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Irgm1基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠CD4^+ T细胞亚群的影响 被引量：2
1
作者 王彩红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期180-184,共5页
目的:探讨免疫相关GTP酶1(Irgm1)基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠CD4+T细胞的影响。方法:C57BL/6纯系小鼠与Irgm1基因敲除杂合小鼠(Irgm1+/-)回交十代繁殖C57BL/6背景下Irgm1+/... 目的:探讨免疫相关GTP酶1(Irgm1)基因敲除对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠CD4+T细胞的影响。方法:C57BL/6纯系小鼠与Irgm1基因敲除杂合小鼠(Irgm1+/-)回交十代繁殖C57BL/6背景下Irgm1+/-小鼠,用C57BL/6 Irgm1+/-小鼠杂交获取Irgm1-/-、Irgm1+/-、Irgm1+/+三种基因型小鼠,PCR扩增DNA检测基因型。用髓鞘少突胶质糖蛋白(Myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG33-55)多肽与弗氏完全佐剂等量混合制成乳剂,免疫C57BL/6野生型(Wt.)和Irgm1基因敲除(Irgm1-/-)小鼠,建立EAE模型,并进行临床评分。MTT法测定MOG33-55免疫后7 d的EAE小鼠淋巴结细胞中MOG33-55特异性T细胞增殖分化水平。取MOG33-55免疫后14 d EAE小鼠脊髓切片,HE染色检测炎细胞浸润情况。取MOG33-55免疫后16 d的EAE-小鼠淋巴结、脊髓和脑组织,提取单个核细胞,用MOG33-55(20μg/ml)体外刺激培养7 d,收集细胞,用流式细胞仪分析EAE小鼠淋巴结、中枢神经系统浸润细胞中Th1、Th17的改变。结果:成功诱导了EAE小鼠模型;HE染色结果显示Wt.小鼠脊髓周围出现明显炎细胞浸润,而Irgm1-/-小鼠则无明显变化;MTT实验表明Irgm1-/-小鼠与Wt.小鼠相比,淋巴结中T细胞对MOG33-55特异性增殖能力降低;流式细胞分析表明相对于Wt.小鼠,Irgm1-/-小鼠EAE模型在淋巴结及中枢神经系统浸润细胞中Th1细胞亚群比例明显增高而Th17细胞亚群比例下降。结论:Irgm1基因敲除可部分保护EAE小鼠的脊髓功能及临床症状。在EAE发病早期,Irgm1可能起到了关键性的作用,因此Irgm1有可能成为EAE治疗的重要分子靶点。 展开更多
关键词 多发性硬化(MS) 实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE) 免疫相关GTP酶1(irgm1) CD4+T细胞亚群
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Irgm1在实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脑脊髓中的表达
2
作者 王春雨 王葳 +3 位作者 于淑杰 杨欣燕 陈桂英 綦莹 《中国医药指南》 2016年第19期35-36,共2页
目的探讨IFN-γ诱导性免疫相关GTP酶Irgml在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病中的免疫调节作用。方法 1建立EAE动物模型:a.经典EAE小鼠模型;b.基因敲除小鼠(Irgm1-/-)EAE模型。2 EAE模型症状学评价。3在基因和蛋白水平检测Irgm1在经典... 目的探讨IFN-γ诱导性免疫相关GTP酶Irgml在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病中的免疫调节作用。方法 1建立EAE动物模型:a.经典EAE小鼠模型;b.基因敲除小鼠(Irgm1-/-)EAE模型。2 EAE模型症状学评价。3在基因和蛋白水平检测Irgm1在经典型EAE小鼠脑和脊髓中的表达。结果 1成功诱导了小鼠EAE模型。2基因和蛋白水平检测经典型EAE小鼠Irgml的表达与对照组小鼠比较有统计学意义(P<0.05)。3经典型EAE小鼠Irgm1的表达在免疫后不同时间呈现先上升后下降的变化趋势。结论 1 EAE模型建立方法稳定、可靠。2 Irgm1在EAE发生、发展和恢复中起着复杂的免疫调节作用,可能是EAE发病的致病因素之一。 展开更多
关键词 irgm1 实验性自身免疫性脑脊髓炎 小鼠 脑 脊髓 表达
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GTP酶-Irgm1对巨噬细胞亚型M1的影响 被引量：1
3
作者 刘芳 孙博 《国际免疫学杂志》 CAS 2016年第4期339-342,共4页
目的 就GTP酶-Irgm1对巨噬细胞亚型M1分化的影响及可能的机制进行探讨.方法 分别对小鼠腹腔原代巨噬细胞和小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞进行培养,通过流式细胞术并以CD11b及F4/80标记巨噬细胞.每种细胞分成siRNA干扰组与对照组,然后待细... 目的 就GTP酶-Irgm1对巨噬细胞亚型M1分化的影响及可能的机制进行探讨.方法 分别对小鼠腹腔原代巨噬细胞和小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞进行培养,通过流式细胞术并以CD11b及F4/80标记巨噬细胞.每种细胞分成siRNA干扰组与对照组,然后待细胞贴壁后24 h加入干扰素（IFN）-γ和脂多糖（LPS）体外诱导巨噬细胞向M1转化,再进行流式细胞术iNOS染色鉴定M1的百分比.最后利用Western blot和RT-PCR检测体外诱导M1细胞过程时IRF5、IRF8及iNOS的表达情况.结果 ①加入Irgm1 siRNA干扰组的M1百分比（3.4％）明显低于对照组（35.8％）,差异有统计学意义（P＜0.05）;②QPCR检测结果显示：加入Irgm1 siRNA的干扰组与对照组相比,IRF5和IRF8 mRNA表达明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.Western blotting检测结果显示：加入Irgm1 siRNA干扰组与对照组相比,IRF5和IRF8蛋白表达明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 巨噬细胞内Irgrn1能够通过影响IFR5和IRF8的表达影响巨噬细胞型别的改变. 展开更多
关键词 irgm1 巨噬细胞 分化
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免疫相关GTP酶Irgm1对小鼠暂时性大脑中动脉缺血再灌注模型脑神经元自噬发生的影响 被引量：2
4
作者 何书宇 夏福灿 +3 位作者 董海燕 孙伟楠 郝增辉 徐红薇 《国际免疫学杂志》 CAS 2012年第3期231-235,共5页
目的探讨免疫相关GTP酶1（Irgml）在小鼠暂时性大脑中动脉缺血再灌注模型（tMCAO）中的表达及其对tMCAO小鼠大脑神经元内自噬发生的影响。方法采用westernblotting和免疫荧光染色，检测Irgml和自噬相关基因LC3I／II及P62在Irgml^＋/＋小... 目的探讨免疫相关GTP酶1（Irgml）在小鼠暂时性大脑中动脉缺血再灌注模型（tMCAO）中的表达及其对tMCAO小鼠大脑神经元内自噬发生的影响。方法采用westernblotting和免疫荧光染色，检测Irgml和自噬相关基因LC3I／II及P62在Irgml^＋/＋小鼠tMCAO脑组织内的表达水平及细胞定位；进一步比较Irgml^＋/＋及Irgml。小鼠tMCAO大脑神经元内自噬发生的差异。结果相比于假手术（sham）组，Irgml在Irgml^＋/＋小鼠tMCAO脑组织中表达明显增高，且主要分布于损伤侧皮层神经元内；同时我们也证实在小鼠tMCAO脑组织中LC3-II表达增加（t=-16．448，P〈0．01），而P62表达明显减低（t=3．975，P〈0．05）。我们进一步实验发现Irgml。小鼠tMCAO脑组织内LC3-II表达量低于Irgml^＋/＋小鼠tMCAO（t=4．073，P〈0．05），而P62表达量高于Irgml^＋/＋小鼠tMCAO（t=-3．383，P〈0．05）。结论在小鼠tMCAO模型中，Irgml参与调节大脑神经元的自噬活动。 展开更多
关键词 irgm1 tMCAO 神经元 自噬
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免疫相关GTP酶1通过调节巨噬细胞吞噬功能改善脓毒症相关小鼠肠道损伤
5
作者 胡志良 颜云峰 +5 位作者 吴源泉 阿布来提江-依不拉因木 李文文 王丽 潘春球 肖雅 《现代消化及介入诊疗》 2025年第8期846-850,共5页
目的探讨免疫相关GTP酶1是否通过调节巨噬细胞吞噬功能改善脓毒症相关小鼠肠道损伤。方法SPF级C57BL/6J小鼠随机分为四组:野生型对照组(wild-type control,Wt)、基因敲除对照组(IRGM1^(-/-))、野生型造模组(Wt-CLP)、基因敲除造模组(IRG... 目的探讨免疫相关GTP酶1是否通过调节巨噬细胞吞噬功能改善脓毒症相关小鼠肠道损伤。方法SPF级C57BL/6J小鼠随机分为四组:野生型对照组(wild-type control,Wt)、基因敲除对照组(IRGM1^(-/-))、野生型造模组(Wt-CLP)、基因敲除造模组(IRGM1^(-/-)-CLP)。IRGM1-/-组、IRGM1^(-/-)-CLP组两组根据文献方法敲除IRGM1基因;Wt-CLP组、IRGM1^(-/-)-CLP组两组以盲肠结扎穿孔术构建了脓毒症小鼠模型;Wt组、IRGM1^(-/-)组两组未行CLP处理;术后评估脓毒症小鼠7 d生存率以及肠损伤严重程度;检测小鼠血清炎症因子;观察小鼠肠道的病理学形态变化;测定腹腔巨噬细胞吞噬功能变化。结果与Wt-CLP组比较,IRGM1^(-/-)-CLP组小鼠结肠组织损伤评分及血清TNF-α均升高,7 d生存率显著降低,结肠长度缩短,体重减轻,腹腔巨噬细胞吞噬功能减弱(P<0.05)。结论免疫相关GTP酶1通过调节巨噬细胞吞噬功能改善脓毒症相关小鼠肠道损伤。 展开更多
关键词 脓毒症 肠损伤 巨噬细胞 irgm1
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免疫相关GTP酶1通过PI3K/AKT/mTOR信号通路调控巨噬细胞自噬 被引量：1
6
作者 张春福 张文娟 +6 位作者 肖雅 陈勇 吴源泉 颜云峰 魏胜梅 潘春球 吐尔地卡日-牙生 《现代消化及介入诊疗》 2023年第3期311-316,共6页
目的探讨免疫相关GTP酶1(IRGM1)调控PI3K/AKT/mTOR通路对巨噬细胞自噬活动的影响。方法小鼠RAW264.7细胞常规传代培养,siRNA-IRGM1序列通过Lipofectamine 2000转染RAW264.7细胞制备siRNA-RAW246.7细胞;利用脂多糖(LPS,20 ug/mL)诱导RAW2... 目的探讨免疫相关GTP酶1(IRGM1)调控PI3K/AKT/mTOR通路对巨噬细胞自噬活动的影响。方法小鼠RAW264.7细胞常规传代培养,siRNA-IRGM1序列通过Lipofectamine 2000转染RAW264.7细胞制备siRNA-RAW246.7细胞;利用脂多糖(LPS,20 ug/mL)诱导RAW246.7构建细胞自噬模型,分为四组:RAW246.7组,siRNA-RAW246.7组,RAW246.7+LPS组,siRNA-RAW246.7+LPS组;Western blot检测各组IRGM1及自噬相关分析分子(LC3-Ⅱ/Ⅰ、P62)、AKT及mTOR磷酸化水平;qRT-PCR检测各组IRGM1及P62表达水平;利用流式细胞学比较各组细胞凋亡率和ELISA检测各组IL-6炎症因子表达情况。结果Western blot结果显示:与RAW246.7组、siRNA-RAW246.7组比较,LPS诱导巨噬细胞(RAW246.7+LPS组、siRNA-RAW246.7+LPS组)自噬相关基因LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比例蛋白表达升高(P<0.05),P62表达明显下降(P<0.05)。其中与RAW246.7+LPS组比较,siRNA-RAW246.7+LPS组自噬活动显著降低(P<0.05),同时流式细胞检测提示siRNA-RAW246.7+LPS组细胞凋亡率显著低下(P<0.05);说明沉默IRGM1抑制了巨噬细胞自噬活动。与RAW246.7+LPS组比较,siRNA-RAW246.7+LPS组的P-AKT及P-mTOR磷酸化水平低(P<0.05)。ELISA检测结果提示:与RAW246.7+LPS组比较,siRNA-RAW246.7+LPS组的IL-6表达水平低(P<0.05)。结论IRGM1与细胞自噬活动有关,并且可能通过PI3K/AKT/mTOR信号通路调控巨噬细胞自噬。 展开更多
关键词 irgm1 自噬 脓毒血症 巨噬细胞
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Irgm 1参与动脉粥样硬化斑块的形成 被引量：1
7
作者 吴进荣 黄凯 +5 位作者 邹海峰 张崇友 马一鸣 张浩强 王丹丹 房绍红 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第11期2046-2050,共5页
目的:探讨免疫相关GTP酶1(Irgm 1)对小鼠血管动脉粥样硬化(AS)斑块形成的影响。方法:高脂饲料喂养野生型(WT)、ApoE-/-Irgm 1+/+和ApoE-/-Irgm1+/-小鼠3个月,建立AS模型;取小鼠主动脉弓,免疫荧光染色方法观察WT和ApoE-/-Irgm 1+/+小鼠血... 目的:探讨免疫相关GTP酶1(Irgm 1)对小鼠血管动脉粥样硬化(AS)斑块形成的影响。方法:高脂饲料喂养野生型(WT)、ApoE-/-Irgm 1+/+和ApoE-/-Irgm1+/-小鼠3个月,建立AS模型;取小鼠主动脉弓,免疫荧光染色方法观察WT和ApoE-/-Irgm 1+/+小鼠血管AS斑块中Irgm 1的表达情况及部位;Western blot方法检测WT和ApoE-/-Irgm 1+/+小鼠血管AS斑块中Irgm 1蛋白表达情况;Q-PCR方法检测WT和ApoE-/-Irgm 1+/+小鼠血管AS斑块中Irgm 1 m RNA表达情况;油红O染色观察ApoE-/-Irgm1+/+和ApoE-/-Irgm1+/-小鼠血管AS斑块形成情况;结果:与WT组相比,ApoE-/-Irgm 1+/+组小鼠主动脉弓AS斑块中Irgm 1+细胞明显增多,Irgm 1+细胞主要位于血管AS斑块的表面;与WT组相比,ApoE-/-Irgm 1+/+组小鼠血管AS斑块中Irgm 1蛋白表达显著增多(P<0.001),Irgm 1 m RNA表达显著增多(P<0.01);与ApoE-/-Irgm1+/-组相比,ApoE-/-Irgm1+/+组小鼠主动脉弓AS斑块面积显著增大(P<0.01);结论:Irgm 1能够促进血管AS斑块的形成。 展开更多
关键词 Irgm 1 ApoE-/-Irgm 1+/+小鼠 动脉粥样硬化 动脉血管斑块
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小鼠免疫相关GTP酶Irgm基因家族的研究进展 被引量：1
8
作者 刘禹汐 刘传亮 王菁华 《国际免疫学杂志》 CAS 2016年第1期76-79,共4页
免疫相关GTP酶（IRG）基因家族与抗感染和炎症免疫过程有关.小鼠Irgm1、Irgm2与Ir-gm3基因编码的蛋白参与细胞自噬、Colon氏病等发生发展,并在固有免疫应答中发挥重要作用.了解Irgm1、Irgm2与Irgm3基因的表达、功能等情况以及Irgm1、Ir... 免疫相关GTP酶（IRG）基因家族与抗感染和炎症免疫过程有关.小鼠Irgm1、Irgm2与Ir-gm3基因编码的蛋白参与细胞自噬、Colon氏病等发生发展,并在固有免疫应答中发挥重要作用.了解Irgm1、Irgm2与Irgm3基因的表达、功能等情况以及Irgm1、Irgm2与Irgm3基因编码的蛋白参与免疫过程的机制,有利于免疫系统疾病的治疗. 展开更多
关键词 irgm1 Irgm2 Irgm3 固有免疫应答
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