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IG4电磁导航系统辅助CT引导下肺穿刺活检术在肺占位病变诊断中的临床价值 被引量：13
1
作者 曾晖 章浙伟 +1 位作者 严兴 邵国良 《中华危重症医学杂志（电子版）》 CAS CSCD 2020年第4期264-269,共6页
目的评估IG4电磁导航系统辅助CT引导下经皮肺穿刺活检术在肺占位病变中的应用价值。方法将125例拟行肺穿刺活检术的肺占位患者分为对照组(62例)及磁导组(63例)。对照组患者采用普通CT引导下肺穿刺活检术,磁导组采用IG4电磁导航系统辅助C... 目的评估IG4电磁导航系统辅助CT引导下经皮肺穿刺活检术在肺占位病变中的应用价值。方法将125例拟行肺穿刺活检术的肺占位患者分为对照组(62例)及磁导组(63例)。对照组患者采用普通CT引导下肺穿刺活检术,磁导组采用IG4电磁导航系统辅助CT引导下肺穿刺活检术。记录所有患者的临床基础资料包括白细胞计数,血小板计数(PLT),国际标准化比值(INR),活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶原时间(PT),丙氨酸转氨酶(ALT),血肌酐,肌酸激酶同工酶(CK-MB),C反应蛋白质(CRP)以及肺癌相关标志物神经元特异性烯醇化酶(NSE)、血清鳞状细胞癌抗原(SCCA),并对两组患者间肺穿刺活检术中定位时间、穿刺针调整次数、扫描次数、接受辐射剂量[剂量长度乘积(DLP)]、病理诊断敏感度以及气胸、出血等并发症发生率进行比较。结果两组患者穿刺前白细胞计数、PLT、INR、APTT、PT、ALT、血肌酐、CK-MB、CRP、NSE、SCCA的比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。同时,磁导组患者在穿刺术中定位时间[(9.5±2.6)min vs.(13.6±4.1)min,t=6.584,P<0.001]、调针次数[(3.0±1.3)次vs.(3.8±1.8)次,t=2.662,P=0.009]、扫描次数[(3.9±1.2)次vs.(5.8±1.8)次,t=6.853,P<0.001]、DLP[(291±167)mGy×cm vs.(407±307)mGy×cm,t=2.622,P=0.010]方面均明显优于对照组;且磁导组患者气胸发生率[15.87%(10/63)vs.33.87%(21/62),χ^2=5.204,P=0.023]及出血发生率[20.63%(13/63)vs.38.71%(24/62),χ^2=4.899,P=0.027]均明显低于对照组患者。而两组患者病理诊断的敏感度比较,差异无统计学意义[89.66%(52/58)vs.96.36%(53/55),χ^2=1.931,P=0.165]。结论IG4电磁导航系统辅助CT引导下肺穿刺活检术在安全性及对患者的伤害程度等方面明显优于常规CT引导下的肺穿刺活检术,具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 ig4电磁导航系统 CT引导下经皮肺穿刺术 肺占位 肺肿瘤
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IgG4相关性自身免疫性肝炎的临床和病理特征分析
2
作者 杨秋霞 侯灼 +3 位作者 周秋烨 和雨艳 胡清荣 尧颖 《肝脏》 2024年第4期444-447,共4页
目的探讨IgG4相关性自身免疫性肝炎(IgG4-AIH)的临床表现、血清学特点和组织病理学特征。方法选取2014年7月至2022年6月昆明医科大学附属延安医院经肝组织病理学检查确诊的38例自身免疫性肝炎(AIH)患者,观察临床表现和血清学特点,收集... 目的探讨IgG4相关性自身免疫性肝炎(IgG4-AIH)的临床表现、血清学特点和组织病理学特征。方法选取2014年7月至2022年6月昆明医科大学附属延安医院经肝组织病理学检查确诊的38例自身免疫性肝炎(AIH)患者,观察临床表现和血清学特点,收集肝组织标本,行HE染色和IgG4免疫组织化学染色,观察其组织学特征和IgG4阳性浆细胞浸润情况。结果38例AIH患者中,有7例血清IgG4水平明显升高,肝组织IgG4染色阳性,患者归为IgG4-AIH组,另31例归为经典型AIH组。两组患者均以黄疸、乏力、纳差为主要临床表现,肝功能异常以ALT、AST升高为主,两组患者无显著差异。IgG4-AIH组患者ANA阳性为6/7,而经典型AIH组患者ANA阳性率为83.8%(26/31),IgG-AIH组血清IgG水平明显升高为(33.2±7.2),而经典型AIH组IgG水平为(26.5±5.3),差异有统计学意义(t=2.828,P=0.008)。IgG4-AIH组患者肝脏组织学炎症以G3、G4期为主,而经典型AIH以G1、G2为主,两者差异显著,两组患者纤维化水平无明显差异。结论IgG4-AIH患者血清及肝组织IgG4水平显著升高,且肝脏病理检测提示炎症活动更明显,但IgG4-AIH与经典型AIH在临床表现、生化学指标方面无显著差异。 展开更多
关键词 自身免疫性肝炎 免疫球蛋白4 临床特征 病理特点
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CTLA4Ig基因表达对鼠皮肤移植免疫抑制作用的研究 被引量：10
3
作者 杨世昕 吴军 +5 位作者 卞修武 易绍萱 罗高兴 贺伟峰 黄赤兵 周立新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期759-761,共3页
目的　探讨静脉注射CTLA4Ig腺病毒后在大鼠体内的表达和对同种异体移植皮肤存活的影响 ,以及该载体应用的安全性 ,为该基因治疗方法在抑制器官移植排斥反应的临床应用奠定基础。方法　供体SD大鼠皮肤移植前 1周 ,用腺病毒作载体将CTLA4I... 目的　探讨静脉注射CTLA4Ig腺病毒后在大鼠体内的表达和对同种异体移植皮肤存活的影响 ,以及该载体应用的安全性 ,为该基因治疗方法在抑制器官移植排斥反应的临床应用奠定基础。方法　供体SD大鼠皮肤移植前 1周 ,用腺病毒作载体将CTLA4Ig导入Wistar大鼠体内 ,用蛋白质斑点印迹实验检测血清中CTLA4Ig的表达 ,用腺病毒荧光抗体检测腺病毒在脏器的分布。同时还观测了各脏器的病理改变及移植物生存时间。结果　CTLA4Ig腺病毒在肝、脾、心、肺、肾均有明显分布 ,但实质细胞均未见严重损伤性改变。CTLA4Ig基因能在血清中的表达高峰时间一般在 7d左右 ,移植皮肤的生存显著长于对照组 (P <0 .0 5 )。结论　从静脉注射导入的CTLA4Ig基因能在大鼠体内表达并对同种移植的排斥反应有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 腺病毒 CTLA4IG 皮肤移植 大鼠
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CTLA4Ig基因转染猪皮异种移植的体外实验研究 被引量：13
4
作者 郑峻松 吴军 +4 位作者 马兵 罗高兴 易绍萱 贺伟峰 陈希炜 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期762-764,共3页
目的　探索重组腺病毒载体 (Recombinantadenovirus ,rAdv)介导CTLA4Ig基因转染猪皮异种移植免疫耐受的分子机制。方法　构建CTLA4Ig重组腺病毒载体 ,转染猪树突状细胞 (DendriticCell,DC) ,以猪表皮细胞匀浆液为刺激原 ,观察DC递呈猪... 目的　探索重组腺病毒载体 (Recombinantadenovirus ,rAdv)介导CTLA4Ig基因转染猪皮异种移植免疫耐受的分子机制。方法　构建CTLA4Ig重组腺病毒载体 ,转染猪树突状细胞 (DendriticCell,DC) ,以猪表皮细胞匀浆液为刺激原 ,观察DC递呈猪表皮抗原刺激人T细胞增殖、活化及信号转导的影响 ;同时 ,以CTLA4Ig rAdv转染小鼠DC细胞 ,观察该DC膜表面分子CD40、CD80表达。结果　CTLA4Ig转染DC能显著抑制人外周血T淋巴细胞增殖能力 (P <0 .0 1)和T细胞肌醇磷脂信号系统转导活性 ,IL 2分泌亦受到明显抑制 (P <0 .0 5 ) ;转染CTLA4Ig的小鼠DC膜表面分子CD80表达降低 (P <0 .0 5 )。结论　腺病毒介导CTLA4Ig基因转染猪皮能诱导人外周血T淋巴细胞免疫耐受。 展开更多
关键词 CTLA4IG 异种移植 免疫耐受 信号转导 皮肤移植
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CTLA4 Ig在诱导小鼠心脏移植免疫耐受中的作用 被引量：5
5
作者 姜庆 方玉华 +4 位作者 吴军 靳凤烁 李黔生 易绍萱 罗高兴 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第11期1050-1052,共3页
目的　通过建立小鼠心脏移植模型 ,探讨CTLA4Ig在免疫抑制和诱导免疫耐受中的作用。方法　建立小鼠心脏移植模型 ,供体分别为DBA/2和 6 15新生鼠心脏 ,受体为BALB/c小鼠 ,移植后分别予以CTLA4Ig 0 .1、1、5mg·kg-1·d-1,治疗 1... 目的　通过建立小鼠心脏移植模型 ,探讨CTLA4Ig在免疫抑制和诱导免疫耐受中的作用。方法　建立小鼠心脏移植模型 ,供体分别为DBA/2和 6 15新生鼠心脏 ,受体为BALB/c小鼠 ,移植后分别予以CTLA4Ig 0 .1、1、5mg·kg-1·d-1,治疗 1周 ,观察不同剂量CTLA4Ig对新生鼠移植心脏存活时间的影响 ;BALB/c小鼠首次移植 2周后再次移植DBA/2或 6 15新生鼠心脏 ,观察CTLA4Ig对再次移植心脏存活的影响。结果　与对照组相比 ,CTLA4Ig 0 .1mg·kg-1·d组 ,移植心脏的存活时间不能延长 ,CTLA4Ig 1mg·kg-1·d和 5mg·kg-1·d-1组能显著延长心脏的存活时间 ,但两组间差异不显著 (P >0 .0 5 )。再次移植 6 15心脏各组 ,移植心脏的存活时间均无显著延长 ,而再次移植DBA/2新生鼠心脏 ,CTLA4Ig 1mg·kg-1·d-1和 5mg·kg-1·d-1组 ,其移植心脏的存活时间仍然能显著延长 (P <0 .0 1)。结论　CTLA4Ig能延长新生鼠心脏移植存活时间 。 展开更多
关键词 免疫耐受 心脏移植 CTLA4IG 小鼠
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Nucleofector^(TM)与脂质体转染PA317细胞效率的比较 被引量：5
6
作者 代飞 吴军 +2 位作者 陈希炜 贺伟峰 张小容 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期104-106,共3页
目的　比较传统的脂质体转染技术与NucleofectorTM转染技术将pLXSN CTLA4Ig TRES2 EGFP重组质粒转染入PA3 17细胞的效率。方法　分别用脂质体技术与NucleofectorTM 转染技术将pLXSN CTLA4Ig IRES2 EGFP重组质粒转染PA3 17细胞 ,应用... 目的　比较传统的脂质体转染技术与NucleofectorTM转染技术将pLXSN CTLA4Ig TRES2 EGFP重组质粒转染入PA3 17细胞的效率。方法　分别用脂质体技术与NucleofectorTM 转染技术将pLXSN CTLA4Ig IRES2 EGFP重组质粒转染PA3 17细胞 ,应用倒置荧光显微镜、流式细胞仪检测转染后PA3 17细胞绿色荧光蛋白表达情况及阳性细胞率 ,比较两种方法的转染效率。结果　脂质体转染后 4、8h未观察到阳性细胞 ,转染后 12h阳性率为 ( 0 5 9± 0 2 ) %,转染后 2 4h阳性率为 ( 4 3 9± 2 43 ) %;NucleofectorTM 转染技术转染后约 4h观察到阳性细胞 ,转染后 12h阳性率为 ( 12 2 7± 3 3 8) %,转染后 2 4h阳性率为 ( 5 0 16± 2 41) %。两者比较 ,在转染后 12、2 4h ,后者阴性率显著高于前者 (P <0 0 1)。结论　NucleofectorTM 技术与传统的脂质体技术比较 ,是一种具有转染速度快。 展开更多
关键词 CTLA4IG Nucleofector^TM技术 脂质体
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CTLA4Ig诱导免疫耐受的体外研究 被引量：4
7
作者 姜庆 吴军 +3 位作者 易绍萱 陈希炜 罗高兴 贺伟峰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第21期1896-1898,共3页
目的 观察CTLA4Ig在诱导人外周血T细胞免疫耐受中的作用。方法以结核菌素刺激人外周血淋巴细胞,观察不同剂量CTLA4Ig对外周血淋巴细胞增殖反应的影响;观察CTLA4Ig和CsA(环孢霉素A)对再次结核菌素刺激和非相关第三者APC细胞刺激淋巴细胞... 目的 观察CTLA4Ig在诱导人外周血T细胞免疫耐受中的作用。方法以结核菌素刺激人外周血淋巴细胞,观察不同剂量CTLA4Ig对外周血淋巴细胞增殖反应的影响;观察CTLA4Ig和CsA(环孢霉素A)对再次结核菌素刺激和非相关第三者APC细胞刺激淋巴细胞增殖反应的影响,IL-2的变化,以及外源性IL-2对免疫耐受诱导的影响。结果CT-LA4Ig抑制淋巴细胞增殖呈剂量依赖关系,20μg/ml时抑制作用最强;CTLA4Ig能诱导免疫耐受并与CsA有协同作用;外源性IL-2能抑制免疫耐受的诱导。结论CTLA4Ig能抑制淋巴细胞的增殖和IL-2的分泌释放,CTLA4Ig和CsA联合应用能更彻底抑制淋巴细胞增殖和IL-2的分泌释放,并诱导免疫耐受;外源性IL-2能逆转免疫耐受。 展开更多
关键词 CTLA4IG T细胞 免疫耐受 细胞增殖
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CTLA_4Ig抑制T细胞增殖的体外研究 被引量：4
8
作者 阎衡 叶庆佾 +2 位作者 郝飞 向明明 施宗萍 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期210-212,共3页
目的观察 CTL A4Ig在人外周血 T细胞增殖反应中的作用。方法植物血凝素 (PHA )、脂多糖 (L PS)、金葡菌肠毒素 B(SEB)刺激 T细胞增殖 ,在加入或未加入 CTL A4Ig情况下 ,观察细胞形态并检测 3H- Td R掺入量。结果 CTL A4Ig对PHA、L PS的... 目的观察 CTL A4Ig在人外周血 T细胞增殖反应中的作用。方法植物血凝素 (PHA )、脂多糖 (L PS)、金葡菌肠毒素 B(SEB)刺激 T细胞增殖 ,在加入或未加入 CTL A4Ig情况下 ,观察细胞形态并检测 3H- Td R掺入量。结果 CTL A4Ig对PHA、L PS的抑制作用呈剂量依赖关系 ;而 CTL A4Ig浓度只有高于 5μg/ m L时 ,对 SEB才有抑制作用 ,且可完全抑制。结论CTL A4Ig对 PHA、L PS、SEB刺激下的 T细胞增殖反应有明显的抑制作用 ,但反应模式不一致。 展开更多
关键词 CTLA4IG T细胞 细胞增殖 超抗原 内毒素
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共刺激阻断剂CTLA4Ig基因重组腺病毒的构建与鉴定 被引量：12
9
作者 黄赤兵 吴军 +4 位作者 易绍萱 方玉华 罗高兴 贺伟峰 陈渝 《重庆医学》 CAS CSCD 2002年第8期682-683,共2页
目的　构建共刺激阻断剂CTLA4Ig基因重组的腺病毒载体。 方法　将CTLA4IgcDNA插入腺病毒表达质粒 ;将重组质粒与腺病毒基因组质粒共转染 2 93细胞 ,产生重组腺病毒 ;采用dot ELISA和PCR法筛选并获得CTLA4Ig阳性表达的重组腺病毒。结果... 目的　构建共刺激阻断剂CTLA4Ig基因重组的腺病毒载体。 方法　将CTLA4IgcDNA插入腺病毒表达质粒 ;将重组质粒与腺病毒基因组质粒共转染 2 93细胞 ,产生重组腺病毒 ;采用dot ELISA和PCR法筛选并获得CTLA4Ig阳性表达的重组腺病毒。结果　同源重组后 ,以dot ELISA法筛选到 2个 2 93细胞的CTLA4Ig蛋白阳性表达空斑 ,PCR证实为含CTLA4Ig基因和腺病毒基因的重组体AdvCTLA4Ig。结论　本研究构建了CTLA4Ig基因重组的复制缺陷型腺病毒AdvCTLA4Ig 。 展开更多
关键词 共刺激阻断剂 CTLA4IG 基因重组 器官移植 腺病毒载体 基因治疗 免疫耐受
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腺病毒介导CTLA4Ig基因在体外培养细胞中的表达 被引量：5
10
作者 黄赤兵 吴军 +4 位作者 方玉华 易绍萱 罗高兴 贺伟峰 陈希炜 《重庆医学》 CAS CSCD 2002年第8期684-685,共2页
目的　鉴定腺病毒介导免疫调节基因CTLA4Ig在体外培养细胞中的表达能力和细胞毒性。 方法　以肾小管上皮细胞(PK 15 )、血管内皮细胞 (ECV 3 0 4)为靶细胞 ,观察感染强度为 10 0、2 0 0、40 0时CTLA4Ig重组腺病毒转染靶细胞后不同时相... 目的　鉴定腺病毒介导免疫调节基因CTLA4Ig在体外培养细胞中的表达能力和细胞毒性。 方法　以肾小管上皮细胞(PK 15 )、血管内皮细胞 (ECV 3 0 4)为靶细胞 ,观察感染强度为 10 0、2 0 0、40 0时CTLA4Ig重组腺病毒转染靶细胞后不同时相细胞存活百分率 ;以免疫组化以及Westernblot分别检测CTLA4Ig在细胞以及上清中的表达。 结果　转染后 2d、4d ,转染组两种细胞存活百分率与对照组相比无显著差异 ;转染后 2 4hCTLA4Ig在PK 15和ECV 3 0 4中的阳性表达率分别为 93 7%和 90 2 % ;Westernblot检测到两种细胞上清中均有CTLA4Ig表达。 结论　重组腺病毒对非包装靶细胞毒性很小 ,能够介导CTLA4Ig基因对靶细胞的高效转染 ,并使其表达分泌型CTLA4Ig ,具备了以基因治疗诱导免疫耐受的潜能 。 展开更多
关键词 腺病毒 CTLA4IG 基因转染 体外培养 免疫耐受
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重组腺病毒介导的CTLA-4Ig基因在人源性细胞中的表达 被引量：7
11
作者 杨世昕 吴军 +7 位作者 罗高兴 易绍萱 贺伟峰 黄赤兵 周立新 李彦 张宁 陈希炜 《重庆医学》 CAS CSCD 2001年第5期385-387,共3页
目的　了解CTLA 4Ig重组腺病毒在不同人细胞中的转染能力及表达效率 ,为其器官转染研究及其治疗应用奠定基础。方法　用所构建的CTLA 4Ig腺病毒感染培养的HeLa细胞、人成纤维细胞、人脐静脉内皮细胞 ,应用免疫组化检测CTLA 4Ig的表达情... 目的　了解CTLA 4Ig重组腺病毒在不同人细胞中的转染能力及表达效率 ,为其器官转染研究及其治疗应用奠定基础。方法　用所构建的CTLA 4Ig腺病毒感染培养的HeLa细胞、人成纤维细胞、人脐静脉内皮细胞 ,应用免疫组化检测CTLA 4Ig的表达情况。结果　与重组腺病毒共培养 6h使HeLa细胞获得转染 ,12h开始表达 ,36h表达达高峰 ;人成纤维细胞 8h获得转染 ,2 4h开始表达 ,6 0h后达高峰 ;人脐静脉内皮细胞 4h获得转染 ,12h开始表达 ,36h后达高峰。结论　CTLA 4Ig重组腺病毒能高效转染HeLa细胞、人成纤维细胞。 展开更多
关键词 腺病毒 CTLA-4Ig基因 重组腺病毒介导 转染能力 表达效率 基因治疗
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健脾渗湿法治疗特应性皮炎患者血清总IgE、IgG、IgG4变化及疗效评价 被引量：12
12
作者 石汉振 曾冬玉 +3 位作者 陈达灿 庄俊华 黄宪章 刘文静 《中国中西医结合皮肤性病学杂志》 CAS 2011年第1期20-22,共3页
目的通过检测血清中总IgE(TIgE)、IgG、IgG4浓度在特应性皮炎(AD)发病过程中的变化,探讨健脾渗湿法治疗有效率与指标间的联系。方法选择38例AD患者为研究对象,于治疗前后观察其主要症状(包括瘙痒、睡眠、皮损面积、皮损严重程度),记录SC... 目的通过检测血清中总IgE(TIgE)、IgG、IgG4浓度在特应性皮炎(AD)发病过程中的变化,探讨健脾渗湿法治疗有效率与指标间的联系。方法选择38例AD患者为研究对象,于治疗前后观察其主要症状(包括瘙痒、睡眠、皮损面积、皮损严重程度),记录SCORAD积分,及检测血清中TIgE、IgG、IgG4水平。并将各项血清学指标与治疗有效率进行相关分析。结果治疗前的SCORAD评分为55.46±15.05,治疗后为49.41±12.33,两者有显著性差异(P<0.01);AD患者血清治疗前、后TIgE、IgG、IgG4均高于正常对照组(P<0.05)。但治疗后TIgE相对于治疗前明显下降,而IgG、IgG4水平明显升高。治疗有效率与TIgE、TIgE/IgG4治疗前后变化差值成中等正相关,相关系数分别为0.541,0.793。结论 TIgE、TIgE/IgG4水平变化是反映AD病情变化的重要指标,在一定程度上可用于评价病情是否好转。使用健脾渗湿法治疗AD后,TIgE、TIgE/IgG4随症状改善变化明显。 展开更多
关键词 特应性皮炎 血清总IGE IgE/IgG4 SCORAD积分
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腺病毒介导CTLA4Ig转染正常人肝细胞株的研究 被引量：3
13
作者 刘潇聪 陈耀凯 +5 位作者 李俊刚 刘国栋 谭朝霞 郭艳 程玲 王宇明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期810-813,共4页
目的研究腺病毒介导CTLA4Ig基因转染正常人肝细胞株L02后,CTLA4Ig在L02细胞内的表达、生物学活性以及对L02细胞生物学特性的影响。方法重组腺病毒载体Ad-CTLA4Ig-EGFP转染体外培养的正常人肝细胞株L02,观察绿色荧光在细胞内的表达情况... 目的研究腺病毒介导CTLA4Ig基因转染正常人肝细胞株L02后,CTLA4Ig在L02细胞内的表达、生物学活性以及对L02细胞生物学特性的影响。方法重组腺病毒载体Ad-CTLA4Ig-EGFP转染体外培养的正常人肝细胞株L02,观察绿色荧光在细胞内的表达情况。以免疫细胞化学、Western blot、ELISA等方法检测CTLA4Ig在L02细胞内、外的表达情况;通过绘制细胞生长曲线、检测尿素合成能力观察转染前后L02细胞的生物学特性;转染后的L02细胞与大鼠脾脏细胞共培养,通过检测脾脏细胞增殖情况评价表达CTLA4Ig的L02细胞在体外的免疫耐受活性;收集共培养体系中的大鼠脾脏细胞,再分别与正常L02细胞、HeLa细胞共培养,检测脾细胞增殖情况以评价转染后L02细胞免疫耐受的特异性。结果转染后的L02细胞可在细胞质内大量表达CTLA4Ig蛋白,并分泌至培养上清中;转染后L02细胞生长速度无明显改变(P>0.05),单个细胞尿素合成能明显升高[(0.56±0.01)pmol/d,P<0.01];转染后的L02细胞在体外可显著抑制大鼠脾脏细胞的增殖(抑制率约为36.8%,P<0.05),被抑制后的大鼠脾脏细胞在正常L02细胞刺激下增殖较低,但在HeLa细胞刺激下则可显著增殖(P<0.01)。结论Ad-CTLA4Ig-EGFP转染后的L02细胞可表达具有生物学活性的CTLA4Ig,并在体外表现出显著的具有抗原特异性的免疫抑制活性。 展开更多
关键词 CTLA4IG 腺病毒载体 L02细胞
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GPI-CTLA4Ig嵌合分子的构建和在CHO-dhfr^-细胞膜上的表达 被引量：3
14
作者 于继云 沈倍奋 +4 位作者 黎燕 陈兴 程绍辉 田蓉 曲梅花 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期212-214,共3页
目的 :研制GPI锚定修饰的新型免疫抑制分子GPI CT LA4Ig。方法 :通过将从促衰变因子 (DAF)来源的GPI修饰性信号序列与CTLA4Ig嵌合 ,获得GPI修饰的CTLA4Ig分子。将编码GPI CTLA4Ig嵌合分子的基因克隆到真核表达载体pCI dhfr中 ,并用脂质... 目的 :研制GPI锚定修饰的新型免疫抑制分子GPI CT LA4Ig。方法 :通过将从促衰变因子 (DAF)来源的GPI修饰性信号序列与CTLA4Ig嵌合 ,获得GPI修饰的CTLA4Ig分子。将编码GPI CTLA4Ig嵌合分子的基因克隆到真核表达载体pCI dhfr中 ,并用脂质体法转染CHO dhfr 细胞 ,用氨甲喋呤 (MTX)进行筛选。重组蛋白的表达用RT PCR、ELISA、细胞免疫荧光和Westernblot进行鉴定。最后采用ProteinA亲和层析纯化。结果 :构建了GPI CTLA4Ig嵌合分子 ,并在CHO dhfr 细胞膜上稳定表达。结论 :GPI修饰的CTLA4Ig分子有可能作为新型的免疫抑制剂用于器官移植中 。 展开更多
关键词 CTLA4IG 蛋白质表达 糖基化磷脂酰肌醇 CHO-dhfr^-细胞
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转hCTLA4Ig树突状细胞诱导T细胞免疫耐受的实验研究 被引量：4
15
作者 贺伟峰 吴军 +5 位作者 易绍萱 罗高兴 陈希炜 郑峻松 马兵 雷晓 《重庆医学》 CAS CSCD 2002年第8期689-691,共3页
目的　通过逆转录病毒载体将人CTLA4Ig转染DCs ,探讨转人CTLA4Ig(hCTLA4Ig)树突状细胞 (DCsRev)诱导T细胞免疫耐受的可能性。方法　通过重组逆转录病毒将目的基因hCTLA4Ig转染到大鼠骨髓来源的DCs中 ,通过流式细胞检测目的基因hCTLA4Ig... 目的　通过逆转录病毒载体将人CTLA4Ig转染DCs ,探讨转人CTLA4Ig(hCTLA4Ig)树突状细胞 (DCsRev)诱导T细胞免疫耐受的可能性。方法　通过重组逆转录病毒将目的基因hCTLA4Ig转染到大鼠骨髓来源的DCs中 ,通过流式细胞检测目的基因hCTLA4Ig表达及DCs表面分子的改变 ;通过混合淋巴细胞反应 (MLR)检测DCsRev抑制T细胞免疫反应的能力。 结果　重组逆转录病毒转染DCs的最大效率为 91 2 5 % ;在功能上 ,DCsRev不但丧失了刺激MLR的能力 ,并且能够强烈抑制MLR中反应T细胞的增殖 ,而且抑制率与加入DCsRev的数量和DCsRev预处理反应T细胞的时间长短有关。具体来说 ,DCsRev数量在 10 3 ～ 10 4之间时 ,抑制率与剂量呈正相关 ,最高为 71 96%。而当DCsRev数量达到 5× 10 4抑制率下降为 5 9 2 %。在 12～ 48h之间 ,随着预处理时间的延长 ,抑制率却不断下降 ,预处理 12h抑制率最高 ,为 99 6%。但不做预处理 ,在反应开始时同时加入DCsRev ,则抑制率明显降低 ,仅为 5 9 2 %。对腹腔注射DCsRev大鼠脾T淋巴细胞体外分析表明 ,DCsRev也能在动物体内诱导耐受 ,但这种免疫耐受状态不能维持终身。结论　通过逆转录病毒载体将人CTLA4Ig转染DCs,不但DCs表面CD86分子被CTLA4Ig有效的封闭 。 展开更多
关键词 hCTLA4Ig 树突状细胞 T细胞 免疫耐受 实验研究 逆转录病毒载体
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CTLA4Ig局部转基因对小肠移植急性排斥的治疗作用 被引量：7
16
作者 王一芳 许爱刚 +1 位作者 华一兵 吴文溪 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第3期685-688,共4页
目的:研究CTLA4Ig基因在移植小肠局部表达及其表达产物对急性排斥反应的治疗作用. 方法:建立SD→Wistar的大鼠异位小肠移植模型,并随机分为实验组(CTLA4Ig转基因组)和对照组(非转基因组). 实验组供肠移植前经肠系膜上动脉注入脂质体包裹... 目的:研究CTLA4Ig基因在移植小肠局部表达及其表达产物对急性排斥反应的治疗作用. 方法:建立SD→Wistar的大鼠异位小肠移植模型,并随机分为实验组(CTLA4Ig转基因组)和对照组(非转基因组). 实验组供肠移植前经肠系膜上动脉注入脂质体包裹的CTLA4Ig cDNA,术后应用免疫组织学检查移植小肠中CTLA4Ig转基因产物的表达.移植术后3,7,10 d分别获取各组的移植小肠进行组织学检查及细胞凋亡测定. 结果:经CTLA4Ig cDNA处理的小肠在移植术后可见大量的CTLA4Ig表达.对照组移植肠在术后7,10 d分别出现I, Ⅱ度急性排斥反应,同时凋亡细胞数量显著增加.实验组移植肠术后未见排斥反应的病理学证据,凋亡细胞偶见. 结论:CTLA4Ig基因可在移植小肠局部转染表达,其表达产物可防止移植术后急性排斥反应的发生. 展开更多
关键词 CTLA4IG基因 小肠移植 急性排斥反应 细胞凋亡 免疫组织化学
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腺病毒介导的CTLA-4Ig基因转染人骨髓间充质干细胞成骨特性研究 被引量：2
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作者 石东文 代飞 +4 位作者 陈希炜 贺伟峰 胡晓红 罗高兴 吴军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期810-813,共4页
目的通过腺病毒介导CTLA-4Ig基因转染人骨髓间充质干细胞(human marrowmesenchymal stem cells,hM-SCs),观察被修饰细胞CTLA-4Ig蛋白表达情况,以及基因修饰对hMSCs诱导成骨特性的影响。方法采用荧光显微镜观察腺病毒介导CTLA-4Ig基因转... 目的通过腺病毒介导CTLA-4Ig基因转染人骨髓间充质干细胞(human marrowmesenchymal stem cells,hM-SCs),观察被修饰细胞CTLA-4Ig蛋白表达情况,以及基因修饰对hMSCs诱导成骨特性的影响。方法采用荧光显微镜观察腺病毒介导CTLA-4Ig基因转染hMSCs的绿色荧光蛋白表达,流式细胞术检测确定转染率,观察对比转染前后细胞形态和细胞周期,用免疫细胞化学方法检测转染hMSCs的CTLA-4Ig蛋白表达,转染hMSCs成骨诱导培养3周后进行成骨特异性标记检测。结果分离培养的hMSCs CD105表达阳性,CD34表达阴性。重组腺病毒介导的CTLA-4Ig基因转染hM-SCs的转染率为81.14%,CTLA-4Ig基因转染hMSCs(CTLA-4Ig-hMSCs)的形态无明显变化,生长良好。免疫细胞化学结果显示,CTLA-4Ig-hMSCs的CTLA-4Ig蛋白表达阳性,诱导培养3周的CTLA-4Ig-hMSCs,碱性磷酸酶染色呈强阳性,免疫细胞化学检测骨钙素表达阳性,钙的四环素荧光标记法显示细胞间有钙的沉积。结论腺病毒介导的CTLA-4Ig基因转染hMSCs能够分泌CTLA-4Ig蛋白,并保持了成骨分化潜能,可用于异基因hMSCs作为骨组织工程种子细胞的应用研究。 展开更多
关键词 HMSCS CTLA-4IG 基因转染 诱导成骨
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腺相关病毒载体介导的CTLA4Ig表达对大鼠肝移植免疫抑制作用的实验研究 被引量：2
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作者 陆森 李国强 +2 位作者 王学浩 俞悦 高云 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期224-227,共4页
目的:将CTLA4Ig腺相关病毒载体经门静脉导入移植肝中,研究该基因在移植肝中的表达以及对同种异体大鼠肝移植排斥反应的抑制作用.方法:二袖套法建立大鼠肝移植模型,供体为SD大鼠,受体为Wistar大鼠,受体随机分成3组,每组12对,对照组:将101... 目的:将CTLA4Ig腺相关病毒载体经门静脉导入移植肝中,研究该基因在移植肝中的表达以及对同种异体大鼠肝移植排斥反应的抑制作用.方法:二袖套法建立大鼠肝移植模型,供体为SD大鼠,受体为Wistar大鼠,受体随机分成3组,每组12对,对照组:将1011v.g.pSNAV-LacZ病毒液灌注移植肝门静脉并冷保存1 h;CsA组:移植后第1～7天腹腔内注射CsA 8 mg(kg·d);基因转染组:供肝加用1011v.g.pSNAV-CTLA4Ig病毒液灌注移植肝门静脉并冷保存1 h,术后1周剖腹取肝、脾和血标本.RT-PCR检测移植肝中CTLA4Ig的表达,双抗体夹心法测定血中CTLA4Ig浓度,TUNEL法检测肝细胞、脾淋巴细胞凋亡情况,并观察大鼠生存时间.结果:基因转染组大鼠生存时间平均为61天,与对照组10天比较差异有显著性(P＜0.05).基因转染组大鼠的肝脏中能扩增出特异性约500bp条带,而对照组未能扩增出相应条带,基因转染组血中CTLA4Ig浓度为(41.87±11.02)μg/ml,明显高于对照组(0.49±0.16)μg/ml,基因转染组大鼠肝移植术后1周肝细胞凋亡计数(5.88±1.88)%与对照组(28.25±6.50)%相比较差异有显著性(P＜0.05).基因转染组大鼠肝移植术后1周脾淋巴细胞凋亡计数(57.62±10.83)%与对照组(16.37±3.11)%相比较差异有显著性(P＜0.05).结论:经门静脉供肝灌注pSNAV-CTLA4Ig能在大鼠移植肝内良好表达,延长生存时间. 展开更多
关键词 腺相关病毒 CTLA4IG 肝移植
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人CTLA4Ig腺病毒载体的构建及其生物学功能研究 被引量：3
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作者 张庆殷 金永柱 +1 位作者 谢蜀生 张海滨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期45-48,共4页
目的:通过同源重组构建CTLA4Ig腺病毒载体,研究其生物学活性,并用于基因治疗诱导心脏移植耐受。方法:通过基因重组技术,将CTLA4Ig基因克隆至腺病毒穿梭质粒pCA13中。然后将该质粒与腺病毒辅助质粒同源重组,经过293细胞包装,构建CTLA4Ig... 目的:通过同源重组构建CTLA4Ig腺病毒载体,研究其生物学活性,并用于基因治疗诱导心脏移植耐受。方法:通过基因重组技术,将CTLA4Ig基因克隆至腺病毒穿梭质粒pCA13中。然后将该质粒与腺病毒辅助质粒同源重组,经过293细胞包装,构建CTLA4Ig腺病毒载体。用RT-PcR、SDS-PAGE及Western blot等技术,检测包装的病毒感染293细胞后CTLA4Ig蛋白的表达及分泌,通过体外实验,观察病毒感染的293细胞上清对混合淋巴细胞反应(MLR)的抑制作用。通过大鼠体内实验,检测用CTLA4Ig腺病毒载体基因治疗后,CTLA4Ig在体内的表达。结果:CTLA4Ig腺病毒载体构建成功。体外实验证实,CTLA4Ig腺病毒感染的293细胞上清液,能够抑制异基因脾细胞的单向MLR。体内实验表明,经过静脉途径给予受体大鼠CTLA4Ig腺病毒载体,能够诱导移植耐受,延长心脏移植物的存活。结论:构建的CTLA4Ig腺病毒载体,体外感染293细胞能够分泌CTLA4Ig蛋白。该蛋白可抑制T细胞的活化,CTLA4Ig腺病毒载体可用于体内基因治疗诱导移植耐受。 展开更多
关键词 人CTLA4Ig 腺病毒载体 构建 生物学功能 基因治疗 移植耐受
原文传递
腺病毒介导CTLA4Ig基因修饰骨髓间质干细胞体外抑制免疫应答的研究 被引量：4
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作者 邓宇斌 郭小荑 +1 位作者 梁海翔 原清涛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期300-305,共6页
目的:通过腺病毒载体介导CTLA4Ig在大鼠骨髓间质干细胞(MSC)中的表达,探讨MSC作为基因转移靶细胞的可行性和转染效率,研究其在体外对免疫应答的抑制作用。方法:构建含有CTLA4Ig基因的重组腺病毒载体pad-CTLA4Ig,按照不同的感染倍率(MOI... 目的:通过腺病毒载体介导CTLA4Ig在大鼠骨髓间质干细胞(MSC)中的表达,探讨MSC作为基因转移靶细胞的可行性和转染效率,研究其在体外对免疫应答的抑制作用。方法:构建含有CTLA4Ig基因的重组腺病毒载体pad-CTLA4Ig,按照不同的感染倍率(MOI)转染大鼠MSC,用荧光显微镜和流式细胞仪分析转染效率,流式细胞术、Western blotting等方法检测目的蛋白CTLA4Ig在MSC中的表达。将转基因MSC加入混合淋巴细胞反应(MLR)体系,观察其抑制淋巴细胞增殖的生物学效应。结果:重组腺病毒载体pAd-CTLA4Ig对MSC的最大转染率为80.7％±4.7％,转基因MSC可检测到目的蛋白的表达。基因修饰的MSC能有效抑制MLR体系中淋巴细胞的增殖,4d达到最大抑制效率51.46％;再次MLR证实这种抑制作用是供者特异性的。结论:MSC是一种较理想的基因转移靶细胞,其表达的转基因产物CTLA4Ig可在体外特异性地抑制免疫应答。 展开更多
关键词 基因 CTLA4IG 腺病毒载体 间质干细胞 免疫应答
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