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运动对Ihh/PTHrP信号通路调控骨形成的影响研究 被引量:2
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作者 王燕杰 《当代体育科技》 2014年第27期13-14,共2页
骨形成主要是通过膜内成骨和软骨内成骨两种方式进行的。膜内成骨侧重于调控骨长粗,而软骨内成骨则负责骨生长。之前大量研究均证实运动有助于骨健康,促进骨形成,而且均致力于膜内成骨,尚鲜有提及软骨内成骨方面。因此,本研究主要从软... 骨形成主要是通过膜内成骨和软骨内成骨两种方式进行的。膜内成骨侧重于调控骨长粗,而软骨内成骨则负责骨生长。之前大量研究均证实运动有助于骨健康,促进骨形成,而且均致力于膜内成骨,尚鲜有提及软骨内成骨方面。因此,本研究主要从软骨内成骨的角度着手,探讨运动调节Ihh/PTHrP信号通路达到促进软骨内成骨并增加青春期的峰值骨量、促进骨生长的机制。 展开更多
关键词 不同方式运动 生长期 小鼠 ihh/pthrp 信号通路
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Ihh-PTHrP信号轴介导髁突软骨细胞对压力微环境改变的调控研究 被引量:3
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作者 黄林剑 李辉 +4 位作者 谢千阳 张旻 黄锦梅 杨驰 蔡协艺 《口腔医学》 CAS 2014年第7期481-485,共5页
目的 探究Ihh-PTHrP负反馈信号通路与静压力下髁突软骨细胞生物学响应的关系。方法 体外分离培养4周龄健康雌性新西兰大白兔髁突软骨细胞,100 kPa静压力条件下,分别对P2代髁突软骨细胞进行0、1、2、3、4 h的加压处理;采用Western印迹的... 目的 探究Ihh-PTHrP负反馈信号通路与静压力下髁突软骨细胞生物学响应的关系。方法 体外分离培养4周龄健康雌性新西兰大白兔髁突软骨细胞,100 kPa静压力条件下,分别对P2代髁突软骨细胞进行0、1、2、3、4 h的加压处理;采用Western印迹的方法比较分析髁突软骨细胞COL2A1、Ihh和PTHrP的蛋白表达变化;通过RT-qPCR检测分析静压力对Ihh和PTHrP基因水平表达的影响;选取0 h和3 h组,使用扫描电子显微镜扫描分析静压力对髁突软骨细胞形态的影响;采用SPSS19.0软件包对数据进行统计学分析。结果 Western印迹实验发现:压力加载3 h后,COL2A1出现明显高表达;Ihh蛋白表达在0-2 h内逐渐升高,在2-4 h内却逐渐降低;PTHrP在0-2 h内蛋白表达逐渐升高,并在2-4 h内维持着一个较高水平的表达。RT-qPCR检测发现Ihh在压力加载1 h时出现明显高表达,而PTHrP则在2 h时出现明显高表达。100 kPa静压力加载3 h后,髁突软骨细胞突起增多、变长。结论 兔髁突软骨细胞对压力微环境的改变具有一定的适应能力;适宜的静压力可以提高髁突软骨细胞的成软骨能力;Ihh-PTHrP负反馈信号通路参与髁突软骨细胞对压力微环境改变的适应性改建过程。 展开更多
关键词 颞下颌关节 髁突 软骨细胞 静压力 ihh pthrp
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氟中毒大鼠生长板Ihh、PTHrP mRNA及蛋白表达的变化 被引量:4
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作者 潘磊磊 何杨 +3 位作者 吴思思 刘爽 郭晓英 孙贵范 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第4期253-255,F0003,共4页
目的观察氟中毒大鼠生长板Ihh、PTHrP mRNA及蛋白表达的影响,探讨Ihh信号通路在氟致软骨损伤中的可能作用。方法 32只Wistar大鼠按体重随机分成4组,对照组饮用自来水,染氟组分别饮用含氟50、100和150 mg/L的自来水,3个月后测定大鼠血清... 目的观察氟中毒大鼠生长板Ihh、PTHrP mRNA及蛋白表达的影响,探讨Ihh信号通路在氟致软骨损伤中的可能作用。方法 32只Wistar大鼠按体重随机分成4组,对照组饮用自来水,染氟组分别饮用含氟50、100和150 mg/L的自来水,3个月后测定大鼠血清及骨组织氟含量,Real-time PT-PCR法检测Ihh、PTHrP mRNA表达情况,免疫组化法检测软骨组织中PTHrP蛋白表达情况。结果染氟组大鼠生长板中Ihh、PTHrP mRNA表达显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组大鼠生长板软骨细胞不表达或极弱表达PThrP,而氟中毒大鼠生长板静止层和肥大层软骨细胞细胞质中PTHrP蛋白为阳性表达,且随染氟剂量增加而升高。结论过量氟可能通过影响Ihh、PTHrP mRNA及蛋白表达水平,造成生长板软骨增殖、分化失衡。 展开更多
关键词 氟中毒 ihh pthrp 生长板
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骨碎补总黄酮通过miR-125b-2-3p调控COL2A1对大鼠生长板软骨细胞增殖的影响
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作者 耿捷 刘欢欢 +2 位作者 李洋 卫柄邑 谢艳 《天津中医药大学学报》 2025年第7期598-605,共8页
[目的]研究旨在探讨骨碎补总黄酮通过调控大鼠生长板软骨细胞微小RNA 125b-2-3p(miR-125b-2-3p)表达对Ⅱ型胶原基因(COL2A1)和印度刺猬蛋白-甲状旁腺激素相关蛋白(Ihh-PTHrP)信号通路的调节作用及对细胞增殖的促进效果。[方法]选取2周龄... [目的]研究旨在探讨骨碎补总黄酮通过调控大鼠生长板软骨细胞微小RNA 125b-2-3p(miR-125b-2-3p)表达对Ⅱ型胶原基因(COL2A1)和印度刺猬蛋白-甲状旁腺激素相关蛋白(Ihh-PTHrP)信号通路的调节作用及对细胞增殖的促进效果。[方法]选取2周龄的SD大鼠胫骨近端生长板软骨细胞进行体外培养并完成细胞鉴定。采用不同浓度的骨碎补总黄酮对细胞进行处理,通过噻唑蓝染色(MTT)实验筛选出最能促进细胞生长的药物浓度。利用实时定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)技术筛选出能够抑制甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)表达的质粒。在后续实验中,设置多个实验组,包括空白对照组、骨碎补总黄酮组、Ihh-PTHrP通路激活组、PTHrP抑制剂组、骨碎补总黄酮+PTHrP组以及骨碎补总黄酮+PTHrP抑制剂组。通过MTT法评估骨碎补总黄酮和PTHrP对细胞增殖的影响,并通过酶联免疫吸附(ELISA)法测定细胞中COL2A1的表达水平。进一步利用生物信息学方法筛选可能调控COL2A1表达的微小核糖核酸(miRNAs),提取细胞培养上清液中的总RNA,并通过RT-qPCR分析筛选出的miRNAs在不同实验组中的表达差异。通过双荧光素酶报告基因实验验证miRNA对COL2A1表达的调控作用。最后,通过miRNA抑制剂和模拟物对COL2A1表达的影响,证实骨碎补总黄酮通过miRNA调控促进COL2A1的表达和细胞增殖。[结果]发现250 mg/L的骨碎补总黄酮在促进细胞增殖方面效果最佳,骨碎补总黄酮组和骨碎补总黄酮+PTHrP组均能显著促进细胞增殖,而PTHrP抑制剂则抑制了细胞增殖。双荧光素酶报告基因实验确认miR-125b-2-3p能够调控COL2A1的表达,且在空白对照组和骨碎补总黄酮组中miR-125b-2-3p表达存在显著差异。进一步实验表明,骨碎补总黄酮和miR-125b-2-3p抑制剂均能提高COL2A1的表达,而miR-125b-2-3p模拟物则降低其表达。[结论]骨碎补总黄酮通过降低miR-125b-2-3p的表达,增强Ihh-PTHrP通路中COL2A1的蛋白表达,从而促进生长板软骨细胞的增殖,对治疗与生长板软骨细胞增殖相关的疾病具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 骨碎补总黄酮 印度豪猪蛋白-甲状旁腺激素相关蛋白通路 COL2A1基因 微小RNA 125b-2-3p 大鼠 生长板软骨细胞
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