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iNOS/IRS1/AKT/GSK-3β信号通路在慢性间歇低氧致胰岛素抵抗中的作用
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作者 靳美娜 周雪利 +8 位作者 李海波 白炜 贾楚璇 高立 任丽珏 陈青宇 王瑞 李华 魏翠英 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第2期210-217,共8页
目的对照观察慢性间歇低氧-复氧条件下大鼠肝脏病理改变和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、磷酸化胰岛素受体底物1丝氨酸307(p-IRS1ser 307)、磷酸化蛋白激酶B丝氨酸473(p-AKTser 473)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、糖原合酶(GS)蛋白的表... 目的对照观察慢性间歇低氧-复氧条件下大鼠肝脏病理改变和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、磷酸化胰岛素受体底物1丝氨酸307(p-IRS1ser 307)、磷酸化蛋白激酶B丝氨酸473(p-AKTser 473)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、糖原合酶(GS)蛋白的表达水平,探讨iNOS/IRS1/AKT/GSK-3β信号通路在慢性间歇低氧所致胰岛素抵抗中的作用。方法将40只SD大鼠随机分为对照组(NC组)和实验组(CIH组),每组20只。NC组置于常氧环境12周,CIH组先予间歇低氧8周,随后恢复常氧饲养至第12周。两组均于基线、第8周、第12周分别测定空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平,并取肝脏组织进行病理检测和iNOS、p-IRS1ser 307、p-AKTser 473、GSK3β、GS水平测定,比较组间差异。结果基线时,两组肝脏病理及各项观察指标间差异无统计学意义;8周时,与NC组比较,CIH组肝脏病理出现肝血窦和肝细胞索排列紊乱、肝细胞水肿、细胞核变小、淋巴细胞浸润增多并可见少量脂肪空泡,FBG、FINS、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、iNOS mRNA、p-IRS1ser 307蛋白、GSK-3β蛋白水平升高,p-AKTser 473蛋白、GS蛋白水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);12周时,与NC组比较,CIH组未见淋巴细胞浸润,脂肪空泡增多,其它已发生的病理损伤无改善,p-AKTser 473蛋白水平升高,p-IRS1ser 307蛋白与GS蛋白水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关分析显示:8周时CIH组HOMA-IR与iNOS mRNA、p-IRS1ser 307蛋白、GSK-3β蛋白水平正相关(r=0.874,0.817,0.872;均P<0.05),与p-AKTser473蛋白、GS蛋白水平呈负相关(r=-0.886,-0.879;均P<0.05)。结论慢性间歇低氧可以导致肝脏病理损害,即使复氧干预也不能逆转,并可能通过上调iNOS mRNA的表达,调控IRS1/AKT/GSK-3β信号通路,从而介导胰岛素抵抗的发生。 展开更多
关键词 慢性间歇低氧-复氧 胰岛素抵抗 诱导型一氧化氮合酶 irs1/AKT/GSK-3β信号通路 SD大鼠 肝脏
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IRS1、TCONS_00056481和miR-660在猪前体脂肪细胞分化过程中的时序表达及靶向关系鉴定
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作者 王黎 王秋妍 +9 位作者 杨香香 孙晓涵 杜子孟 尹丁 张亚兰 丁小玲 殷宗俊 郑先瑞 张晓东 丁月云 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3152-3163,共12页
为探明IRS1、TCONS_00056481与miR-660之间的竞争性结合靶向关系。本研究分离培养猪皮下前体脂肪细胞,通过RT-qPCR检测TCONS_00056481、miR-660和IRS1在安庆六白猪(脂肪型)和大白猪(瘦肉型)背部脂肪中的表达水平及在猪前体脂肪细胞分化... 为探明IRS1、TCONS_00056481与miR-660之间的竞争性结合靶向关系。本研究分离培养猪皮下前体脂肪细胞,通过RT-qPCR检测TCONS_00056481、miR-660和IRS1在安庆六白猪(脂肪型)和大白猪(瘦肉型)背部脂肪中的表达水平及在猪前体脂肪细胞分化过程中的时序表达变化,Western blot检测IRS1蛋白在两猪种背脂中的表达情况,通过双荧光素酶报告基因检测系统鉴定miR-660与TCONS_00056481、IRS1之间的靶向结合关系。结果表明,IRS1、miR-660和TCONS_00056481在两猪种背脂中的表达水平均极显著差异(P<0.01),且在猪前体脂肪细胞分化过程中均显著差异性表达,说明三者在猪脂肪沉积和猪前体脂肪细胞分化的过程中具有潜在的调控作用;共转染TCONS_00056481野生型载体和miR-660 mimics的双荧光素酶活性极显著低于其对照组(P<0.01),共转染IRS1野生型载体和miR-660 mimics的双荧光素酶活性极显著低于其对照组(P<0.01);而共转染TCONS_00056481/IRS1突变型载体和miR-660 mimics的双荧光素酶活性与其对照组无显著差异(P>0.05),说明miR-660能够通过结合位点发挥对IRS1、TCONS_00056481的调控作用。研究初步验证了lncRNA TCONS_00056481可竞争性结合miR-660从而调控IRS1表达的靶向关系;IRS1、TCONS_00056481和miR-660可作为猪成脂调控的ceRNAs分子候选基因对进行后续研究。 展开更多
关键词 irs1 miR-660 TCONS_00056481 双荧光素酶报告基因检测
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基于IRS1/PI3K/Akt通路探究黄蜀葵花总黄酮改善糖尿病肾脏疾病胰岛素抵抗和足细胞转分化的作用和机制 被引量:12
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作者 王玉 曹东维 +7 位作者 万毅刚 穆耕林 吴薇 房其军 李雅静 察思雨 涂玥 WAN Zi-yue 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期2646-2656,共11页
为了探究传统治肾中药黄蜀葵花的提取物——黄蜀葵花总黄酮(total flavones of Abelmoschus manihot,TFA)在体内改善糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)和足细胞转分化(epithelial-mesenchy... 为了探究传统治肾中药黄蜀葵花的提取物——黄蜀葵花总黄酮(total flavones of Abelmoschus manihot,TFA)在体内改善糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)和足细胞转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用和机制,并进一步揭示其科学内涵,将32只大鼠随机分为正常组、模型组、TFA组和罗格列酮(rosiglitazone,ROS)组。通过“高脂饲料饲养、单肾切除以及STZ腹腔注射”等综合措施联合诱导改良型DKD大鼠模型。成模后,对于4组大鼠,每天经灌胃分别给予其双蒸水、TFA混悬液以及ROS混悬液。在中、西药物干预的第8周末,处死全部大鼠,收集尿液、血液以及肾组织等标本,进而针对DKD模型鼠IR和足细胞EMT相关的各项参数和指标进行检测和观察,包括大鼠一般情况,体质量(body weight,BW)及肾脏质量(kidney weight,KW),生化参数和IR指标,肾组织胰岛素受体底物(insulin receptor substrate,IRS)1/磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(serine-threonine kinase,Akt)通路关键信号分子和裂隙膜结构分子蛋白表达水平,足突形态和肾小球基底膜(glomerular basement membrane,GBM)厚度,足细胞EMT标志分子和裂隙膜结构分子的表达程度以及肾小球组织形态特征等。结果显示,首先,对于DKD模型鼠,TFA和ROS均能改善一般情况、部分生化参数、肾脏外观和KW;然后对于BW、尿白蛋白(urinary albumin,UAlb)/尿肌酐(urinary creatinine,UCr)、血清肌酐(serum creatinine,Scr)、血清甘油三酯(triglyceride,TG)、KW的改善作用,TFA和ROS相似;再者,两者均能改善IR指标,其中,对于空腹血清胰岛素(fast insulin,FIN)、IR指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)的改善作用,ROS优于TFA;其次,两者均能不同程度地改善肾组织IRS1/PI3K/Akt通路关键信号分子的蛋白表达水平和肾小球硬化,而且TFA的改善作用和ROS相似;最后,两者均能改善足细胞损伤和EMT,其中TFA的改善作用优于ROS。总之,该研究提示,肾组织IR及其IRS1/PI3K/Akt通路活性低下会诱导DKD足细胞EMT和肾小球硬化;TFA和ROS相似,其抑制DKD足细胞EMT的作用与诱导IRS1/PI3K/Akt通路活性而改善IR有关,这可能是TFA治疗DKD的科学内涵之一。该研究为TFA在糖尿病并发症领域的开发和应用提供了初步的药理学证据。 展开更多
关键词 黄蜀葵花总黄酮 糖尿病肾脏疾病 胰岛素抵抗 足细胞转分化 irs1/PI3K/Akt通路
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针刺对糖尿病大鼠下丘脑弓状核IRS1/PI3K途径的影响 被引量:9
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作者 袁爱红 鲍陶陶 +1 位作者 倪英群 刘剑 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第18期5145-5148,共4页
目的探讨糖尿病大鼠下丘脑弓状核IRS1/PI3K信号通路以及针刺对该通路的影响。方法高脂高糖喂养后腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病大鼠模型,分为针刺组和模型组,干预4 w后,分别用实时荧光定量PCR和Western印迹测定下丘脑弓状核INSR、I... 目的探讨糖尿病大鼠下丘脑弓状核IRS1/PI3K信号通路以及针刺对该通路的影响。方法高脂高糖喂养后腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病大鼠模型,分为针刺组和模型组,干预4 w后,分别用实时荧光定量PCR和Western印迹测定下丘脑弓状核INSR、ISR1、PI3K、GLUT4 mRNA和蛋白表达。结果糖尿病模型大鼠存在高血糖、高胰岛素血症,下丘脑弓状核INSR、ISR1、PI3K、GLUT4 mRNA和蛋白表达均显著降低;针刺组大鼠空腹血糖和血清胰岛素水平比模型组明显下降,下丘脑弓状核INSR、ISR1、PI3K、GLUT4 mRNA和蛋白表达均比模型组明显增加。结论STZ诱导的糖尿病大鼠存在中枢胰岛素抵抗,IRS1/PI3K是其重要的中枢信号通路,针刺对中枢IRS1/PI3K通路有着良性调节作用,从而改善了STZ诱导的糖尿病大鼠的中枢胰岛素抵抗状态。 展开更多
关键词 弓状核 irs1/PI3K通路 糖尿病 中枢胰岛素抵抗 针刺
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针刺对2型糖尿病大鼠肝组织IRS1和2基因表达的调整 被引量:7
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作者 蔡辉 袁爱红 +1 位作者 魏群利 刘志诚 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第6期1140-1142,共3页
目的:探讨针刺对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝组织胰岛素受体底物1和2基因(IRS1和2mRNA)表达的影响。方法:给食源性肥胖大鼠腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)(25mg/kg)造模成T2DM大鼠,随机分为针刺组、优降糖组和模型组,处理4周后,用快速血糖仪... 目的:探讨针刺对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝组织胰岛素受体底物1和2基因(IRS1和2mRNA)表达的影响。方法:给食源性肥胖大鼠腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)(25mg/kg)造模成T2DM大鼠,随机分为针刺组、优降糖组和模型组,处理4周后,用快速血糖仪检测空腹血糖(FBS)、用放免法检测空腹胰岛素(FINS)、用实时定量荧光PCR(real-tim e RT PCR)法检测肝组织IRS1和2mRNA表达,并与正常组大鼠进行对照。结果:针刺组和优降糖组FBS和FINS比模型组显著降低(P<0.05);模型组IRS1mRNA相对含量是正常组的25%,针刺组为正常组的2.83倍,优降糖组为正常组的1.23倍。模型组IRS2mRNA相对含量为正常组的2.19倍,针刺组IRS2mRNA相对含量为正常组的4.84%,优降糖组IRS2mRNA相对含量为正常组的4.59倍。结论:肝组织IRS1和2mRNA表达异常可能是T2DM的发病机制之一,针刺和优降糖均可上调T2DM大鼠肝组织IRS1mRNA的表达,针刺对T2DM大鼠肝组织IRS1 mRNA表达的上调作用优于优降糖;针刺具有显著抑制T2DM大鼠肝组织IRS2mRNA表达的作用,而优降糖无此作用。 展开更多
关键词 T2DM irs1mRNA IRS2mRNA real-timeRTPCR法 针刺
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IRS1、Akt、FOXO1在少肌症发生及其运动性缓解中的作用 被引量:6
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作者 王今越 王小虹 冯维斗 《成都体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2012年第7期86-91,共6页
目的:探索IRS1、Akt、FOXO1在少肌症的发生及运动缓解中的作用。方法:24只雄性SD大鼠分为3组,C组(青年安静组)、S组(40d D-半乳糖注射致衰组)、E组(40d D-半乳糖注射衰老+6wk跑台运动组)。检测C、S、E组大鼠体重、腓肠肌的质量、Phospho... 目的:探索IRS1、Akt、FOXO1在少肌症的发生及运动缓解中的作用。方法:24只雄性SD大鼠分为3组,C组(青年安静组)、S组(40d D-半乳糖注射致衰组)、E组(40d D-半乳糖注射衰老+6wk跑台运动组)。检测C、S、E组大鼠体重、腓肠肌的质量、Phospho-IRS1(Ser307)、IRS1、Phospho-Akt(Ser473)、Akt、核内FOXO1、MAFbx mRNA、MuRF1 mRNA、MyoD mRNA、MyoG mR-NA。结果:与C组相比,S组大鼠腓肠肌/体重降低、Phospho-IRS1(Ser307)升高、IRS1、Phospho-Akt(Ser473)、Akt下降,FOXO1、MAFbx mRNA、MuRF1mRNA、MyoD mRNA、MyoG mRNA升高,与S组相比,E组大鼠上述除MyoD mRNA、MyoG mRNA(均上调)外的指标均发生相反变化。结论:衰老肌肉IRS1/Akt/FOXO1通路的生肌信号抑制、分解信号增强,通路可能通过提高(泛素蛋白酶体途径)分解代谢而非降低(生肌因子途径)合成代谢介导了少肌症发生,长期规律运动引起衰老肌肉IRS1/Akt/FOXO1通路生肌信号增强、分解信号抑制,通路可能通过抑制(泛素蛋白酶体途径)分解代谢及提高(生肌因子途径)合成代谢拮抗少肌症,缓解肌肉流失。 展开更多
关键词 运动 衰老 少肌症 irs1 AKT FOXO1
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利用CRISPR/Cas9敲除大鼠胰岛素受体底物1(Irs1)基因 被引量:18
7
作者 马元武 马婧 +4 位作者 路迎冬 陈炜 张旭 于磊 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2014年第3期55-60,共6页
目的为研究胰岛素受体底物1(Irs1)基因与代谢病之间的关系,我们利用CRISPR/Cas9系统敲除大鼠Irs1基因,为研究代谢病提供基因敲除大鼠。方法针对Irs1第一外显子,设计CRISPR/Cas9作用靶点,构建sgRNA表达质粒。利用T7 RNA聚合酶体外转录sg... 目的为研究胰岛素受体底物1(Irs1)基因与代谢病之间的关系,我们利用CRISPR/Cas9系统敲除大鼠Irs1基因,为研究代谢病提供基因敲除大鼠。方法针对Irs1第一外显子,设计CRISPR/Cas9作用靶点,构建sgRNA表达质粒。利用T7 RNA聚合酶体外转录sgRNA和Cas9。将Cas9 mRNA和sgRNA混合物注射入SD大鼠的受精卵中,实现靶基因敲除。用T7EN1实验初步检测靶基因的修饰情况,再经过测序分析确定突变。结果获得了5个在Irs1基因突变的首建鼠,突变效率为83%。结论得到了稳定遗传的Irs1基因敲除大鼠。 展开更多
关键词 irs1 基因敲除 大鼠 CRISPR Cas9
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干预DAG-PKC信号转导通路对糖尿病大鼠心肌细胞JNK1和IRS1基因表达的影响 被引量:3
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作者 王生级 吴伟 +1 位作者 范晓婷 李延辉 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2014年第1期40-44,共5页
目的干预二酰甘油-蛋白激酶C(DAG-PKC)信号转导通路后观察JNK1、IRS1等在糖尿病大鼠心肌中的表达情况。方法采用HE染色,masson染色、电镜观察大鼠心肌的病理变化,应用免疫组化、Real-Time PCR检测PKCβ2、JNK1及IRS1在大鼠心肌的表达情... 目的干预二酰甘油-蛋白激酶C(DAG-PKC)信号转导通路后观察JNK1、IRS1等在糖尿病大鼠心肌中的表达情况。方法采用HE染色,masson染色、电镜观察大鼠心肌的病理变化,应用免疫组化、Real-Time PCR检测PKCβ2、JNK1及IRS1在大鼠心肌的表达情况。结果糖尿病模型组PKCβ2、JNK1、p-JNK、IRS1表达明显高于对照组,干预DAG-PKC信号转导通路后明显下调其表达水平。结论 DAG-PKC通路可能是通过G蛋白受体和胰岛素受体途径的共同信号点JNK1影响下游的信号传导而导致糖尿病心肌病的发生发展,DAG-PKC-JNK1-IRS1-Akt/PKB-mTOR-p70S6K1等一系列信号位点可能是DAG-PKC信号转导通路引起糖尿病心肌病可能的潜在途径。 展开更多
关键词 糖尿病心肌病 信号通路 PKCβ2 JNK1 irs1
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猪IRS1基因对C2C12细胞系增殖分化的影响 被引量:2
9
作者 张冬杰 柳樱子 +2 位作者 汪亮 杨秀芹 刘娣 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2021年第S01期46-51,56,共7页
本课题组在前期研究中发现IRS1是民猪和大白猪背最长肌中存在表达差异的一个关键基因,为了深入探讨IRS1在骨骼肌细胞中发挥的生物学功能,本研究首先将猪的IRS1基因完整编码区序列连入pcDNA3.1载体内,构建过表达质粒,同时人工合成IRS1的s... 本课题组在前期研究中发现IRS1是民猪和大白猪背最长肌中存在表达差异的一个关键基因,为了深入探讨IRS1在骨骼肌细胞中发挥的生物学功能,本研究首先将猪的IRS1基因完整编码区序列连入pcDNA3.1载体内,构建过表达质粒,同时人工合成IRS1的siRNA干扰序列,在C2C12细胞系内过表达或干扰IRS1基因,使用qRT-PCR技术检测生肌决定因子家族基因(MyoD、MyoG和Myf5)、决定肌纤维类型的MyHC I、MyHC IIa、MyHC IIb和MyHC IIx基因以及PI3K、Akt、FoxO1基因的表达变化情况。结果表明,干扰IRS1基因后,肌细胞分化受阻,MRFs表达有下降趋势,过表达IRS1后,MRFs在不同分化时间发生了显著上调,说明IRS1对MyoD、Myf5和MyoG的转录有促进作用。过表达IRS1基因后,决定肌纤维类型的MyHC IIa基因和MyHC IIx基因表达水平均在诱导分化第6天时发生显著上调,干扰IRS1基因后,MyHC I型肌纤维在第4天和第6天、MyHC IIx型在第6天时的表达量均发生了显著下调,说明IRS1可影响肌纤维类型。干扰IRS1基因后,诱导分化初期(2 d)Akt的表达量出现显著下调,到了诱导分化末期(6 d),FoxO1表达量出现显著上调,说明IRS1表达的变化可以激活IRS1/Akt/FoxO1信号通路。 展开更多
关键词 irs1基因 C2C12细胞 过表达 干扰 实时定量PCR
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运动对Fetuin-A诱导的胰岛素抵抗鼠骨骼肌IR和IRS1磷酸化的影响 被引量:3
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作者 张明军 《体育学刊》 CAS CSSCI 北大核心 2014年第2期141-144,共4页
为了解运动对Fetuin-A诱导的胰岛素抵抗鼠骨骼肌IR和IRS1磷酸化的影响。运用牛fetuin-A注射建立胰岛素抵抗鼠模型。将小鼠分为一次性运动组(Acute exercise group,AE)、8周运动组(Exercise group,E)、安静对照组(Control group,C)。结果... 为了解运动对Fetuin-A诱导的胰岛素抵抗鼠骨骼肌IR和IRS1磷酸化的影响。运用牛fetuin-A注射建立胰岛素抵抗鼠模型。将小鼠分为一次性运动组(Acute exercise group,AE)、8周运动组(Exercise group,E)、安静对照组(Control group,C)。结果:与C组比较,AE组和E组胰岛素抵抗指数均非常显著下降(P<0.01);AE组骨骼肌IRS1(Tyr612)磷酸化非常显著增加(P<0.01);E组骨骼肌IR(Tyr1150)磷酸化和IRS1(Tyr612)磷酸化均非常显著增加(P<0.01);AE组和E组骨骼肌GLUT4mRNA表达和骨骼肌葡萄糖摄取率均非常显著增加(P<0.01)。结果说明:运动能够非常显著改善Fetuin-A诱导的胰岛素抵抗,8周有氧运动机制与增加骨骼肌IR(Tyr1150)、IRS1(Tyr612)磷酸化和GLUT4 mRNA表达有关。急性运动与增加骨骼肌IRS1(Tyr612)磷酸化和GLUT4 mRNA表达有关。 展开更多
关键词 运动生物化学 FETUIN-A 蛋白 胰岛素抵抗 IR(Tyr1150)磷酸化 irs1(Tyr612)磷酸化 小鼠
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AMPK/IR/IRS1通路介导影响糖尿病小鼠心肌胰岛素抵抗机制的实验研究
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作者 张普 张俊 李雪锋 《现代检验医学杂志》 2025年第2期119-122,128,共5页
目的探究AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)/胰岛素受体(IR)/胰岛素受体底物(IRS1)通路在糖尿病小鼠心肌胰岛素抵抗中的作用及可能机制。方法将30只C57BL/6J小鼠根据实验设计随机分为对照组、糖尿病组及AMPK激活组,每组10只。使用小鼠动态血糖检... 目的探究AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)/胰岛素受体(IR)/胰岛素受体底物(IRS1)通路在糖尿病小鼠心肌胰岛素抵抗中的作用及可能机制。方法将30只C57BL/6J小鼠根据实验设计随机分为对照组、糖尿病组及AMPK激活组,每组10只。使用小鼠动态血糖检测仪检测小鼠空腹血糖(FBG);糖化血红蛋白(HbA1c)试剂盒检测小鼠HbA1c水平;胰岛素检测试剂盒检测小鼠空腹胰岛素(FINS);超声心动图检测小鼠心率(HR)、左心室收缩末期内径(LVIDd)、左心室舒张末期内径(LVIDs)、射血分数(EF)及左室短轴缩短率(LVFS)。Masson染色检测小鼠心肌胶原沉积水平。ELISA试剂盒检测小鼠总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)及活性氧(ROS)水平。蛋白质免疫印迹(WB)检测心肌组织中AMPK,IR,IRS1蛋白水平。RT-qPCR检测心肌组织中AMPK,IR,IRS1的mRNA水平。结果与对照组相比,糖尿病组小鼠FBG,HbA1c,FINS,TC,TG,LDL-C水平增加(t=14.94~63.46),心功能指标HR,EF及LVFS减少(t=56.62,199.00,42.50),LVIDd增加(t=176.80),差异具有统计学意义(均P<0.05);LVIDs变化差异无统计学意义(t=3.46,P>0.05);小鼠心肌间质小血管周围胶原沉积增加;血清GSH水平减少(t=5.75),ROS与MDA水平增加(t=22.60,15.18),心肌组织中AMPK,IR,IRS1蛋白(t=7.00,4.33,3.66)及mRNA(t=2.61,5.17,6.79)表达水平减少,差异具有统计学意义(均P<0.05)。与糖尿病组相比,AMPK激活组小鼠FBG,HbA1c,FINS,TC,TG,LDL-C水平减少(t=9.14~56.34),心功能指标HR,EF及LVFS增加(t=135.90,152.00,41.99),LVIDd减少(t=203.20),差异具有统计学意义(均P<0.05);LVIDs变化差异无统计学意义(t=1.58,P>0.05);血管周围胶原沉积减少;血清GSH水平增加(t=19.60),ROS与MDA水平减少(t=32.90,23.44),心肌组织AMPK,IR,IRS1蛋白(t=15.14,29.44,17.15)及mRNA(t=11.52,9.67,8.49)表达水平增加,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论激活AMPK可改善糖尿病小鼠心功能结构,降低血糖血脂水平并下调氧化应激水平,作用机制可能与AMPK/IR/IRSs通路介导的胰岛素抵抗相关。 展开更多
关键词 糖尿病 心肌 AMP依赖的蛋白激酶/胰岛素受体/胰岛素受体底物通路 胰岛素抵抗 氧化应激
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miR-145通过IGF1R与IRS1逆转胃癌SGC7901/DDP细胞对顺铂的耐药性 被引量:7
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作者 朱明霞 周鑫 +4 位作者 黄泽波 王同杉 朱伟 束永前 刘平 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期144-150,共7页
目的 :研究miR-145对胃癌耐顺铂细胞株SGC7901/DDP顺铂耐药的影响。方法 :应用QRT-PCR检测miR-145在胃癌组织、细胞中的表达水平;MTT法和细胞克隆形成实验检测细胞活性与增殖能力;荧光素酶实验验证miR-145的靶基因;Western blot、免疫... 目的 :研究miR-145对胃癌耐顺铂细胞株SGC7901/DDP顺铂耐药的影响。方法 :应用QRT-PCR检测miR-145在胃癌组织、细胞中的表达水平;MTT法和细胞克隆形成实验检测细胞活性与增殖能力;荧光素酶实验验证miR-145的靶基因;Western blot、免疫组化和免疫荧光实验检测相关蛋白表达;流式细胞术检测耐药细胞对顺铂诱导凋亡的影响。结果 :miR-145在胃癌组织、各种胃癌细胞株中呈低表达;在胃癌耐顺铂细胞株SGC7901/DDP中,miR-145呈低表达,IGF1R与IRS1呈高表达;上调miR-145增强SGC7901/DDP细胞对顺铂的敏感性;荧光素酶报告实验证实IGF1R与IRS1为miR-145的靶基因;上调miR-145显著降低靶蛋白表达,抑制SGC7901/DDP细胞增殖,促进顺铂诱导的凋亡。结论 :上调miR-145通过靶向IGF1R与IRS1逆转胃癌细胞对顺铂的耐药性。 展开更多
关键词 MIR-145 顺铂耐药 IGF1R irs1
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慢性间歇低氧和复氧对大鼠胰岛素抵抗及骨骼肌miR-27a-3p/PPARγ/IRS1/PI3K/AKT表达的影响 被引量:4
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作者 周雪利 李华 +5 位作者 陈青宇 靳美娜 李海波 白炜 贾楚璇 魏翠英 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1729-1737,共9页
目的探讨慢性间歇低氧(CIH)和复氧对大鼠胰岛素抵抗(IR)及骨骼肌miR-27a-3p/PPARγ/IRS1/PI3K/AKT表达的影响。方法从基因表达数据库(GEO)中下载CIH条件下miRNA数据集,运用DESeq2筛选差异表达最显著的miRNA作为研究对象,使用miRNA walk... 目的探讨慢性间歇低氧(CIH)和复氧对大鼠胰岛素抵抗(IR)及骨骼肌miR-27a-3p/PPARγ/IRS1/PI3K/AKT表达的影响。方法从基因表达数据库(GEO)中下载CIH条件下miRNA数据集,运用DESeq2筛选差异表达最显著的miRNA作为研究对象,使用miRNA walk网站对差异miRNA的靶基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,并Cytoscape软件构建miRNA-mRNA-pathway调控网络。将48只雄性SD大鼠随机分为对照(CON)组和CIH组,24只/组,CON组常氧环境饲养12周,CIH组先予CIH环境饲养8周,再恢复常氧饲养4周。两组均在基线、8周、12周时留取血样和骨骼肌组织,检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平,HE染色观察骨骼肌病理改变并计算肌纤维横截面积,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blotting法检测骨骼肌miR-27a-3p、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、胰岛素受体1(IRS1)、p-IRS1、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸激酶B(AKT)、p-AKT表达,比较组间差异。结果生信分析发现,GEO数据库未筛选出CIH状态下肌肉组织相关的miRNA数据集,仅得到肾脏组织差异表达miRNA的GSE202480数据集,从CON组和CIH组样本中筛选出165个差异表达的miRNA,选最显著miR-27a-3p作为研究对象。GO和KEGG分析显示,差异miRNA的靶基因主要参与肌肉调节和胰岛素信号传导。miRNA-mRNA-pathway调控网络显示miR-27a-3p是PPAR信号通路和PI3K/AKT信号通路的关键调控因子。动物实验发现,基线时,两组各项观察指标均无统计学意义(P>0.05);8周时,与CON组相比,CIH组FBG、FINS、HOMA-IR、PPARγ显著升高(P<0.05或P<0.01),肌纤维排列疏松,肌纤维横截面积、miR-27a-3p、p-IRS1/IRS1、PI3K、p-AKT/AKT显著降低(P<0.05或P<0.01),GLUT4表达呈升高趋势但无统计学意义(P>0.05);12周时,两组各项观察指标均无统计学意义(P>0.05)。结论CIH可导致大鼠IR增加和骨骼肌病理改变,而复氧可以逆转;CIH可致骨骼肌miR-27a-3p表达下调,PPARγ表达上调,IRS1/PI3K/AKT胰岛素信号转导受到抑制,而复氧干预可以逆转;miR-27a-3p可能通过调控PPARγ/IRS1/PI3K/AKT信号通路参与了CIH所致的IR。 展开更多
关键词 慢性间歇低氧-复氧 胰岛素抵抗 GEO miR-27a-3p irs1/PI3K/AKT通路
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IRS1/PI3K信号通路在T2DM骨骼肌胰岛素抵抗中的相关研究进展 被引量:4
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作者 肖露露 梁永林 +1 位作者 李钦 崔泽方 《实用中医内科杂志》 2023年第6期71-75,共5页
胰岛素抵抗(IR)主要发生于骨骼肌等胰岛素敏感组织,是2型糖尿病(T2DM)的关键病理环节与主要发病机制。PI3K信号通路作为胰岛素调控血糖主要途径在传导障碍时会引发IR,是T2DM相关研究的热点,且相关实验颇多,但其对IR发病与治疗的干预机... 胰岛素抵抗(IR)主要发生于骨骼肌等胰岛素敏感组织,是2型糖尿病(T2DM)的关键病理环节与主要发病机制。PI3K信号通路作为胰岛素调控血糖主要途径在传导障碍时会引发IR,是T2DM相关研究的热点,且相关实验颇多,但其对IR发病与治疗的干预机制目前尚未被完全阐明。PI3K信号通路主要涉及胰岛素受体(INsR)、胰岛素受体底物1(IRS1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)及葡萄糖转运体4(GLUT4)等调节因子,即IRS1/PI3K通路。从IRS1/PI3K通路干预骨骼肌IR的作用机制角度去探晰IR的发病机制,对临床探寻其防治靶点具有重要意义。文章对近年来IRS1/PI3K相关通路参与T2DM骨骼肌IR的相关研究进行了整理与归纳,以期为IR相关实验与临床防治提供文献理论参考与新思路。 展开更多
关键词 2型糖尿病 胰岛素抵抗 骨骼肌 irs1/PI3K信号通路
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牛IRS1基因3’UTR的克隆、鉴定及生物信息学分析 被引量:1
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作者 李文清 李中举 +2 位作者 孟志鹏 牛梦宇 李万利 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期48-52,共5页
以奶牛乳腺组织为材料,采用3’RACE技术克隆到奶牛IRS1基因3’UTR的全长,进一步对测得的序列进行了验证,同时利用Target Scan 7.0和Pic Tar软件预测可能结合的microRNA,并对多个软件预测结合的microRNA,进行最小结合自由能分析。结果表... 以奶牛乳腺组织为材料,采用3’RACE技术克隆到奶牛IRS1基因3’UTR的全长,进一步对测得的序列进行了验证,同时利用Target Scan 7.0和Pic Tar软件预测可能结合的microRNA,并对多个软件预测结合的microRNA,进行最小结合自由能分析。结果表明,成功克隆了1 327 bp的牛IRS1 3’UTR全长,与NCBI上的预测序列一致率达到99%;miR-128、miR-96、miR-27a为2个软件共同预测到的结合microRNA;3个结合位点的最小自由能分别为-89.58、-87.91、-100.88 k J·mol-1,表明牛IRS1基因表达可能受到这3个microRNA的调控。 展开更多
关键词 胰岛素受体基质1 3’非翻译区 3’RACE 最小自由能
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miR-29a调控IRS1促进肝门部胆管癌细胞增殖的机制研究 被引量:3
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作者 王慧玲 董亚京 +3 位作者 林兴滔 区应亮 区金锐 简志祥 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2019年第4期456-460,共5页
目的检测miR-29a在肝门部胆管癌(hilar cholangiocarcinoma,HCCA)中的表达情况,探讨其在HCCA发生、发展中的作用。方法收集30对HCCA组织及癌旁正常组织标本,实时荧光定量PCR法检测miR-29a表达;利用生物信息学软件预测其靶基因,并进一步... 目的检测miR-29a在肝门部胆管癌(hilar cholangiocarcinoma,HCCA)中的表达情况,探讨其在HCCA发生、发展中的作用。方法收集30对HCCA组织及癌旁正常组织标本,实时荧光定量PCR法检测miR-29a表达;利用生物信息学软件预测其靶基因,并进一步采用双荧光素酶报告基因法和分子生物学实验进行验证;选取HCCA细胞株FRH0201,采用CCK-8法和流式细胞仪分别检测miR-29a/IRS1对HCCA细胞增殖及周期的影响。结果与癌旁正常组织相比,HCCA组织中miR-29a表达明显下调(P<0.05);在肿瘤细胞株FRH0201中上调miR-29a表达后可抑制肿瘤细胞增殖,引起G_0/G_1期阻滞,而上调IRS1表达可有效逆转这一现象。结论 HCCA中miR-29a显著低表达,并可能通过靶向调控IRS1引起HCCA细胞异常增殖和周期阻滞。 展开更多
关键词 肝门部胆管癌 miR-29a irs1
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5+2轻断食模式通过IRS1/PI3K/AKT通路激活自噬缓解2型糖尿病大鼠肾损伤 被引量:1
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作者 吴斌 夏年红 +3 位作者 胡惠贞 王玲 张作鹏 章丹 《锦州医科大学学报》 CAS 2024年第1期39-45,52,共8页
目的探究轻断食模式缓解2型糖尿病大鼠肾损伤的机制。方法将SD大鼠分为正常组、糖尿病组、轻断食+糖尿病组、MHY1485+轻断食+糖尿病组和740 Y-P+轻断食+糖尿病组,每组5只,除正常组外,其余各组均采用喂养高脂高糖饲料联合链脲佐霉素建立... 目的探究轻断食模式缓解2型糖尿病大鼠肾损伤的机制。方法将SD大鼠分为正常组、糖尿病组、轻断食+糖尿病组、MHY1485+轻断食+糖尿病组和740 Y-P+轻断食+糖尿病组,每组5只,除正常组外,其余各组均采用喂养高脂高糖饲料联合链脲佐霉素建立2型糖尿病大鼠模型。轻断食模式采用高脂高糖饲料喂食12 h禁食36 h的方法干预12 w,采用生化检测仪检测血清中肾功能指标。ELISA试剂盒检测大鼠空腹血清胰岛素(fasting serum insulin,FIN),并计算其胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);qPCR检测IRS1、WT1、LC3B和P62的mRNA表达水平,Western Blot检测大鼠肾脏组织的IRS1、WT1、P62和LC3I/II蛋白的表达水平,研究IRS1/PI3K/AKT通路及自噬相关指标。取肾脏组织进行HE、PAS染色观察病理变化,采用免疫组化检测P62和LC3B的表达;最后采用Tunel染色评估肾脏组织凋亡情况。结果与正常组相比,糖尿病组的大鼠血清中血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血脂甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TCHO)、血清游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量、空腹FINS、HOMA-IR均升高;而经轻断食模式后,上述指标含量均降低,与此同时qPCR和Western Blot结果显示,轻断食模式+糖尿病组相较于糖尿病组会下调IRS1表达,降低PI3K和AKT的磷酸化水平,从而影响LC3B表达上升,P62表达下降,使得肾脏组织的自噬活性提高,这与免疫组化的结果表现一致;病理染色证明轻断食使肾脏组织损伤减少,凋亡情况得到缓解,从WT1的上调也可看出足细胞损伤也到恢复。结论轻断食模式通过下调IRS1,抑制PI3K/AKT通路提高自噬活性,可缓解2型糖尿病大鼠肾损伤。缓解肾脏组织损伤对于延缓糖尿病肾病的发展有重要的意义。 展开更多
关键词 轻断食 irs1 自噬 糖尿病肾病 胰岛素抵抗 肾损伤
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IRS1基因rs7578326位点多态性与2型糖尿病合并高甘油三酯关联研究
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作者 武志凤 金花 +3 位作者 吴英博 刘玉娇 韩立坤 白海花 《内蒙古民族大学学报(自然科学版)》 2023年第2期178-183,共6页
目的:探究胰岛素受体底物-1(IRS1)基因单核苷酸多态性(SNP)位点rs7578326与2型糖尿病合并高甘油三酯的关系,揭示不同基因型对2型糖尿病合并高甘油三酯的影响。方法:采用问卷调查、临床研究、Sanger测序等分子生物学研究方法,将IRS1基因r... 目的:探究胰岛素受体底物-1(IRS1)基因单核苷酸多态性(SNP)位点rs7578326与2型糖尿病合并高甘油三酯的关系,揭示不同基因型对2型糖尿病合并高甘油三酯的影响。方法:采用问卷调查、临床研究、Sanger测序等分子生物学研究方法,将IRS1基因rs7578326位点多态性作为目标,采用SPSS统计分析,确定不同组间的基因型和等位基因频率差异。结果:IRS1基因rs7578326位点等位基因为A、G,等位基因A、G在T2DM+高甘油三酯组和对照组的分布频率依次为85.8%、14.2%,76.3%、23.7%,在高甘油三酯组和T2DM组的分布频率依次为83.3%、16.7%,76.1%、23.9%。与对照组相比,T2DM+高甘油三酯组和高甘油三酯组等位基因频率差异显著(P<0.05),T2DM组无显著差异(P>0.05)。T2DM+高甘油三酯组中AG+AA型人群TG、LDL-C水平均显著高于GG型(P<0.05)。结论:IRS1基因rs7578326位点等位基因A与蒙古族2型糖尿病合并高甘油三酯关联。 展开更多
关键词 蒙古族 2型糖尿病 高甘油三酯 irs1基因多态性
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IRS1在藻蓝蛋白介导的H460细胞增殖和迁移调控中的作用
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作者 王静 郝帅 +2 位作者 刘媛璞 李爽 赵磊 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期805-813,共9页
藻蓝蛋白来源于海洋藻类,是我国认可的食品着色剂和功能型食品.初期研究表明,藻蓝蛋白处理能抑制人类非小细胞肺癌系H460的体外增殖能力和迁移能力,使得其体外集落形成能力减弱.通过转录组学测序分析进一步探究具体作用机制,从藻蓝蛋白... 藻蓝蛋白来源于海洋藻类,是我国认可的食品着色剂和功能型食品.初期研究表明,藻蓝蛋白处理能抑制人类非小细胞肺癌系H460的体外增殖能力和迁移能力,使得其体外集落形成能力减弱.通过转录组学测序分析进一步探究具体作用机制,从藻蓝蛋白处理前后发生显著变化的基因中,筛选出了一个藻蓝蛋白处理后发生显著下调的基因,即胰岛素受体底物1(irs1),并通过体外转染siRNA的方法抑制IRS1的表达,来研究其对非小细胞肺癌系H460的增殖和迁移能力的影响.采用MTT法检测细胞增殖,细胞划痕实验检测细胞迁移,克隆形成实验检测细胞集落形成能力,流式细胞术检测细胞周期分布.结果表明,下调IRS1的表达后,与对照组相比,细胞的生长速率降低,迁移能力、集落形成能力受到抑制,同时使细胞周期被阻滞到G1期.PI3K-AKT信号通路研究表明,藻蓝蛋白处理使得PI3K-AKT信号通路活性受到抑制,下调IRS1的表达使得PI3K-AKT信号通路部分蛋白表达也下调,通路活性受到一定程度抑制.本研究结果表明,藻蓝蛋白抑制非小细胞肺癌系H460体外活性功能的机制,可能与IRS1的表达和PI3K-AKT信号通路的活性有关,这为藻蓝蛋白的调控机制提供了有力的理论基础. 展开更多
关键词 藻蓝蛋白 胰岛素受体底物1 H460 非小细胞肺癌 细胞增殖和迁移
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绵羊IRS1基因CDS区克隆、序列分析及其组织表达研究
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作者 王建清 郝志云 +5 位作者 沈继源 王继卿 罗玉柱 胡江 刘秀 李少斌 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期522-529,共8页
【目的】克隆绵羊IRS1基因CDS区,并研究其序列特征和组织表达。【方法】选择健康、3岁、处于第4胎的泌乳高峰期(产后第3周)小尾寒羊和空怀期小尾寒羊母羊各3只作为研究对象,利用克隆测序技术获得绵羊IRS1基因的CDS序列,用生物信息学分... 【目的】克隆绵羊IRS1基因CDS区,并研究其序列特征和组织表达。【方法】选择健康、3岁、处于第4胎的泌乳高峰期(产后第3周)小尾寒羊和空怀期小尾寒羊母羊各3只作为研究对象,利用克隆测序技术获得绵羊IRS1基因的CDS序列,用生物信息学分析其编码的氨基酸序列特征,用RT-qPCR检测IRS1基因在肝脏、心脏、背最长肌、脾脏、肺脏、卵巢、肾脏和乳腺组织中的表达模式。【结果】绵羊IRS1基因的CDS全长为3708 bp,编码1235个氨基酸,蛋白分子量为130462.80,等电点为8.99,不稳定指数为73.55,预测该蛋白为不稳定、碱性亲水性蛋白。蛋白互作分析表明,绵羊IRS1可以与胰岛素样生长因子1受体(IGFR1)、磷酸肌醇-3-激酶调节亚基1(PIK3R1)、丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)、丝裂原活化蛋白激酶10(MAPK10)和生长因子受体结合蛋白2(GRB2)相互作用,KEGG分析发现IRS1主要参与了PI3K/AKT和MAPK 2个信号通路。RT-qPCR分析表明,IRS1基因在小尾寒羊各组织中均表达,并且表现出明显的组织特异性,它在背最长肌中的表达量最高,其次是肝脏和心脏,在肺脏、肾脏、卵巢和乳腺组织中表达量较低,在脾脏中弱表达。同时,绵羊IRS1基因也表现出明显的时序表达性,在泌乳高峰期小尾寒羊中,IRS1基因在乳腺组织中的表达量是空怀期乳腺组织中表达量的2.77倍(P<0.05)。但在除乳腺和脾脏外的其他6个组织中,该基因在空怀期中的表达量均显著高于泌乳高峰期中的表达量(P<0.05)。【结论】克隆得到绵羊IRS1基因完整的CDS序列,它全长3708 bp,编码1235个氨基酸。IRS1在小尾寒羊各组织中广泛表达,并且表达出明显的组织特异性和时序特异性。 展开更多
关键词 irs1 克隆 绵羊 组织表达
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