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小肠结肠炎耶尔森菌irp2基因的克隆与表达
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作者 方娅琼 冯以勒 +8 位作者 马玉婷 冯春辉 赵猛 陆文凯 许文豪 李生强 马凯茹 冈林环树 张红见 《青海畜牧兽医杂志》 2025年第3期14-18,共5页
Irp2基因参与编码合成铁载体-耶尔森杆菌素(Ybt),是小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛的重要标志基因。为了探索小肠结肠炎耶尔森菌irp2基因的功能、免疫原性及强毒力岛的致病机制,本研究基于GenBank数据库中小肠结肠炎耶尔森菌的irp2基因序列... Irp2基因参与编码合成铁载体-耶尔森杆菌素(Ybt),是小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛的重要标志基因。为了探索小肠结肠炎耶尔森菌irp2基因的功能、免疫原性及强毒力岛的致病机制,本研究基于GenBank数据库中小肠结肠炎耶尔森菌的irp2基因序列,设计合成了一对特异性引物,以小肠结肠炎耶尔森菌ZDN6菌株为研究对象,通过PCR技术扩增获得413 bp的irp2基因片段,并进行了测序分析;随后将其克隆至pET28a(+)载体,转化入TOP10感受态细胞,通过限制性酶切和测序对重组质粒进行验证;然后将鉴定正确的重组质粒pET28a(+)-irp2导入BL21(DE)3菌株中,通过IPTG促使融合蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot分析其表达水平。结果表明,pET28a(+)-irp2原核表达载体构建成功,并在大肠埃希菌BL21(DE)3中成功表达出irp2基因,该融合蛋白的大小约为15 kDa。研究结果可为后期高致病性小肠结肠炎耶尔森菌的筛选、鉴定以及强毒力岛的致病机制等研究奠定基础。 展开更多
关键词 小肠结肠炎耶尔森菌 irp2基因 克隆 原核表达
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加味金水六君煎通过HIF-1α/IRP1/TFR1通路调控肺腺癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力
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作者 武晓媛 李占林 +1 位作者 乔廷廷 刘戴维 《标记免疫分析与临床》 2025年第3期584-591,共8页
目的探讨加味金水六君煎(JSLJD)通过HIF-1α/IRP1/TFR1通路调控肺腺癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力。方法将肺腺癌H157细胞分为Control组、JSLJD低剂量(JSLJD-L)组、JSLJD中剂量(JSLJD-M)组、JSLJD高剂量(JSLJD-H)组、JSLJD-H+YC-1... 目的探讨加味金水六君煎(JSLJD)通过HIF-1α/IRP1/TFR1通路调控肺腺癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力。方法将肺腺癌H157细胞分为Control组、JSLJD低剂量(JSLJD-L)组、JSLJD中剂量(JSLJD-M)组、JSLJD高剂量(JSLJD-H)组、JSLJD-H+YC-1(HIF-1α抑制剂)组。CCK-8检测细胞增殖;细胞划痕实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡率;Matrigel胶三维培养观察血管生成情况;试剂盒检测亚铁离子(Fe^(2+))、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、活性氧(ROS)水平;Western blot检测细胞PCNA、MMP-9、Cleaved caspase-3、GPX4、HIF-1α、IRP1、TFR1蛋白表达水平。结果与Control组相比,JSLJD-L组、JSLJD-M组和JSLJD-H组H157细胞VM结构数量明显减少,且有不同程度的破损,OD 450值(24、48h),细胞划痕愈合率与细胞侵袭个数、GSH水平低,PCNA、MMP-9和GPX4蛋白表达水平降低,细胞凋亡率,Fe^(2+)、MDA、ROS水平、Cleaved-caspase-3、HIF-1α、IRP1、TFR1蛋白表达水平升高(P<0.05);与JSLJD-H组相比,JSLJD-H+YC-1组H157细胞VM结构数量明显增多,结构相对完整,OD 450值(24、48h),细胞划痕愈合率与细胞侵袭个数、GSH水平低,PCNA、MMP-9和GPX4蛋白表达水平升高,细胞凋亡率,Fe^(2+)、MDA、ROS水平、Cleaved-caspase-3、HIF-1α、IRP1、TFR1蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论JSLJD可抑制肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,可能是通过激活HIF-1α/IRP1/TFR1通路实现的。 展开更多
关键词 加味金水六君煎 HIF-1α/IRP1/TFR1通路 肺腺癌细胞 增殖 凋亡 迁移和侵袭
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Effects of Three Kinds of Chinese Medicine Polysaccharides on the Immune Effect of Newcastle Disease Vaccine 被引量:7
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作者 杨庆芳 杨康林 +1 位作者 姚静 蒋春茂 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2015年第10期2283-2285,2303,共4页
240 14-day-old healthy and non-immune Roman chicken were randomly divided into 8 groups, including blank control group (BC group), immune control group (IC group), and immunity groups of each Chinese medicine. On ... 240 14-day-old healthy and non-immune Roman chicken were randomly divided into 8 groups, including blank control group (BC group), immune control group (IC group), and immunity groups of each Chinese medicine. On the day of the first immunity, 3 d before the second immunity, the day of the second immunity and 3 d after the second immunity, high-dose concentration and low-dose concen- tration of Astragalus polysaccharide (ASP), Epimedium polysaccharide (EPP) and Isatis roots polysaccharide (IRPS) were used for the immunity groups of each Chi- nese medicine using the gavage, and 0.5 ml for each chick, and the equivalent normal saline was used for the blank control group and vaccine control group. On the 7^th, 14^th, 21^st and 28^th day after the first immunity, 10 chicken of each group were randomly got and weighed, and the antibody titer and the changes of the pro- liferation of T lymphocyte were measured. The results showed that 3 kinds of Chi- nese medicine polysaccharides all can increase the weight of chicken, improve HI antibody titer of Newcastle disease, and promote the proliferation of peripheral T lymphocyte, in which the effect of IRPS at low dosage is the best. 展开更多
关键词 Astragalus polysaccharides (ASP) Epimedium polysaccharides (EPP) Isatis root polysaccharides irps Newcastle disease vaccine Antibody titer T lymphocyte
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3种中药多糖对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响 被引量:2
4
作者 杨庆芳 杨康林 +1 位作者 姚静 蒋春茂 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第4期220-221,225,共3页
14日龄健康、非免疫罗曼蛋公鸡240羽,随机均分为8组,用鸡新城疫疫苗首次免疫和二次免疫前3 d、当日及后3 d,试验组分别灌胃0.5 m L高、低剂量黄芪多糖(ASP)、淫羊藿多糖(EPP)和板蓝根多糖(IRPS)溶液,空白对照组和免疫对照组灌胃等量生... 14日龄健康、非免疫罗曼蛋公鸡240羽,随机均分为8组,用鸡新城疫疫苗首次免疫和二次免疫前3 d、当日及后3 d,试验组分别灌胃0.5 m L高、低剂量黄芪多糖(ASP)、淫羊藿多糖(EPP)和板蓝根多糖(IRPS)溶液,空白对照组和免疫对照组灌胃等量生理盐水。各组分别于首免后连续4周随机取鸡10羽称量体质量、测定抗体效价和T淋巴细胞增殖变化。结果表明,3种中药多糖均可促进鸡体质量增加,提高新城疫HI抗体效价,促进外周血T淋巴细胞增殖,其中低剂量的IRPS效果最好。 展开更多
关键词 黄芪多糖(ASP) 淫羊藿多糖(EPP) 板蓝根多糖(irps) 新城疫疫苗 抗体效价 T淋巴细胞
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铁过载对人乳腺癌细胞c-MYC蛋白表达的影响 被引量:1
5
作者 史云湘 史杪 +4 位作者 冯琼 周季平 方旭 王强 潘桂兰 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第11期1488-1492,共5页
目的研究铁过载催化的氧化应激对乳腺癌细胞中癌前因子c-MYC影响。方法分别以0、50和500μmol/L硫酸亚铁溶液培养人乳腺癌MCF-7细胞系24 h后,以细胞荧光染色法检测ROS活性,Western blot检测IRP1、IRP2、c-MYC、p-ERK1/2、GSK和PP2A蛋白... 目的研究铁过载催化的氧化应激对乳腺癌细胞中癌前因子c-MYC影响。方法分别以0、50和500μmol/L硫酸亚铁溶液培养人乳腺癌MCF-7细胞系24 h后,以细胞荧光染色法检测ROS活性,Western blot检测IRP1、IRP2、c-MYC、p-ERK1/2、GSK和PP2A蛋白的表达。加入NADPH氧化酶抑制剂二苯基碘(DPI)后检测ROS活性和c-MYC蛋白表达。结果随着铁剂量的增加,MCF-7细胞内ROS活性和IRP2蛋白表达均显著增加(P<0.05),IRP1无明显改变。铁过载还显著增加c-MYC蛋白表达,促进ERK1/2的磷酸化,降低GSK、PP2A蛋白表达(P<0.05)。加入DPI后,铁诱导的ROS活性及c-MYC蛋白表达被显著抑制(P<0.05)。结论铁过载可以通过诱导细胞内ROS活性的增强上调乳腺癌细胞c-MYC蛋白的表达。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 ROS irps C-MYC
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APEC强毒力岛核心基因irp2、fyuA敲除对其致病性影响的研究 被引量:11
6
作者 邵颖 涂健 +4 位作者 汪雪雁 周秀红 白灏 韩先干 祁克宗 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期564-570,共7页
采用Red同源重组技术分别构建出APEC irp2单基因敲除株△AE17和irp2、fyuA双基因敲除株△△AE17。运用活菌计数法分别观察AE17、△AE17、△△AE17黏附鸡胚成纤维细胞DF-1的能力。并且应用Real-time PCR检测AE17、△AE17和△△AE17中的lu... 采用Red同源重组技术分别构建出APEC irp2单基因敲除株△AE17和irp2、fyuA双基因敲除株△△AE17。运用活菌计数法分别观察AE17、△AE17、△△AE17黏附鸡胚成纤维细胞DF-1的能力。并且应用Real-time PCR检测AE17、△AE17和△△AE17中的luxs,pfs,tsh,ibeA,stx2f,iss,ompA,fimC 8个毒力基因转录水平。结果成功构建出基因敲除株△AE17和△△AE17,它们黏附DF-1细胞的能力分别下降为AE17的66.04%和53.54%。同时,Real-time PCR结果显示,△AE17的luxs,iss,ompA和fimC等4个毒力基因的转录水平均极显著下降(P<0.01),△△AE17的luxs,pfs,tsh,iss,ompA和fimC等6个毒力基因的转录水平极显著的下降(P<0.01)。结果表明强毒力岛中核心基因的敲除能够减弱APEC黏附DF-1的能力,并且使其毒力基因的转录水平有所降低。irp2、fyuA双基因敲除较irp2单基因敲除对APEC的致病性影响更显著。 展开更多
关键词 APEC 强毒力岛 irp2 fyuA 致病性
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高精度非回转对称非球面加工方法研究 被引量:13
7
作者 徐乐 张春雷 +1 位作者 代雷 张健 《中国光学》 EI CAS CSCD 2016年第3期364-370,共7页
本文提出一种高精度非回转对称非球面加工方法。首先,通过范成法铣磨出非回转对称非球面的最佳拟合球;然后,利用古典抛光修正小磨头确定抛光难以修正的中频误差;最后,利用高精度气囊抛光设备(IRP)精确对位精修面形,在不引入额外中频误... 本文提出一种高精度非回转对称非球面加工方法。首先,通过范成法铣磨出非回转对称非球面的最佳拟合球;然后,利用古典抛光修正小磨头确定抛光难以修正的中频误差;最后,利用高精度气囊抛光设备(IRP)精确对位精修面形,在不引入额外中频误差条件下,通过高精度对位检测技术实现非回转对称非球面高精度加工。将该方法应用于定点曲率半径为970.737 mm、k=-1、口径为106 mm三次非球面加工,降低了加工难度,提高了加工精度,面形误差收敛到1/30λ(RMS)。实验结果验证了本文加工方法的正确性和可行性,对高精度非回转对称非球面加工具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 非回转对称 非球面 气囊抛光 IRP 抛光
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腹泻仔貉检出携带耶尔森菌HPI毒力岛的大肠杆菌 被引量:13
8
作者 张艳英 史秋梅 +3 位作者 房海 陈翠珍 刘亚君 杨月琳 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期179-182,共4页
目的为了解大肠杆菌引起仔貉腹泻的机理,进行了小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因的检测,并对其菌株作毒力试验。方法用PCR扩增法检测毒力岛基因irp2和fyua,小鼠腹腔注射检测菌株毒力。结果从3个貉场腹泻病死貉脏器以及粪便中分离出血清... 目的为了解大肠杆菌引起仔貉腹泻的机理,进行了小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因的检测,并对其菌株作毒力试验。方法用PCR扩增法检测毒力岛基因irp2和fyua,小鼠腹腔注射检测菌株毒力。结果从3个貉场腹泻病死貉脏器以及粪便中分离出血清型分别为O23和O20的大肠杆菌,对两血清型大肠杆菌进行毒力岛检测,均检出携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因irp2和fyuA。2个血清型O23、O20大肠杆菌均分别使小鼠发病死亡。结论仔貉腹泻是由携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因irp2和fyua的大肠杆菌引起,该菌对仔貉的健康具有潜在的威胁。 展开更多
关键词 腹泻 毒力岛基因irp2和fyua 小肠结肠炎耶尔森菌 仔貉
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腹泻水貂检出携带耶尔森菌HPI毒力岛的大肠杆菌 被引量:14
9
作者 史秋梅 张艳英 +2 位作者 房海 陈翠珍 刘杰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期857-861,共5页
为了解大肠杆菌引起水貂腹泻的机理,进行了小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因的检测,并对其菌株做毒力试验。用PCR扩增法检测毒力岛基因irp2和fyua,小鼠腹腔注射检测菌株毒力。结果:从3个貂场腹泻病死水貂脏器以及粪便中分离出血清型分别... 为了解大肠杆菌引起水貂腹泻的机理,进行了小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因的检测,并对其菌株做毒力试验。用PCR扩增法检测毒力岛基因irp2和fyua,小鼠腹腔注射检测菌株毒力。结果:从3个貂场腹泻病死水貂脏器以及粪便中分离出血清型分别为O78、O29和O38的大肠杆菌,对3个血清型大肠杆菌进行毒力岛检测,均检出携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因irp2和fyua。3个血清型O78、O29和O38的大肠杆菌均使小鼠发病死亡。结果表明水貂腹泻是由携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因irp2和fyua的大肠杆菌引起,该菌对水貂的健康具有潜在的威胁。 展开更多
关键词 腹泻 毒力岛基因irp2和fyua 小肠结肠炎耶尔森菌 水貂
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禽致病性大肠杆菌HPI毒力岛irp2蛋白表达、纯化及其间接ELISA方法建立 被引量:6
10
作者 王艳萍 郭时金 +6 位作者 徐倩倩 苗立中 刘吉山 沈志强 莫玲 董林 李风叶 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期287-292,300,共7页
PCR扩增irp2主要抗原表位区,构建pET32a—irp2表达载体,转化BL21(DM3)细胞诱导表达。以纯化irp2蛋白为抗原建立ELISA检测方法,确定抗原包被浓度、血清稀释度、封闭液与封闭条件和临界值等参数,进行ELISA性能检测及应用。结果显示... PCR扩增irp2主要抗原表位区,构建pET32a—irp2表达载体,转化BL21(DM3)细胞诱导表达。以纯化irp2蛋白为抗原建立ELISA检测方法,确定抗原包被浓度、血清稀释度、封闭液与封闭条件和临界值等参数,进行ELISA性能检测及应用。结果显示,PCR扩增出约519bp特异性irp2主要抗原表位基因,经菌液PCR、双酶切及DNA测序显示成功构建pET-32a—irp2表达栽体。irp2目的蛋白获得有效表达,相对分子质量大小约34500,亲和纯化后纯度达90%以上。Westernblot显示目的蛋白irp2与抗血清在约34500出现特异性显示条带。确定ELISA抗原包被质量浓度3.25mg/L、血清稀释度1:80,封闭液为5%脱脂奶粉,封闭条件37℃1h+4℃10h,临界值为0.320。性能检测显示,其敏感性可达1:5120;与鸡白痢沙门菌、鸡传染性鼻炎、鸡霉形体、鸡巴氏杆菌、HPI大肠杆菌等血清无交叉反应特异性,批内、批间变异系数分别为3.40%~6.71%和5.20%~8.44%;与PCR方法对124份血清平行试验其符合率93.8%;对1425份临床血清样品irp2抗体阳性检出率37.4%。结果表明,建立了可检测血清中irp2蛋白抗体的间接ELISA方法,适用于临床血清样品进行快速抗体检测,为HPI大肠杆菌的流行病学调查和致病性大肠杆菌免疫机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 大肠杆菌 毒力岛 irp2 ELISA
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Windows内核级Rootkits隐藏技术的研究 被引量:10
11
作者 龚广 李舟军 +2 位作者 忽朝俭 邹蕴珂 李智鹏 《计算机科学》 CSCD 北大核心 2010年第4期59-62,共4页
随着Rootkits技术在信息安全领域越来越受到重视,各种Anti-rootkits新技术不断出现。在各种Anti-root-kits工具的围剿下,常规的Rootkits隐藏技术难以遁形。在系统分析和深入研究传统内核级Rootkits隐藏技术的基础上,提出了一个集驱动模... 随着Rootkits技术在信息安全领域越来越受到重视,各种Anti-rootkits新技术不断出现。在各种Anti-root-kits工具的围剿下,常规的Rootkits隐藏技术难以遁形。在系统分析和深入研究传统内核级Rootkits隐藏技术的基础上,提出了一个集驱动模块整体移位、内核线程注入、IRP深度内联Hook 3种技术为一体的Rootkits隐藏技术体系。实验结果显示,基于该隐藏技术体系所实现的Rootkits能够很好地躲避专业的Anti-rootkits工具(如Rootkit Unhooker和冰刃)的检测,从而充分表明了这种三位一体的Rootkits隐藏技术体系的有效性。 展开更多
关键词 ROOTKITS Anti—rootkits 驱动模块整体移位 内核线程注入 IRP深度内联Hook
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基于文件系统过滤驱动器的加密软件设计 被引量:33
12
作者 邵昱 萧蕴诗 《计算机应用》 CSCD 北大核心 2005年第5期1151-1152,共2页
在比较几种文件加密方法特点的基础上,提出了一种基于文件过滤器的加密方法, 并介绍了程序设计方法。新的加密方法与其他文件加密方法相比,具有访问控制方便、安全性好的优点,且支持多种存储介质。
关键词 文件系统 过滤驱动器 文件加密 WDM IRP
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信息资源规划与企业信息化 被引量:22
13
作者 杨君 李纲 《情报学报》 CSSCI 北大核心 2003年第6期704-708,共5页
本文提出了企业信息化的四个层次以及中国企业信息化所处的层次,分析了中国企业信息化过程中存在的问题--"信息孤岛",指出了解决这一问题的方法--信息资源规划(IRP),并具体阐述了IRP的含义、作用、解决方案的构成、IRP的应用... 本文提出了企业信息化的四个层次以及中国企业信息化所处的层次,分析了中国企业信息化过程中存在的问题--"信息孤岛",指出了解决这一问题的方法--信息资源规划(IRP),并具体阐述了IRP的含义、作用、解决方案的构成、IRP的应用项目类型,实施要点以及IRP实施过程中的计划控制与协调. 展开更多
关键词 信息资源规划 IRP 企业信息化 网络信息系统 应用软件工程 协调工作
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禽源性大肠杆菌HPI毒力岛irp2基因PCR检测方法的建立与应用 被引量:6
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作者 王艳萍 董林 +5 位作者 郭时金 徐倩倩 莫玲 王金良 刘吉山 沈志强 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期86-89,共4页
为了解临床禽源致病性大肠杆菌中高致病性毒力岛(High pathogenicity island HPI)流行情况和基因特征,根据Gen Bank已知禽源irp2基因序列,设计、合成一对特异性引物,建立irp2基因PCR检测方法,优化、确定PCR扩增特性,进行敏感性、特异性... 为了解临床禽源致病性大肠杆菌中高致病性毒力岛(High pathogenicity island HPI)流行情况和基因特征,根据Gen Bank已知禽源irp2基因序列,设计、合成一对特异性引物,建立irp2基因PCR检测方法,优化、确定PCR扩增特性,进行敏感性、特异性、重复性检测评价。对256份临床分离禽源大肠杆菌进行irp2基因PCR检测和基因遗传变异分析。结果显示,建立的PCR检测方法敏感性可达2.14×10^(-4)ng/μL;特异性显示与鸡沙门菌、副鸡嗜血杆菌、鸭疫里默菌、禽巴氏杆菌、鸡毒支原体、鸡新城疫病毒、禽流感病毒(H9N5)核酸均无交叉反应;重复性显示3份阳性样品重复5次检测,变异系数3.4%~5.0%。256份临床样品PCR检测irp2基因,阳性率30.6%。获得了9株分离株irp2基因序列,分析显示,与GenBank已知基因同源性高达96.2%以上。说明建立的禽源大肠杆菌HPI毒力岛irp2基因PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可应用于临床致病性大肠杆菌毒力岛基因快速检测。 展开更多
关键词 禽源大肠杆菌 HPI 毒力岛 irp2基因
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基于铁死亡探讨温阳复元方对脑缺血再灌注损伤大鼠神经损伤的保护机制 被引量:9
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作者 向军军 李丽琴 +3 位作者 李建铮 莫雪妮 陈炜 胡跃强 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1649-1657,共9页
目的基于铁死亡探讨中药温阳复元方改善脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)大鼠神经损伤的可能机制。方法SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、温阳复元方组、铁死亡诱导剂组、温阳复元方+铁死亡诱导剂组... 目的基于铁死亡探讨中药温阳复元方改善脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)大鼠神经损伤的可能机制。方法SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、温阳复元方组、铁死亡诱导剂组、温阳复元方+铁死亡诱导剂组、铁死亡抑制剂组,每组12只。假手术组手术步骤同模型组,但线栓只插入颈内动脉深度9 mm,不堵塞大脑中动脉,其余各组采用线栓法构建大脑中动脉闭塞/再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)模型。在造模前24 h开始,按照分组给予铁死亡诱导剂(100 mg·kg^(-1))、铁死亡抑制剂(5 mg·kg^(-1))腹腔注射;中药温阳复元方(18.0 g·kg^(-1))灌胃于麻醉清醒后2 h开始。各干预措施每天1次,连续7 d。分别于MCAO/R术后第1、3、7天采用Longa评分标准进行神经功能缺损评分。疗程结束后取材,采用苏木素-伊红染色法(HE)观察各组大鼠神经元形态学变化,透射电子显微镜观察各组大鼠神经元超微结构变化,生化试剂盒检测脑组织亚铁离子(Fe^(2+))和还原型谷胱甘肽(GSH)含量的变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、Western Blot法检测转运铁蛋白受体1(TFR1)、铁调节蛋白1(IRP1)、膜铁转运蛋白(FPN)mRNA及蛋白的表达变化。结果(1)与假手术组比较,模型组大鼠在各时间点神经功能缺损评分均升高(P<0.01);HE染色显示神经元稀疏杂乱、细胞核固缩、边缘出现空泡,电镜下可见神经元线粒体数目减少、线粒体膜密度增加或破裂溶解、线粒体嵴消失;Fe2+含量与TFR1 mRNA及蛋白表达量升高(P<0.01),GSH含量与IRP1、FPN mRNA及蛋白表达量明显下降(P<0.05,P<0.01)。(2)与模型组比较,温阳复元方组大鼠在各时间点神经功能缺损评分降低(P<0.05);神经元数目增多且排列相对整齐、细胞核形态完整清晰,神经元线粒体结构相对完整、线粒体膜相对完整、线粒体嵴清晰;Fe^(2+)含量与TFR1 mRNA及蛋白表达量下降(P<0.05,P<0.01)、GSH含量与IRP1及FPN mRNA、蛋白表达量升高(P<0.05,P<0.01)。(3)与温阳复元方组比较,铁死亡诱导剂组及温阳复元方+铁死亡诱导剂组大鼠在各时间点神经功能缺损评分均升高(P<0.05);神经元分布杂乱,细胞核缩小,边缘出现空泡,线粒体膜密度增加可见部分破裂溶解、线粒体数目减少、线粒体嵴消失;Fe^(2+)含量与TFR1 mRNA及蛋白表达量升高(P<0.05,P<0.01)、GSH含量及IRP1、FPN mRNA及蛋白表达量减少(P<0.05,P<0.01);而铁死亡抑制剂组与温阳复元方组比较,各观察指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论温阳复元方可改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能及病理损伤,其机制可能与调节IRP1蛋白表达,改善脑铁代谢途径抑制铁死亡有关。 展开更多
关键词 温阳复元方 脑缺血再灌注损伤 神经损伤 脑铁代谢 铁死亡 铁调节蛋白1(IRP1) 大鼠
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基于WDM设备驱动的虚拟仪器的研究与实现 被引量:9
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作者 赵鸽 陈姚节 熊文龙 《武汉理工大学学报(交通科学与工程版)》 北大核心 2003年第2期267-269,共3页
常规用来调试电路的高端仪器主要是靠进口获得 ,价位比较高 ,而且对于采集的数据也没有作相应的处理 ,如 :备份、打印以及浏览等 .在 Windows2 0 0 0平台上 ,采用虚拟仪器以及一块配有相应的数据采集和分析软件的信号采集卡 。
关键词 WDM 设备驱动程序 IRP I/O端口 虚拟仪器 数据采集
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利用Red重组系统敲除APEC毒力岛irp2基因 被引量:4
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作者 李叶芳 涂健 +2 位作者 邵颖 刘红梅 祁克宗 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期854-858,共5页
应用质粒pKD46介导的Red同源重组系统,以质粒pKD3为模板,设计irp2基因序列敲除引物,引物5′端有51 bp的拟敲除基因的同源臂,3′端为扩增引物,扩增两侧含FRT位点的氯霉素抗性基因,通过第1次同源重组将拟敲除的irp2基因替换为氯霉素抗性基... 应用质粒pKD46介导的Red同源重组系统,以质粒pKD3为模板,设计irp2基因序列敲除引物,引物5′端有51 bp的拟敲除基因的同源臂,3′端为扩增引物,扩增两侧含FRT位点的氯霉素抗性基因,通过第1次同源重组将拟敲除的irp2基因替换为氯霉素抗性基因,再通过重组酶质粒pCP20在FRT位点发生第2次同源重组,消除抗性基因。结果表明,利用该重组系统成功敲除了禽致病性大肠杆菌HPI毒力岛irp2基因。为深入研究irp2基因在禽致病性大肠杆菌致病过程中所发挥的作用打下基础。 展开更多
关键词 禽致病性大肠杆菌 HPI毒力岛 Red同源重组酶 irp2 缺失
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禽大肠杆菌毒力岛主要摄铁基因及生物膜的检测 被引量:3
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作者 汪凯 王琦 +2 位作者 潘玲 刘红梅 周杰 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期47-50,共4页
以临床病禽分离17株E.coli为研究对象,分别检测分离菌株的毒力岛中irp2、irp3、irp4、irp5和生物膜形成能力。先用irp2 PCR扩增检出7株致病性大肠杆菌,并对其进行ERIC-PCR分型,结果分为2个类型。又对分离株进行irp3、irp4和irp5基因检测... 以临床病禽分离17株E.coli为研究对象,分别检测分离菌株的毒力岛中irp2、irp3、irp4、irp5和生物膜形成能力。先用irp2 PCR扩增检出7株致病性大肠杆菌,并对其进行ERIC-PCR分型,结果分为2个类型。又对分离株进行irp3、irp4和irp5基因检测,结果分离株中irp2、irp3、irp4和irp5的阳性检出率分别为41.2%、64.7%、29.4%和35.3%;最后对分离株进行生物膜形成能力的检测,结果携带irp2的阳性菌株都有较强的生物膜形成能力。结果提示,禽致病性大肠杆菌的HPI中irp2与生物膜的形成有一定的关联。 展开更多
关键词 致病性大肠杆菌 irp2 ERIC-PCR 生物膜
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IRP中基于广义聚合度的主题数据库划分技术 被引量:4
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作者 刘文远 徐丽娜 +1 位作者 王宝文 陈国鹰 《情报杂志》 CSSCI 北大核心 2007年第10期70-71,74,共3页
提出了广义聚合度的概念,利用广义聚合度分析技术进行主题数据库划分克服了聚合性分析过程中出现的双向性问题,使实体之间的联系更加清晰,从而更有利于主题数据库的划分。基于广义聚合度的主题数据库的划分方法为信息资源规划中主题数... 提出了广义聚合度的概念,利用广义聚合度分析技术进行主题数据库划分克服了聚合性分析过程中出现的双向性问题,使实体之间的联系更加清晰,从而更有利于主题数据库的划分。基于广义聚合度的主题数据库的划分方法为信息资源规划中主题数据库的划分打下了稳定的基础。 展开更多
关键词 主题数据库 实体 聚合度 广义聚合度 IRP
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高致病性毒力岛Irp1介导的细菌对Vero细胞黏附作用 被引量:4
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作者 金文杰 郑志明 +2 位作者 吉荣 钱文正 秦爱建 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期1-4,共4页
高致病性毒力岛(HPI)已经在多种类型大肠杆菌中被发现。为了解HPI-Irp1在细菌致病中的作用,通过生物软件DNAStar的分析,筛选出HPI中irp1和fyuA基因上10个表位作用优势较强的区域。设计特异性引物10对,进行PCR扩增,将获得的PCR产物,插入... 高致病性毒力岛(HPI)已经在多种类型大肠杆菌中被发现。为了解HPI-Irp1在细菌致病中的作用,通过生物软件DNAStar的分析,筛选出HPI中irp1和fyuA基因上10个表位作用优势较强的区域。设计特异性引物10对,进行PCR扩增,将获得的PCR产物,插入原核表达载体pET32a,构建重组质粒;将获得的重组质粒转化进入菌毛阴性宿主菌BL21,获得的重组菌用IPTG诱导表达后与Vero细胞混合进行体外作用。结果表明:带有irp1-1基因片段的重组菌BL21-rpET32a-irp1-1表现出对Vero细胞较强的聚集黏附作用,空载体对照和宿主菌对照均未出现相关现象。因而推测irp1-1基因片段编码的产物在细菌对宿主致病过程中,介导了细菌与宿主细胞的相互作用。 展开更多
关键词 大肠杆菌 高致病性毒力岛(HPI) Irp1 黏附作用
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