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转录激活因子1(ATF1)内部核糖体进入位点的鉴定及活性分析 被引量:2
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作者 李琪 高文青 +1 位作者 朱瑞宇 金坚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期937-943,共7页
蛋白质翻译起始通常有两种机制,一是依赖帽结构的翻译,另一种是依赖5'非翻译区的内部核糖体进入位点(IRES).在后一种方式中,在某些IRES反式作用因子,如La蛋白、多聚嘧啶串结合蛋白1等的参与下,直接招募核糖体小亚基到mRNA的翻译起... 蛋白质翻译起始通常有两种机制,一是依赖帽结构的翻译,另一种是依赖5'非翻译区的内部核糖体进入位点(IRES).在后一种方式中,在某些IRES反式作用因子,如La蛋白、多聚嘧啶串结合蛋白1等的参与下,直接招募核糖体小亚基到mRNA的翻译起始位点,启始翻译.研究发现,参与细胞生长、分化、细胞周期进程、凋亡和压力调控的相关蛋白中通常含有IRES元件.基于功能,我们提出假说:转录激活因子1(ATF1)的5'-UTR可能具有IRES活性.为验证假说,首先构建了含全长ATF1 5'-UTR的双荧光素酶报告质粒;质粒转染结合报告酶活性分析显示,ATF1 5'-UTR在Bel7402、HCT-8和HEK293细胞中表现出不同的IRES活性;而此IRES活性与5'-UTR中的隐藏启动子无关.同时还发现,ATF1 5'-UTR在NIH3T3细胞中却没有IRES活性.与此结果相一致,Western印迹检测ATF1在这几种细胞系中的表达.结果显示,Bel7402、HCT-8和HEK293中ATF1蛋白质表达水平较高,而在NIH3T3中却极低.ATF1 5'-UTR的系列5'-删除突变及报告酶分析证明,ATF1 5'-UTR的完整性对其IRES活性大小发挥重要作用;其中5'端的204 bp序列对其IRES活性贡献较大.RNA-蛋白免疫共沉淀实验揭示,ATF1 5'-UTR可与La和PTBP1蛋白结合;抑制La和PTBP1蛋白质的表达,并可减低HEK293细胞中ATF1蛋白质表达水平.这些结果提示,La和PTBP1蛋白(两种ITAFs)为ATF1 5'-UTR发挥IRES活性所必需.总之,上述结果证明,ATF1 5'-UTR具有IRES活性,其活性发挥依赖与La和PTBP1蛋白的结合.上述发现为进一步研究La和PTBP1表达及亚细胞定位对ATF1 IRES调控机制的影响奠定了基础. 展开更多
关键词 转录激活因子1(ATF1) 5'-非编码区(5'-UTR) 内部核糖体进入位点(IRES) IRES反式作用因子(itafs)
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IRES介导的非帽依赖翻译调控研究进展 被引量:2
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作者 轩依然 赵健 宋晓峰 《生物信息学》 2024年第1期1-10,共10页
内部核糖体进入位点(Internal ribosome entry site,IRES)是一种存在于RNA内部的特殊功能元件,其可在不依赖5’端帽子结构的情况下直接招募核糖体启动蛋白翻译,已被发现与多种细胞过程密切相关。近来,越来越多的证据表明IRES在环形RNA... 内部核糖体进入位点(Internal ribosome entry site,IRES)是一种存在于RNA内部的特殊功能元件,其可在不依赖5’端帽子结构的情况下直接招募核糖体启动蛋白翻译,已被发现与多种细胞过程密切相关。近来,越来越多的证据表明IRES在环形RNA翻译调控中扮演着极其重要的角色,由此IRES引起人们的极大关注。本文针对目前真核细胞中IRES介导的翻译调控机制进行了综述,并对IRES元件相关生物信息学工具进行了总结。 展开更多
关键词 内部核糖体进入位点 非帽依赖翻译 反式作用因子 G-四链体 上游开放阅读框
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IRES-mediated cap-independent translation,a path leading to hidden proteome 被引量:25
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作者 Yun Yang Zefeng Wang 《Journal of Molecular Cell Biology》 SCIE CAS CSCD 2019年第10期911-919,共9页
Most eukaryotic mRNAs are translated in a cap-dependent fashion;however,under stress conditions,the cap-independent translation driven by internal ribosomal entry sites(IRESs)can serve as an alternative mechanism for ... Most eukaryotic mRNAs are translated in a cap-dependent fashion;however,under stress conditions,the cap-independent translation driven by internal ribosomal entry sites(IRESs)can serve as an alternative mechanism for protein production.Many IRESs have been discovered from viral or cellular mRNAs to promote ribosome assembly and initiate translation by recruiting different trons-acting factors.Although the mechanisms of translation initiation driven by viral IRESs are relatively well understood,the existence of cellular IRESs is still under debate due to the limitations of translation reporter systems used to assay IRES activities.A recent screen identified>1000 putative IRESs from viral and human mRNAs,expanding the scope and mechanism for capindependent translation.Additionally,a large number of circular RNAs lacking free ends were identified in eukaryotic cells,many of which are found to be translated through IRESs.These findings suggest that IRESs may play a previously unappreciated role in driving translation of the new type of mRNA,implying a hidden proteome produced from cap-independent translation. 展开更多
关键词 IRES itaf TRANSLATION BICISTRONIC system CIRCULAR RNA
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