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人和猪软骨细胞aggrecan球间区域基因的克隆和同源性分析
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作者 李卿 刘伟 +2 位作者 陆峻泓 崔磊 曹谊林 《中华创伤骨科杂志》 CAS CSCD 2003年第2期146-149,共4页
目的 分析人和猪软骨细胞aggrecan球间区域(interglobular domain,IGD)蛋白酶水解位点的同源性,在分子水平探讨猪软骨细胞作为组织工程化软骨研究模型的意义。方法 通过RT-PCR扩增人和猪软骨细胞aggrecan IGD片段,将纯化的RT-PCR产物克... 目的 分析人和猪软骨细胞aggrecan球间区域(interglobular domain,IGD)蛋白酶水解位点的同源性,在分子水平探讨猪软骨细胞作为组织工程化软骨研究模型的意义。方法 通过RT-PCR扩增人和猪软骨细胞aggrecan IGD片段,将纯化的RT-PCR产物克隆入T-载体,通过测序、软件分析及Northern杂交,比较二者基因和氨基酸序列的同源性。结果 人和猪aeerecan IGD cDNA有84％的同源性。经PSI-BLAST(PositionSpecific Iterated BLAST)分析,相关的氨基酸序列的同源性也达到84％,表明其在进化过程中高度保守。Northern杂交可见,人和猪的aggrecan IGD探针对猪总RNA均有明显的分子量大小相同的放射自显影条带。结论猪软骨细胞可以作为组织工程化软骨研究的模型,对软骨细胞老化和体内构建软骨的降解等过程中蛋白酶参与的aggrecan水解反应进行深入的探讨,为完善组织工程化软骨的构建提供分子水平的依据。 展开更多
关键词 猪 人类 软骨细胞 aggrecan球间区域 基因 克隆 同源性 IGD 氨基酸
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