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基于免疫磁珠富集粪便脱落细胞的大肠癌筛选法 被引量：4
1
作者 梁超 李丹滢 周国华 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第8期1568-1572,共5页
大肠癌是目前发病率、致死率均较高的恶性肿瘤,严重危害人民健康生活。现有的临床检测技术均存在一定的局限性,因而限制了其临床应用的范围。与常规临床大肠癌检测相比,粪便脱落细胞检测法具有高特异性、高灵敏性且容易被受试者接受等... 大肠癌是目前发病率、致死率均较高的恶性肿瘤,严重危害人民健康生活。现有的临床检测技术均存在一定的局限性,因而限制了其临床应用的范围。与常规临床大肠癌检测相比,粪便脱落细胞检测法具有高特异性、高灵敏性且容易被受试者接受等显著优点。作为最新型的脱落细胞检测法-免疫磁珠富集粪便脱落细胞检测法除具有一般脱落细胞检测法的优点外,还具有细胞回收效率高、肿瘤细胞特异性高等优点。本文阐述了脱落细胞检测大肠癌的原理和基本方法,着重介绍了免疫磁珠富集脱落细胞的原理和操作过程以及针对脱落细胞进行大肠癌检测的多种方法,并对全自动、快速、高通量的自动化脱落细胞检测仪器应用于脱落细胞检测进行了展望。 展开更多
关键词 大肠癌 脱落细胞 免疫磁珠法 筛选
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免疫磁珠法分离纯化乳鼠肾血管周细胞
2
作者 王丽 马跃荣 《现代医药卫生》 2016年第16期2453-2455,共3页
目的通过建立肾原代细胞培养,探讨免疫磁珠分离纯化乳鼠肾血管周细胞的方法。方法选取健康BALB/c乳鼠肾脏,剪碎、消化和过滤制成细胞悬液,原代培养并传代(传3代)。免疫磁珠法分离出神经胶质细胞2型硫酸软骨素糖蛋白(NG-2);倒置相差显微... 目的通过建立肾原代细胞培养,探讨免疫磁珠分离纯化乳鼠肾血管周细胞的方法。方法选取健康BALB/c乳鼠肾脏,剪碎、消化和过滤制成细胞悬液,原代培养并传代(传3代)。免疫磁珠法分离出神经胶质细胞2型硫酸软骨素糖蛋白(NG-2);倒置相差显微镜观察细胞形态特点,免疫细胞化学检测NG-2、平滑肌肌动蛋白(SMA)和CD31表达,Brd U法检测细胞增殖活性,鉴定是否符合周细胞特征及纯化后的细胞是否具有增殖活性。结果纯化后获取的细胞宽大扁平,形态呈梭形、三角形或多边形并有突起。细胞核椭圆居中,多为单核,偶为双核,细胞质丰富,无接触性抑制生长,符合周细胞形态及生长特征。NG-2和SMA免疫细胞化学染色阳性表达,CD31免疫细胞化学染色阴性表达,符合周细胞特点。分离纯化后的细胞48、72 h细胞增殖率分别为(0.37±0.11)%、(0.42±0.10)%。结论免疫磁珠法可使周细胞从细胞成分复杂的肾组织中分离出来,并具有生物活性,可继续体外培养,为后续研究提供参考依据。 展开更多
关键词 免疫磁珠法 周细胞 肾小管 分离和提纯
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基于免疫磁珠法的自动化粪便脱落细胞提取仪的研制与应用
3
作者 梁超 李传军 +1 位作者 邓黎莉 周国华 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2010年第4期304-308,共5页
目的根据免疫磁珠法的原理设计研制自动化粪便脱落细胞提取仪，实现大肠癌脱落细胞的自动化富集。方法根据粪便组分、理化特性以及粪便脱落细胞分布特点，设计制造包括粪便样本采集装置、粪便样本预处理器、脱落细胞-免疫磁珠结合装置... 目的根据免疫磁珠法的原理设计研制自动化粪便脱落细胞提取仪，实现大肠癌脱落细胞的自动化富集。方法根据粪便组分、理化特性以及粪便脱落细胞分布特点，设计制造包括粪便样本采集装置、粪便样本预处理器、脱落细胞-免疫磁珠结合装置和脱落细胞-免疫磁珠复合物洗涤装置的自动化粪便脱落细胞提取仪。采用抗大肠癌特异表面抗原表皮细胞黏附分子（EpCAM）的单抗Ber-EP4包被至磁珠表面制备免疫磁珠，用于从细胞培养物中富集大肠癌细胞，并在显微镜下观察免疫磁珠与大肠癌细胞的结合效果。收集10例大肠癌患者的癌组织（或癌旁组织），并应用自动化粪便脱落细胞仪提取患者粪便样本的脱落细胞，应用实时荧光定量PCR检测癌组织（或癌旁组织）以及粪便样本的脱落细胞肿瘤相关基因c-myc、cox-2和CD44v6的表达，并对比两种不同来源的样本检出的3种基因的阳性表达率。结果设计制作了自动化粪便脱落细胞提取仪样机，并且结合自行制备包被特异抗体的免疫磁珠成功提取到直肠癌细胞，细胞回收率达27％。在10例癌组织或癌旁组织中，c-myc、cox-2、CD44v6基因的阳性表达率分别为20％、10％、20％，而在粪便脱落细胞中均为100％，差异有统计学意义（均P〈0．01）。自动粪便脱落细胞仪提取的患者粪便样本的脱落细胞为肿瘤细胞。结论利用免疫磁珠富集大肠癌脱落细胞是可行的，以此为依据制作的自动化脱落细胞提取仪可以用于临床大肠癌的早期筛查。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 粪便 脱落细胞 免疫磁珠法 自动化装置
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