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IPEC-J2细胞氧化应激模型的建立及抗氧化益生菌的筛选 被引量：1
1
作者 张华 王星迪 +3 位作者 丁硕 鹿萱萱 高佳悦 周闯 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2025年第8期125-133,共9页
为了探究抗氧化应激机制并为新型功能性动物饲料提供重要资源,试验通过应用不同浓度(200,400,600,800,1000μmol/L)H_(2)O_(2)处理猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)3 h,另设不加H_(2)O_(2)的空白对照,检测细胞存活率;使用细胞氧化模型确定的... 为了探究抗氧化应激机制并为新型功能性动物饲料提供重要资源,试验通过应用不同浓度(200,400,600,800,1000μmol/L)H_(2)O_(2)处理猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)3 h,另设不加H_(2)O_(2)的空白对照,检测细胞存活率;使用细胞氧化模型确定的H_(2)O_(2)浓度处理IPEC-J2细胞不同时间(1,2,3,4 h)后,观察细胞形态,检测细胞活性氧相对荧光强度、Caspase-3表达和抗氧化酶活性,建立IPEC-J2细胞氧化应激模型。在此基础上,以缓解氧化损伤为筛选指标,检测益生菌的抗氧化特性,从新疆克州传统发酵乳制品分离出的8株益生菌中筛选出抗氧化益生菌。结果表明:400μmol/L H_(2)O_(2)处理IPEC-J23 h,细胞存活率为45.9389%,表明细胞已受到一定程度的损伤,同时又保留了一定的细胞活力。因此,选择400μmol/L H_(2)O_(2)建立IPEC-J2细胞氧化应激模型。与空白对照相比,400μmol/L H_(2)O_(2)处理IPEC-J2细胞3 h,活性氧相对荧光强度极显著升高(P<0.01);过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);细胞中Caspase-3蛋白穿梭入核现象明显并诱导细胞凋亡。在4株益生菌的预处理下,氧化损伤细胞的存活率和抗氧化酶活性均有所回升,其中加纳醋杆菌JK-23效果最好。说明IPEC-J2细胞氧化应激模型建立的最佳条件为400μmol/L H_(2)O_(2)处理3 h,并筛选出4株具有缓解细胞氧化应激作用的益生菌。 展开更多
关键词 H_(2)O_(2) ipec-j2细胞 氧化应激 益生菌 抗氧化
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山豆根多糖对IPEC-J2细胞氧化损伤的保护作用 被引量：1
2
作者 许双 杨琨兆 +8 位作者 郭鑫 陈怡沁 严思茵 何政科 苏利娟 马琪 董世起 曹立亭 杜红旭 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第2期330-340,共11页
旨在探究山豆根多糖(Sophora subprostrate polysaccharide, SSP)对叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide, TBHP)诱导的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化损伤的保护作用及可能机制。通过MTT法确定TBHP的最佳造模剂量和SSP的安全浓度范... 旨在探究山豆根多糖(Sophora subprostrate polysaccharide, SSP)对叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide, TBHP)诱导的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化损伤的保护作用及可能机制。通过MTT法确定TBHP的最佳造模剂量和SSP的安全浓度范围。试验分为5组:空白组(CC组)、模型组(TBHP组)、SSPL组、SSPM组和SSPH组,观察细胞形态并测定细胞存活率和LDH释放量,利用DCFH-DA染色检测细胞内ROS的含量,通过生化检测试剂盒检测细胞中的MDA的含量以及抗氧化指标的变化,利用转录组技术分析SSP缓解IPEC-J2细胞氧化损伤的可能机制。结果显示,625μmol/L TBHP作用2 h,可以显著降低IPEC-J2细胞活性,显著提高LDH的释放量(P<0.05),显著抑制CAT、SOD和GPX活性(P<0.05),明显提高MDA和ROS的含量(P<0.05)。与模型组相比,SSP处理后,细胞内ROS的含量显著降低(P<0.05),同时CAT、SOD和GPX活力显著地提高(P<0.05),MDA含量和LDH释放量显著降低(P<0.05),且呈剂量依赖性。转录组分析发现,TBHP处理明显改变了IPEC-J2细胞的转录谱,而SSP处理则可以一定程度恢复受损细胞的转录谱变化,同时GO与KEGG富集分析表明,CC与TBHP组之间差异表达基因主要显著富集在氧化磷酸化、核糖体等通路上。而SSP与TBHP组之间的差异表达基因主要富集在氧化磷酸化、凋亡与乙醛酸和二羧酸酯代谢等通路。结果表明,TBHP可能是通过氧化磷酸化和影响甘氨酸,丝氨酸和苏氨酸代谢等代谢通路,干扰IPEC-J2细胞正常氧化呼吸链从而引起肠上皮细胞氧化受损。而SSP处理可能通过作用于氧化磷酸化、凋亡和溶酶体等信号通路,恢复肠上皮细胞氧化磷酸化过程,缓解溶酶体损伤,减少细胞的凋亡来减轻肠上皮细胞氧化损伤。这一发现为SSP在缓解猪肠道氧化损伤的临床应用中提供了理论依据。 展开更多
关键词 山豆根多糖 叔丁基过氧化氢 ipec-j2细胞 氧化应激
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氯甲基蛋氨酸缓解脂多糖诱导的IPEC-J2细胞凋亡及其机制
3
作者 姜东凤 乔英英 +5 位作者 杨建平 聂芙蓉 李蕊 王可 雷蕾 张卫宪 《华北农学报》 北大核心 2025年第4期232-238,共7页
旨在探讨氯甲基蛋氨酸(MMC)对脂多糖(LPS)诱导的仔猪空肠上皮细胞IPEC-J2凋亡及相关蛋白表达的影响,并解析其潜在的作用机制。通过设立空白组、模型组(LPS处理)和试验组(MMC+LPS处理),分析MMC对LPS诱导的IPEC-J2细胞的活力、凋亡率、迁... 旨在探讨氯甲基蛋氨酸(MMC)对脂多糖(LPS)诱导的仔猪空肠上皮细胞IPEC-J2凋亡及相关蛋白表达的影响,并解析其潜在的作用机制。通过设立空白组、模型组(LPS处理)和试验组(MMC+LPS处理),分析MMC对LPS诱导的IPEC-J2细胞的活力、凋亡率、迁移数及凋亡相关蛋白的影响。结果显示,试验组相较于模型组,细胞活力显著提升了18%,迁移数极显著提升了约2倍,凋亡率极显著降低了40%。MMC抑制了LPS诱导的JNK通路激活,表现为p-JNK蛋白表达水平极显著下降25.5%。进一步分析表明,MMC显著降低了促凋亡蛋白Cleaved-caspase-3和BAX的表达,分别下降了31.5%,26.3%,同时显著提高了抗凋亡蛋白BCL-2的表达水平。综上,氯甲基蛋氨酸通过调控凋亡相关蛋白表达、抑制JNK通路激活,有效缓解LPS诱导的IPEC-J2细胞凋亡,为氯甲基蛋氨酸在猪肠道健康保护中的应用提供了科学依据。 展开更多
关键词 氯甲基蛋氨酸 脂多糖 ipec-j2细胞 细胞活力 细胞凋亡
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异丹叶大黄素缓解IPEC-J2细胞氧化损伤的效果研究
4
作者 朱龙龙 蔡龙 +3 位作者 刘泽青 宋妍辰 吴秋珏 王晶 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第6期2865-2873,共9页
【目的】探究异丹叶大黄素(isorhapontigenin,ISO)对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化损伤的缓解作用,为ISO作为一种抗氧化剂在动物生产中应用提供理论参考。【方法】使用过氧化氢(H_(2)O_(2))处理IPEC-J2细胞构建氧化应激模型,通过细胞存... 【目的】探究异丹叶大黄素(isorhapontigenin,ISO)对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化损伤的缓解作用,为ISO作为一种抗氧化剂在动物生产中应用提供理论参考。【方法】使用过氧化氢(H_(2)O_(2))处理IPEC-J2细胞构建氧化应激模型,通过细胞存活率筛选出ISO缓解IPEC-J2细胞氧化损伤的最佳浓度;采用相应试剂盒测定细胞中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHDG)含量及过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC);通过实时荧光定量PCR检测IPEC-J2细胞中抗氧化酶基因(SOD-1、CAT、GSH-Px、HO-1和NQO-1)、炎症相关基因(IL-1β、IL-12和TNF-α)及宿主防御肽基因(pBD1、pBD2和pBD3)的相对表达量。【结果】与H_(2)O_(2)组相比,用5、20、40μmol/L ISO预处理细胞24 h后细胞存活率显著或极显著提高(P<0.05;P<0.01),其中20μmol/L ISO缓解效果最好。与H_(2)O_(2)组相比,ISO预处理可显著或极显著降低IPEC-J2细胞MDA、ROS和8-OHDG水平(P<0.05;P<0.01);极显著提高GSH-Px、SOD1、CAT和NQO-1基因相对表达量及CAT活性(P<0.01)。与H_(2)O_(2)组相比,ISO预处理可降低IL-1β和IL-12基因相对表达量(P<0.05;P<0.01),提高pBD1、pBD2和pBD3基因相对表达量(P<0.05;P<0.01)。【结论】ISO可减少细胞中应激产物的生成,提高抗氧化酶基因的表达和抗氧化酶活性,并调节炎症相关基因的表达,从而缓解H_(2)O_(2)引起的IPEC-J2细胞氧化损伤。本试验条件下,推荐ISO浓度为20μmol/L。 展开更多
关键词 异丹叶大黄素 氧化损伤 抗氧化 ipec-j2细胞
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ShRNA干扰核转录因子E2相关因子2基因表达对玉米赤霉烯酮诱导的IPEC-J2细胞凋亡和氧化应激的影响
5
作者 程群 桑艺豪 +3 位作者 姜淑贞 侯绍金 牛现琇 杨维仁 《动物营养学报》 北大核心 2025年第4期2661-2673,共13页
本试验旨在通过ShRNA干扰核转录因子E2相关因子2(Nrf2)基因表达探索玉米赤霉烯酮(ZEA)诱导IPEC-J2细胞凋亡和氧化应激中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)-Nrf2信号通路的作用。试验构建干扰Nrf2表达IPEC-J2细胞模型,分别设置空白对照... 本试验旨在通过ShRNA干扰核转录因子E2相关因子2(Nrf2)基因表达探索玉米赤霉烯酮(ZEA)诱导IPEC-J2细胞凋亡和氧化应激中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)-Nrf2信号通路的作用。试验构建干扰Nrf2表达IPEC-J2细胞模型,分别设置空白对照组(Control组)、阴性对照组(Sh-control组)、干扰Nrf2表达转染组(Nrf2-ShRNA组),以确定Nrf2介导的信号通路对ZEA诱导的IPEC-J2细胞氧化应激的作用。当成功转染Nrf2-ShRNA的IPEC-J2细胞处于对数生长期时,分别添加10、20和40μmol/L的ZEA(Nrf2-ShRNA+ZEA10组、Nrf2-ShRNA+ZEA20组和Nrf2-ShRNA+ZEA40组)处理36 h后收集细胞,进行相关指标测定。结果显示:1)Nrf2-ShRNA组IPEC-J2细胞的凋亡率显著高于Control组和Sh-control组(P<0.05)。与Nrf2-ShRNA组相比较,ZEA以一定的剂量依赖性显著增加了干扰Nrf2表达的IPEC-J2细胞的凋亡率(P<0.05),表明干扰细胞Nrf2表达和高浓度ZEA均能诱导细胞凋亡。2)与Control组和Sh-control组相比,Nrf2-ShRNA组IPEC-J2细胞中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性与Keap1、Nrf2、还原型辅酶/醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素加氧酶-1(HO-1)mRNA和蛋白相对表达量均显著降低(P<0.05),丙二醛(MDA)含量和活性氧(ROS)荧光强度显著增加(P<0.05)。3)与Nrf2-ShRNA组相比,Nrf2-ShRNA+ZEA20组和Nrf2-ShRNA+ZEA40组IPEC-J2细胞中T-SOD和GSH-Px活性与Keap 1 mRNA和蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),MDA含量和Nrf2荧光强度以及Nrf2、NQO1和HO-1 mRNA和蛋白相对表达量显著增加(P<0.05)。当ZEA浓度达到40μmol/L,IPEC-J2细胞中Nrf2和ROS的荧光强度最高。由此可见,ZEA能够诱导IPEC-J2细胞的氧化应激,促进细胞凋亡的发生,而干扰IPEC-J2细胞Nrf2的表达能够影响Keap1-Nrf2信号通路的激活,降低细胞抵抗ZEA诱导氧化应激能力,因此Keap1-Nrf2信号通路在ZEA诱导的肠道氧化应激中具有重要的保护作用。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 ipec-j2细胞 Keap1-Nrf2信号通路 Nrf2-ShRNA 氧化应激
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虎杖水提取物对猪流行性腹泻病毒在IPEC-J2细胞中复制的影响
6
作者 王煜轩 杨植 +5 位作者 刘昊阳 王兴海 杨富琳 芦烘德 何至远 董虹 《华北农学报》 北大核心 2025年第3期215-224,共10页
为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)在猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中的繁殖适应性,并评估虎杖水提取物对其体外抑制作用,通过细胞毒性试验和Western Blot试验,评估不同胰酶浓度、不同时间对IPEC-J2细胞活性以及PEDV N蛋白在细胞内表达的影响;再... 为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)在猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中的繁殖适应性,并评估虎杖水提取物对其体外抑制作用,通过细胞毒性试验和Western Blot试验,评估不同胰酶浓度、不同时间对IPEC-J2细胞活性以及PEDV N蛋白在细胞内表达的影响;再通过TCID50、实时荧光定量PCR和Western Blot等方法检测病毒滴度、PEDV N基因转录水平及N蛋白的表达量;使用CCK-8法检测虎杖水提取物对IPEC-J2细胞增殖活力的影响;进一步通过实时荧光定量PCR和Western Blot试验,检测虎杖水提取物对PEDV N基因和N蛋白表达的抑制作用,以及探究虎杖水提取物对PEDV生命周期各个阶段的影响。结果表明,当胰酶浓度为2μg/mL时,胰酶对细胞无影响,此时PEDV展示出最佳的繁殖适应性,且36 h后达到最高毒力值;虎杖水提取物浓度低于100μg/mL时在12 h,24 h无细胞毒性。虎杖水提取物在All-treatment Co-treatment、Post-treatment 3种加药方式下显著抑制N基因表达,并呈剂量依赖显著抑制PEDV N基因mRNA和N蛋白的表达;虎杖水提取物主要在病毒生命周期中复制增殖阶段对PEDV N基因有显著抑制效果,在其他阶段无明显抑制作用。综上,2μg/mL胰酶浓度对PEDV繁殖适应性最佳,并且虎杖水提取物在体外有显著的抑制PEDV效果,主要作用于PEDV生命周期的复制增殖阶段。 展开更多
关键词 虎杖水提取物 PEDV ipec-j2 细胞适应性 体外抑制
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稳定表达人IFITM3的猪IPEC-J2细胞系的构建及其对PEDV增殖的影响
7
作者 唐金梦 余澍楠 +4 位作者 袁一心 马雨辰 杜文娟 于林洋 李永涛 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第10期5180-5189,共10页
前期研究通过全基因组CRISPR文库筛选人肝癌细胞中调控猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的宿主因子,鉴定出人干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)参与PEDV感染进程,但其在猪源细胞中的功能尚未明确。本研究旨在构建稳定表达人IFITM3(hIFITM3)的猪肠... 前期研究通过全基因组CRISPR文库筛选人肝癌细胞中调控猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的宿主因子,鉴定出人干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)参与PEDV感染进程,但其在猪源细胞中的功能尚未明确。本研究旨在构建稳定表达人IFITM3(hIFITM3)的猪肠上皮IPEC-J2细胞系,并系统评估其对PEDV复制的影响。首先,构建携带hIFITM3基因的重组慢病毒载体,与包装质粒pMD2.G/psPAX2共转染HEK293T细胞制备病毒颗粒。随后,通过慢病毒感染IPEC-J2细胞,经嘌呤霉素筛选和有限稀释法获得单克隆稳转细胞株(IPEC-J2^(hIFITM3))。Western blot、间接免疫荧光法(IFA)及RT-qPCR验证显示hIFITM3在靶细胞中高效表达。CCK-8试验证实hIFITM3过表达未显著影响细胞活力。功能验证表明,IPEC-J2^(hIFITM3)细胞可有效抑制水泡性口炎病毒(VSV-GFP)的早期复制,与其已知抗病毒特性一致。然而,感染PEDV DR13-GFP毒株后,IPEC-J2^(hIFITM3)细胞表现出显著的促病毒增殖效应:24 h时病毒滴度(TCID50·mL^(-1))较野生型细胞提高约1000倍。本研究成功建立hIFITM3稳转猪肠上皮细胞模型,其反常促进PEDV复制的特性为解析病毒种属特异性感染机制、开发抗病毒策略及优化病毒分离培养体系提供了重要工具。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 ipec-j2细胞 干扰素诱导跨膜蛋白3 细胞系
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基于转录组学测序研究白屈菜碱缓解H_(2)O_(2)诱导IPEC-J2细胞炎症损伤的作用机制
8
作者 莫佳荣 陆伟峰 +4 位作者 张偌益 林惠莹 曾春丽 林福 李健 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第1期74-83,106,共11页
将处于对数生长期的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)分为空白组(K组)、H_(2)O_(2)组(S组)和白屈菜碱(chelidonine)组(L组),每组设3个重复样本。L组给予含2.5 mg/L白屈菜碱进行预处理,24 h后,S组和L组给予含1 mg/L的完全培养基,培养12 h后,提取... 将处于对数生长期的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)分为空白组(K组)、H_(2)O_(2)组(S组)和白屈菜碱(chelidonine)组(L组),每组设3个重复样本。L组给予含2.5 mg/L白屈菜碱进行预处理,24 h后,S组和L组给予含1 mg/L的完全培养基,培养12 h后,提取各组细胞的总RNA,构建测序文库,并对组装数据进行功能注释、差异基因分析以及GO和KEGG富集分析。采用qPCR法验证关键差异基因的表达情况,ELISA法检测白屈菜碱对IPEC-J2细胞通透性的影响。结果显示,测序数据的质控合格,样本间相关性良好。GO功能注释结果表明,白屈菜碱的干预作用主要涉及细胞氧化应激反应、有丝分裂周期G2/M转变调控等生物学过程,与跨膜转运活性等分子功能密切相关。KEGG富集分析结果显示,IPEC-J2细胞经H_(2)O_(2)处理后,差异表达基因(DEGs)主要富集于p53信号通路、补血和凝血级联反应、FoxO信号通路等多种信号通路,而白屈菜碱预处理后,DEGs主要富集在TNF信号通路、突触囊泡循环、IL-17信号通路等炎症相关信号通路。qPCR验证结果与测序结果一致。白屈菜碱还能显著抑制LDH释放、升高GLN含量、降低DOA含量。结果表明,白屈菜碱可以通过调控TNF信号通路等炎症相关通路,降低细胞通透性,缓解H_(2)O_(2)诱导的IPEC-J2细胞炎症损伤。 展开更多
关键词 ipec-j2细胞 白屈菜碱 H_(2)O_(2) 炎症 转录组测序
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吲哚-3-甲醇激活芳香烃受体缓解脂多糖诱导的IPEC-J2细胞损伤及铁死亡研究
9
作者 张亚磊 胡曦文 +2 位作者 方懿 姜浩然 荀文娟 《中国畜牧杂志》 北大核心 2025年第4期270-276,共7页
本实验旨在研究吲哚-3-甲醇(I3C)在猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)上激活芳香烃受体(AhR)通过相关信号通路来保护仔猪肠道以及缓解肠上皮细胞铁死亡,明确其对肠道损伤修复的作用,并探讨其对铁死亡的影响。分别使用0、5、10、25、100、250、500... 本实验旨在研究吲哚-3-甲醇(I3C)在猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)上激活芳香烃受体(AhR)通过相关信号通路来保护仔猪肠道以及缓解肠上皮细胞铁死亡,明确其对肠道损伤修复的作用,并探讨其对铁死亡的影响。分别使用0、5、10、25、100、250、500、1000μmol/L的I3C预处理IPEC-J2细胞后,基于前期研究,向细胞培养体系中添加1μg/mL的LPS进行处理,评估细胞活力,依据检测结果,确定了在该条件下对细胞活力产生显著影响的I3C最佳浓度,即100μmol/L。将IPEC-J2细胞分为4组:对照组(CON组)、脂多糖组(LPS组)、LPS+I3C组(L+I组)和I3C组,CON组细胞不做处理,LPS组添加1μg/mL LPS,L+I组添加1μg/mL LPS和100μmol/L I3C,I3C组添加100μmol/L I3C,收集细胞和上清用于检测抗氧化能力和亚铁离子含量,采用实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA相对表达量。结果表明:(1)添加100μmol/LI3C能够逆转LPS的损伤效果(P<0.05);(2)I3C预处理后可缓解LPS导致的乳酸脱氢酶(LDH)以及丙二醛(MDA)含量的升高(P<0.05),并使谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)升高(P<0.05),缓解了细胞的氧化应激损伤;(3)I3C预处理细胞后,可缓解LPS导致的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β(IL-1β)以及IL-6的mRNA表达量升高(P<0.05),并使IL-10的mRNA表达量升高(P<0.05),减弱了LPS所诱导的细胞炎症反应;(4)与LPS组相比,I3C处理后,可使LPS引起的细胞中AhR、CYP1A1、Nrf2、NQO1、HO-1、GPX4、SLC7A11mRNA相对表达量降低趋势发生改变(P<0.05),并促进铁蛋白重链1(FerritinHeavy Chain 1,FTH1)及铁蛋白轻链(Ferritin Light Chain,FTL)mRNA相对表达量降低到正常范围(P<0.05),同时使细胞中的亚铁离子含量降低(P<0.05),这表明通过激活AhR可通过上调Nrf2/SLC7A11/GPX4通路降低细胞铁死亡的产生。综合以上所述,I3C可能通过激活IPEC-J2细胞中AhR,调控Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路,提高抗氧化酶活性、抑制铁死亡,缓解LPS诱导的猪小肠上皮细胞损伤。 展开更多
关键词 吲哚-3-甲醇 脂多糖 ipec-j2 铁死亡
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26种中药抗PEDV感染IPEC-J2细胞的筛选效果分析
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作者 任涛 李俊贤 +3 位作者 郭杨 文安林 张依裕 欧德渊 《动物医学进展》 北大核心 2025年第6期47-56,共10页
由于猪流行性腹泻病毒(PEDV)具有较高的变异性并引起仔猪的高死亡率,且疫苗免疫对变异毒株的保护率低,西药的治疗成本高,因此,目前寻找抗PEDV中药已成为当今研究关键。通过TCID 50法检测病毒滴度,结果显示PEDV感染猪肠上皮细胞(IPEC-J2... 由于猪流行性腹泻病毒(PEDV)具有较高的变异性并引起仔猪的高死亡率,且疫苗免疫对变异毒株的保护率低,西药的治疗成本高,因此,目前寻找抗PEDV中药已成为当今研究关键。通过TCID 50法检测病毒滴度,结果显示PEDV感染猪肠上皮细胞(IPEC-J2)随时间的增加病毒滴度逐渐升高;HE观察发现PEDV感染IPEC-J2细胞后发生皱缩,细胞间隙变大,拉丝及变圆的现象;CCK8法检测中药液在IPEC-J2细胞的最大安全浓度,以及通过计算病毒抑制率得出,在阻断PEDV作用上穿心莲水煎液(CXL)最佳,病毒抑制率高达57.8%;炒白术水煎液(CBZ)对病毒直接灭活效果最佳,病毒抑制率高达51.9%;党参水煎液(DS)的抑制效果最佳,病毒抑制率高达60.7%;设计不同剂量DS组(DS 1.25、2.5、5 mg/mL),进行RT-PCR检测DS对PEDV感染IPEC-J2细胞中PEDV N、IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-αmRNA表达水平,发现DS对PEDV N基因呈浓度依赖性抑制,DS能极显著降低PEDV感染IPEC-J2细胞中PEDV N mRNA表达水平(P<0.01);与低、中剂量DS(DS 1.25、2.5 mg/mL)比,高剂量DS更能降低PEDV感染IPEC-J2细胞中的IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-αmRNA表达水平;ELISA检测IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α蛋白含量,与低、中剂量DS比,高剂量DS更能降低PEDV感染IPEC-J2细胞后IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α蛋白含量。结果表明,DS对病毒抑制作用最佳,其中高剂量DS对PEDV复制有着显著的抑制作用,能缓解PEDV对IPEC-J2细胞的炎症反应。 展开更多
关键词 中药 猪流行性腹泻病毒 猪肠上皮细胞 病毒抑制率 抗病毒作用 炎症
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转录组揭示产气荚膜梭菌毒素诱导猪IPEC-J2细胞损伤中关键基因和通路
11
作者 贺莹 白晓琴 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1957-1964,1998,共9页
仔猪腹泻是由产气荚膜梭菌毒素引发的肠道疾病,本研究旨在通过研究与仔猪腹泻相关的关键基因和通路,揭示其对IPEC-J2细胞的损伤机制。使用产气荚膜梭菌毒素处理IPEC-J2细胞,并进行了转录组测序。通过分析差异表达基因的GO功能、KEGG通... 仔猪腹泻是由产气荚膜梭菌毒素引发的肠道疾病,本研究旨在通过研究与仔猪腹泻相关的关键基因和通路,揭示其对IPEC-J2细胞的损伤机制。使用产气荚膜梭菌毒素处理IPEC-J2细胞,并进行了转录组测序。通过分析差异表达基因的GO功能、KEGG通路和蛋白互作网络,确定了细胞损伤中的关键基因和通路。结果显示,相对于对照组,损伤组共检测到460个基因,其中419个基因上调,41个基因下调。KEGG分析进一步发现,Influenza A和NOD样受体信号通路较为显著,蛋白互作网络分析筛选出了8个核心基因的子网络,它们之间呈正相关,这些基因主要注释在Influenza A和NF-kappa B等信号通路上,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)试验进一步证实了RNA-seq测序结果可靠。产气荚膜梭菌毒素对猪IPEC-J2细胞的损伤主要涉及Influenza A、NOD样受体信号通路以及NF-kappa B等通路,MX2、MX1、DDX58、IFI44、ISG15等基因通过关键信号通路可能在猪小肠抵产气荚膜梭菌毒素过程中发挥了重要功能。这为进一步研究产气荚膜梭菌毒素引起仔猪腹泻的机制提供了新的见解。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌毒素 转录组 ipec-j2细胞 通路
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白藜芦醇对鼠伤寒沙门氏菌诱导型IPEC-J2细胞损伤的缓解作用 被引量：3
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作者 赵峥 余秋颖 +3 位作者 杨聪燕 李珊珊 陈琳琳 王娜 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期957-965,共9页
【目的】研究白藜芦醇(resveratrol, RES)对鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)诱导猪小肠上皮细胞(intestinal porcine epithelial cells, IPEC-J2)损伤的缓解作用,为促进动物健康养殖提供新思路。【方法】用鼠伤寒沙门氏菌建立IP... 【目的】研究白藜芦醇(resveratrol, RES)对鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)诱导猪小肠上皮细胞(intestinal porcine epithelial cells, IPEC-J2)损伤的缓解作用,为促进动物健康养殖提供新思路。【方法】用鼠伤寒沙门氏菌建立IPEC-J2损伤模型,测定细胞上清液一氧化氮(NO)浓度、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)质量浓度、白介素-6(IL-6)质量浓度、白介素-4(IL-4)质量浓度、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)水平、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase, T-SOD)活力、还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)质量浓度和丙二醛(malondialdehyde, MDA)浓度,分析RES对IPEC-J2损伤模型的缓解作用。【结果】RES预处理IPEC-J2细胞的最佳质量浓度为7.8 mg·L^(-1),且能有效缓解鼠伤寒沙门氏菌诱导IPEC-J2细胞产生的炎症损伤,显著降低促炎因子(TNF-α和IL-6)的质量浓度,提高抑炎因子(IL-4)的表达,进而有效减缓肠道炎症反应。同时,RES可显著提高T-SOD活力和GSH质量浓度,显著降低MDA浓度,缓解鼠伤寒沙门氏菌诱发的氧化损伤,达到维持机体肠道氧化还原平衡的稳态。【结论】RES对IPEC-J2损伤具有保护作用,可用于预防鼠伤寒沙门氏菌感染。 展开更多
关键词 白藜芦醇 鼠伤寒沙门氏菌 ipec-j2细胞 炎症反应 氧化应激
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pAPN基因敲除的IPEC-J2介导的TGEV感染特征分析 被引量：1
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作者 夏振涛 王楠 +3 位作者 王婉洁 周期律 黄雷 牟玉莲 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3395-3407,共13页
旨在探究猪氨基肽酶N(porcine aminopeptidase N,pAPN)基因敲除的猪空肠上皮细胞系(intestinal porcine epithelial cell line J2,IPEC-J2)介导猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)感染的特征,为深入了解pAP... 旨在探究猪氨基肽酶N(porcine aminopeptidase N,pAPN)基因敲除的猪空肠上皮细胞系(intestinal porcine epithelial cell line J2,IPEC-J2)介导猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)感染的特征,为深入了解pAPN基因在TGEV感染过程中的作用机制提供理论依据。研究分为pAPN基因敲除IPEC-J2组(IPEC-J2-KO组)、野生型IPEC-J2组(IPEC-J2-WT组)和未接种TGEV的野生型IPEC-J2组(Mock组)3组,每组设置3个重复。首先通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)确定IPEC-J2接种TGEV毒株后收取细胞样品的最佳时间节点;其次,对IPEC-J2-KO进行了脱靶效应检测;然后,通过qPCR、蛋白免疫印迹(western blot,WB)、间接免疫荧光分析(indirect immunofluorescence assay,IFA)和50%组织细胞感染量(50%tissue culture infective dose,TCID_(50))对接种TGEV的IPEC-J2-KO、IPEC-J2-WT及Mock进行感染特征分析;最后,通过WB检测IPEC-J2-KO、IPEC-J2-WT和Mock中NF-κB p65及其磷酸化蛋白pp65的表达情况。qPCR结果显示,接毒24 h是收集细胞样本以评估TGEV对IPEC-J2影响的最佳时间节点;脱靶分析结果显示,在IPEC-J2-KO中未检测到脱靶效应;病毒感染特征分析结果显示,与IPEC-J2-WT相比,IPEC-J2-KO内病毒拷贝数、病毒滴度均极显著降低(P<0.001),与Mock相比,IPEC-J2-KO内病毒拷贝数、病毒滴度均无显著差异(P>0.05),且IPEC-J2-KO内未检测到TGEV-N蛋白的表达;此外,与Mock相比,接种TGEV后,IPEC-J2-WT组NF-κB p65的磷酸化水平极显著上调(P<0.001),而IPEC-J2-KO组无显著差异(P>0.05)。本研究表明,IPEC-J2-KO可有效抵抗TGEV的感染,接种TGEV未影响IPEC-J2-KO中先天免疫相关信号通路中转录因子NF-κB的活性。该研究为IPEC-J2作为TGEV感染特征研究的细胞模型提供了理论依据,为阐明pAPN基因在TGEV入侵宿主细胞的机制及抗病猪新品种的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪氨基肽酶N ipec-j2 TGEV NF-ΚB
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乳酸菌与益生元组合的筛选并利用IPEC-J2细胞模型验证其对肠道屏障的作用 被引量：3
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作者 荆学毅 禹爱兵 +3 位作者 程雨菲 高杨 姜南 洪亮 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期4693-4705,共13页
为开发改善动物肠道健康的绿色添加剂产品,本研究旨在筛选乳酸菌与益生元组合,并探究其对肠道屏障的影响。首先,根据碳水化合物生化鉴定试剂条的发酵结果确定5种乳酸菌[植物乳杆菌177(LP)、唾液乳杆菌KLW001(LSa)和罗伊氏乳杆菌(LRe)、... 为开发改善动物肠道健康的绿色添加剂产品,本研究旨在筛选乳酸菌与益生元组合,并探究其对肠道屏障的影响。首先,根据碳水化合物生化鉴定试剂条的发酵结果确定5种乳酸菌[植物乳杆菌177(LP)、唾液乳杆菌KLW001(LSa)和罗伊氏乳杆菌(LRe)、类干酪乳杆菌(LPa)和鼠李糖乳杆菌(LRh)]对应的候选益生元;其次,根据5种乳酸菌和候选益生元[山梨醇(So)、甘露醇(Ma)、鼠李糖(Rh)、低聚木糖(Xyo)、海藻糖(Tr)、棉子糖(Ra)和普鲁兰多糖(Pu)]的短链脂肪酸(SCFA)发酵能力选择合生元组合,将筛选得到的3种合生元组合(LP+Pu、LSa+Pu、LRe+Ra)通过脂多糖(LPS)构建的“肠漏”细胞模型,以测定单层细胞渗透率、跨上皮细胞电阻(TEER)值的变化、肠道紧密连接蛋白[跨膜蛋白-1(Claudin-1)、闭合蛋白(Occludin)和闭锁小带蛋白-1(ZO-1)]的表达,验证合生元对肠道屏障的作用效果。结果表明:LP+Pu组合能发酵产生更多的SCFA,特别是能增加丁酸含量;“肠漏”细胞模型结果表明,LP+Pu组合上调了Claudin-1和ZO-1的mRNA相对表达量,维持了细胞上皮完整性。综上所述,LP+Pu组合可以作为增加SCFA产量、增加肠道紧密连接蛋白表达的合生元,为今后治疗及预防畜禽肠道屏障相关疾病提供新思路。 展开更多
关键词 乳酸菌 合生元 短链脂肪酸 肠道屏障 ipec-j2细胞系
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虾青素缓解玉米赤霉烯酮诱导的IPEC-J2细胞损伤效果研究 被引量：1
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作者 刘钦宇 佘福泽 +2 位作者 顾依萍 杨年溥 秦顺义 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第3期39-44,共6页
本试验旨在探究虾青素对玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEN)诱导的猪小肠上皮细胞IPEC-J2损伤的缓解作用。试验分组为:C组(普通培养基)、Z组(25μg/mL ZEN)、ZA1组(25μg/mL ZEN+5μmol/L虾青素)、ZA2组(25μg/mL ZEN+10μmol/L虾青素)和ZA... 本试验旨在探究虾青素对玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEN)诱导的猪小肠上皮细胞IPEC-J2损伤的缓解作用。试验分组为:C组(普通培养基)、Z组(25μg/mL ZEN)、ZA1组(25μg/mL ZEN+5μmol/L虾青素)、ZA2组(25μg/mL ZEN+10μmol/L虾青素)和ZA3组(25μg/mL ZEN+20μmol/L虾青素);测定细胞活力,细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性,白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平,抗氧化指标水平以及内质网应激相关基因mRNA表达水平。结果显示:细胞活力,超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化能力(T-AOC)水平、IL-4水平、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-XL(Bcl-XL)基因mRNA表达水平,Z组显著低于C组(P<0.01),ZA1组、ZA2组和ZA3组显著高于Z组(P<0.01或P<0.05);细胞LDH活性、丙二醛(MDA)水平、IL-1水平、IL-6水平、TNF-α水平以及激活转录因子6(ATF6)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、Bcl-2关联X蛋白(BAX)基因mRNA表达水平和BAX/Bcl-2比值,Z组显著高于C组(P<0.01),ZA1组、ZA2组和ZA3组显著低于Z组(P<0.01或P<0.05)。综上,虾青素能够缓解ZEN诱导的IPEC-J2细胞活力、LDH活性、细胞因子水平、抗氧化功能和内质网应激相关基因mRNA表达水平的改变,具有潜在的应用前景。 展开更多
关键词 虾青素 ZEN ipec-j2细胞 乳酸脱氢酶活性 细胞因子 抗氧化功能 内质网应激
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HO-1对IPEC-J2细胞氧化损伤的缓解作用
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作者 吴魏 杨涵琳 +6 位作者 刘一 张赛宇 何俊辉 杨彦宾 郭爽 王月影 李和平 《动物医学进展》 北大核心 2024年第7期64-70,共7页
旨在研究HO-1对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化损伤的缓解作用。利用不同浓度H_(2)O_(2)(100、200、300、400、500、600、1000μmol/L)分别处理IPEC-J2细胞6、12、24 h,利用CCK-8法检测细胞活力,确定H_(2)O_(2)处理细胞的浓度。将IPEC-J2... 旨在研究HO-1对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化损伤的缓解作用。利用不同浓度H_(2)O_(2)(100、200、300、400、500、600、1000μmol/L)分别处理IPEC-J2细胞6、12、24 h,利用CCK-8法检测细胞活力,确定H_(2)O_(2)处理细胞的浓度。将IPEC-J2细胞分为对照组(CT)、H_(2)O_(2)组、HO-1+H_(2)O_(2)组,每组3个重复。RT-qPCR检测IPEC-J2细胞中IL-1α、IL-6、IL-8、Keap1、Nrf2 mRNA的相对表达丰度;ELISA检测IPEC-J2细胞中丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)活性;化学荧光法检测细胞中活性氧(ROS)水平。结果显示,随着H_(2)O_(2)浓度的增加,IPEC-J2细胞活力降低,400μmol/L H_(2)O_(2)处理12 h,600μmol/L H_(2)O_(2)处理6 h或24 h,IPEC-J2细胞活力均降至50%以下。根据细胞活力下降50%的原则,后续选用400μmol/L H_(2)O_(2)处理IPEC-J2细胞12 h。与CT组相比,H_(2)O_(2)组IPEC-J2细胞中的IL-1α(P<0.05)、IL-6(P<0.01)和IL-8(P<0.01)mRNA相对表达丰度增加,细胞中ROS荧光强度增强(P<0.01)和MDA含量(P<0.001)升高。与H_(2)O_(2)组相比,HO-1+H_(2)O_(2)组IPEC-J2细胞中IL-6(P<0.05)、IL-1α(P<0.01)和IL-8(P<0.05)mRNA相对表达丰度降低,细胞中ROS荧光强度减弱(P<0.05)和MDA含量显著下降(P<0.01)。Keap1/Nrf2信号结果显示,H_(2)O_(2)上调Keap1 mRNA表达(P<0.01),下调Nrf2 mRNA表达(P<0.01),降低CAT活性(P<0.01);HO-1与H_(2)O_(2)共处理,IPEC-J2细胞中Keap1 mRNA表达下调(P<0.01),Nrf2 mRNA表达上调(P<0.01),CAT活性升高(P<0.01)。提示400μmol/L H_(2)O_(2)能诱导IPEC-J2细胞发生氧化损伤,HO-1能在一定程度上缓解H_(2)O_(2)诱导IPEC-J2细胞的氧化损伤,HO-1能激活H_(2)O_(2)抑制的Keap1/Nrf2信号,促进抗氧化酶CAT的产生,发挥抑炎、抗氧化作用。 展开更多
关键词 血红素加氧酶1 过氧化氢 猪小肠上皮细胞 氧化损伤
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虾青素对脂多糖通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路诱导的IPEC-J2细胞炎症的影响 被引量：11
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作者 朱凌羽 张子琪 +3 位作者 兰海楠 吴旻 刘惠麟 郑鑫 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期53-58,共6页
【目的】研究虾青素(AST)对脂多糖(LPS)通过TLR4/My D88/NF-κB信号通路诱导的IPEC-J2细胞炎症的影响。【方法】采用MTT法确定虾青素和LPS对IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞的最佳处理浓度和处理时间,在处理后采用实时荧光定量PCR检测IPEC... 【目的】研究虾青素(AST)对脂多糖(LPS)通过TLR4/My D88/NF-κB信号通路诱导的IPEC-J2细胞炎症的影响。【方法】采用MTT法确定虾青素和LPS对IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞的最佳处理浓度和处理时间,在处理后采用实时荧光定量PCR检测IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞炎症因子NF-κB、TNF-α、IL-6和IL^(-1)β的m RNA相对表达量,采用ELISA检测上述炎症因子的分泌量。【结果】当处理3 h,虾青素浓度达到150μmol·L^(-1)时,IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞活力达到峰值;当处理6 h,LPS质量浓度达到100 ng·m L^(-1)时,IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞活力达到峰值。与对照组相比,LPS组IPEC-J2细胞NF-κB、TNF-α、IL-6、IL^(-1)β的m RNA相对表达量和分泌量显著升高(P<0.05);与LPS组相比,AST+LPS组NF-κB、TNF-α、IL-6、IL^(-1)β在IPEC-J2细胞中的m RNA相对表达量和分泌量显著降低(P<0.05),而在转染IPEC-J2细胞中的炎症因子m RNA相对表达量和分泌量均无显著变化(P>0.05)。【结论】虾青素可以抑制细胞炎症反应,且对细胞的保护作用与TLR4/My D88/NF-κB信号通路相关。 展开更多
关键词 虾青素 脂多糖 ipec-j2细胞 转染ipec-j2细胞 TLR4/MyD88/NF-κB信号通路 炎症因子
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乳酸锌对猪空肠上皮细胞IPEC-J2增殖及相关调控基因mRNA表达的影响 被引量：10
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作者 韩国全 余冰 +6 位作者 陈代文 相振田 亓宏伟 陈洪 毛倩 毛湘冰 黄志清 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期740-747,共8页
旨在探讨乳酸锌对猪空肠上皮细胞增殖及相关调控基因ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1和ZIP4mRNA表达的影响。用乳酸锌的锌浓度分别为50、100、150、200mg.L-1的培养基培养IPEC-J2细胞,采用比色法测定分析细胞增殖变化;用实时荧光定量RT-PCR方... 旨在探讨乳酸锌对猪空肠上皮细胞增殖及相关调控基因ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1和ZIP4mRNA表达的影响。用乳酸锌的锌浓度分别为50、100、150、200mg.L-1的培养基培养IPEC-J2细胞,采用比色法测定分析细胞增殖变化;用实时荧光定量RT-PCR方法检测ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1及ZIP4mRNA表达,以TBPmRNA的表达水平作为内参对照。在细胞培养前36h,乳酸锌对IPEC-J2细胞基本没有影响,随锌浓度递增细胞增殖幅度升高;乳酸锌处理IPEC-J2细胞后,ZnT2、DMT1、IREG-1及MT1mRNA表达随锌浓度增高而升高,ZIP4mRNA表达则随锌浓度增高而降低。添加乳酸锌可以促进IPEC-J2细胞增殖,上调ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1mRNA表达,下调ZIP4mRNA表达。 展开更多
关键词 乳酸锌 猪空肠上皮细胞ipec-j2 MRNA表达 相关调控基因
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猴头菇多糖对氧化应激的IPEC-J2细胞抗氧化能力及紧密连接蛋白ZO-1的影响 被引量：6
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作者 陈新瑶 张建龙 +3 位作者 董星 陈景杰 黄一帆 李健 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1769-1776,共8页
旨在探究在H_2O_2诱导的氧化应激损伤状态下,猴头菇多糖(HEPs)对IPEC-J2细胞的保护作用。将IPEC-J2细胞分为5组:空白组、模型组、HEPs低剂量组、HEPs中剂量组、HEPs高剂量组。采用MTT法分别选取试验用的H_2O_2和HEPs的最佳剂量;利用DCFH... 旨在探究在H_2O_2诱导的氧化应激损伤状态下,猴头菇多糖(HEPs)对IPEC-J2细胞的保护作用。将IPEC-J2细胞分为5组:空白组、模型组、HEPs低剂量组、HEPs中剂量组、HEPs高剂量组。采用MTT法分别选取试验用的H_2O_2和HEPs的最佳剂量;利用DCFH-DA染色观察并测定细胞内活性氧簇(ROS)的含量;通过比色法检测培养细胞上清液中丙二醛(MDA)的含量,细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活力以及乳酸脱氢酶(LDH)的释放率;应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测紧密连接蛋白ZO-1基因的转录水平。结果显示,(1)构建IPEC-J2细胞氧化应激模型的H_2O_2浓度为0.4mmol·L-1。(2)H_2O_2能够极显著地增加细胞内的ROS含量,诱导细胞凋亡,同时极显著地降低了SOD和CAT的活力,极显著地升高MDA含量与LDH释放率。但是,与模型组相比,经过HEPs预处理后,细胞内ROS的含量极显著地降低(P<0.01);同时极显著地提高了SOD和CAT的活力(P<0.01),极显著地降低了MDA含量与LDH释放率(P<0.01)。(3)实时荧光定量PCR结果显示,H_2O_2能够极显著地降低ZO-1基因的转录量(P<0.01),与模型组比较,HEPs能够极显著的提高ZO-1基因的转录量(P<0.01);Western blot结果显示ZO-1蛋白的表达量与ZO-1基因类似。可见,猴头菇多糖对H_2O_2诱导氧化损伤状态下的IPEC-J2细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 猴头菇多糖 过氧化氢 ipec-j2细胞 氧化应激 ZO-1
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黄芪多糖对脂多糖诱导肠上皮细胞IPEC-J2氧化应激和炎症反应的缓解作用 被引量：9
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作者 崔海燕 纪龙翔 +1 位作者 朱宇晴 李卫国 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2022年第4期101-106,共6页
为探究黄芪多糖对脂多糖诱导IPEC-J2细胞炎症反应的影响.将IPEC-J2细胞分为对照组、LPS处理组、ASP处理组和ASP+LPS处理组,分别检测各组细胞活力、抗氧化指数、相关炎症因子含量和mRNA表达水平.结果表明当10 mg/L LPS作用细胞12 h后,显... 为探究黄芪多糖对脂多糖诱导IPEC-J2细胞炎症反应的影响.将IPEC-J2细胞分为对照组、LPS处理组、ASP处理组和ASP+LPS处理组,分别检测各组细胞活力、抗氧化指数、相关炎症因子含量和mRNA表达水平.结果表明当10 mg/L LPS作用细胞12 h后,显著降低了细胞活力.当100 mg/L ASP预处理细胞4 h后显著提高了细胞的存活率.与对照组相比,LPS组显著提高了MDA含量并降低了SOD,CAT酶活力,显著上调细胞上清液中IL-6,IL-8和TNF-α的含量以及细胞内三者基因mRNA的表达水平,显著下调了IL-10基因mRNA的表达.而采用ASP预处理4 h后可显著降低细胞内MDA含量及提高SOD和CAT酶活力,且显著下调IL-6,IL-8和TNF-α的含量和细胞内三者基因mRNA的表达及显著上调IL-10基因的表达.试验表明ASP可缓解LPS引起的氧化应激和炎症反应,抑制IL-6,IL-8和TNF-α含量及其基因表达,促进IL-10基因表达,从而发挥抗氧化和抗炎作用. 展开更多
关键词 黄芪多糖 ipec-j2细胞 脂多糖 氧化应激 炎症
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