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IPEC-J2细胞氧化应激模型的建立及抗氧化益生菌的筛选 被引量:1
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作者 张华 王星迪 +3 位作者 丁硕 鹿萱萱 高佳悦 周闯 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2025年第8期125-133,共9页
为了探究抗氧化应激机制并为新型功能性动物饲料提供重要资源,试验通过应用不同浓度(200,400,600,800,1000μmol/L)H_(2)O_(2)处理猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)3 h,另设不加H_(2)O_(2)的空白对照,检测细胞存活率;使用细胞氧化模型确定的... 为了探究抗氧化应激机制并为新型功能性动物饲料提供重要资源,试验通过应用不同浓度(200,400,600,800,1000μmol/L)H_(2)O_(2)处理猪小肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)3 h,另设不加H_(2)O_(2)的空白对照,检测细胞存活率;使用细胞氧化模型确定的H_(2)O_(2)浓度处理IPEC-J2细胞不同时间(1,2,3,4 h)后,观察细胞形态,检测细胞活性氧相对荧光强度、Caspase-3表达和抗氧化酶活性,建立IPEC-J2细胞氧化应激模型。在此基础上,以缓解氧化损伤为筛选指标,检测益生菌的抗氧化特性,从新疆克州传统发酵乳制品分离出的8株益生菌中筛选出抗氧化益生菌。结果表明:400μmol/L H_(2)O_(2)处理IPEC-J23 h,细胞存活率为45.9389%,表明细胞已受到一定程度的损伤,同时又保留了一定的细胞活力。因此,选择400μmol/L H_(2)O_(2)建立IPEC-J2细胞氧化应激模型。与空白对照相比,400μmol/L H_(2)O_(2)处理IPEC-J2细胞3 h,活性氧相对荧光强度极显著升高(P<0.01);过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);细胞中Caspase-3蛋白穿梭入核现象明显并诱导细胞凋亡。在4株益生菌的预处理下,氧化损伤细胞的存活率和抗氧化酶活性均有所回升,其中加纳醋杆菌JK-23效果最好。说明IPEC-J2细胞氧化应激模型建立的最佳条件为400μmol/L H_(2)O_(2)处理3 h,并筛选出4株具有缓解细胞氧化应激作用的益生菌。 展开更多
关键词 H_(2)O_(2) ipec-j2细胞 氧化应激 益生菌 抗氧化
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山豆根多糖对IPEC-J2细胞氧化损伤的保护作用 被引量:1
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作者 许双 杨琨兆 +8 位作者 郭鑫 陈怡沁 严思茵 何政科 苏利娟 马琪 董世起 曹立亭 杜红旭 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第2期330-340,共11页
旨在探究山豆根多糖(Sophora subprostrate polysaccharide, SSP)对叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide, TBHP)诱导的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化损伤的保护作用及可能机制。通过MTT法确定TBHP的最佳造模剂量和SSP的安全浓度范... 旨在探究山豆根多糖(Sophora subprostrate polysaccharide, SSP)对叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide, TBHP)诱导的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化损伤的保护作用及可能机制。通过MTT法确定TBHP的最佳造模剂量和SSP的安全浓度范围。试验分为5组:空白组(CC组)、模型组(TBHP组)、SSPL组、SSPM组和SSPH组,观察细胞形态并测定细胞存活率和LDH释放量,利用DCFH-DA染色检测细胞内ROS的含量,通过生化检测试剂盒检测细胞中的MDA的含量以及抗氧化指标的变化,利用转录组技术分析SSP缓解IPEC-J2细胞氧化损伤的可能机制。结果显示,625μmol/L TBHP作用2 h,可以显著降低IPEC-J2细胞活性,显著提高LDH的释放量(P<0.05),显著抑制CAT、SOD和GPX活性(P<0.05),明显提高MDA和ROS的含量(P<0.05)。与模型组相比,SSP处理后,细胞内ROS的含量显著降低(P<0.05),同时CAT、SOD和GPX活力显著地提高(P<0.05),MDA含量和LDH释放量显著降低(P<0.05),且呈剂量依赖性。转录组分析发现,TBHP处理明显改变了IPEC-J2细胞的转录谱,而SSP处理则可以一定程度恢复受损细胞的转录谱变化,同时GO与KEGG富集分析表明,CC与TBHP组之间差异表达基因主要显著富集在氧化磷酸化、核糖体等通路上。而SSP与TBHP组之间的差异表达基因主要富集在氧化磷酸化、凋亡与乙醛酸和二羧酸酯代谢等通路。结果表明,TBHP可能是通过氧化磷酸化和影响甘氨酸,丝氨酸和苏氨酸代谢等代谢通路,干扰IPEC-J2细胞正常氧化呼吸链从而引起肠上皮细胞氧化受损。而SSP处理可能通过作用于氧化磷酸化、凋亡和溶酶体等信号通路,恢复肠上皮细胞氧化磷酸化过程,缓解溶酶体损伤,减少细胞的凋亡来减轻肠上皮细胞氧化损伤。这一发现为SSP在缓解猪肠道氧化损伤的临床应用中提供了理论依据。 展开更多
关键词 山豆根多糖 叔丁基过氧化氢 ipec-j2细胞 氧化应激
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氯甲基蛋氨酸缓解脂多糖诱导的IPEC-J2细胞凋亡及其机制
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作者 姜东凤 乔英英 +5 位作者 杨建平 聂芙蓉 李蕊 王可 雷蕾 张卫宪 《华北农学报》 北大核心 2025年第4期232-238,共7页
旨在探讨氯甲基蛋氨酸(MMC)对脂多糖(LPS)诱导的仔猪空肠上皮细胞IPEC-J2凋亡及相关蛋白表达的影响,并解析其潜在的作用机制。通过设立空白组、模型组(LPS处理)和试验组(MMC+LPS处理),分析MMC对LPS诱导的IPEC-J2细胞的活力、凋亡率、迁... 旨在探讨氯甲基蛋氨酸(MMC)对脂多糖(LPS)诱导的仔猪空肠上皮细胞IPEC-J2凋亡及相关蛋白表达的影响,并解析其潜在的作用机制。通过设立空白组、模型组(LPS处理)和试验组(MMC+LPS处理),分析MMC对LPS诱导的IPEC-J2细胞的活力、凋亡率、迁移数及凋亡相关蛋白的影响。结果显示,试验组相较于模型组,细胞活力显著提升了18%,迁移数极显著提升了约2倍,凋亡率极显著降低了40%。MMC抑制了LPS诱导的JNK通路激活,表现为p-JNK蛋白表达水平极显著下降25.5%。进一步分析表明,MMC显著降低了促凋亡蛋白Cleaved-caspase-3和BAX的表达,分别下降了31.5%,26.3%,同时显著提高了抗凋亡蛋白BCL-2的表达水平。综上,氯甲基蛋氨酸通过调控凋亡相关蛋白表达、抑制JNK通路激活,有效缓解LPS诱导的IPEC-J2细胞凋亡,为氯甲基蛋氨酸在猪肠道健康保护中的应用提供了科学依据。 展开更多
关键词 氯甲基蛋氨酸 脂多糖 ipec-j2细胞 细胞活力 细胞凋亡
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异丹叶大黄素缓解IPEC-J2细胞氧化损伤的效果研究
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作者 朱龙龙 蔡龙 +3 位作者 刘泽青 宋妍辰 吴秋珏 王晶 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第6期2865-2873,共9页
【目的】探究异丹叶大黄素(isorhapontigenin,ISO)对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化损伤的缓解作用,为ISO作为一种抗氧化剂在动物生产中应用提供理论参考。【方法】使用过氧化氢(H_(2)O_(2))处理IPEC-J2细胞构建氧化应激模型,通过细胞存... 【目的】探究异丹叶大黄素(isorhapontigenin,ISO)对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化损伤的缓解作用,为ISO作为一种抗氧化剂在动物生产中应用提供理论参考。【方法】使用过氧化氢(H_(2)O_(2))处理IPEC-J2细胞构建氧化应激模型,通过细胞存活率筛选出ISO缓解IPEC-J2细胞氧化损伤的最佳浓度;采用相应试剂盒测定细胞中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHDG)含量及过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC);通过实时荧光定量PCR检测IPEC-J2细胞中抗氧化酶基因(SOD-1、CAT、GSH-Px、HO-1和NQO-1)、炎症相关基因(IL-1β、IL-12和TNF-α)及宿主防御肽基因(pBD1、pBD2和pBD3)的相对表达量。【结果】与H_(2)O_(2)组相比,用5、20、40μmol/L ISO预处理细胞24 h后细胞存活率显著或极显著提高(P<0.05;P<0.01),其中20μmol/L ISO缓解效果最好。与H_(2)O_(2)组相比,ISO预处理可显著或极显著降低IPEC-J2细胞MDA、ROS和8-OHDG水平(P<0.05;P<0.01);极显著提高GSH-Px、SOD1、CAT和NQO-1基因相对表达量及CAT活性(P<0.01)。与H_(2)O_(2)组相比,ISO预处理可降低IL-1β和IL-12基因相对表达量(P<0.05;P<0.01),提高pBD1、pBD2和pBD3基因相对表达量(P<0.05;P<0.01)。【结论】ISO可减少细胞中应激产物的生成,提高抗氧化酶基因的表达和抗氧化酶活性,并调节炎症相关基因的表达,从而缓解H_(2)O_(2)引起的IPEC-J2细胞氧化损伤。本试验条件下,推荐ISO浓度为20μmol/L。 展开更多
关键词 异丹叶大黄素 氧化损伤 抗氧化 ipec-j2细胞
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ShRNA干扰核转录因子E2相关因子2基因表达对玉米赤霉烯酮诱导的IPEC-J2细胞凋亡和氧化应激的影响
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作者 程群 桑艺豪 +3 位作者 姜淑贞 侯绍金 牛现琇 杨维仁 《动物营养学报》 北大核心 2025年第4期2661-2673,共13页
本试验旨在通过ShRNA干扰核转录因子E2相关因子2(Nrf2)基因表达探索玉米赤霉烯酮(ZEA)诱导IPEC-J2细胞凋亡和氧化应激中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)-Nrf2信号通路的作用。试验构建干扰Nrf2表达IPEC-J2细胞模型,分别设置空白对照... 本试验旨在通过ShRNA干扰核转录因子E2相关因子2(Nrf2)基因表达探索玉米赤霉烯酮(ZEA)诱导IPEC-J2细胞凋亡和氧化应激中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)-Nrf2信号通路的作用。试验构建干扰Nrf2表达IPEC-J2细胞模型,分别设置空白对照组(Control组)、阴性对照组(Sh-control组)、干扰Nrf2表达转染组(Nrf2-ShRNA组),以确定Nrf2介导的信号通路对ZEA诱导的IPEC-J2细胞氧化应激的作用。当成功转染Nrf2-ShRNA的IPEC-J2细胞处于对数生长期时,分别添加10、20和40μmol/L的ZEA(Nrf2-ShRNA+ZEA10组、Nrf2-ShRNA+ZEA20组和Nrf2-ShRNA+ZEA40组)处理36 h后收集细胞,进行相关指标测定。结果显示:1)Nrf2-ShRNA组IPEC-J2细胞的凋亡率显著高于Control组和Sh-control组(P<0.05)。与Nrf2-ShRNA组相比较,ZEA以一定的剂量依赖性显著增加了干扰Nrf2表达的IPEC-J2细胞的凋亡率(P<0.05),表明干扰细胞Nrf2表达和高浓度ZEA均能诱导细胞凋亡。2)与Control组和Sh-control组相比,Nrf2-ShRNA组IPEC-J2细胞中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性与Keap1、Nrf2、还原型辅酶/醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素加氧酶-1(HO-1)mRNA和蛋白相对表达量均显著降低(P<0.05),丙二醛(MDA)含量和活性氧(ROS)荧光强度显著增加(P<0.05)。3)与Nrf2-ShRNA组相比,Nrf2-ShRNA+ZEA20组和Nrf2-ShRNA+ZEA40组IPEC-J2细胞中T-SOD和GSH-Px活性与Keap 1 mRNA和蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),MDA含量和Nrf2荧光强度以及Nrf2、NQO1和HO-1 mRNA和蛋白相对表达量显著增加(P<0.05)。当ZEA浓度达到40μmol/L,IPEC-J2细胞中Nrf2和ROS的荧光强度最高。由此可见,ZEA能够诱导IPEC-J2细胞的氧化应激,促进细胞凋亡的发生,而干扰IPEC-J2细胞Nrf2的表达能够影响Keap1-Nrf2信号通路的激活,降低细胞抵抗ZEA诱导氧化应激能力,因此Keap1-Nrf2信号通路在ZEA诱导的肠道氧化应激中具有重要的保护作用。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 ipec-j2细胞 Keap1-Nrf2信号通路 Nrf2-ShRNA 氧化应激
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虎杖水提取物对猪流行性腹泻病毒在IPEC-J2细胞中复制的影响
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作者 王煜轩 杨植 +5 位作者 刘昊阳 王兴海 杨富琳 芦烘德 何至远 董虹 《华北农学报》 北大核心 2025年第3期215-224,共10页
为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)在猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中的繁殖适应性,并评估虎杖水提取物对其体外抑制作用,通过细胞毒性试验和Western Blot试验,评估不同胰酶浓度、不同时间对IPEC-J2细胞活性以及PEDV N蛋白在细胞内表达的影响;再... 为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)在猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中的繁殖适应性,并评估虎杖水提取物对其体外抑制作用,通过细胞毒性试验和Western Blot试验,评估不同胰酶浓度、不同时间对IPEC-J2细胞活性以及PEDV N蛋白在细胞内表达的影响;再通过TCID50、实时荧光定量PCR和Western Blot等方法检测病毒滴度、PEDV N基因转录水平及N蛋白的表达量;使用CCK-8法检测虎杖水提取物对IPEC-J2细胞增殖活力的影响;进一步通过实时荧光定量PCR和Western Blot试验,检测虎杖水提取物对PEDV N基因和N蛋白表达的抑制作用,以及探究虎杖水提取物对PEDV生命周期各个阶段的影响。结果表明,当胰酶浓度为2μg/mL时,胰酶对细胞无影响,此时PEDV展示出最佳的繁殖适应性,且36 h后达到最高毒力值;虎杖水提取物浓度低于100μg/mL时在12 h,24 h无细胞毒性。虎杖水提取物在All-treatment Co-treatment、Post-treatment 3种加药方式下显著抑制N基因表达,并呈剂量依赖显著抑制PEDV N基因mRNA和N蛋白的表达;虎杖水提取物主要在病毒生命周期中复制增殖阶段对PEDV N基因有显著抑制效果,在其他阶段无明显抑制作用。综上,2μg/mL胰酶浓度对PEDV繁殖适应性最佳,并且虎杖水提取物在体外有显著的抑制PEDV效果,主要作用于PEDV生命周期的复制增殖阶段。 展开更多
关键词 虎杖水提取物 PEDV ipec-j2 细胞适应性 体外抑制
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稳定表达人IFITM3的猪IPEC-J2细胞系的构建及其对PEDV增殖的影响
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作者 唐金梦 余澍楠 +4 位作者 袁一心 马雨辰 杜文娟 于林洋 李永涛 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第10期5180-5189,共10页
前期研究通过全基因组CRISPR文库筛选人肝癌细胞中调控猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的宿主因子,鉴定出人干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)参与PEDV感染进程,但其在猪源细胞中的功能尚未明确。本研究旨在构建稳定表达人IFITM3(hIFITM3)的猪肠... 前期研究通过全基因组CRISPR文库筛选人肝癌细胞中调控猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的宿主因子,鉴定出人干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)参与PEDV感染进程,但其在猪源细胞中的功能尚未明确。本研究旨在构建稳定表达人IFITM3(hIFITM3)的猪肠上皮IPEC-J2细胞系,并系统评估其对PEDV复制的影响。首先,构建携带hIFITM3基因的重组慢病毒载体,与包装质粒pMD2.G/psPAX2共转染HEK293T细胞制备病毒颗粒。随后,通过慢病毒感染IPEC-J2细胞,经嘌呤霉素筛选和有限稀释法获得单克隆稳转细胞株(IPEC-J2^(hIFITM3))。Western blot、间接免疫荧光法(IFA)及RT-qPCR验证显示hIFITM3在靶细胞中高效表达。CCK-8试验证实hIFITM3过表达未显著影响细胞活力。功能验证表明,IPEC-J2^(hIFITM3)细胞可有效抑制水泡性口炎病毒(VSV-GFP)的早期复制,与其已知抗病毒特性一致。然而,感染PEDV DR13-GFP毒株后,IPEC-J2^(hIFITM3)细胞表现出显著的促病毒增殖效应:24 h时病毒滴度(TCID50·mL^(-1))较野生型细胞提高约1000倍。本研究成功建立hIFITM3稳转猪肠上皮细胞模型,其反常促进PEDV复制的特性为解析病毒种属特异性感染机制、开发抗病毒策略及优化病毒分离培养体系提供了重要工具。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 ipec-j2细胞 干扰素诱导跨膜蛋白3 细胞系
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基于转录组学测序研究白屈菜碱缓解H_(2)O_(2)诱导IPEC-J2细胞炎症损伤的作用机制
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作者 莫佳荣 陆伟峰 +4 位作者 张偌益 林惠莹 曾春丽 林福 李健 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第1期74-83,106,共11页
将处于对数生长期的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)分为空白组(K组)、H_(2)O_(2)组(S组)和白屈菜碱(chelidonine)组(L组),每组设3个重复样本。L组给予含2.5 mg/L白屈菜碱进行预处理,24 h后,S组和L组给予含1 mg/L的完全培养基,培养12 h后,提取... 将处于对数生长期的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)分为空白组(K组)、H_(2)O_(2)组(S组)和白屈菜碱(chelidonine)组(L组),每组设3个重复样本。L组给予含2.5 mg/L白屈菜碱进行预处理,24 h后,S组和L组给予含1 mg/L的完全培养基,培养12 h后,提取各组细胞的总RNA,构建测序文库,并对组装数据进行功能注释、差异基因分析以及GO和KEGG富集分析。采用qPCR法验证关键差异基因的表达情况,ELISA法检测白屈菜碱对IPEC-J2细胞通透性的影响。结果显示,测序数据的质控合格,样本间相关性良好。GO功能注释结果表明,白屈菜碱的干预作用主要涉及细胞氧化应激反应、有丝分裂周期G2/M转变调控等生物学过程,与跨膜转运活性等分子功能密切相关。KEGG富集分析结果显示,IPEC-J2细胞经H_(2)O_(2)处理后,差异表达基因(DEGs)主要富集于p53信号通路、补血和凝血级联反应、FoxO信号通路等多种信号通路,而白屈菜碱预处理后,DEGs主要富集在TNF信号通路、突触囊泡循环、IL-17信号通路等炎症相关信号通路。qPCR验证结果与测序结果一致。白屈菜碱还能显著抑制LDH释放、升高GLN含量、降低DOA含量。结果表明,白屈菜碱可以通过调控TNF信号通路等炎症相关通路,降低细胞通透性,缓解H_(2)O_(2)诱导的IPEC-J2细胞炎症损伤。 展开更多
关键词 ipec-j2细胞 白屈菜碱 H_(2)O_(2) 炎症 转录组测序
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柑橘果胶多糖对脂多糖诱导的IPEC-J2细胞炎性损伤的缓解作用
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作者 方巧玉 吴娴 +6 位作者 王轲信 李昂扬 宋丹 王攀林 武永淑 李向臣 张亚南 《中国畜牧杂志》 北大核心 2025年第10期393-400,共8页
本文旨在探究柑橘果胶多糖(Citrus Pectin Polysaccharide,CPP)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的IPEC-J2细胞炎症损伤的缓解作用。首先,利用LPS诱导建立IPEC-J2细胞炎症损伤模型;随后,分别使用不同浓度CPP处理IPEC-J2细胞炎症损... 本文旨在探究柑橘果胶多糖(Citrus Pectin Polysaccharide,CPP)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的IPEC-J2细胞炎症损伤的缓解作用。首先,利用LPS诱导建立IPEC-J2细胞炎症损伤模型;随后,分别使用不同浓度CPP处理IPEC-J2细胞炎症损伤模型,试验分为对照组、LPS组、LPS+0.5 mg/mL CPP组、LPS+1.0 mg/mL CPP组、LPS+2.0 mg/mL CPP组,处理24 h后,检测细胞活力,测定细胞跨膜电阻值(Trans-Epithelial Electrical Resistance,TEER)、细胞炎症因子的mRNA表达水平和分泌量;检测紧密连接蛋白和NF-κB/MAPK信号通路相关基因mRNA表达水平。结果显示:不同浓度CPP提高了受损细胞的活力及其TEER值(P<0.05)。在细胞炎症因子表达方面,相较于LPS组,高浓度CPP(2 mg/mL)下调了细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8的mRNA表达水平(P<0.05);ELISA结果表明,与LPS组相比,LPS+CPP共处理的3组TNF-α、IL-6、IL-8分泌水平均降低(P<0.05)。在紧密连接蛋白表达方面,qPCR结果显示,相比于LPS组,高浓度CPP(2.0 mg/mL)上调了LPS诱导细胞中Claudin-1和ZO-1的mRNA表达水平(P<0.05)。对于NF-κB/MAPK信号通路,与LPS组相比,LPS+1.0 mg/mL CP组和LPS+2.0 mg/mL CPP组均下调了TLR4、MyD88、NF-κB、JNK、p38、ERK的mRNA表达水平(P<0.05)。由以上可知,CPP可显著缓解LPS诱导的IPEC-J2细胞炎症反应以及屏障损伤,其机制可能与CPP抑制NF-κB/MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 柑橘果胶多糖 炎症 紧密连接 NF-κB/MAPK信号通路 ipec-j2细胞
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吲哚-3-甲醇激活芳香烃受体缓解脂多糖诱导的IPEC-J2细胞损伤及铁死亡研究
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作者 张亚磊 胡曦文 +2 位作者 方懿 姜浩然 荀文娟 《中国畜牧杂志》 北大核心 2025年第4期270-276,共7页
本实验旨在研究吲哚-3-甲醇(I3C)在猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)上激活芳香烃受体(AhR)通过相关信号通路来保护仔猪肠道以及缓解肠上皮细胞铁死亡,明确其对肠道损伤修复的作用,并探讨其对铁死亡的影响。分别使用0、5、10、25、100、250、500... 本实验旨在研究吲哚-3-甲醇(I3C)在猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)上激活芳香烃受体(AhR)通过相关信号通路来保护仔猪肠道以及缓解肠上皮细胞铁死亡,明确其对肠道损伤修复的作用,并探讨其对铁死亡的影响。分别使用0、5、10、25、100、250、500、1000μmol/L的I3C预处理IPEC-J2细胞后,基于前期研究,向细胞培养体系中添加1μg/mL的LPS进行处理,评估细胞活力,依据检测结果,确定了在该条件下对细胞活力产生显著影响的I3C最佳浓度,即100μmol/L。将IPEC-J2细胞分为4组:对照组(CON组)、脂多糖组(LPS组)、LPS+I3C组(L+I组)和I3C组,CON组细胞不做处理,LPS组添加1μg/mL LPS,L+I组添加1μg/mL LPS和100μmol/L I3C,I3C组添加100μmol/L I3C,收集细胞和上清用于检测抗氧化能力和亚铁离子含量,采用实时荧光定量PCR检测相关基因mRNA相对表达量。结果表明:(1)添加100μmol/LI3C能够逆转LPS的损伤效果(P<0.05);(2)I3C预处理后可缓解LPS导致的乳酸脱氢酶(LDH)以及丙二醛(MDA)含量的升高(P<0.05),并使谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)升高(P<0.05),缓解了细胞的氧化应激损伤;(3)I3C预处理细胞后,可缓解LPS导致的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β(IL-1β)以及IL-6的mRNA表达量升高(P<0.05),并使IL-10的mRNA表达量升高(P<0.05),减弱了LPS所诱导的细胞炎症反应;(4)与LPS组相比,I3C处理后,可使LPS引起的细胞中AhR、CYP1A1、Nrf2、NQO1、HO-1、GPX4、SLC7A11mRNA相对表达量降低趋势发生改变(P<0.05),并促进铁蛋白重链1(FerritinHeavy Chain 1,FTH1)及铁蛋白轻链(Ferritin Light Chain,FTL)mRNA相对表达量降低到正常范围(P<0.05),同时使细胞中的亚铁离子含量降低(P<0.05),这表明通过激活AhR可通过上调Nrf2/SLC7A11/GPX4通路降低细胞铁死亡的产生。综合以上所述,I3C可能通过激活IPEC-J2细胞中AhR,调控Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路,提高抗氧化酶活性、抑制铁死亡,缓解LPS诱导的猪小肠上皮细胞损伤。 展开更多
关键词 吲哚-3-甲醇 脂多糖 ipec-j2 铁死亡
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26种中药抗PEDV感染IPEC-J2细胞的筛选效果分析
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作者 任涛 李俊贤 +3 位作者 郭杨 文安林 张依裕 欧德渊 《动物医学进展》 北大核心 2025年第6期47-56,共10页
由于猪流行性腹泻病毒(PEDV)具有较高的变异性并引起仔猪的高死亡率,且疫苗免疫对变异毒株的保护率低,西药的治疗成本高,因此,目前寻找抗PEDV中药已成为当今研究关键。通过TCID 50法检测病毒滴度,结果显示PEDV感染猪肠上皮细胞(IPEC-J2... 由于猪流行性腹泻病毒(PEDV)具有较高的变异性并引起仔猪的高死亡率,且疫苗免疫对变异毒株的保护率低,西药的治疗成本高,因此,目前寻找抗PEDV中药已成为当今研究关键。通过TCID 50法检测病毒滴度,结果显示PEDV感染猪肠上皮细胞(IPEC-J2)随时间的增加病毒滴度逐渐升高;HE观察发现PEDV感染IPEC-J2细胞后发生皱缩,细胞间隙变大,拉丝及变圆的现象;CCK8法检测中药液在IPEC-J2细胞的最大安全浓度,以及通过计算病毒抑制率得出,在阻断PEDV作用上穿心莲水煎液(CXL)最佳,病毒抑制率高达57.8%;炒白术水煎液(CBZ)对病毒直接灭活效果最佳,病毒抑制率高达51.9%;党参水煎液(DS)的抑制效果最佳,病毒抑制率高达60.7%;设计不同剂量DS组(DS 1.25、2.5、5 mg/mL),进行RT-PCR检测DS对PEDV感染IPEC-J2细胞中PEDV N、IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-αmRNA表达水平,发现DS对PEDV N基因呈浓度依赖性抑制,DS能极显著降低PEDV感染IPEC-J2细胞中PEDV N mRNA表达水平(P<0.01);与低、中剂量DS(DS 1.25、2.5 mg/mL)比,高剂量DS更能降低PEDV感染IPEC-J2细胞中的IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-αmRNA表达水平;ELISA检测IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α蛋白含量,与低、中剂量DS比,高剂量DS更能降低PEDV感染IPEC-J2细胞后IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α蛋白含量。结果表明,DS对病毒抑制作用最佳,其中高剂量DS对PEDV复制有着显著的抑制作用,能缓解PEDV对IPEC-J2细胞的炎症反应。 展开更多
关键词 中药 猪流行性腹泻病毒 猪肠上皮细胞 病毒抑制率 抗病毒作用 炎症
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虾青素对脂多糖通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路诱导的IPEC-J2细胞炎症的影响 被引量:11
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作者 朱凌羽 张子琪 +3 位作者 兰海楠 吴旻 刘惠麟 郑鑫 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期53-58,共6页
【目的】研究虾青素(AST)对脂多糖(LPS)通过TLR4/My D88/NF-κB信号通路诱导的IPEC-J2细胞炎症的影响。【方法】采用MTT法确定虾青素和LPS对IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞的最佳处理浓度和处理时间,在处理后采用实时荧光定量PCR检测IPEC... 【目的】研究虾青素(AST)对脂多糖(LPS)通过TLR4/My D88/NF-κB信号通路诱导的IPEC-J2细胞炎症的影响。【方法】采用MTT法确定虾青素和LPS对IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞的最佳处理浓度和处理时间,在处理后采用实时荧光定量PCR检测IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞炎症因子NF-κB、TNF-α、IL-6和IL^(-1)β的m RNA相对表达量,采用ELISA检测上述炎症因子的分泌量。【结果】当处理3 h,虾青素浓度达到150μmol·L^(-1)时,IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞活力达到峰值;当处理6 h,LPS质量浓度达到100 ng·m L^(-1)时,IPEC-J2细胞和转染IPEC-J2细胞活力达到峰值。与对照组相比,LPS组IPEC-J2细胞NF-κB、TNF-α、IL-6、IL^(-1)β的m RNA相对表达量和分泌量显著升高(P<0.05);与LPS组相比,AST+LPS组NF-κB、TNF-α、IL-6、IL^(-1)β在IPEC-J2细胞中的m RNA相对表达量和分泌量显著降低(P<0.05),而在转染IPEC-J2细胞中的炎症因子m RNA相对表达量和分泌量均无显著变化(P>0.05)。【结论】虾青素可以抑制细胞炎症反应,且对细胞的保护作用与TLR4/My D88/NF-κB信号通路相关。 展开更多
关键词 虾青素 脂多糖 ipec-j2细胞 转染ipec-j2细胞 TLR4/MyD88/NF-κB信号通路 炎症因子
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乳酸锌对猪空肠上皮细胞IPEC-J2增殖及相关调控基因mRNA表达的影响 被引量:10
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作者 韩国全 余冰 +6 位作者 陈代文 相振田 亓宏伟 陈洪 毛倩 毛湘冰 黄志清 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期740-747,共8页
旨在探讨乳酸锌对猪空肠上皮细胞增殖及相关调控基因ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1和ZIP4mRNA表达的影响。用乳酸锌的锌浓度分别为50、100、150、200mg.L-1的培养基培养IPEC-J2细胞,采用比色法测定分析细胞增殖变化;用实时荧光定量RT-PCR方... 旨在探讨乳酸锌对猪空肠上皮细胞增殖及相关调控基因ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1和ZIP4mRNA表达的影响。用乳酸锌的锌浓度分别为50、100、150、200mg.L-1的培养基培养IPEC-J2细胞,采用比色法测定分析细胞增殖变化;用实时荧光定量RT-PCR方法检测ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1及ZIP4mRNA表达,以TBPmRNA的表达水平作为内参对照。在细胞培养前36h,乳酸锌对IPEC-J2细胞基本没有影响,随锌浓度递增细胞增殖幅度升高;乳酸锌处理IPEC-J2细胞后,ZnT2、DMT1、IREG-1及MT1mRNA表达随锌浓度增高而升高,ZIP4mRNA表达则随锌浓度增高而降低。添加乳酸锌可以促进IPEC-J2细胞增殖,上调ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1mRNA表达,下调ZIP4mRNA表达。 展开更多
关键词 乳酸锌 猪空肠上皮细胞ipec-j2 MRNA表达 相关调控基因
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猴头菇多糖对氧化应激的IPEC-J2细胞抗氧化能力及紧密连接蛋白ZO-1的影响 被引量:6
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作者 陈新瑶 张建龙 +3 位作者 董星 陈景杰 黄一帆 李健 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1769-1776,共8页
旨在探究在H_2O_2诱导的氧化应激损伤状态下,猴头菇多糖(HEPs)对IPEC-J2细胞的保护作用。将IPEC-J2细胞分为5组:空白组、模型组、HEPs低剂量组、HEPs中剂量组、HEPs高剂量组。采用MTT法分别选取试验用的H_2O_2和HEPs的最佳剂量;利用DCFH... 旨在探究在H_2O_2诱导的氧化应激损伤状态下,猴头菇多糖(HEPs)对IPEC-J2细胞的保护作用。将IPEC-J2细胞分为5组:空白组、模型组、HEPs低剂量组、HEPs中剂量组、HEPs高剂量组。采用MTT法分别选取试验用的H_2O_2和HEPs的最佳剂量;利用DCFH-DA染色观察并测定细胞内活性氧簇(ROS)的含量;通过比色法检测培养细胞上清液中丙二醛(MDA)的含量,细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活力以及乳酸脱氢酶(LDH)的释放率;应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测紧密连接蛋白ZO-1基因的转录水平。结果显示,(1)构建IPEC-J2细胞氧化应激模型的H_2O_2浓度为0.4mmol·L-1。(2)H_2O_2能够极显著地增加细胞内的ROS含量,诱导细胞凋亡,同时极显著地降低了SOD和CAT的活力,极显著地升高MDA含量与LDH释放率。但是,与模型组相比,经过HEPs预处理后,细胞内ROS的含量极显著地降低(P<0.01);同时极显著地提高了SOD和CAT的活力(P<0.01),极显著地降低了MDA含量与LDH释放率(P<0.01)。(3)实时荧光定量PCR结果显示,H_2O_2能够极显著地降低ZO-1基因的转录量(P<0.01),与模型组比较,HEPs能够极显著的提高ZO-1基因的转录量(P<0.01);Western blot结果显示ZO-1蛋白的表达量与ZO-1基因类似。可见,猴头菇多糖对H_2O_2诱导氧化损伤状态下的IPEC-J2细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 猴头菇多糖 过氧化氢 ipec-j2细胞 氧化应激 ZO-1
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黄芪多糖对脂多糖诱导肠上皮细胞IPEC-J2氧化应激和炎症反应的缓解作用 被引量:10
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作者 崔海燕 纪龙翔 +1 位作者 朱宇晴 李卫国 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第4期101-106,共6页
为探究黄芪多糖对脂多糖诱导IPEC-J2细胞炎症反应的影响.将IPEC-J2细胞分为对照组、LPS处理组、ASP处理组和ASP+LPS处理组,分别检测各组细胞活力、抗氧化指数、相关炎症因子含量和mRNA表达水平.结果表明当10 mg/L LPS作用细胞12 h后,显... 为探究黄芪多糖对脂多糖诱导IPEC-J2细胞炎症反应的影响.将IPEC-J2细胞分为对照组、LPS处理组、ASP处理组和ASP+LPS处理组,分别检测各组细胞活力、抗氧化指数、相关炎症因子含量和mRNA表达水平.结果表明当10 mg/L LPS作用细胞12 h后,显著降低了细胞活力.当100 mg/L ASP预处理细胞4 h后显著提高了细胞的存活率.与对照组相比,LPS组显著提高了MDA含量并降低了SOD,CAT酶活力,显著上调细胞上清液中IL-6,IL-8和TNF-α的含量以及细胞内三者基因mRNA的表达水平,显著下调了IL-10基因mRNA的表达.而采用ASP预处理4 h后可显著降低细胞内MDA含量及提高SOD和CAT酶活力,且显著下调IL-6,IL-8和TNF-α的含量和细胞内三者基因mRNA的表达及显著上调IL-10基因的表达.试验表明ASP可缓解LPS引起的氧化应激和炎症反应,抑制IL-6,IL-8和TNF-α含量及其基因表达,促进IL-10基因表达,从而发挥抗氧化和抗炎作用. 展开更多
关键词 黄芪多糖 ipec-j2细胞 脂多糖 氧化应激 炎症
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胰高血糖素样肽-2对脂多糖应激的IPEC-J2细胞形态和紧密连接相关基因表达的影响 被引量:9
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作者 余长松 贾刚 +4 位作者 邓秋红 陈小玲 赵华 刘光芒 王康宁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期592-599,共8页
本研究旨在考察胰高血糖素样肽-2(Glucagons-like peptide-2,GLP-2)和脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)对仔猪空肠上皮细胞及其紧密连接(Tight Junctions,TJ)相关蛋白基因表达的影响,并探讨GLP-2调控仔猪肠道TJ蛋白基因表达可能的作用机... 本研究旨在考察胰高血糖素样肽-2(Glucagons-like peptide-2,GLP-2)和脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)对仔猪空肠上皮细胞及其紧密连接(Tight Junctions,TJ)相关蛋白基因表达的影响,并探讨GLP-2调控仔猪肠道TJ蛋白基因表达可能的作用机理。试验一设对照、GLP-2、LPS、LPS+GLP-2共4个组,考查各处理对IPEC-J2细胞形态和紧密连接关键蛋白Occludin、Claudin-1和ZO-1基因表达的影响。结果:添加100nmol·L-1 GLP-2能显著改善IPEC-J2细胞形态,显著提高Occludin、Claudin-1和ZO-1mRNA表达(P<0.01);100μg·mL-1 LPS处理能显著破坏细胞形态、降低IPEC-J2细胞紧密连接蛋白mRNA的表达(P<0.01);在添加LPS基础上添加100nmol·L-1 GLP-2能有效维护细胞形态,显著增加IPEC-J2细胞TJ相关蛋白Occludin、Claudin-1和ZO-1mRNA的表达(P<0.01),增加量分别为46.3%、65.1%和30.3%。试验二考察了添加PI3K特异性抑制剂Wortmannin(Wort)和LY294002(LY)阻断PI3K-Akt-mTOR信号转导途径后Occludin、Claudin-1和ZO-1mRNA表达量的变化,试验共设对照、GLP-2、GLP-2+Wort、GLP-2+LY等4个组。结果:添加抑制剂Wort后可显著降低IPEC-J2细胞Akt、mTOR、Occludin、Claudin-1和ZO-1mRNA的表达(P<0.01),降低量分别为46.9%、50.5%,38.1%、49.6%和18.9%;添加LY后上述mRNA的表达量分别显著降低了67.2%、70.8%,49.6%、60.9%和25.8%(P<0.01)。以上结果表明:添加GLP-2能够有效抑制LPS应激对IPEC-J2细胞形态和TJ相关基因表达的损伤,PI3K-Akt-mTOR信号转导途径可能是GLP-2调控肠道紧密连接蛋白基因表达的重要信号通路之一。 展开更多
关键词 胰高血糖素样肽-2 脂多糖 仔猪空肠上细胞ipec-j2 紧密连接 PI3K-Akt-mTOR
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乳酸菌对IPEC-J2细胞黏着斑激酶磷酸化及紧密连接蛋白Occludin表达的影响 被引量:3
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作者 陈德龙 朱宏亮 +4 位作者 许光勇 王明 姜金奇 乔雨 任晓明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期283-288,共6页
本试验旨在探讨嗜酸乳杆菌(LAB1)如何影响黏着斑激酶(FAK)磷酸化及紧密连接蛋白Occludin的表达。用高(1.0×109 CFU·mL-1)、中(1.0×108 CFU·mL-1)、低(1.0×107 CFU·mL-1)3种浓度的致病性大肠杆菌(Escheric... 本试验旨在探讨嗜酸乳杆菌(LAB1)如何影响黏着斑激酶(FAK)磷酸化及紧密连接蛋白Occludin的表达。用高(1.0×109 CFU·mL-1)、中(1.0×108 CFU·mL-1)、低(1.0×107 CFU·mL-1)3种浓度的致病性大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)和霍乱沙门菌(Salmonella choleraesuis,S.cho)对猪空肠上皮细胞系(IPEC-J2)进行感染后,用高、中、低3种浓度的LAB1作用于感染后的IPEC-J2(模拟治疗试验),用Western blotting检测FAK第397位酪氨酸磷酸化水平;用ELISA方法检测Occludin表达水平。结果显示:在LAB1模拟治疗S.cho感染的试验中,FAK磷酸化水平和Occludin的表达量与LAB1浓度呈正浓度效应,而与S.cho浓度呈负浓度效应;3种浓度的LAB1处理中、低浓度S.cho感染时,组间相互比较差异显著(P<0.05)。在LAB1模拟治疗E.coli感染的试验中,FAK磷酸化水平和Occludin表达量与LAB1浓度呈正浓度效应,3种浓度的LAB1处理低浓度E.coli感染时,组间相互比较差异显著(P<0.05)。结论:LAB1激活受E.coli和S.cho抑制的FAK磷酸化,并能上调细胞紧密连接蛋白Occludin的表达。 展开更多
关键词 嗜酸乳杆菌 致病性大肠杆菌 霍乱沙门菌 ipec-j2 FAK OCCLUDIN
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呕吐毒素对IPEC-J2细胞凋亡的影响 被引量:5
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作者 廖美芳 孟英才 +3 位作者 詹济华 印遇龙 廖鹏 李玲 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期1027-1034,共8页
本研究以IPEC-J2细胞为材料,研究不同浓度和时间处理下呕吐毒素(DON)对猪空肠上皮细胞凋亡的影响。通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖毒性,筛选出合适的DON作用时间(6、12、24 h)。通过低浓度(200 ng/mL)和高浓度(2 000 ng/mL)DON分别作用IPE... 本研究以IPEC-J2细胞为材料,研究不同浓度和时间处理下呕吐毒素(DON)对猪空肠上皮细胞凋亡的影响。通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖毒性,筛选出合适的DON作用时间(6、12、24 h)。通过低浓度(200 ng/mL)和高浓度(2 000 ng/mL)DON分别作用IPEC-J2细胞6、12、24 h,检测DON对细胞有丝分裂周期和细胞早期凋亡的影响。结果表明:1)DON对IPEC-J2细胞生长有明显抑制作用,200和2 000 ng/mL DON浓度下,48和72 h的细胞存活率显著低于24 h(P<0.05);2 000 ng/mL DON浓度下,72 h的细胞存活率显著低于48 h(P<0.05)。2)不同DON浓度对细胞周期影响不同,低浓度DON主要作用于细胞有丝分裂S期,干扰DNA的复制;而高浓度DON主要作用于细胞有丝分裂G2/M期,干扰有关酶与纺锤丝蛋白质的合成。3)DON作用6 h,低浓度DON组和高浓度DON组早期凋亡率和总凋亡率显著高于对照组(P<0.05);DON作用12 h,高浓度DON组早期凋亡率和总凋亡率显著高于对照组和低浓度DON组(P<0.05)。由此可见,DON抑制了IPEC-J2细胞增殖,低浓度DON使细胞有丝分裂停留在S期,高浓度DON使细胞有丝分裂停留在G2/M期。DON促使细胞早期凋亡,使总凋亡率上升,且促凋亡作用随DON浓度升高而增强。 展开更多
关键词 呕吐毒素 ipec-j2细胞 周期 凋亡 增殖
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猪源乳酸杆菌对鼠伤寒沙门氏菌DT104在猪肠道上皮细胞IPEC-J2上粘附的影响 被引量:6
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作者 倪学勤 Joshua Gong +3 位作者 曾东 HaiYu Weido Si 周小秋 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1072-1077,共6页
采用猪肠道上皮细胞株IPEC-J2体外培养模型,考察9株猪源乳酸杆菌对IPEC-J2细胞的粘附特性,以及对鼠伤寒沙门氏菌DT104粘附的竞争、排斥、置换和抗侵袭作用。结果显示,9株乳酸杆菌均能粘附IPEC-J2细胞,粘附率在0.1%-10%之间,具有菌株特... 采用猪肠道上皮细胞株IPEC-J2体外培养模型,考察9株猪源乳酸杆菌对IPEC-J2细胞的粘附特性,以及对鼠伤寒沙门氏菌DT104粘附的竞争、排斥、置换和抗侵袭作用。结果显示,9株乳酸杆菌均能粘附IPEC-J2细胞,粘附率在0.1%-10%之间,具有菌株特异性和浓度效应。乳酸杆菌和沙门氏菌同时加入细胞培养,能竞争性抑制沙门氏菌的粘附,并具有浓度效应,高浓度(109CFU/mL)添加K30、K67和K16时,抑制率可达80%以上。乳酸杆菌预处理细胞后再加入沙门氏菌,高浓度乳酸杆菌可降低沙门氏菌粘附率40%-70%,而中浓度(108CFU/mL)乳酸杆菌能抑制23%-33%沙门氏菌对细胞的侵入。但是,只有高浓度添加乳酸杆菌能置换已经粘附的沙门氏菌,置换率在12%-84%之间。该结果为临床上筛选乳酸杆菌,有效防治猪沙门氏菌病提供了一条新的途径。 展开更多
关键词 粘附 乳酸杆菌 鼠伤寒沙门氏菌 ipec-j2细胞
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丙酸钠对IPEC-J2细胞紧密连接及炎症细胞因子的影响 被引量:4
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作者 张亚南 李轩 +2 位作者 陈慧子 余凯凡 朱伟云 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期137-144,共8页
[目的]本文以猪肠道上皮IPEC-J2细胞为模型,探究不同水平丙酸钠对细胞紧密连接和炎症细胞因子的影响。[方法]分别用1和10 mmol·L^(-1)丙酸钠处理IPEC-J2细胞,以不加丙酸钠处理IPEC-J2细胞为对照组,分别处理12 h和24 h后测定各组细... [目的]本文以猪肠道上皮IPEC-J2细胞为模型,探究不同水平丙酸钠对细胞紧密连接和炎症细胞因子的影响。[方法]分别用1和10 mmol·L^(-1)丙酸钠处理IPEC-J2细胞,以不加丙酸钠处理IPEC-J2细胞为对照组,分别处理12 h和24 h后测定各组细胞活力、跨膜电阻(TEER)值、紧密连接相关蛋白及炎症细胞因子基因表达和细胞上清液中炎症因子浓度。[结果]丙酸钠处理24 h后,处理组细胞活力显著下降(P<0.05),细胞的TEER值则显著上升(P<0.05)。RT-qPCR结果显示,紧密连接相关蛋白Claudin中,不同浓度丙酸钠处理12和24 h后,显著下调Claudin-1 mRNA的表达(P<0.05),但显著上调Claudin-2、Claudin-3和Claudin-4 mRNA的表达(P<0.05)。紧密连接相关蛋白ZO中,处理12和24 h时,1和10 mmol·L^(-1)丙酸钠分别显著上调ZO-2 mRNA和ZO-1 mRNA的表达(P<0.05),但10 mmol·L^(-1)丙酸钠则显著下调ZO-2 mRNA的表达(P<0.05)。不同浓度丙酸钠处理12和24 h均显著上调炎症细胞因子IL-8、IL-18和TNF-αmRNA的表达(P<0.05),显著下调IL-6 mRNA的表达(P<0.05)。ELISA测定结果表明,丙酸钠显著刺激IL-8和TNF-α的分泌(P<0.05),对IL-18和IL-6的分泌则无显著影响(P>0.05)。[结论]丙酸钠选择性上调紧密连接蛋白家族相关基因的表达,一定程度上维护小肠上皮细胞屏障功能的完整性,同时调节细胞炎症反应,揭示丙酸在调节小肠上皮细胞屏障功能以及炎症反应过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 丙酸钠 紧密连接 炎症细胞因子 ipec-j2细胞
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