDNA全长,并通过DNAMA... 目的对连接黑三棱初生代谢及次生代谢途径的关键酶苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)进行基因全长的克隆和生物学信息分析。方法以黑三棱总RNA为模板,采用同源克隆法和RACE技术克隆黑三棱PAL基因的cDNA全长,并通过DNAMAN软件和ExPASy在线分析等方法对其生物信息学进行分析。结果获得黑三棱PAL基因全长cDNA,GenBank注册号为KF633470,序列分析表明,所克隆的cDNA全长为2 413 bp,包含一个2 151 bp的开放阅读框架,编码716个氨基酸的蛋白。预测该蛋白的相对分子质量为1.98×105,等电点为4.84,无信号肽,含有PAL酶活性中心序列GTITASGDLVPLSYIAG。结论首次克隆并获得黑三棱PAL基因全长cDNA,为黑三棱药效成分生源合成途径的阐明和改善中药材品质提供科学依据。 展开更多
关键词 黑三棱 苯丙氨酸解氨酶 基因克隆 信号肽 生物信息学分析
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芳香新塔花总黄酮通过调控PPARγ/LXRα/ABCA1通路对ApoE^(-/-)动脉粥样硬化小鼠肝脏脂质代谢紊乱的影响 被引量:5
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作者 叶丹 马晓宇 +2 位作者 钊浩然 乔会林 张选明 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期3577-3582,共6页
目的探究芳香新塔花总黄酮对ApoE^(-/-)动脉粥样硬化小鼠肝脏脂质代谢及对PPARγ/LXRα/ABCA1通路的影响。方法60只ApoE^(-/-)小鼠给予高脂饲料喂养8周后随机分为模型组、阿托伐他汀组(3 mg/kg)及芳香新塔花总黄酮低、中、高剂量组(25... 目的探究芳香新塔花总黄酮对ApoE^(-/-)动脉粥样硬化小鼠肝脏脂质代谢及对PPARγ/LXRα/ABCA1通路的影响。方法60只ApoE^(-/-)小鼠给予高脂饲料喂养8周后随机分为模型组、阿托伐他汀组(3 mg/kg)及芳香新塔花总黄酮低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg),每组12只。灌胃给予相应剂量药物干预12周,给药同时继续饲喂高脂饲料;另取12只C57BL/6J小鼠为空白组,灌胃给予生理盐水,同时喂养普通饲料。给药结束后,油红O染色观察肝组织脂质沉积情况,HE染色观察主动脉斑块形态,全自动生化分析仪检测血脂水平,ELISA法检测血清IL-18、IL-1β、MCP-1水平,试剂盒检测肝组织TC、TG、NEFA、FC水平,Western blot法检测肝组织PPARγ、LXRα、ABCA1、ABCG1蛋白表达。结果与空白组比较,模型组肝脏脂滴面积增加(P<0.01),血清TC、TG、LDL-C、IL-18、IL-1β、MCP-1水平和肝组织TC、TG、NEFA、FC水平均升高(P<0.05,P<0.01),血清HDL-C水平和肝组织PPARγ、LXRα、ABCA1、ABCG1蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,阿托伐他汀组和总黄酮中、高剂量组上述指标均有改善(P<0.05,P<0.01)。结论芳香新塔花总黄酮可抑制ApoE^(-/-)动脉粥样硬化小鼠肝脏脂质代谢水平,其机制可能与激活PPARγ/LXRα/ABCA1通路有关。 展开更多
关键词 芳香新塔花总黄酮 ApoE^(-/-)小鼠 动脉粥样硬化 肝脏脂质代谢 PPARγ/LXRα/ABCA1通路
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黄岑属植物化学研究——Ⅳ.薄叶黄芩中葡萄糖醛酸黄酮甙的高效液相色谱(英文) 被引量:1
8
作者 王永奇 松崎桂一 +2 位作者 高桥邦夫 奥山徹 柴田承二 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第5期358-361,共4页
在薄叶黄芩成分分离的过程中,用反相HPLC分离葡萄糖醛酸黄酮甙,包括柱和溶媒系统等的条件选择:并发现当羟基和葡萄糖醛酸基的取代位置不同时,其保留时间的变化规律(简称构保关系)。例如,当羟基从4位变化到2位时,保留时间增大:2′,6,8位... 在薄叶黄芩成分分离的过程中,用反相HPLC分离葡萄糖醛酸黄酮甙,包括柱和溶媒系统等的条件选择:并发现当羟基和葡萄糖醛酸基的取代位置不同时,其保留时间的变化规律(简称构保关系)。例如,当羟基从4位变化到2位时,保留时间增大:2′,6,8位羟基的存在,保留时间依次增大;而当葡萄糖醛酸基从7位变化到8位时,保留时间相应变小。有人提出在相同位置上都存在有羟基的黄酮类化合物在一起时,是用HPLC不能得到很好分离的“临界群”,如易与羰基形成内氢键的5位羟基。本文方法解决了这一问题,成功地分离到的7个葡萄糖醛酸黄酮甙,5位都存在有羟基。本文还介绍了两种不同型号的ODS柱对分离葡萄糖醛酸黄酮甙的效果。 展开更多
关键词 黄芩 化学成分 高效液相色谱
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泽泻ISSR反应体系的建立与优化 被引量:1
9
作者 何天友 瞿印权 +3 位作者 徐雯 陈凌艳 荣俊冬 郑郁善 《安徽农学通报》 2017年第7期23-26,100,共5页
目的:建立并优化泽泻反应体系和扩增程序,筛选出多态性、重复性较好的ISSR引物,为泽泻种源鉴别以及指纹图谱的构建提供理论基础。方法:利用单因素试验法,对Mg^(2+)浓度、dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度及模板DNA含量这5个PCR反... 目的:建立并优化泽泻反应体系和扩增程序,筛选出多态性、重复性较好的ISSR引物,为泽泻种源鉴别以及指纹图谱的构建提供理论基础。方法:利用单因素试验法,对Mg^(2+)浓度、dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度及模板DNA含量这5个PCR反应体系主要成分以及退火温度进行筛选,并利用建立优化的反应体系和扩增程序对以往泽泻文献报道的ISSR引物进行筛选。结果:建立了最佳PCR反应体系:20μL的反应液中含2.0mmol·L^(-1)Mg^(2+),0.4mmol·L^(-1)d NTPs,1.0 U Taq DNA聚合酶,0.4mol·L^(-1)引物,10ng模板DNA,2μL10x Buffer,13.1μL dd H_2O。反应程序为:94℃预变性5min;94℃变性45s。58.9℃退火45s,72℃延伸90s,40个循环;72℃延伸7min,4℃保存。结论:利用优化的泽泻的反应体系,筛选出15条多态性较好的引物,并对泽泻的21个种源进行ISSR扩增,扩增出的条带清晰、多态性较高,证实了该体系具有较高稳定性、重现性和适用性。此体系也为泽泻种源间的遗传多样性研究以及ISSR分子标记奠定了基础。 展开更多
关键词 泽泻 ISSR 反应体系 优化
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新塔花的组织培养与快速繁殖 被引量:9
10
作者 马丽娜 何江 李冠 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1349-1355,共7页
以新疆特有药用植物新塔花(Ziziphora bungeana Juz.)幼嫩茎段为外植体材料,筛选初代培养、继代增殖与生根培养的条件,建立了新塔花组织培养与快速繁殖体系。结果表明:新塔花种子最适萌发培养基为MS+0.25 mg·L^(-1) NAA,萌发率达57... 以新疆特有药用植物新塔花(Ziziphora bungeana Juz.)幼嫩茎段为外植体材料,筛选初代培养、继代增殖与生根培养的条件,建立了新塔花组织培养与快速繁殖体系。结果表明:新塔花种子最适萌发培养基为MS+0.25 mg·L^(-1) NAA,萌发率达57.78%;茎段诱导腋芽最适培养基为MS+0.5 mg·L^(-1) 6-BA+0.1 mg·L^(-1) NAA,诱导率为90.47%;适宜芽增殖培养基为MS+0.5 mg·L^(-1 )6-BA+0.1 mg·L^(-1) NAA+0.3 mg·L^(-1) GA_3+35 g·L^(-1)蔗糖,20 d增殖系数达1.95;最佳诱导根生长培养基为1/2MS+0.5 mg·L^(-1) NAA+0.2%AC,生根率达60%,平均生根数为3.5,20 d株高达4.5 cm。移栽至混合基质(营养土:珍珠岩:蛭石=1:1:1)中,组培苗成活率为80.45%。 展开更多
关键词 新塔花 组织培养 快速繁殖 茎段
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新塔花实时定量PCR内参基因的筛选和验证 被引量:1
11
作者 王兆丰 马艺沔 +2 位作者 李勇 何江 杨伟俊 《中药材》 CAS 北大核心 2020年第3期569-574,共6页
目的:筛选出新塔花在不同组织(根、茎、叶、花)及脱落酸(ABA)处理不同时间的叶片中表达相对稳定的内参基因。方法:从新塔花转录组数据中搜索到5个看家基因ZbIF3G1、ZbGAPDH1、ZbEF1γ、ZbUBC9、ZbTUBα,将其作为新塔花相对实时定量PCR... 目的:筛选出新塔花在不同组织(根、茎、叶、花)及脱落酸(ABA)处理不同时间的叶片中表达相对稳定的内参基因。方法:从新塔花转录组数据中搜索到5个看家基因ZbIF3G1、ZbGAPDH1、ZbEF1γ、ZbUBC9、ZbTUBα,将其作为新塔花相对实时定量PCR候选内参基因,并设计内参引物。利用实时荧光定量PCR获得5个候选内参基因的Ct值,通过3种基于不同算法的软件(GeNorm、NormFinder和BestKeeper)对内参基因稳定性进行分析。结果:ZbGAPDH1、ZbEF1γ的表达相对更为稳定,适合作为新塔花不同组织及ABA处理的基因表达研究的内参基因,并用新塔花ZbFLS、ZbCHI基因的表达分析实验进一步验证了上述预测。结论:确定ZbGAPDH1与ZbEF1γ为适合用于新塔花定量分析的内参基因,该研究为新塔花后续相关基因表达研究奠定了基础。 展开更多
关键词 新塔花 内参基因 实时定量PCR ABA处理 组织表达
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新塔花查耳酮合成酶基因克隆及表达分析 被引量:3
12
作者 程波 满尔哈巴·海如拉 何江 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3134-3141,共8页
目的克隆新塔花Ziziphora bungena黄酮类化合物生物合成途径中关键酶查耳酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因,对其进行组织表达特异性分析,构建原核表达载体并进行重组蛋白诱导表达。方法结合新塔花转录组数据设计特异性引物,通过RT-... 目的克隆新塔花Ziziphora bungena黄酮类化合物生物合成途径中关键酶查耳酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因,对其进行组织表达特异性分析,构建原核表达载体并进行重组蛋白诱导表达。方法结合新塔花转录组数据设计特异性引物,通过RT-PCR克隆新塔花查耳酮合成酶zbCHS基因,对其进行生物信息学分析,通过RT-PCR进一步分析其组织表达特异性,构建原核表达载体pET28a-chs,并转化至BL21(DE3)感受态细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达。结果zbCHS基因长1226 bp,包含一个长度为1176 bp的开放阅读框,编码319个氨基酸,其理论相对分子质量为42848.37。该编码蛋白定位于细胞质中,不存在跨膜区及信号肽,为非分泌蛋白,有1个糖基化位点和31个磷酸化位点。α-螺旋是该蛋白多肽链中大量的结构元件,散布于整个肽链之中。系统进化树分析表明,新塔花zbCHS基因与丹参、藿香、紫苏等亲缘关系最为接近。RT-PCR结果显示zbCHS基因在各组织中均有所表达,在叶中表达量较高,花相对表达量次之,根、茎中表达量相对较低。原核表达载体pET28a-chs在BL21(DE3)感受态细胞表达系统中,经IPTG诱导后,有明显的重组蛋白表达,其相对分子质量为42800,与预测相符合。结论通过对zbCHS基因的全长cDNA克隆、组织表达特异性分析和原核表达载体的构建,为进一步研究zbCHS基因在新塔花黄酮类化合物生物合成与基因调控提供依据,最终为该药材品质的提升奠定基础。 展开更多
关键词 新塔花 查耳酮合成酶 基因克隆 RT-PCR 原核表达
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