新工科背景下基于IPACE的网络互联技术实验课程教学模式探索

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作者 唐灯平 张文哲 张宏斌 《计算机教育》 2025年第11期234-239,共6页

分析计算机网络专业核心课程网络互联技术实验课程传统教学方法存在的问题,提出基于IPACE的教学模式,以“搭建IPv4大型校园网”为例,介绍IPACE教学模式的具体实施,探讨如何将探究式学习、项目式学习、主动学习、协作学习和体验式学习融... 分析计算机网络专业核心课程网络互联技术实验课程传统教学方法存在的问题,提出基于IPACE的教学模式,以“搭建IPv4大型校园网”为例,介绍IPACE教学模式的具体实施,探讨如何将探究式学习、项目式学习、主动学习、协作学习和体验式学习融入实验教学中,最后通过问卷调查结果说明教学效果。 展开更多

关键词 新工科 ipacE教学模式 网络互联技术 实验教学 教学模式改革

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福氏志贺菌ipaC基因的克隆及序列分析 被引量：2

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作者 姚潇 王恒樑 +4 位作者 杨伯伦 闫晓宇 史兆兴 冯尔玲 黄留玉 《陕西师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期89-91,94,共4页

为了克隆福氏志贺氏菌的ipaC基因,以志贺氏菌福氏2a菌株为模板进行PCR,并将PCR产物插入到pMD T载体中,得到阳性重组子,并命名为pMD ipaC.测序结果显示,其核苷酸序列与文献报道的序列有差异,但编码的氨基酸序列相同,表明志贺氏菌的ipaC... 为了克隆福氏志贺氏菌的ipaC基因,以志贺氏菌福氏2a菌株为模板进行PCR,并将PCR产物插入到pMD T载体中,得到阳性重组子,并命名为pMD ipaC.测序结果显示,其核苷酸序列与文献报道的序列有差异,但编码的氨基酸序列相同,表明志贺氏菌的ipaC基因已被成功克隆. 展开更多

关键词 细菌性痢疾 福氏志贺菌 ipac基因 基因克隆 序列分析 致病机制

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鸡源志贺菌IpaC基因的克隆及原核表达 被引量：3

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作者 苗银萍 蒋大伟 +3 位作者 许兰菊 王川庆 尤晓楠 李克宇 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1352-1357,共6页

应用PCR方法从ZMD-01株鸡源志贺菌中扩增IpaC目的基因,并将IpaC基因克隆至载体pET32α（＋）中,构建原核表达载体pET32α（＋）-IpaC,然后转化至大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达并优化表达条件,最后进行目的蛋白的可溶性鉴定及Western-b... 应用PCR方法从ZMD-01株鸡源志贺菌中扩增IpaC目的基因,并将IpaC基因克隆至载体pET32α（＋）中,构建原核表达载体pET32α（＋）-IpaC,然后转化至大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达并优化表达条件,最后进行目的蛋白的可溶性鉴定及Western-blot鉴定。结果显示,扩增出大小为1 092bp的IpaC基因,与10株人源志贺菌参考株的核苷酸序列同源性为97.3%~99.8%、氨基酸序列同源性为96.4%~99.7%;进化树结果显示,与参考株AL391753相似性较大,它们在同一个分支上;SDS-PAGE结果显示,重组表达菌在约63 000处出现条带,最佳表达条件确定为诱导前培养3h、IPTG终浓度为1.0mmol/L、加入IPTG诱导4h;蛋白既存在上清中也存在包涵体中,上清蛋白纯化后纯度可达90%以上;Western-blot分析显示,融合蛋白有反应原性。以上结果表明,鸡源志贺菌IpaC基因与人源志贺菌有较高的同源性;成功表达了IpaC蛋白,为今后研究鸡源志贺菌IpaC蛋白参与的致病机制奠定基础。 展开更多

关键词 鸡源志贺菌 ipac基因 克隆

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鸡源志贺菌IpaC基因变构体重组酵母表达载体的构建及初步表达 被引量：1

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作者 李克宇 刘一尘 +6 位作者 蒋大伟 张春杰 许兰菊 张彬 王雪云 马金玉 韩志霞 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1631-1635,共5页

为使IpaC基因表达产物保持天然的生物学活性,实现在酵母表达系统中高效表达,本研究首先采用反向PCR将IpaC基因358～360位和361～363位酵母菌低频密码子突变为偏嗜性密码子,并进一步构建了克隆载体pMD18-T-IpaC＊和酵母表达载体pPICZαA-... 为使IpaC基因表达产物保持天然的生物学活性,实现在酵母表达系统中高效表达,本研究首先采用反向PCR将IpaC基因358～360位和361～363位酵母菌低频密码子突变为偏嗜性密码子,并进一步构建了克隆载体pMD18-T-IpaC＊和酵母表达载体pPICZαA-IpaC＊,然后将线性化重组质粒pPICZαA-IpaC＊电转化至毕赤酵母X-33中,对阳性转化子进行诱导表达,并用SDS-PAGE检测其表达产物。结果表明SDS-PAGE在大约63 000处检测出目的条带,实现了鸡源志贺菌IpaC基因在毕赤酵母中的初步表达。这为进一步研究IpaC生物学功能奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡源志贺菌 ipac基因 毕赤酵母 表达载体 构建 表达

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痢疾志贺菌侵袭素IpaC的原核表达及纯化复性 被引量：1

5

作者 姚晓坤 伦永志 +3 位作者 成军 刘顺爱 韩铭 孙杰 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2017年第4期373-376,共4页

目的为进一步研究痢疾志贺菌侵袭素IpaC蛋白的侵袭活性,必须先获得IpaC重组融合蛋白。方法将IpaC基因亚克隆至表达载体pET-24α(+)中,转化至E.coli BL21(DE3)表达宿主菌中,采用IPTG优化诱导表达,然后纯化复性重组蛋白。结果重组蛋白最... 目的为进一步研究痢疾志贺菌侵袭素IpaC蛋白的侵袭活性,必须先获得IpaC重组融合蛋白。方法将IpaC基因亚克隆至表达载体pET-24α(+)中,转化至E.coli BL21(DE3)表达宿主菌中,采用IPTG优化诱导表达,然后纯化复性重组蛋白。结果重组蛋白最佳表达条件为0.50mmol/L IPTG、30℃诱导6h,获得分子量约为33kDa的IpaC重组蛋白。Western blotting证实了重组蛋白的特异性。IpaC重组蛋白主要以包涵体形式在宿主菌中表达,通过纯化后得到单一的目的蛋白。结论成功构建IpaC原核表达体系,并获得了蛋白的高效表达及优化。初步建立了IpaC重组蛋白的纯化方案。为进一步研究IpaC的侵袭性作用奠定了基础。 展开更多

关键词 侵袭素 ipac 原核表达 蛋白纯化

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利用免疫沉淀法对鸡源志贺菌IpaC蛋白受体候选蛋白的初步筛选 被引量：1

6

作者 韩志霞 刘芳 +3 位作者 蒋大伟 许兰菊 孔江南 李克宇 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1869-1874,共6页

为筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白的受体。利用生物素标记试剂盒标记IpaC蛋白，分离培养原代鸡肠上皮细胞和。利用ProteoExtract？天然膜蛋白提取试剂盒提取鸡肠上皮细胞的膜蛋白；应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与IpaC蛋白结合的蛋白质；利... 为筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白的受体。利用生物素标记试剂盒标记IpaC蛋白，分离培养原代鸡肠上皮细胞和。利用ProteoExtract？天然膜蛋白提取试剂盒提取鸡肠上皮细胞的膜蛋白；应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与IpaC蛋白结合的蛋白质；利用SDS-PAGE电泳检测和Western blot鉴定。结果获得了与IpaC蛋白特异性结合的大约在34000～55000之间的蛋白条带。筛选得到的SDS-PAGE蛋白条带进行LC—MS／MS测序鉴定和生物信息学分析。初步将annexin A2，37000 Laminin receptor precursor，LIM and SH3 proteinl，ras—related protein Rab-43作为IpaC蛋白受体的候选蛋白。为研究志贺菌在鸡体内的致病机制奠定基础，而且可以为评估鸡源志贺菌在公共卫生方面的重要性提供参考依据。 展开更多

关键词 鸡源志贺菌 ipac蛋白 鸡肠上皮细胞 免疫沉淀 LC—MS/MS 受体

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福氏志贺氏菌毒力基因ipaC在大肠杆菌中表达的初步研究 被引量：1

7

作者 孙素霞 王红 +3 位作者 王勇 向前 吴爱军 俞守义 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第6期29-31,41,共4页

目的　构建福氏志贺氏菌毒力基因ipaC与质粒pET32a的重组质粒 ,转入大肠杆菌中表达 ,并检测表达产物的活性。方法　PCR扩增福氏志贺氏菌毒力质粒中ipaC基因 ,克隆到质粒 pET32aT7启动子下游 ,转化感受态大肠杆菌BL2 1(λDE3) ,IPTG诱导... 目的　构建福氏志贺氏菌毒力基因ipaC与质粒pET32a的重组质粒 ,转入大肠杆菌中表达 ,并检测表达产物的活性。方法　PCR扩增福氏志贺氏菌毒力质粒中ipaC基因 ,克隆到质粒 pET32aT7启动子下游 ,转化感受态大肠杆菌BL2 1(λDE3) ,IPTG诱导表达 ,SDS -PAGE以及Western -Blot分析。结果　获得pET32a -ipaC重组表达质粒 ,SDS -PAGE以及Western -Blot显示重组质粒表达产物的分子量约为 6 3kDa,并具有一定的免疫活性。结论　福氏志贺氏菌毒力基因ipaC可在大肠杆菌中表达 ,且表达产物具有一定的免疫活性。 展开更多

关键词 福氏志贺氏菌 毒力基因 ipac 大肠杆菌 基因表达 细菌性痢疾

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福氏志贺菌毒力蛋白IpaC的表达、纯化及免疫活性鉴定 被引量：1

8

作者 孙素霞 卢晓翠 +2 位作者 陈思强 罗海吉 俞守义 《热带医学杂志》 CAS 2007年第2期126-128,132,共4页

目的表达、纯化福氏志贺菌毒力蛋白IpaC并对其免疫活性进行鉴定。方法将含有ipaC基因的pET32a-ipaC表达质粒载体转入大肠杆菌BL21(λDE3)中表达,表达产物进行SDS-PAGE鉴定,并采用QIAexpressionistTM蛋白纯化系统纯化IpaC蛋白;用纯化的... 目的表达、纯化福氏志贺菌毒力蛋白IpaC并对其免疫活性进行鉴定。方法将含有ipaC基因的pET32a-ipaC表达质粒载体转入大肠杆菌BL21(λDE3)中表达,表达产物进行SDS-PAGE鉴定,并采用QIAexpressionistTM蛋白纯化系统纯化IpaC蛋白;用纯化的蛋白免疫动物获得抗血清,Western-blot检测抗原的免疫活性。结果诱导后的表达产物经SDS-PAGE发现有一相对分子量约为63000的条带,其含量约占总蛋白量的11%,对融合蛋白进行纯化纯度可达90%以上,抗His的抗体Western-blot分析,发现特异性区带出现在63000u处,证明该蛋白是所要表达的融合蛋白,制备的免疫血清可与IpaC发生特异免疫反应。结论pET32a-ipaC重组表达质粒转入大肠杆菌后,可稳定、高效地表达毒力蛋白IpaC,且纯化后的蛋白具有免疫活性。 展开更多

关键词 福氏志贺菌 毒力蛋白(ipac) 原核表达 蛋白纯化 免疫活性

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鸡源志贺菌IpaC蛋白单抗制备及其受体的初步鉴定

9

作者 蒋大伟 张彬 +4 位作者 马金玉 韩志霞 王亚宾 许兰菊 苗银萍 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2061-2066,共6页

为制备特异性的鸡源志贺菌IpaC蛋白单克隆抗体和鉴定其受体,以纯化的重组鸡源志贺菌IpaC蛋白制备多克隆抗体,Western blot和间接ELISA分析表明重组IpaC蛋白具有很好的免疫反应原性。将纯化的IpaC蛋白免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤... 为制备特异性的鸡源志贺菌IpaC蛋白单克隆抗体和鉴定其受体,以纯化的重组鸡源志贺菌IpaC蛋白制备多克隆抗体,Western blot和间接ELISA分析表明重组IpaC蛋白具有很好的免疫反应原性。将纯化的IpaC蛋白免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。经过杂交瘤细胞阳性孔的筛选、单克隆抗体效价测定、单克隆抗体亚型鉴定、单克隆抗体Western blot鉴定后,获得1株杂交瘤阳性细胞5A12B5。同时,通过鸡胚肠组织提取总蛋白,利用铺覆蛋白印迹技术,初步测定IpaC蛋白受体相对分子质量约为55 000。试验为IpaC蛋白检测和该蛋白与鸡肠上皮细胞之间的相互作用研究奠定基础,同时也为评估鸡源志贺菌在公共卫生等方面的重要性提供参考依据。 展开更多

关键词 鸡源志贺菌 ipac蛋白 单克隆抗体 受体

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鸡源志贺氏菌IpaC基因新型表达载体构建及其在毕赤酵母中的表达

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作者 马金玉 韩志霞 +4 位作者 蒋大伟 王亚宾 许兰菊 苗银萍 孔江南 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第10期36-41,共6页

为使鸡源志贺氏菌IpaC蛋白保持天然的生物学活性,在毕赤酵母表达系统中实现分泌表达,进一步研究IpaC蛋白的生物学功能,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,利用真核表达载体p GAPZA和8种... 为使鸡源志贺氏菌IpaC蛋白保持天然的生物学活性,在毕赤酵母表达系统中实现分泌表达,进一步研究IpaC蛋白的生物学功能,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,利用真核表达载体p GAPZA和8种真核信号肽,分别构建真核表达载体pGAPZA-Inu/Inv/Kil/Lys/Mat/Amy/Glu/Ser-IpaC#,然后将线性化的重组质粒电转化至毕赤酵母X-33中,对阳性转化子进行表达,并用SDS-PAGE及Western-blot检测其表达产物。结果表明:在8种重组菌表达产物的菌体沉淀中检测到大小约为60 ku的目的蛋白。说明鸡源志贺氏菌IpaC基因成功实现了在毕赤酵母的胞内表达。 展开更多

关键词 鸡源志贺氏菌 ipac基因 毕赤酵母 pGAPZA 真核信号肽

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基于IPAC-SGM模型的高油价影响分析及政策建议 被引量：1

11

作者 李继尊 姜克隽 《中国物价》 北大核心 2007年第4期29-31,共3页

高油价给各国经济带来了多方面的影响和冲击。本文在介绍IPAC-SGM模型原理和构成的基础上,根据2007年国际油价走势,假定三种油价情景测算其对我国经济的影响,结论是尚处在可承受范围内。本文建议抓住时机加快推进产业结构调整和经济增... 高油价给各国经济带来了多方面的影响和冲击。本文在介绍IPAC-SGM模型原理和构成的基础上,根据2007年国际油价走势,假定三种油价情景测算其对我国经济的影响,结论是尚处在可承受范围内。本文建议抓住时机加快推进产业结构调整和经济增长方式转变,加快解决影响我国石油安全的突出矛盾和问题。 展开更多

关键词 ipac—SGM模型 油价 中国经济

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鸡源志贺菌IpaC基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达

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作者 韩志霞 马金玉 +4 位作者 王雪云 蒋大伟 刘芳 许兰菊 李克宇 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第8期39-42,共4页

为使IpaC基因表达产物保持天然的生物学活性,实现在酵母表达系统中高效表达,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,分别构建真核表达载体pGAPZαA-IpaC和pGAPZαA-IpaC#,然后将线性化重组... 为使IpaC基因表达产物保持天然的生物学活性,实现在酵母表达系统中高效表达,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,分别构建真核表达载体pGAPZαA-IpaC和pGAPZαA-IpaC#,然后将线性化重组质粒电转化至毕赤酵母X-33中,对阳性转化子用SDS-PAGE及Westernblot检测其表达产物。结果表明,经SDS-PAGE及Westernblot检测,仅在pGAPZαA-IpaC#/X-33重组菌表达产物菌体沉淀中检测到大小为70ku的目的蛋白,实现了鸡源志贺菌IpaC#基因在毕赤酵母中的胞内表达,从而验证毕赤酵母表达系统与外源基因序列的相关性,为进一步提高鸡源志贺菌IpaC基因在毕赤酵母中的高效表达提供科学依据,对研究该病的发病机制具有重要意义。 展开更多

关键词 鸡源志贺菌 ipac基因 毕赤酵母 优化密码子 pGAPZαA 真核表达

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痢疾志贺菌侵袭素IpaC的生物信息学分析

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作者 孙杰 姚晓坤 伦永志 《莆田学院学报》 2016年第5期9-13,共5页

以NCBI Gen Bank数据库作为数据来源,基于Ipa C蛋白的基因序列进行理化性质、疏水区、信号肽、亚细胞定位、结构域、跨膜区及二级结构、三级结构预测。分析表明,Ipa C蛋白由382 aa组成,分子量为41.016k Da,理论等电点为8.42,不稳定系数... 以NCBI Gen Bank数据库作为数据来源,基于Ipa C蛋白的基因序列进行理化性质、疏水区、信号肽、亚细胞定位、结构域、跨膜区及二级结构、三级结构预测。分析表明,Ipa C蛋白由382 aa组成,分子量为41.016k Da,理论等电点为8.42,不稳定系数为50.52,亲水性蛋白质;无信号肽;亚细胞定位于细菌体外。跨膜区分析表明,Ipa C蛋白有较短的跨膜区域,大部分区域位于宿主细胞膜外侧。空间结构分析显示,Ipa C蛋白结构以α螺旋为主。分析结果表明,痢疾志贺菌侵袭素Ipa C属于不稳定碱性亲水性的细菌分泌蛋白,嵌于宿主细胞膜外侧,与其生物学功能相一致。 展开更多

关键词 痢疾志贺菌 侵袭素 ipac 生物信息学

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基于传统图书馆的并行iPAC平台构建

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作者 陈文强 《情报杂志》 CSSCI 北大核心 2004年第9期58-60,共3页

基于传统图书馆既具优势又存在诸多难解矛盾的事实 ,提出了基于iPAC平台构建其并行数字图书馆的设想 ,给出了具体运作模式 ,并从图书数字化加工、网站软硬件建设、知识产权。

关键词 传统图书馆 数字图书馆 网站建设 ipac 信息发布 网络发布 知识产权

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浅谈并行iPAC在传统图书馆应用中的设想

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作者 冀月芹 《情报杂志》 CSSCI 北大核心 2008年第5期113-114,160,共3页

根据传统图书馆既具优势又存在诸多难解矛盾的事实,提出了基于传统图书馆并行的、以iPAC为平台的其数字图书馆的设想,给出了具体运作模式,并从图书数字化加工、网站软硬件建设、网络资源现状等方面进行了论证。

关键词 传统图书馆 数字图书馆 网站建设 ipac

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用酵母双杂交系统筛选与痢疾杆菌侵袭素IpaC相互作用的蛋白 被引量：4

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作者 阎晓宇 姚潇 +5 位作者 王恒樑 冯尔玲 史兆兴 苏国富 游松 黄留玉 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期369-374,共6页

利用酵母双杂交技术筛选与IpaC相互作用的真核细胞蛋白。首先将IpaC全长基因克隆到诱饵蛋白载体pGBKT7中 ,以构建的pGBKT IpaC为靶蛋白质粒 ,筛选人HeLa细胞cDNA文库。在 2× 10 6个克隆中得到 2 2个阳性克隆。其中 2个阳性克隆编... 利用酵母双杂交技术筛选与IpaC相互作用的真核细胞蛋白。首先将IpaC全长基因克隆到诱饵蛋白载体pGBKT7中 ,以构建的pGBKT IpaC为靶蛋白质粒 ,筛选人HeLa细胞cDNA文库。在 2× 10 6个克隆中得到 2 2个阳性克隆。其中 2个阳性克隆编码人胶原酶蛋白片段。并且进一步证明与胶原酶片段相互作用的IpaC结构域在 6 2aa～ 170aa之间。提示IpaC可能在胶原酶参与的生物学过程中发挥作用。 展开更多

关键词 痢疾杆菌 酵母双杂交系统 ipac 胶原酶

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IPAC系统在图书馆高效信息管理中的应用

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作者 田奕崴 田锐 田晏嘉 《内蒙古科技与经济》 2009年第14期114-114,116,共2页

随着计算机及网络技术在图书馆的广泛应用,图书馆自动化建设已取得了很大发展。但如何能使这些数据库资源发挥更有效的作用,实现本馆读者及更广泛用户的远程检索,达成真正意义上的资源共享,是许多图书馆自动化发展面临的新问题。"... 随着计算机及网络技术在图书馆的广泛应用,图书馆自动化建设已取得了很大发展。但如何能使这些数据库资源发挥更有效的作用,实现本馆读者及更广泛用户的远程检索,达成真正意义上的资源共享,是许多图书馆自动化发展面临的新问题。"图书馆信息资源网上发布与检索系统",简称IPAC,在处理现有图书馆自动化管理系统网络化方面的不足和关系型数据库系统在处理文献型数据时的缺陷等方面有很大优势,可以满足图书馆早日实现资源上网共享的迫切需求。文章对此进行了简介。 展开更多

关键词 图书馆 ipac 信息管理 数字化

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IPAC系统在图书馆资源共享中的应用

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作者 赵慧 《互联网世界》 2001年第9期75-76,共2页

关键词 图书馆自动化 资源共享 ipac系统 校园网

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基于Solr的IPAC书目信息系统整合 被引量：3

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作者 郭利敏 《微型电脑应用》 2013年第3期4-7,共4页

主要讨论基于Solr的上海图书馆书目检索系统的整合,面对ipac这种较老的商用书目检所系统相对比较封闭的情况,提出了新的Solr-ipac系统整合方案以及基于Solr的书目检索系统构架,以应对手机等移动设备上的移动服务的需求。

关键词 SOLR LUCENE OPAC ipac 检索系统全文检索

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基于iBASE非结构化网络数据库的iPAC图书馆网上资源发布与检索系统

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作者 张启瑞 闫蕾 《情报杂志》 CSSCI 北大核心 2001年第12期34-35,共2页

详细介绍了iBASE非结构化网络数据库引擎和iBASE WEB网上资源管理系统为iPAC网上图书馆提供了全方位的信息采集方式以及强大的信息内容检索引擎。从五个方面阐明iPAC网上图书馆提供了输出格式可自行任意设定的功能。

关键词 IBASE 非结构化 网络数据库 ipac 图书馆 网上资源发布 检索系统

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