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清化养肺颗粒通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路抑制肺纤维化巨噬细胞焦亡的机制
1
作者 何星灵 李姿儒 +10 位作者 张小娇 李思静 刘东华 陈嘉慧 李嘉祺 余航宇 汤慧敏 廖慧丽 鲁路 倪世豪 杨忠奇 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第5期2567-2573,共7页
目的:探讨清化养肺颗粒(QHYF)对特发性肺纤维化(IPF)的治疗作用及其潜在机制。方法:将小鼠随机分为对照组(Control组),模型组(Model组),QHYF低、中、高剂量组(QHYF-L组、QHYF-M组、QHYF-H组)和吡非尼酮组(PFD组),采用博来霉素诱导建立IP... 目的:探讨清化养肺颗粒(QHYF)对特发性肺纤维化(IPF)的治疗作用及其潜在机制。方法:将小鼠随机分为对照组(Control组),模型组(Model组),QHYF低、中、高剂量组(QHYF-L组、QHYF-M组、QHYF-H组)和吡非尼酮组(PFD组),采用博来霉素诱导建立IPF模型;体外培养RAW264.7巨噬细胞,采用LPS建立细胞焦亡模型。观察小鼠一般情况,记录体质量、肺系数;观察肺组织病理变化;检测肺组织羟脯氨酸(Hyp)及炎症因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平;采用免疫组化评估α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平;通过转录组学分析小鼠基因表达的变化;Western Blot检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)、IL-1β蛋白表达;免疫荧光观察活性氧(ROS)水平及F4/80和GSDMD表达情况;qPCR检测NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA水平。结果:与Model组比较,第28天时QHYF-H组及PFD组体质量显著增加(P<0.01),肺系数、病理评分均显著降低(P<0.01,P<0.05),肺Hyp含量、α-SMA表达、ROS、IL-1β和TNF-α水平显著降低(P<0.01,P<0.05)。转录组分析显示,QHYF组抑制纤维化与焦亡相关基因表达。与Model组比较,QHYF-H组及PFD组肺组织中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白及NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA表达显著下降(P<0.01,P<0.05),巨噬细胞焦亡信号显著降低(P<0.01)。体外实验表明,QHYF含药血清较LPS组可显著降低焦亡细胞NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA表达水平(P<0.01),这种改善作用可被NLRP3激动剂显著逆转(P<0.01)。结论:QHYF通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路抑制IPF巨噬细胞焦亡。 展开更多
关键词 清化养肺颗粒 特发性肺纤维化 巨噬细胞 焦亡 机制 NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路 炎症因子
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基于ASS1介导的Src/STAT3、MAPK/ERK级联反应探究参七虫草方对IPF模型大鼠成纤维细胞的影响
2
作者 纪文雯 何程 +3 位作者 朱恩惠 王三凤 黄丽娜 陈炜 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第9期192-196,I0014,I0015,共7页
目的探究参七虫草方对博莱霉素(bleomycin,BLM)诱导的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)模型大鼠成纤维细胞的影响。方法除空白组外均采用气管内滴注BLM的方法体外分离培养模型成纤维细胞。CCK-8法检测肺成纤维细胞增... 目的探究参七虫草方对博莱霉素(bleomycin,BLM)诱导的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)模型大鼠成纤维细胞的影响。方法除空白组外均采用气管内滴注BLM的方法体外分离培养模型成纤维细胞。CCK-8法检测肺成纤维细胞增殖情况,选取最佳浓度及时间进行后续实验。实验分为6组:正常成纤维细胞+正常含药血清组(A组)、模型成纤维细胞+正常含药血清组(B组)、参七虫草方最佳含药血清组(C组)、精氨酸琥珀酸盐合成酶-1(arginine succinate synthetase-1,ASS1)抑制剂组(D组)、酪氨酸激酶(tyrosine kinase,Src)/信号转导和转化激活因子3(signal transducer and transformation activator 3,STAT3)阻断剂组(E组)、MAPK/细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulatory protein kinase,ERK)通路抑制剂组(F组)。采用CCK-8法、细胞划痕实验分别检测细胞活力和迁移速率;RT-qPCR检测ASS1、Src、STAT3、双特异性蛋白激酶1/2(bispecific protein kinase 1/2,MEK1/2)、ERK1/2基因表达水平;Western Blot(WB)检测各组p-ERK、激活蛋白-1(activator-1,AP-1)、P-MEK、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)、核蛋白因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果与A组比较,B组的细胞活力及细胞迁移速率增强和增快(P<0.05);与B组比较,其余干预组的细胞活力及细胞迁移速率减弱及降低(P<0.05)。RT-qPCR检测结果:B组与A组比较,ASS1、MEK1、MEK2、ERK1、ERK2、Src、STAT3基因表达水平升高(P<0.05)。与B组比较,其余干预组有关基因表达水平降低(P<0.05)。WB检测结果显示:B组与A组比较,p-ERK、P-MEK、MMP-2、MMP-9、NF-κB p65、AP-1蛋白表达水平升高(P<0.05)。与B组比较,其余干预组表达水平降低(P<0.05)。结论参七虫草方能够抑制ASS1介导的Src/STAT3、MAPK/ERK级联反应,下调MMP-2、MMP-9、AP-1、NF-κBp65蛋白表达,改善IPF病情进展。 展开更多
关键词 特发性肺纤维化 成纤维细胞 Src/STAT3 MAPK/ERK MMP-2 MMP-9 AP-1 NF-κBp65
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肺纤方对特发性肺间质纤维化患者血清基质金属蛋白酶1、2及其抑制剂的影响 被引量：8
3
作者 张晓梅 姜良铎 +2 位作者 尹婷 张伟 吴建军 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期739-741,共3页
目的:观察肺纤方治疗特发性肺间质纤维化的疗效和对患者肺基质重塑的影响。方法:将40例特发性肺间质纤维化患者随机分为治疗组20例、对照组20例,治疗组给予中药肺纤方治疗,对照组给予激素泼尼松治疗,疗程均为3个月。观察治疗后的临床疗... 目的:观察肺纤方治疗特发性肺间质纤维化的疗效和对患者肺基质重塑的影响。方法:将40例特发性肺间质纤维化患者随机分为治疗组20例、对照组20例,治疗组给予中药肺纤方治疗,对照组给予激素泼尼松治疗,疗程均为3个月。观察治疗后的临床疗效和患者血清基质金属蛋白酶1、2及其抑制剂的变化。结果:治疗组总有效率为84.2%,对照组总有效率为81.3%,肺纤方组治疗后能显著降低患者血清基质金属蛋白酶1、2及其抑制剂。结论:肺纤方能有效治疗特发性肺间质纤维化可能与其抑制患者肺基质重塑有关。 展开更多
关键词 特发性肺间质纤维化 肺纤方 基质金属蛋白酶1、2 组织金属蛋白酶抑制剂1、2
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特发性肺纤维化肺组织STAT_1的表达及其临床意义 被引量：4
4
作者 范贤明 范运斌 +2 位作者 邓述恺 李振华 湛晓勤 《泸州医学院学报》 2002年第5期375-377,共3页
目的 :探讨特发性肺纤维化 (IPF)肺组织中STAT1 的表达及其临床意义。方法 :对 15例健康人和 11例IPF患者行支气管肺泡灌洗 ,并同时应用免疫组化方法检测其肺组织的STAT1 表达。结果 :IPF组支气管肺泡灌洗液 (BALF)中炎性细胞总数和中... 目的 :探讨特发性肺纤维化 (IPF)肺组织中STAT1 的表达及其临床意义。方法 :对 15例健康人和 11例IPF患者行支气管肺泡灌洗 ,并同时应用免疫组化方法检测其肺组织的STAT1 表达。结果 :IPF组支气管肺泡灌洗液 (BALF)中炎性细胞总数和中性粒细胞均高于健康对照组 ;IPF组肺组织STAT1 表达明显高于健康对照组 ;肺组织STAT1 表达与BALF中炎性细胞总数呈正相关。结论 :IPF患者肺组织中存在STAT1 异常表达 ;STAT1 展开更多
关键词 特发性肺纤维化 STAT1 支气管肺泡灌洗 IPF BALF 肺组织 转录因子
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HMGB1对人肺成纤维细胞ERK1/2-NF-κB信号通路的影响及补阳还五汤含药血清的干预作用 被引量：13
5
作者 杜全宇 王振兴 +3 位作者 孙中莉 季节 郝丽君 王飞 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第13期153-157,共5页
目的:观察肺纤维化中诱导免疫损伤的高迁移率族蛋白Box-1(high mobility group Box-1 protein,HMGB1)刺激人肺成纤维细胞(HFL1)后细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase1/2,ERK1/2),核转录因子-κB(nuclear fac... 目的:观察肺纤维化中诱导免疫损伤的高迁移率族蛋白Box-1(high mobility group Box-1 protein,HMGB1)刺激人肺成纤维细胞(HFL1)后细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase1/2,ERK1/2),核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路的活化情况,以及补阳还五汤含药血清对HMGB1刺激HFL1后以上信号通路的干预作用。方法:采用含药血清药理学的实验方法,以5%,10%,15%,20%的补阳还五汤含药血清和空白血清来干预HMGB1诱导刺激的HFL1细胞。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞总蛋白中ERK1/2,胞浆胞核中NF-κB p65蛋白的表达。结果:与空白组比较,HMGB1刺激组诱导后ERK1/2蛋白,胞浆和胞核中NF-κB p65蛋白及IL-1β含量的表达均增高(P<0.05,P<0.01);与20%空白血清预培养加HMGB1组比较,HMGB1刺激组诱导后ERK1/2蛋白,胞浆和胞核中NF-κB p65蛋白及IL-1β含量的表达均增高(P<0.05);与HMGB1刺激组比较,补阳还五汤含药血清各组能够降低ERK1/2蛋白,胞浆和胞核中NF-κB p65蛋白及IL-1β含量的表达,其中15%和20%补阳还五汤含药血清组降低ERK1/2的表达(P<0.05);胞浆10%补阳还五汤含药血清组和胞核20%补阳还五汤含药血清组降低NF-κB p65蛋白的表达(P<0.05);15%补阳还五汤含药血清组降低IL-1β的含量(P<0.05)。结论:补阳还五汤含药血清在体外实验中,可抑制HMGB1引起的人肺成纤维细胞中ERK1/2/NF-κB信号通路的活化,减少IL-1β等炎症因子分泌。提示补阳还五汤可能通过调控人肺成纤维细胞中ERK1/2/NF-κB信号通路,防治肺纤维化的发生发展。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白Box-1 特发性肺纤维化 人肺成纤维细胞 细胞外调节蛋白激酶1/2/核转录因子-κB 补阳还五汤
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血清CEA、CYFRA21-1、NSE检测在特发性肺间质纤维化患者合并肺癌中的临床意义 被引量：6
6
作者 赵静 刘瑞娟 《医药与保健》 2014年第2期6-7,共2页
目的 探讨外周血血清癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）3种标志物对特发性肺间质纤维化（IPF）患者合并肺癌的诊断及分型意义.方法 对2012年1月至2013年8月收入院的IPF患者33例,肺癌患者38... 目的 探讨外周血血清癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）3种标志物对特发性肺间质纤维化（IPF）患者合并肺癌的诊断及分型意义.方法 对2012年1月至2013年8月收入院的IPF患者33例,肺癌患者38例,IPF合并肺癌患者30例,分别作为A、B、C三组,检测3组患者CEA、CYFRA21-1、NSE值.结果 ①三组之间比较,A组与B组,A组与C组,均有显著差异（P＜0.01）,B组与C组比较,无显著差异（P＞0.05）.②各组组间分别比较CEA、NSE均有显著差异（P＜0.05）,A组与B组,A组与C组比较,CYFRA21-1均有显著差异（P＜0.05）,B组与C组比较,上述指标无显著差异（P＞0.05）.③各组组内CEA、CYFRA21-1、NSE值比较,A组内,NSE ＞CYFRA21-1＞CEA,B组内,NSE＞CEA ＞CYFRA21-1,C组内,NSE＞CEA ＞CYFRA21-1.结论 血清CEA、CYFRA21-1、NSE检测对特发性肺间质纤维化患者合并肺癌的诊断具有临床价值,还可用于对其分型. 展开更多
关键词 癌胚抗原 细胞角蛋白19片段 神经元特异性烯醇化酶 IPF 肺癌
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柴胡皂甙-d调控ECM微环境抑制肺纤维化的机制研究
7
作者 徐云聪 郑金旭 《药物生物技术》 2025年第1期50-57,共8页
探究柴胡皂甙-d(saikosaponin-d,SSd),对肺纤维化细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的调控及作用机制。随机将C57BL/6小鼠分为四组(每组n=20):空白对照(control,Cont)组,博来霉素(bleomycin,BLM)组、柴胡皂甙-d(saikosaponin,SSd)组... 探究柴胡皂甙-d(saikosaponin-d,SSd),对肺纤维化细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的调控及作用机制。随机将C57BL/6小鼠分为四组(每组n=20):空白对照(control,Cont)组,博来霉素(bleomycin,BLM)组、柴胡皂甙-d(saikosaponin,SSd)组,地塞米松(dexamethasone,DXM)组。通过气管内分别注射BLM至BLM组、SSd组、DXM组小鼠肺组织中完成IPF模型的建立,并在SSd组和DXM组每日腹腔注射药物干预。在建模后第3、7、14、28 d,通过染色进行组织病理学检查。用酶联免疫吸附技术(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测肺匀浆液的羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)、IL-4、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量,Western Blot技术检测建模后肺组织促纤维化因子TGF-β、IGF-1的表达。免疫组化技术、Western Blot技术检测肺组织中E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、AKT1、纤维连接蛋白-蛋白结构域B(fibronectin-extra domain B,FN-EDB)的表达。与Cont组相比,BLM组、SSd组、DXM组TGF-β、IGF-1、HYP、AKT1、FN-EDB、TNF-α、IL-4表达升高,E-cad表达降低;与BLM组相比,SSd组、DXM组TGF-β、IGF-1、HYP、AKT1、FN-EDB、TNF-α、IL-4表达降低,E-cad表达有所回升,IL-10表达差异不明显。肺纤维化进展中TGF-β、IGF-1升高,并受到SSd的抑制,SSd组通过调控PI3K/AKT通路缓解ECM的异常沉积和纤维化区域的炎症因子释放,改变ECM的微环境,延缓肺纤维化的进展。 展开更多
关键词 特发性肺纤维化 柴胡皂甙-D 细胞外基质 胰岛素样生长因子-1
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大黄䗪虫丸对转化生长因子-β_(1)诱导A549细胞上皮-间充质转化的影响 被引量：5
8
作者 蒋锋利 黄茂 +5 位作者 蔡松 任士杰 孙文丽 张晶 赵明镜 张立山 《世界中医药》 CAS 2021年第24期3606-3610,共5页
目的:基于“IPF患者存在肺络干血”假说,观察大黄䗪虫丸含药血清对TGF-β_(1)诱导后A549细胞上皮-间充质转化(EMT)及Smad3,CollagenⅢ表达的影响,探讨其防治特发性肺纤维化(IPF)的作用机制。方法:正常培养并取对数生长期A549细胞,TGF-β_... 目的:基于“IPF患者存在肺络干血”假说,观察大黄䗪虫丸含药血清对TGF-β_(1)诱导后A549细胞上皮-间充质转化(EMT)及Smad3,CollagenⅢ表达的影响,探讨其防治特发性肺纤维化(IPF)的作用机制。方法:正常培养并取对数生长期A549细胞,TGF-β_(1)对其诱导48 h,电子显微镜下观察A549细胞的形态学变化;选择吡非尼酮(PFD)为阳性对照药,RT-PCR法检测EMT相关基因及Smad3 mRNA的表达;Western Blottingting法检测Smad3,p-Smad3,CollagenⅢ蛋白表达。结果:成功获取发生EMT的A549细胞;以α-SMA mRNA表达情况判断EMT程度由高到低依次为:模型组(M),大黄䗪虫丸含药血清大剂量组(D),西药组(P),大黄䗪虫丸含药血清中剂量组(Z),大黄䗪虫丸含药血清小剂量组(X),空白对照组(K);与M组比较,Z组,X组,P组中CollagenⅢ表达不同程度降低(P<0.05),且其在Z组与K组中表达差异无统计学意义(P>0.05);与M组及K组比较,各观察组Smad3表达差异无统计学意义(P>0.05),但对其基因及磷酸化,即Smad3 mRNA及p-Smad3的表达有影响,且与M组比较,Z组,X组,P组中均不同程度降低(P<0.05),D组中表达虽低于M组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:大黄䗪虫丸对TGF-β_(1)诱导后A549细胞发生EMT程度与Smad3 mRNA及CollagenⅢ的表达有影响,推测大黄䗪虫丸对IPF的保护机制可能与不同程度阻断或逆转了TGF-β_(1)/Smad3介导的EMT有关。 展开更多
关键词 大黄䗪虫丸 肺络干血 特发性肺纤维化 含药血清 上皮细胞-间充质转化 转化生长因子-β_(1) Α-平滑肌肌动蛋白 Ⅲ型胶原蛋白
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MODY的研究进展 被引量：3
9
作者 林建立 林丽香 庄维特 《国外医学（内分泌学分册）》 2000年第1期42-45,共4页
青少年发病的成年型糖尿病 (MODY)是 2型糖尿病中的一种异质性单基因疾病 ,特点是常染色体显性遗传。随着基因定位克隆和候选克隆等技术的发展 ,多个 2型糖尿病的易感性特定缺陷基因及其标记位点已被阐明。讨论了肝细胞核转移因子 (HNF)... 青少年发病的成年型糖尿病 (MODY)是 2型糖尿病中的一种异质性单基因疾病 ,特点是常染色体显性遗传。随着基因定位克隆和候选克隆等技术的发展 ,多个 2型糖尿病的易感性特定缺陷基因及其标记位点已被阐明。讨论了肝细胞核转移因子 (HNF) 4α、葡萄糖激酶 (GCK)、HNF 1α、胰岛素启动因子 (IPF) 1的基因缺陷和有关MODY的发病机制。 展开更多
关键词 MODY HNF-1α HNF-4Α GCK ipf-1 糖尿病
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HOXB7在特发性肺纤维化中抗纤维化的作用 被引量：2
10
作者 周淼 李风雷 +1 位作者 张海龙 孙俊波 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第24期4037-4041,共5页
目的探讨抑制HOXB7对TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞纤维化的影响及可能的相关机制。方法 qRT-PCR检测肺纤维化组织中HOXB7的mRNA表达量;TGF-β1诱导A549纤维化;转染HOXB7siRNA到A549细胞,抑制HOXB7;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;qRT-PC... 目的探讨抑制HOXB7对TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞纤维化的影响及可能的相关机制。方法 qRT-PCR检测肺纤维化组织中HOXB7的mRNA表达量;TGF-β1诱导A549纤维化;转染HOXB7siRNA到A549细胞,抑制HOXB7;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;qRT-PCR检测A549细胞HOXB7、E-cadherin、α-SMA和COL1A1的mRNA表达量;Western blot检测A549细胞HOXB7、E-cadherin、α-SMA、bFGF和COL1A1蛋白表达量。细胞分组:control组(空白对照)、TGF-β1组(TGF-β1诱导)、β1-HOXB7 si组(TGF-β1诱导后转染HOXB7 siRNA)、β1-non-spe组(TGF-β1诱导后转染non-specific siRNA)、β1-HOXB7si-bFGF组(bFGF处理的β1-HOXB7 si组)。结果肺纤维组织HOXB7的mRNA表达量显著升高;细胞转染实验中HOXB7的mRNA和蛋白表达量均显著降低;降低HOXB7表达量显著抑制A549向细胞纤维化形态改变;抑制HOXB7显著升高E-cadherin mRNA和蛋白表达量,且降低α-SMA和COL1A1的mRNA和蛋白表达量;抑制HOXB7显著降低bFGF的蛋白表达量,且bFGF孵育细胞可有效反转抑制HOXB7对细胞E-cadherin、α-SMA和COL1A1表达量的影响。结论抑制HOXB7可通过调控bFGF有效降低TGF-β1诱导的肺泡细胞EMT过程,进而抑制其纤维化。 展开更多
关键词 HOXB7 EGR-1 EMT Ⅱ型肺泡上皮细胞 IPF
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