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TRIP13基因mRNA在慢性淋巴细胞白血病B淋巴细胞的表达及其调控JVM-2细胞增殖和凋亡的分子机制探讨 被引量：6
1
作者 周可树 张青 +5 位作者 张文涛 刘燕燕 吴胜胜 周健 魏旭东 宋永平 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期618-622,共5页
【摘要】目的探讨甲状腺激素受体相互作用分子13（TRIP13）基因表达和慢性淋巴细胞白血病（CLL）的相关性，验证TRIP13基因在CLL发生发展中发挥的生物学功能，探讨TRIP13基因调控CLL发生发展的下游分子机制。方法①应用实时荧光定量PCR... 【摘要】目的探讨甲状腺激素受体相互作用分子13（TRIP13）基因表达和慢性淋巴细胞白血病（CLL）的相关性，验证TRIP13基因在CLL发生发展中发挥的生物学功能，探讨TRIP13基因调控CLL发生发展的下游分子机制。方法①应用实时荧光定量PCR检测30例CLL患者和12名造血干细胞供者（正常对照组）外周血CD19’B淋巴细胞TRIP13mRNA的表达水平。②使用慢病毒介导的shRNA干扰JVM-2细胞TRIP13mRNA和蛋白表达水平，同时使用随机序列shRNA处理JVM-2细胞作为对照组，分别应用MTT法和流式细胞术检测TRIP13干扰组、对照组JVM．2细胞的增殖和凋亡情况。@Westernblot法检测TRIP13干扰对JVM-2细胞凋亡相关蛋白表达的影响。结果①30例CLL患者外周血B淋巴细胞TRIP13mRNA表达水平（2^△Ct=0．01489）高于正常对照组（2^△Ct=0．00019）（P〈0．001）。②在JVM2细胞中筛选出有效干扰shRNA靶点，下调TRIP13的表达能够有效抑制JVM-2细胞增殖并促进细胞凋亡。③干扰TRIP13后JVM-2细胞Myc和Bcl-2蛋白表达下调（P〈0．001），Bax、caspase3、Bad蛋白表达上调（P〈0．001）。结论CLL患者外周血CD19^＋B淋巴细胞TRIP13mRNA表达上调；TRIP13基因通过影响细胞增殖和凋亡相关蛋白表达而调控JVM2细胞的增殖与凋亡。 展开更多
关键词 白血病 淋巴细胞 慢性 B细胞 基因 TRIP13 jvm-2细胞
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TRIP13对B细胞淋巴瘤细胞增殖与凋亡的调控作用及机制
2
作者 闫肃然 张青 +3 位作者 刘星辰 原静静 张帆 周可树 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1485-1492,共8页
目的:通过在细胞系Granta-519和JVM-2敲低/过表达TRIP13来探索TRIP13对B细胞淋巴瘤细胞增殖与凋亡的调控作用及可能的分子机制。方法:使用慢病毒转染技术构建敲低/过表达TRIP13的Granta-519细胞和JVM-2细胞及其对照组细胞,荧光显微镜判... 目的:通过在细胞系Granta-519和JVM-2敲低/过表达TRIP13来探索TRIP13对B细胞淋巴瘤细胞增殖与凋亡的调控作用及可能的分子机制。方法:使用慢病毒转染技术构建敲低/过表达TRIP13的Granta-519细胞和JVM-2细胞及其对照组细胞,荧光显微镜判断慢病毒对细胞的转染效率,实时荧光定量PCR技术和蛋白免疫印迹法评估敲低/过表达效率,CCK-8法检测细胞增殖能力,Annexin V-APC单染法检测细胞凋亡率,PI染色法检测细胞周期,蛋白免疫印迹法检测P53、MDM4和BCL-2的表达水平。结果:敲低TRIP13后Granta-519和JVM-2细胞的增殖能力显著减弱而凋亡率显著升高,过表达TRIP13后细胞的增殖能力显著增强而凋亡率显著降低。敲低TRIP13后Granta-519细胞明显阻滞于G1期,JVM-2细胞明显阻滞于G1和G2/M期。在Granta-519中敲低TRIP13后BCL-2蛋白的表达降低,MDM4蛋白的表达升高;过表达TRIP13后MDM4蛋白的表达降低。在JVM-2细胞中过表达TRIP13后BCL-2蛋白的表达升高。结论:TRIP13促进B细胞淋巴瘤细胞的增殖,抑制其凋亡,并通过参与细胞周期的调控影响增殖和凋亡。B细胞淋巴瘤细胞中TRIP13促进BCL-2蛋白的表达,抑制MDM4蛋白的表达。 展开更多
关键词 B细胞淋巴瘤 甲状腺激素受体相互作用因子13 增殖 凋亡 Granta-519 jvm-2
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