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三黄凝胶对痤疮模型大鼠MyD88/IRAK1/TRAF6/NF-κB信号通路及下游相关因子的影响
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作者 杜雪洋 董小平 +4 位作者 牛凡琪 郭斐斐 杨鹏斐 金彩云 王思农 《中药新药与临床药理》 北大核心 2025年第5期666-673,共8页
目的研究三黄凝胶对痤疮模型大鼠髓样分化因子(MyD88)/白细胞介素1受体相关激酶1(IRAK1)/肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路及下游相关因子表达的影响,探讨其治疗痤疮的作用机制。方法将60只Wistar雄性... 目的研究三黄凝胶对痤疮模型大鼠髓样分化因子(MyD88)/白细胞介素1受体相关激酶1(IRAK1)/肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路及下游相关因子表达的影响,探讨其治疗痤疮的作用机制。方法将60只Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组(盐酸克林霉素凝胶,10 g·kg^(-1))及三黄凝胶高、中、低剂量组(生药量280、140、70 g·kg^(-1)),每组10只。采用右耳耳廓开口处涂抹油酸+皮下注射痤疮丙酸杆菌诱导耳廓复合痤疮大鼠模型,大鼠耳廓皮损面积为1 cm^(2)。模型复制成功后给药组均每次涂抹0.25 g相应药物,每日1次,连续给药28 d。观察各组大鼠耳廓皮损变化;采用HE染色法观察耳廓组织病理变化;RT-qPCR法检测耳廓组织中MyD88、TRAF6、NF-κB p65 mRNA表达;Western Blot法检测耳廓组织中MyD88、IRAK1、TRAF6、NF-κB p65、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)蛋白表达水平;免疫组化法检测耳廓组织中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、衔接分子(ASC)蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠耳廓皮肤外观可见明显丘疹、脓疱、囊肿,伴有角质层及表皮明显增厚,大量炎性细胞浸润,毛囊口大量角化物等病理改变;耳廓组织中MyD88、TRAF6、NF-κB p65 mRNA表达水平均显著升高(P<0.01),MyD88、IRAK1、TRAF6、NF-κB p65、IL-1β、IL-18、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠耳廓丘疹脓疱及角质层增厚、炎性细胞浸润情况明显改善,其中以三黄凝胶高剂量组效果更佳;各给药组大鼠耳廓组织中MyD88、TRAF6、NF-κB p65 mRNA表达水平均显著降低(P<0.01),MyD88、IRAK1、IL-1β、IL-18、Caspase-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01);阳性对照组及三黄凝胶高剂量组大鼠耳廓组织中TRAF6、NF-κB p65、ASC蛋白表达水平显著降低(P<0.01);阳性对照组及三黄凝胶中、高剂量组大鼠耳廓组织中NLRP3表达量显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论三黄凝胶可以明显改善痤疮模型大鼠耳廓组织丘疹、脓疱等轻中度痤疮皮损,减轻炎症损伤,其作用机制可能与调控MyD88/IRAK1/TRAF6/NF-κB信号通路及下游NLRP3炎性小体、IL-1β、IL-18表达,改善皮肤免疫炎症反应有关。 展开更多
关键词 三黄凝胶 痤疮 MyD88/irak1/traf6/NF-κB信号通路 NLRP3炎性小体 炎症因子 大鼠
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The Regulatory Effect of miR-146a Overexpression on Corneal Inflammatory Response in a Mouse Model of Dry Eye Disease and Its Relationship with the IRAK1/TRAF6/NF-κB Signaling Pathway
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作者 ZHONG Jun-mu LIN Xiao-yan +1 位作者 LAI Mei-hua LIN Cui-rong 《Chinese Journal of Biomedical Engineering(English Edition)》 2025年第2期69-77,共9页
Objective:To investigate the regulatory effect of miR-146a overexpression on corneal inflammatory response in a mouse model of dry eye,and to analyze its relationship with the IRAK1/TRAF6/NF-кB signaling pathway.Meth... Objective:To investigate the regulatory effect of miR-146a overexpression on corneal inflammatory response in a mouse model of dry eye,and to analyze its relationship with the IRAK1/TRAF6/NF-кB signaling pathway.Methods:A total of 50 SPF-grade BALB/c mice were randomly divided into five groups,with10 mice in each group.Except for the control group,the other four groups were treated with 0.2%benzalkonium chloride(BAC)solution in both eyes to construct a dry eye model.After successful modeling,the control group and model group received NC agomir;the miR antagonist group received miR-146a antagomir;the miR agonist group received miR-146a agomir;and the pathway agonist group received miR-146a agomir+NF-κB activator 2.After four weeks of treatment,the expressions levels of miR-146a,inflammatory factors,and IRAK1/TRAF6/NF-κB signaling pathway proteins were observed and compared among the five groups.Results:After four weeks of treatment,there was a statistically significant difference in the relative expression of miR-146a in the five groups(F=61.058,P<0.001),which was significantly higher in the miR agonist group than in the other four groups.After4 weeks of treatment,there were statistically significant differences in the expression levels of IL-1β,IL-6,IL-8 and TNF-αin the five groups(F=84.757,103.658,55.477,46.762;P<0.001).After four weeks of treatment,there were statistically significant differences in the protein expression levels of IRAK1,TRAF6,NF-κB and IκBαin the five groups(F=62.975,77.173,67.108,29.381;P<0.001),except for the control group,the expression levels of IRAK1,TRAF6 and NF-κB proteins in the miR agonist group were significantly lower than those in the other three groups,and the expression levels of IκBαprotein were significantly higher than those in the other three groups.Conclusion:Overexpression of miR-146a can negatively regulate corneal inflammatory response in dry eye mice through the IRAK1/TRAF6/NF-κB signaling pathway,which can provide new insights for the clinical treatment of dry eye disease. 展开更多
关键词 dry eye disease MIR-146A irak1/traf6/NF-κB signaling pathway inflammatory response
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TLRs/IRAK1/TRAF6/NF-κB信号通路介导神经炎症参与神经病理性痛的研究进展 被引量:1
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作者 王新颖 任安 +2 位作者 李梦绮 夏阳阳 黄诚 《赣南医学院学报》 2020年第9期917-923,共7页
TLRs/IRAK1/TRAF6/NF-κB信号通路参与炎症形成和免疫应答,并且其介导的神经炎症在神经病理性痛的发生发展中起着至关重要的作用,这将为药物干预神经病理性痛提供新的治疗靶点。为此,本文就TLRs/IRAK1/TRAF6/NF-κB信号通路介导的神经... TLRs/IRAK1/TRAF6/NF-κB信号通路参与炎症形成和免疫应答,并且其介导的神经炎症在神经病理性痛的发生发展中起着至关重要的作用,这将为药物干预神经病理性痛提供新的治疗靶点。为此,本文就TLRs/IRAK1/TRAF6/NF-κB信号通路介导的神经炎症参与神经病理性痛的研究进展进行综述,为临床治疗神经病理性痛提供依据。 展开更多
关键词 神经病理性痛 TLRS irak1/traf6 NF-ΚB 神经炎症
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基于IRAK1/TRAF6/NF-κB通路探讨参附注射液治疗大鼠脓毒症心功能障碍的作用机制 被引量:3
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作者 陆佳敏 魏久翔 +5 位作者 邵旭鹏 谢娜 张铎 卢伟 李嘉彤 范开亮 《中医学报》 CAS 2024年第5期1029-1035,共7页
目的:基于白细胞介素-1受体相关激酶-1(interleukin-1 receptor-related kinase-1,IRAK1)/TNF受体相关因子6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路探讨参附注射液治疗大鼠脓毒症心功能障... 目的:基于白细胞介素-1受体相关激酶-1(interleukin-1 receptor-related kinase-1,IRAK1)/TNF受体相关因子6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路探讨参附注射液治疗大鼠脓毒症心功能障碍(sepsis induced myocardial dysfunction,SIMD)的作用机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组和参附注射液组。对照组不采取任何干预措施,假手术组只寻找盲肠段但不进行结扎穿孔,其余大鼠采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症模型。造模后,大鼠尾静脉注射参附注射液或生理盐水(5 mL·kg^(-1)),12 h后重复注射1次。采用超声心动图检测大鼠心功能,包括左室收缩末内径(left ventricular end-systolic diameter,LVIDs)、左室舒张末内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVIDd)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、短轴缩短率(fraction shortening,FS)。采用HE染色观察大鼠心肌组织病理形态;采用透射电镜观察大鼠心肌组织超微结构;采用ELISA检测大鼠血清白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteine aspartic acid specific protease-3,Caspase-3)含量;采用Western blot检测大鼠心肌组织IRAK1、TRAF6、NF-κB表达水平。结果:对照组与假手术组大鼠LVIDd、LVIDs、LVEF、FS的差异无统计学意义(P>0.05);与假手术组比较,模型组大鼠LVIDd、LVIDs增加(P<0.01)且FS、LVEF减少(P<0.001);与模型组比较,参附注射液组大鼠LVIDd、LVIDs减少(P<0.05)且FS、LVEF增加(P<0.001)。对照组与假手术组大鼠心肌组织结构正常;模型组大鼠心肌细胞明显水肿,存在心肌溶解及炎性细胞浸润;参附注射液组大鼠心肌细胞轻度水肿,少量炎性细胞浸润。对照组和假手术组大鼠心肌细胞线粒体结构正常;模型组大鼠心肌细胞内可见大量线粒体肿胀,嵴断裂,基质出现空白区;参附注射液组大鼠心肌细胞内大部分线粒体形态正常。对照组与假手术组大鼠血清IL-10、TNF-α、Bcl-2、Caspase-3含量的差异无统计学意义(P>0.05);与假手术组比较,模型组大鼠血清IL-10、TNF-α、Bcl-2、Caspase-3含量增加(P<0.05);与模型组比较,参附注射液组大鼠血清IL-10、TNF-α、Caspase-3含量减少(P<0.01)。对照组与假手术组大鼠心肌组织IRAK1、TRAF6、NF-κB表达水平的差异无统计学意义(P>0.05);与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织IRAK1、NF-κB、TRAF6表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,参附注射液组大鼠心肌组织IRAK1、NF-κB、TRAF6表达水平降低(P<0.05)。结论:参附注射液通过调节IRAK1/TRAF6/NF-κB通路,改善大鼠心功能,减轻心肌损伤和炎症反应,从而发挥治疗SIMD的作用。 展开更多
关键词 参附注射液 脓毒症心功能障碍 irak1/traf6/NF-κB通路 心肌损伤 炎症反应 大鼠
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基于TRAF6/TAK1信号通路探讨清眩润目饮对干眼大鼠的作用机制 被引量:2
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作者 赵珊珊 刘颖 +1 位作者 王佳娣 姚靖 《中国中医急症》 2024年第11期1920-1923,1946,共5页
目的探究清眩润目饮通过TRAF6/TAK1信号通路对干眼模型大鼠的作用机制。方法将40只雌性大鼠分为空白组、模型组、清眩润目饮组、玻璃酸钠组,模型组、清眩润目饮组、玻璃酸钠组予0.2%BAC滴眼建立干眼模型。造模成功后,清眩润目饮组予中... 目的探究清眩润目饮通过TRAF6/TAK1信号通路对干眼模型大鼠的作用机制。方法将40只雌性大鼠分为空白组、模型组、清眩润目饮组、玻璃酸钠组,模型组、清眩润目饮组、玻璃酸钠组予0.2%BAC滴眼建立干眼模型。造模成功后,清眩润目饮组予中药灌胃+PBS缓冲液滴眼;玻璃酸钠组大鼠予等量生理盐水灌胃+玻璃酸钠滴眼液滴眼,连续2周。给药2周时进行泪液分泌检测(SIT)及角膜荧光素钠评分(FL),处死大鼠并留取角膜组织,采用ELISA检测白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及MMP9含量,HE染色观察角膜组织病理学变化;免疫组化染色观察TFAF6的蛋白表达,Western blotting检测TRAF6、p-TAK1及TAK1蛋白的表达量。结果与模型组相比,清眩润目饮组及玻璃酸钠组SIT显著增高(P<0.05),FL显著降低(P<0.05)。HE染色结果显示,清眩润目饮组及玻璃酸钠组角膜组织形态得到明显改善。免疫组化结果显示,清眩润目饮组及玻璃酸钠组TFAF6含量显著低于模型组(P<0.05)。Western blotting结果显示,与模型组相比,清眩润目饮组及玻璃酸钠组大鼠TRAF6水平降低(P<0.05),清眩润目饮组p-TAK1/TAK1水平显著降低(P<0.05)。ELISA结果显示,清眩润目饮组及玻璃酸钠组IL-1β、TNF-α及MMP9水平较模型组显著降低(P<0.05)。结论清眩润目饮能够改善干眼大鼠角膜组织损伤,抑制炎症反应的发生,从而缓解干眼大鼠眼部症状,其机制可能是通过抑制TRAF6/TAK1信号通路实现的。 展开更多
关键词 干眼 清眩润目饮 traf6/TAK1信号通路 炎症 大鼠
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miR-146a激动剂对大鼠神经病理性疼痛行为学和IRAK1、TRAF6表达的影响 被引量:3
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作者 王之遥 申乐 +3 位作者 魏敏 丘玥 马超 黄宇光 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2015年第6期406-410,416,共6页
目的:探讨miR-146a激动剂(agomiR-146a)经鞘内给药对大鼠神经病理性疼痛的影响.方法:雌性SD大鼠16只,体重200~250g,采用随机数字表法随机分为对照组(n=8)和agomiR-146a组(n=8),两组均行双侧坐骨神经结扎手术,于手术当天及术后... 目的:探讨miR-146a激动剂(agomiR-146a)经鞘内给药对大鼠神经病理性疼痛的影响.方法:雌性SD大鼠16只,体重200~250g,采用随机数字表法随机分为对照组(n=8)和agomiR-146a组(n=8),两组均行双侧坐骨神经结扎手术,于手术当天及术后第3、5、7、10天分别经鞘内注射体积为15 μl的agomiR-对照组或agomiR-146a(5nmol溶于生理盐水),于术前及术后第1、3、7、14天进行动物行为学评估,观察大鼠对机械和热刺激的反应.实时定量PCR法检测术后第14天大鼠L4~6背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中miR-146a、白介素1受体相关激酶(interleukin-1receptor-associated kinase 1,IRAK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor-associated factor 6,TRAF6)的mRNA表达水平;Western-blot法检测IRAK1及TRAF6蛋白表达水平变化.结果:agomiR-146a组大鼠缩足反射热辐射潜伏期自建模后3天显著增加,而缩足反射机械刺激阈值在建模后7和14天比对照组明显升高(P<0.05).与对照组相比,术后14天agomiR-146a组miR-146a表达显著上调(P<0.05),IRAK1、TRAF6的mRNA表达水平下降(P<0.05);agomiR-146a组IRAK1、TRAF6蛋白水平亦明显降低(P<0.05).结论:miR-146a激动剂agomiR-146a经鞘内给药可以减轻大鼠神经病理性疼痛,可能为治疗神经病理性疼痛提供新的靶点. 展开更多
关键词 神经病理性疼痛 miR-146a激动剂 白介素1受体相关激酶 肿瘤坏死因子受体相关因子6 双侧坐骨神经结扎 irak1 traf6
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安肠汤通过TRAF6/IRAK1/NF-κB信号通路对溃疡性结肠炎大鼠的抑制作用研究 被引量:5
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作者 梁运特 孙平良 +4 位作者 廖志远 赖斯华 张琴 汤勇 黄仲海 《西部中医药》 2023年第4期1-7,共7页
目的:从TRAF6/IRAK1/NF-κB信号通路角度观察安肠汤对TNBS诱导的大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用及机制。方法:选择60只实验大鼠,除空白组10只外,其余各组均采用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid ... 目的:从TRAF6/IRAK1/NF-κB信号通路角度观察安肠汤对TNBS诱导的大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用及机制。方法:选择60只实验大鼠,除空白组10只外,其余各组均采用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid sol,TNBS)/乙醇灌肠法建立UC大鼠模型,造模成功大鼠分为模型组,美沙拉嗪组,安肠汤低、中、高剂量组,每组10只。空白组、模型组灌胃生理盐水,美沙拉嗪组采用美沙拉嗪混悬液灌胃,安肠汤各剂量组给予对应剂量安肠汤灌胃。给药14天后处死各组大鼠。观察各组大鼠结肠病理改变;酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)水平;Western blot法检测结肠组织中TNF受体关联因子6重组蛋白(recombinant tnf receptor associated factor 6,TRAF6)、白细胞介素1受体相关激酶(recombinant interleukin 1receptor associated kinase 1,IRAK1)、磷酸化细胞核因子NF-κB抗体(phosphorylated nuclear factor NF-κB antibody,p-NF-κB)、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)蛋白的表达;通过定量聚合酶链反应测定大鼠结肠组织中TRAF6、IRAK1、NF-κB mRNA的相对表达量。结果:与空白组比较,模型组结肠黏膜病理受损严重,血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量显著升高,结肠组织中TRAF6、IRAK1、p-NF-κB、NF-κB蛋白表达上调(P<0.05)。与模型组相比,安肠汤各剂量组和美沙拉嗪组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量显著降低(P<0.05);结肠组织中TRAF6、IRAK1、p-NF-κB、NF-κB蛋白表达下调(P<0.05)。结论:安肠汤对TNBS诱导的UC大鼠有治疗作用,其作用可能与其调节TRAF6/IRAK1/NF-κB通路及相关炎症因子,从而减轻肠道炎症反应,缓解肠黏膜损伤有关。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 安肠汤 traf6 irak1 NF-ΚB 大鼠 动物实验
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IRAK1, TRAF6 and AUF1 are involved in myocardial inflammatory response after coronary microembolization in miniature swines
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作者 马国添 吴海 +3 位作者 夏炳辉 林士云 柯红红 梁艺 《South China Journal of Cardiology》 CAS 2016年第1期49-54,共6页
Background Coronary microembolization (CME) is characterized by distal microvascular occlusion. However, the inflammatory mechanisms and therapeutic targets of CME are largely unknown. Methods A total of 11 Guangxi ... Background Coronary microembolization (CME) is characterized by distal microvascular occlusion. However, the inflammatory mechanisms and therapeutic targets of CME are largely unknown. Methods A total of 11 Guangxi Bama miniature swines were divided into two groups: sham (n = 5) and CME (n = 6). Microspheres were injected into the left anterior descending artery of the CME group to make an animal model of CME. The expres- sions of microRNA-146a (miR-146a) and IRAK1, TRAF6, and AUF1 in the myocardium were detected by qPCR. Results In the CME group, microspheres, microinfarction, and inflammatory cell infiltration were found under an optical microscope. The expression levels of miR-146a were low in both groups. After CME, the expression levels of IRAK1, TRAF6, and AUF1 in the CME group were upregulated compared with those in the sham group (P 〈 0.01;P 〈 0.05;P 〈 0.05, respectively). Conclusions AUF1, IRAK1 and TRAF6, but not miR-146a, could be involved, in myocardium inflammation following CME. 展开更多
关键词 coronary microembolization swine miniature microRNA-146a irak1 traf6 AUF1
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血清TRAF-6、MCP-1、sTREM-1、IL-33水平与脓毒症严重程度及与合并急性肾损伤关系的临床分析 被引量:24
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作者 张琪 姜利 +3 位作者 席修明 费雅楠 王鹏 姜琦 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第23期4440-4444,共5页
目的:探讨脓毒症患者血清肿瘤坏死因子受体相关因子(Tumor necrosis factor receptor-related factor,TRAF)-6、单核细胞趋化蛋白(Monocyte chemotactic protein,MCP)-1、可溶性髓样细胞触发受体(Soluble myeloid cell trigger receptor... 目的:探讨脓毒症患者血清肿瘤坏死因子受体相关因子(Tumor necrosis factor receptor-related factor,TRAF)-6、单核细胞趋化蛋白(Monocyte chemotactic protein,MCP)-1、可溶性髓样细胞触发受体(Soluble myeloid cell trigger receptor,s TREM)-1、白介素(Interleukin,IL)-33水平的变化及与病情严重程度及合并急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的相关性。方法:选择2014年2月到2018年7月在我医院ICU病房进行诊治的脓毒症患者145例,分析脓毒症相关性急性肾损伤(sepsis-associated AKI,SAKI)的发生情况,比较SAKI和非SAKI患者血清TRAF-6、MCP-1、s TREM-1、IL-33水平,采用Pearson相关分析血清TRAF-6、MCP-1、s TREM-1、IL-33含量与APACHEⅡ评分、SOFA评分的相关性,多因素logistic回归分析脓毒症患者发生SAKI的影响因素。结果:在145例患者中,发生SAKI者69例,发生率为47.6%。SAKI组患者的年龄、性别、原发病、白细胞(white blood cell,WBC)计数、C反应蛋白(C reactive protein,CRP)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、体重指数、BUN、Scr与eGFR值与非SAKI组患者对比差异均无统计学意义(P<0.05)。SAKI组患者APACHEⅡ评分、SOFA评分血清TRAF-6、MCP-1、s TREM-1、IL-33含水平含量均显著高于非SAKI组患者(P<0.05)。Pearson相关性分析显示血清TRAF-6、MCP-1、s TREM-1、IL-33水平与SAKI患者的急性生理和慢性健康Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluation II,APACHEⅡ)评分、序贯多器官功能障碍(sequential organ failure assessment,SOFA)评分均呈显著正相关性(P<0.05)。logistic回归分析显示血清TRAF-6、MCP-1、s TREM-1、IL-33水平升高均为影响SAKI发生的独立危险因素(P<0.05)。结论:血清TRAF-6、MCP-1、s TREM-1、IL-33水平与脓毒症严重程度显著相关,可能作为诊断和治疗SAKI的参考指标及干预靶点。 展开更多
关键词 脓毒症 急性肾损伤 traf-6 MCP-1 STREM-1
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TLR4、TRAF6、IL-6和IL-1β在深静脉血栓大鼠模型中的表达和意义 被引量:9
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作者 王喜尧 王育文 +2 位作者 齐桂云 徐洪伟 杜桂芹 《现代生物医学进展》 CAS 2023年第4期641-645,共5页
目的:探究4个炎症因子Toll样受体4(TLR4)、TNF受体相关因子6(TRAF6)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)在深静脉血栓大鼠体内的表达及在深静脉血栓形成的作用。方法:将SD大鼠随机分成对照组(n=10)和模型组(n=90),采用血管钳... 目的:探究4个炎症因子Toll样受体4(TLR4)、TNF受体相关因子6(TRAF6)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)在深静脉血栓大鼠体内的表达及在深静脉血栓形成的作用。方法:将SD大鼠随机分成对照组(n=10)和模型组(n=90),采用血管钳夹结合固定制动的方式建立深静脉血栓模型,建模后分别于1 h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d、14 d、21 d、28 d处死,检测血栓重量/长度比值、血浆中4个炎症因子的浓度,并进行组织学观察。结果:(1)1 h、6 h、12 h的血栓重量/长度比值较低,组间无显著性差异(P>0.05);1 d、3 d、7 d的血栓重量/长度比值维持在较高水平,组间无显著性差异(P>0.05);14 d、21 d、28 d的血栓重量/长度比值均降低,组间无显著性差异(P>0.05)。(2)模型组中1-7 d的血栓重量/长度比值均明显高于正常组(P<0.05)。(3)模型组中1-7 d的TLR4、TRAF6、IL-6和IL-1β浓度水平均明显高于正常组(P<0.05)。(4)Pearson相关性分析显示TLR4、TRAF6、IL-6和IL-1β浓度与血栓程度具有正相关性。结论:深静脉血栓大鼠体内的TLR4、TRAF6、IL-6和IL-1β表达上调可能在深静脉血栓形成中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 深静脉血栓 TLR4 traf6 IL-6 IL-1Β
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半滑舌鳎TRAF6基因和TAK1基因的克隆及表达分析 被引量:5
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作者 陈燕 樊琳 +3 位作者 刘田田 刘跃中 李赞 张全启 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期867-876,共10页
本研究通过同源克隆和RACE技术获得了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)和转化生长因子β激活激酶1(transforming growth factor-β-activated ki... 本研究通过同源克隆和RACE技术获得了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)和转化生长因子β激活激酶1(transforming growth factor-β-activated kinase 1,TAK1)的c DNA全长,并分析了其在不同组织和早期胚胎发育时期的表达情况。结果表明,TRAF6 c DNA全长1956 bp,开放阅读框(ORF)为1731 bp,编码576个氨基酸。二级结构预测显示TRAF6具有保守的蛋白结构域:N端的RING结构,两个锌指结构以及C端的环–环(coiled-coil)α螺旋结构和高度保守的MATH同源结构。TAK1 c DNA全长2519 bp,ORF为1731 bp,编码576个氨基酸。TAK1的蛋白结构域包括丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶激活结构域和C端的环–环(coiled-coil)α螺旋结构域。系统进化树分析表明,半滑舌鳎TRAF6和TAK1分别与牙鲆(Paralichthys olivaceus)TRAF6和TAK1聚为一支,亲缘关系最近。荧光定量PCR结果显示,TRAF6和TAK1在所检测的8种组织中都有表达,TRAF6在鳃中的表达最高,肠中也有较高的表达;TAK1在心脏中的表达量最高,其次是肾。TRAF6和TAK1在鳃、肾等免疫器官中的高表达,与其在Toll样受体信号通路中的重要作用是一致的。对TRAF6和TAK1在早期胚胎发育时期的表达情况进行检测,结果显示,在未受精卵中可检测到TRAF6和TAK1,提示了这两种免疫分子的母源性m RNA遗传的可能性。免疫分子母源性m RNA可能参与发育过程,也可能参与构建免疫体系,以保护胚胎或仔鱼免受病原体的侵袭。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 traf6 TAK1 克隆 表达
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血清MCP-1、TRAF-6水平在脓毒症严重程度和急性肾损伤评估的作用 被引量:11
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作者 郭峻氚 陈东 +2 位作者 郭仁楠 肖东 刘艳 《新疆医科大学学报》 CAS 2023年第4期485-489,共5页
目的探讨血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)水平在脓毒症严重程度和急性肾损伤评估中的作用。方法回顾性分析2021年6月至2022年6月在新疆维吾尔自治区人民医院重症医学科接受治疗的110例脓毒症患者的... 目的探讨血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)水平在脓毒症严重程度和急性肾损伤评估中的作用。方法回顾性分析2021年6月至2022年6月在新疆维吾尔自治区人民医院重症医学科接受治疗的110例脓毒症患者的病例资料,依据脓毒症相关急性肾损伤发生情况分为发生组(50例)、未发生组(60例)。统计分析两组患者基线资料、血清MCP-1、TRAF-6水平,并分析脓毒症患者血清MCP-1、TRAF-6水平与序贯多器官功能障碍(SOFA)评分、急性生理和慢性健康Ⅱ(APACHEⅡ)评分的相关性,多因素Logistic回归分析脓毒症相关急性肾损伤影响因素。结果110例患者中,脓毒症相关急性肾损伤发生50例,未发生60例,发生率为45.45%。发生组患者的高血压、肺部感染比例均高于未发生组(P<0.05),SOFA评分、APACHEⅡ评分均高于未发生组(P<0.05),氧合指数低于未发生组(P<0.05),肾小球滤过率(eGFR)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平均高于未发生组(P<0.05),动脉血乳酸水平高于未发生组(P<0.05),但两组患者的性别、年龄、糖尿病比例的差异无统计学意义(P>0.05)。发生组患者的血清MCP-1、TRAF-6水平均高于未发生组(P<0.05)。脓毒症患者血清MCP-1、TRAF-6水平与SOFA评分、APACHEⅡ评分均呈显著的正相关关系(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,脓毒症相关急性肾损伤影响因素包括高血压、肺部感染、SOFA评分、APACHEⅡ评分、肾小球滤过率(eGFR)、动脉血乳酸、MCP-1、TRAF-6(P<0.05),不包括氧合指数、尿素氮(BUN)、SCr(P>0.05)。结论血清MCP-1、TRAF-6水平和脓毒症严重程度和关系密切,可作为急性肾损伤的诊断参考指标。 展开更多
关键词 脓毒症 严重程度 急性肾损伤 MCP-1 traf-6
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TRAF6,TAK1和TGF-β基因在弥漫大B细胞淋巴瘤患者化疗前后外周血单个核细胞中的表达 被引量:1
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作者 陈珍珠 尹青松 +2 位作者 魏旭东 陈琳 李玉富 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1301-1305,共5页
本研究检测弥漫大B细胞性淋巴瘤(DLBCL)患者外周血单个核细胞中TRAF6、TAK1及TGF-β基因在化疗前后的表达变化,探讨化疗对TRAF6/TAK1信号通路活性的影响。采用Ct值比较法,通过SYBR Green II实时定量PCR检测38例DLBCL患者化疗前及化疗2... 本研究检测弥漫大B细胞性淋巴瘤(DLBCL)患者外周血单个核细胞中TRAF6、TAK1及TGF-β基因在化疗前后的表达变化,探讨化疗对TRAF6/TAK1信号通路活性的影响。采用Ct值比较法,通过SYBR Green II实时定量PCR检测38例DLBCL患者化疗前及化疗2周期后外周血单个核细胞(PBMNC)中TRAF6、TAK1及TGF-β在mRNA的表达水平,并以12例健康人PBMNC作为对照。结果表明:DLBCL患者治疗前后PBMNC中TRAF6、TAK1和TGF-βmRNA表达水平均高于正常人。治疗前患者TRAF6及TAK1基因表达水平与正常人相比未发现统计学差异(P>0.05),治疗后这两基因的表达明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05);在此同时治疗后与治疗前相比,这两基因的表达水平也具明显统计学差异(P<0.05),且这两基因的表达水平呈明显正相关,而TGF-β基因治疗后较治疗前明显下降,差异具统计学差异(P<0.05)。结论:DLBCL患者化疗后TRAF6/TAK1信号通路的活性明显增高,而TGF-β基因治疗后则较治疗前明显下降。 展开更多
关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 traf6 TAK1 TGF-β 信号通路 免疫抑制因子
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IFN-λR1与TRAF6的相互作用及对NF-κB与ISRE活性的影响 被引量:2
14
作者 杨霞 张俊文 +1 位作者 黄秉仁 陈虹 《医学研究杂志》 2014年第10期53-58,共6页
目的构建含有信号肽的全长IFN-λR1质粒,研究在配体IFN-λ1存在的情况下IFN-λR1与TRAF6的相互作用及对NF-κB与ISRE活性的影响。方法利用多次PCR将信号肽编码序列引入IFN-λR1序列中,构建表达载体,用免疫荧光及膜蛋白分离实验鉴定IFN-... 目的构建含有信号肽的全长IFN-λR1质粒,研究在配体IFN-λ1存在的情况下IFN-λR1与TRAF6的相互作用及对NF-κB与ISRE活性的影响。方法利用多次PCR将信号肽编码序列引入IFN-λR1序列中,构建表达载体,用免疫荧光及膜蛋白分离实验鉴定IFN-λR1的表达定位。用免疫共沉淀的方法研究IFN-λ1刺激下IFN-λR1与TRAF6间的相互作用。用双荧光素酶报告基因实验研究IFN-λR1与TRAF6相互作用后对下游NF-κB与ISRE活性的影响,采用实时定量PCR的方法检测此种作用对OAS1与Mx1基因表达的影响。结果成功构建了含信号肽的全长IFN-λR1表达载体,细胞内表达的IFN-λR1可正确定位于细胞膜上。细胞共转染IFN-λR1和TRAF6,在免疫沉淀物中可以检测到两个蛋白同时存在。细胞内共表达的IFN-λR1能够抑制TRAF6诱导的NF-λB的激活,而共表达的TRAF6可以抑制IFN-λR1下游ISRE的活性,并下调OAS1与Mx1基因的表达。结论证实了在IFN-λ1存在下IFN-λR1与TRAF6的相互作用及二者相互作用对各自细胞信号转导通路的影响,为TRAF6作为IFN-λ受体信号通路中的相互作用蛋白提供了新的实验依据。 展开更多
关键词 IFN-λR1 traf6 NF-ΚB ISRE 相互作用
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牛蒡子苷元抑制TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路对哮喘模型大鼠气道重塑和Th1/Th2免疫平衡的影响 被引量:25
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作者 雷俊 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期12-20,共9页
目的研究牛蒡子苷元抑制Toll样受体4(TLR4)/肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF6)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对哮喘模型大鼠气道重塑和Th1/Th2免疫平衡的影响。方法构建急性哮喘大鼠模型,随机分为5组(每组12只模型大鼠):模型组、牛... 目的研究牛蒡子苷元抑制Toll样受体4(TLR4)/肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF6)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对哮喘模型大鼠气道重塑和Th1/Th2免疫平衡的影响。方法构建急性哮喘大鼠模型,随机分为5组(每组12只模型大鼠):模型组、牛蒡子苷元低、高剂量组、脂多糖(LPS,TLR4激活剂)组、牛蒡子苷元+LPS组,以12只Wistar正常大鼠作为对照组。分组处理后,观察各组大鼠哮喘症状并做评分、分类计数各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞、检测各组大鼠肺组织病理变化、血清IgE水平、BALF和血清中白细胞介素(IL)-4、干扰素γ(IFN-γ)水平、IFN-γ/IL-4及肺组织TLR4/TRAF6/NF-κB通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠肺组织产生严重病理损伤,哮喘症状评分、WAt/Pbm、WAm/Pbm、BALF中巨噬细胞及淋巴细胞计数、血清IgE水平、BALF与血清中IL-4水平、肺组织TLR4、TRAF6表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05),BALF与血清中Th1型细胞因子IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4降低(P<0.05);与模型组相比,各牛蒡子苷元处理组中模型鼠的上述改变均被扭转,且高剂量牛蒡子苷元作用更强;LPS组大鼠各指标变化与牛蒡子苷元处理组相反,另外LPS可逆转高剂量牛蒡子苷元对大鼠各指标的作用。结论牛蒡子苷元可通过抑制TLR4/TRAF6/NF-κB信号激活而阻止哮喘大鼠气道炎症,促使Th1/Th2免疫平衡向Th1转移,改善大鼠气道重塑和肺损伤。 展开更多
关键词 牛蒡子苷元 TLR4/traf6/NF-κB 哮喘 气道重塑 TH1/TH2
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TRAF6和IFN-λR1相互作用后的泛素化变化对IFN-λ1信号通路的影响 被引量:1
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作者 张俊文 杨霞 +3 位作者 米蕊芳 刘福生 陈虹 黄秉仁 《医学研究杂志》 2016年第9期43-48,共6页
目的研究IFN-λ1抑制NF-κB激活和TRAF6抑制ISRE激活的分子机制。方法利用细胞培养、细胞转染、免疫共沉淀、SDS-PAGE及Western blot等方法检测IFN-λ1对TRAF6泛素化,以及泛素连接酶TRAF6对IFN-λ1的受体IFN-λR1泛素化的作用。结果 IFN... 目的研究IFN-λ1抑制NF-κB激活和TRAF6抑制ISRE激活的分子机制。方法利用细胞培养、细胞转染、免疫共沉淀、SDS-PAGE及Western blot等方法检测IFN-λ1对TRAF6泛素化,以及泛素连接酶TRAF6对IFN-λ1的受体IFN-λR1泛素化的作用。结果 IFN-λ1会抑制TRAF6的自身泛素化,TRAF6能泛素化受体IFN-λR1,并且IFN-λ1会增加IFN-λR1与泛素K63位点的结合。结论 IFN-λ1抑制了NF-κB的激活的原因是IFN-λ1能够抑制TRAF6的自身泛素化。TRAF6能泛素化IFN-λR1,从而抑制ISRE的激活。 展开更多
关键词 IFN—λ1 IFN-λR1 traf6 NF—κB ISRE
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TRAF6在B淋巴瘤细胞系NF-κB和AP-1信号传导通路中的作用 被引量:1
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作者 张文 张烜 +1 位作者 曾小峰 张奉春 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第7期716-720,共5页
目的利用人B淋巴瘤细胞系模型探讨TRAF6在调控NF-κB和AP-1信号系统中的作用。方法将融合有黄色荧光素(YFP)的功能缺失型TRAF6(DN-TRAF6)质粒和小干扰RNA-TRAF6质粒转染至人类B淋巴细胞系,过夜培养后经流式细胞仪或G418筛选阳性转染细胞... 目的利用人B淋巴瘤细胞系模型探讨TRAF6在调控NF-κB和AP-1信号系统中的作用。方法将融合有黄色荧光素(YFP)的功能缺失型TRAF6(DN-TRAF6)质粒和小干扰RNA-TRAF6质粒转染至人类B淋巴细胞系,过夜培养后经流式细胞仪或G418筛选阳性转染细胞,通过Western blot、ELISA等方法研究TRAF6对NF-κB通路中IκBα磷酸化和转录因子(P65,P50和c-Rel)向细胞核内转移以及AP-1通路中ERK、JNK、P38磷酸化和转录因子(C-FOS,C-JUN,ATF和CREB)向细胞核内转移等的影响。结果B细胞过度表达DN-TRAF6或转染小干扰RNA-TRAF6均可抑制IκBα和JNK的磷酸化水平以及P65、P50、c-Rel和c-Fos、C-JUN的核内转录。结论TRAF6可选择性地作用于人B淋巴细胞的NF-κB和AP-1信号传导系统中部分激酶,在上述两条信号系统活化中起重要作用。 展开更多
关键词 人B淋巴瘤细胞系 traf6 NF-ΚB信号通路 AP-1信号通路
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基于TRAF2/AP-1信号通路探讨柴苓合剂对痰瘀互结MS-IR大鼠炎症因子影响 被引量:5
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作者 王晨阳 张业 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2024年第6期37-42,共6页
目的基于TRAF2/AP-1信号通路探讨柴苓合剂对痰瘀互结代谢综合征胰岛素抵抗(MS-IR)大鼠糖代谢、脂代谢、炎症因子的部分作用机制。方法48只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组和造模组。造模组大鼠采用高脂高糖饲料喂养,注射小剂量链脲佐菌素... 目的基于TRAF2/AP-1信号通路探讨柴苓合剂对痰瘀互结代谢综合征胰岛素抵抗(MS-IR)大鼠糖代谢、脂代谢、炎症因子的部分作用机制。方法48只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组和造模组。造模组大鼠采用高脂高糖饲料喂养,注射小剂量链脲佐菌素(STZ)(35 mg/kg),同时用物理刺激方法,建立痰瘀互结型MSIR大鼠模型。造模成功后将大鼠随机分为模型组,柴苓合剂低、中、高剂量组,西药组进行干预。给药各组分别进行柴苓合剂、吡格列酮干预治疗3周,空白组、模型组给予等体积的蒸馏水灌服。生化检测大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);ELISA法检测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;Western Blot检测肝组织TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达;HE染色切片,光学显微镜观察用药前后肝细胞损伤、肝细胞坏死、脂质堆积、炎症细胞浸润等情况。结果(1)糖代谢指标水平。与空白组相比,模型组大鼠FBG、FINS、HOMA-IR水平均升高(P<0.01);与模型组相比,柴苓合剂低、中、高剂量组及西药组FBG、FINS、HOMA-IR水平均降低(P<0.01);与西药组比较,柴苓合剂高剂量组FBG、FINS、HOMA-IR水平差异无统计学意义(P>0.05);与柴苓合剂低剂量组比较,柴苓合剂高、中剂量组及西药组FBG、FINS、HOMA-IR水平均降低(P<0.01);与柴苓合剂中剂量组比较,柴苓合剂高剂量组及西药组FBG、FINS、HOMA-IR水平降低(P<0.01)。(2)脂代谢指标水平。与空白组相比,模型组大鼠甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)水平均升高(P<0.01);与模型组相比,柴苓合剂低、中、高剂量组及西药组TG、CHO水平均降低(P<0.01);与西药组相比,柴苓合剂中、高剂量组TG、CHO水平均降低(P<0.05,P<0.01),柴苓合剂低剂量组TG、CHO水平差异无统计学意义(P>0.05);与柴苓合剂低剂量组相比,柴苓合剂中、高剂量组TG、CHO水平均降低(P<0.01);与柴苓合剂中剂量组相比,柴苓合剂高剂量组TG、CHO水平均降低(P<0.01)。(3)TNF-α、IL-6水平。与空白组相比,模型组大鼠TNF-α、IL-6水平均升高(P<0.01);与模型组相比,柴苓合剂低、中、高剂量组及西药组TNF-α、IL-6水平均降低(P<0.01);与西药组相比,柴苓合剂低、中、高剂量组TNF-α、IL-6水平均降低(P<0.01);与柴苓合剂低剂量组相比,柴苓合剂中、高剂量组TNF-α、IL-6水平均降低(P<0.05,P<0.01);与柴苓合剂中剂量组相比,柴苓合剂高剂量组TNF-α、IL-6水平均降低(P<0.01)。(4)肝组织TRAF2/JNK/AP-1信号通路蛋白表达。与空白组相比,模型组大鼠肝组织TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达均上调(P<0.01);与模型组比较,柴苓合剂低、中、高剂量组及西药组肝组织TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达水平均降低(P<0.05,P<0.01);与西药组比较,柴苓合剂高剂量组肝组织TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达水平均降低(P<0.01),柴苓合剂低、中剂量组肝组织TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与柴苓合剂低剂量组比较,柴苓合剂高剂量组肝组织TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达水平均降低(P<0.01),柴苓合剂中剂量组肝组织AP-1蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),TRAF2、JNK蛋白表达水平均降低(P<0.01);与柴苓合剂中剂量组比较,柴苓合剂高剂量组TRAF2、JNK、AP-1蛋白表达水平均降低(P<0.05,P<0.01)。结论柴苓合剂高剂量能显著改善痰瘀互结MS-IR大鼠糖代谢、脂代谢和炎症因子,其作用机制可能是柴苓合剂通过调控TRAF2蛋白作用于JNK蛋白,引起它的下游反应,又通过JNK的磷酸化作用于AP-1,释放炎症因子,从而TRAF2作用于JNK,然后磷酸化于AP-1使炎症因子降低有关。 展开更多
关键词 代谢综合征 柴苓合剂 痰瘀互结型 traf2 JNK AP-1 TNF-α IL-6
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siRNA靶向干扰TRAF6的表达对肺癌细胞增殖与凋亡的影响 被引量:2
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作者 赵轩 任丽梅 +4 位作者 王晓茹 韩广欣 顾丹丹 姚亚森 祁永浩 《生物技术进展》 2024年第5期875-881,共7页
研究旨在探究体外干扰肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)的表达对肺癌A549细胞增殖与凋亡的影响以及可能的作用机理。siRNA转染A549细胞,运用荧光定量PCR(qPCR)和Western blotting... 研究旨在探究体外干扰肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)的表达对肺癌A549细胞增殖与凋亡的影响以及可能的作用机理。siRNA转染A549细胞,运用荧光定量PCR(qPCR)和Western blotting检测siRNA转染后TRAF6的mRNA和蛋白表达水平。CCK-8法检测增殖情况,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell小室探究转染后细胞的侵袭能力,Western blotting检测TRAF6/TAK1通路相关蛋白(TAK1、ub-TAK1、p-TAK1、Bax、Bcl-2)的表达水平。A549细胞经siRNA干扰后,TRAF6 mRNA和蛋白的表达水平与空白对照组相比均显著下降,细胞增殖减少,凋亡增多,且侵袭能力下降明显。同时,干扰TRAF6的表达抑制了TAK1的活化,明显诱导Bax表达,显著抑制了Bcl-2蛋白的表达。结果表明干扰TRAF6的表达可以抑制肺癌细胞的增殖和侵袭,促进凋亡,其作用机制可能与抑制TRAF6/TAK1信号通路活化有关。 展开更多
关键词 肺癌 traf6 TAK1 凋亡
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Notch1信号通过TRAF6参与TLR4介导的NF-κB激活 被引量:9
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作者 黄超 杨今实 +4 位作者 叶晶 车楠 姜京植 刘超 李良昌 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期673-677,共5页
目的观察Notch1和TLR4信号交叉调控NF-κB激活并探讨其可能的作用机制。方法体外培养RAW264.7细胞,LPS刺激RAW264.7细胞后检测Notch1信号激活以及Notch1信号抑制剂DAPT对TNF-α、IL-6和IL-1β表达的影响,Western blot检测DAPT对IKKα/... 目的观察Notch1和TLR4信号交叉调控NF-κB激活并探讨其可能的作用机制。方法体外培养RAW264.7细胞,LPS刺激RAW264.7细胞后检测Notch1信号激活以及Notch1信号抑制剂DAPT对TNF-α、IL-6和IL-1β表达的影响,Western blot检测DAPT对IKKα/β磷酸化以及NF-κB p65活化的影响,并检测DAPT对TLR4信号通路IKKα/β上游信号My D88和TRAF6表达的影响。结果 LPS刺激RAW264.7细胞后能显著提高Notch1信号蛋白NICD和目的蛋白Hes1表达,DAPT能明显抑制NICD和Hes1的表达。LPS诱导TNF-α、IL-6和IL-1β表达和释放能被DAPT抑制但被Notch1信号激动剂jagged1增强。DAPT能够抑制LPS介导的TRAF6表达和IKKα/β磷酸化,促进NF-κB p65核转位,但DAPT对LPS诱导My D88的表达没有明显的影响。结论 Notch1和TLR4信号存在交叉对话,Notch1通过TRAF6调控NF-κB活化参与TLR4介导的免疫应答。 展开更多
关键词 炎症 NOTCH1 TLR4 traf6 NF-ΚB
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