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不同海拔雄性藏绵羊生殖器官组织学差异及AR与INHA基因的表达差异
1
作者 周娜 高榕 王欣荣 《河南农业科学》 北大核心 2025年第5期130-141,共12页
为了探讨藏绵羊对高海拔低氧环境的适应性,以分别取自高海拔(3500 m)和低海拔(2200 m)的2个成年雄性藏绵羊群体为研究对象,采用石蜡切片、H.E.染色、RT-qPCR以及Western blot等试验方法,比较不同海拔藏绵羊睾丸、附睾(附睾头、附睾体、... 为了探讨藏绵羊对高海拔低氧环境的适应性,以分别取自高海拔(3500 m)和低海拔(2200 m)的2个成年雄性藏绵羊群体为研究对象,采用石蜡切片、H.E.染色、RT-qPCR以及Western blot等试验方法,比较不同海拔藏绵羊睾丸、附睾(附睾头、附睾体、附睾尾)、输精管的组织形态学差异以及雄激素受体(AR)和抑制素α亚基(INHA)基因在不同生殖器官中的组织表达差异。结果表明,与低海拔藏绵羊相比,高海拔藏绵羊睾丸的曲细精管直径、生精上皮厚度、精子细胞直径、曲细精管横截面面积、支持细胞数量均显著降低,精原细胞直径、初级精母细胞均显著增加;附睾管腔内、外径均显著降低且纤毛总体上变短;但输精管管腔直径显著增大,平滑肌厚度变薄。藏绵羊在高海拔环境中通过增强附睾体、附睾尾中AR基因的转录调控及睾丸、附睾体、附睾尾、输精管中的AR蛋白表达来促进精子发生及成熟;与低海拔藏绵羊相比,高海拔藏绵羊在附睾头、尾及输精管中INHA基因表达极显著下调,睾丸组织中INHA蛋白表达显著降低而附睾尾部极显著升高,这种差异可能通过调控促卵泡素(FSH)分泌和精子发生过程,影响生精上皮发育并帮助适应高寒低氧环境。综上,在高海拔低氧环境中,藏绵羊睾丸、附睾及输精管的组织形态学变化可能是其适应高原低氧的保护性反应;同时,高海拔藏绵羊通过调控生殖器官中AR和INHA基因及蛋白质的表达,直接或间接影响精子发生与成熟。 展开更多
关键词 藏绵羊 海拔 生殖器官 AR基因 inha基因
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3个绵羊群体INHA基因的遗传多态性及对产羔数的影响 被引量：11
2
作者 田秀娥 孙红霞 王永军 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第1期23-29,共7页
【目的】比较滩羊、蒙古羊和小尾寒羊INHA基因的多态性,分析不同基因型对产羔数的影响,为绵羊繁殖力标记的辅助选择提供理论依据。【方法】利用PCR-SSCP方法检测和分析3个绵羊品种INHA基因的多态性,通过最小二乘分析方法研究不同基因型... 【目的】比较滩羊、蒙古羊和小尾寒羊INHA基因的多态性,分析不同基因型对产羔数的影响,为绵羊繁殖力标记的辅助选择提供理论依据。【方法】利用PCR-SSCP方法检测和分析3个绵羊品种INHA基因的多态性,通过最小二乘分析方法研究不同基因型对产羔数的影响。【结果】(1)滩羊和蒙古羊INHA基因在5′调控区282核苷酸处发生1处A→G突变(P1位点),在第2外显子的第470核苷酸处发生1处A→T突变(P2位点),3个绵羊品种在第2外显子第903核苷酸处发生G→A突变(P3位点)。(2)滩羊、蒙古羊和小尾寒羊P1位点C、D基因频率分别为0.840和0.160,0.852和0.148及0.162和0.838,均处于中度多态;P2位点E、F基因频率分别为0.784和0.216,0.787和0.213及1.000和0.000,滩羊和蒙古羊在该位点均处于中度多态;引物P3扩增片段中,滩羊和蒙古羊表现为A、B和C 3种单倍体基因型,而小尾寒羊仅表现出A和B 2种基因型。滩羊、蒙古羊和小尾寒羊的A、B、C基因型频率分别为0.136,0.037和0.147;0.800,0.926和0.853及0.064,0.037和0.000,B基因在3品种中均为优势基因型。(3)P1位点DD型小尾寒羊产羔数较CD型提高0.636只,CD型滩羊产羔数较CC型提高0.332只,差异均显著(P<0.05),CD型蒙古羊产羔数较CC型有提高的趋势;P2位点EF型滩羊产羔数较EE型降低0.387只,差异显著(P<0.05),EF型蒙古羊产羔数较EE型提高0.053只,差异不显著(P>0.05);P3位点,滩羊B基因型平均产羔数较A、C基因型分别多0.215只和0.200只,蒙古羊B基因型平均产羔数较C基因型多0.250只,小尾寒羊B基因型平均产羔数较A基因型多0.620只,差异均显著(P<0.05)。【结论】3个绵羊群体在INHA基因P1、P2位点均表现一定的多态性;滩羊和蒙古羊P2位点可能为控制产羔数的"不利"突变位点,3个绵羊群体INHA基因P1、P3位点可能为控制产羔数的"有利"突变位点。 展开更多
关键词 滩羊 蒙古羊 小尾寒羊 inha基因 产羔数
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云南省异烟肼耐药结核分枝杆菌katG和inhA基因突变特征 被引量：7
3
作者 陈连勇 茹浩浩 +4 位作者 杨星 闫双群 陈涛 倪沁璇 许琳 《昆明医科大学学报》 CAS 2022年第8期28-33,共6页
目的分析云南省异烟肼耐药结核分枝杆菌katG和inhA基因突变特征。方法采用PCR方法对云南省异烟肼耐药结核分枝杆菌进行katG和inhA基因扩增,并将扩增产物进行基因测序后比对分析。结果88株异烟肼耐药菌株中,耐药基因与表型药敏结果的符... 目的分析云南省异烟肼耐药结核分枝杆菌katG和inhA基因突变特征。方法采用PCR方法对云南省异烟肼耐药结核分枝杆菌进行katG和inhA基因扩增,并将扩增产物进行基因测序后比对分析。结果88株异烟肼耐药菌株中,耐药基因与表型药敏结果的符合率为82.95%(73/88),katG和inhA基因突变率分别为75.00%(66/88)和9.09%(8/88)。最为常见的基因突变位点为katG315(67.05%)和inhA-15(7.95%),katG315位点基因突变主要表现为Ser315Thr(59.09%,52/88)。耐多药与单耐异烟肼菌株中katG基因突变比例,差异有统计学意义(χ^(2)=4.190,P=0.041),而inhA基因及katG315、inhA-15位点基因突变比例,差异无统计学意义(P>0.05)。结论云南省异烟肼耐药以katG315和inhA-15基因突变为主,MDR菌株中katG基因突变率高于异烟肼单耐,目前基于基因突变的分子检测技术是检测异烟肼耐药的有效手段。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 异烟肼 耐药 KATG inha
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山羊INHA和INHBA基因的cDNA克隆、序列分析及组织表达研究 被引量：4
4
作者 郑杰 刘霜 +1 位作者 罗斌 字向东 《西南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2015年第6期672-677,共6页
分别提取处于同一发情周期的5只低繁藏山羊和5只高繁金堂黑山羊的卵巢、垂体的总RNA,并通过RT-PCR技术对INHA、INHBA基因cDNA进行克隆、序列分析,以Real-time PCR技术对其进行组织表达研究.结果表明:藏山羊和金堂黑山羊INHA基因编码区均... 分别提取处于同一发情周期的5只低繁藏山羊和5只高繁金堂黑山羊的卵巢、垂体的总RNA,并通过RT-PCR技术对INHA、INHBA基因cDNA进行克隆、序列分析,以Real-time PCR技术对其进行组织表达研究.结果表明:藏山羊和金堂黑山羊INHA基因编码区均长1083bp,编码360个氨基酸,两品种基因编码区有7处碱基不同,并导致3处氨基酸的差异;INHBA基因编码区均长1278bp,编码425个氨基酸,两品种基因编码区有4处碱基不同,并导致1处氨基酸的差异.藏山羊INHA基因编码区核苷酸序列与金堂黑山羊、绵羊、牛、野猪、小鼠、褐家鼠、人的同源性分别为:99.4%、98.9%、95.8%、88.6%、81.0%、79.5%和84.8%;藏山羊INHBA基因编码区核苷酸序列与金堂黑山羊、绵羊、牛、野猪、小鼠、褐家鼠、人的同源性分别为:99.7%、99.4%、98.1%、91.7%、88.0%、88.5%和91.2%.INHA和INHBA基因mRNA在两个山羊品种的卵巢、垂体中均有表达,但两品种间无显著性差异(P>0.05).说明INHA和INHBA基因在动物进化中比较保守,与山羊多羔性状的相关性有待进一步研究. 展开更多
关键词 藏山羊 金堂黑山羊 inha INHBA 多羔性状
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黑白花牛INHA基因多态性与超数排卵性状关系 被引量：3
5
作者 罗布 朱彦宾 +5 位作者 巴桑旺堆 平措占堆 次仁卓玛 尼玛 梁春芳 德吉曲宗 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期511-515,共5页
为了研究黑白花牛抑制素α基因(INHA)的遗传多样性和超数排卵效果的关联分析,找到一种能够作为黑白花牛超数排卵预测的候选基因,本试验以50头黑白花牛为实验材料,对其进行了超排处理并且采集了黑白花牛的血液样本提取基因组。采用PCR-S... 为了研究黑白花牛抑制素α基因(INHA)的遗传多样性和超数排卵效果的关联分析,找到一种能够作为黑白花牛超数排卵预测的候选基因,本试验以50头黑白花牛为实验材料,对其进行了超排处理并且采集了黑白花牛的血液样本提取基因组。采用PCR-SSCP技术,在INHA基因的第一外显子和第二外显子各设计了一对引物进行基因型检测,然后与超排性状进行关联分析。结果表明:黑白花牛INHA基因的177 bp处(+1为转录起始位点)存在一个A>G突变的多态性位点,AA和AG基因型的频率分别为0.62和0.38。与超排性状关联分析,结果显示AG基因型黑白花牛的排卵数和鲜胚数均显著多于AA基因型(p<0.05),这说明黑白花牛个体的超排性状可能与其本身的INHA基因的遗传特性有关。 展开更多
关键词 黑白花牛 抑制素α(inha) 多态性 超数排卵
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基因芯片技术检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药水平和katG、inhA、oxyR-ahpC以及rpoB基因突变位置的关联性分析 被引量：10
6
作者 黄海滨 张海晴 +7 位作者 刘成永 刘加彬 魏素梅 成松 贾彤 张礼茂 郭岩 张雪迪 《北京医学》 CAS 2016年第11期1247-1249,共3页
结核分枝杆菌（mycobacterium tuberculosis,MTB）是一种能够引起结核病的病原菌,除了能够引起常见的肺结核外,还能够侵犯全身多个器官引起相应结核病。肺结核病是由结核分枝杆菌引起的呼吸系统传染病,人感染结核分枝杆菌后是否发病与... 结核分枝杆菌（mycobacterium tuberculosis,MTB）是一种能够引起结核病的病原菌,除了能够引起常见的肺结核外,还能够侵犯全身多个器官引起相应结核病。肺结核病是由结核分枝杆菌引起的呼吸系统传染病,人感染结核分枝杆菌后是否发病与免疫功能密切相关。目前结核病的诊断和治疗面临着巨大挑战,尤其是难治性结核病及耐药结核病的诊断及有效治疗问题。 展开更多
关键词 inha KATG oxyR-ahpC rpoB基因 耐药水平 基因突变 关联性分析 tuberculosis 基因芯片技术 基因芯片法
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INHA、INHBA基因在单、多羔黔北麻羊不同组织的表达研究 被引量：4
7
作者 张艳 敖叶 +4 位作者 周志楠 韦仕南 陈祥 洪磊 宋俊伟 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期62-66,72,共6页
为探究抑制素(Inhibin,INH)α亚基(INHA)和βA亚基(INHBA)基因在单、多羔黔北麻羊不同组织中的表达水平及初步探明其对山羊产羔性状的影响,本实验以单、多羔黔北麻羊母羊为研究对象,采集子宫、输卵管、垂体、下丘脑和卵巢组织并提取总R... 为探究抑制素(Inhibin,INH)α亚基(INHA)和βA亚基(INHBA)基因在单、多羔黔北麻羊不同组织中的表达水平及初步探明其对山羊产羔性状的影响,本实验以单、多羔黔北麻羊母羊为研究对象,采集子宫、输卵管、垂体、下丘脑和卵巢组织并提取总RNA,通过qRT-PCR技术对INHA、INHBA基因mRNA在单、多羔黔北麻羊不同组织中的表达水平进行检测。结果表明:INHA、INHBA基因在单、多羔黔北麻羊卵巢组织中的表达量高于其他组织(P<0.01),在多羔组黔北麻羊卵巢中的表达量高于单羔组(P<0.01),INHA基因在单羔黔北麻羊5个组织的表达量依次为:卵巢>输卵管>垂体>子宫>下丘脑,在多羔黔北麻羊5个组织中的表达量依次为:卵巢>垂体>下丘脑>输卵管>子宫;INHBA基因在单羔黔北麻羊5个组织的表达量依次为:卵巢>输卵管>子宫>垂体>下丘脑,在多羔黔北麻羊5个组织中的表达量依次为:卵巢>子宫>输卵管>垂体>下丘脑。结果提示,INHA、INHBA基因主要调控单、多羔黔北麻羊母羊的卵巢组织,本研究为进一步探讨INHA、INHBA基因对山羊繁殖性能的影响机制及基因功能奠定基础。 展开更多
关键词 inha基因 INHBA基因 黔北麻羊 实时荧光定量PCR
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猪INHA与GnRHR基因型互作效应对产仔数的影响 被引量：2
8
作者 丁朝阳 陈斌 +1 位作者 柳小春 贺长青 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期509-513,共5页
利用不对称PCR-SSCP、PCR-SSCP、PCR-RFLP技术检测了INHA基因、GnRHR基因在大白猪、长白猪、宁乡猪、桃源猪、大围子猪、沙子岭猪、海南五指山猪中的多态性.结果表明,INHA基因外显子Ⅱ检测到2个突变位点,即外显子ⅡG262A位点和A852G位点... 利用不对称PCR-SSCP、PCR-SSCP、PCR-RFLP技术检测了INHA基因、GnRHR基因在大白猪、长白猪、宁乡猪、桃源猪、大围子猪、沙子岭猪、海南五指山猪中的多态性.结果表明,INHA基因外显子Ⅱ检测到2个突变位点,即外显子ⅡG262A位点和A852G位点.在GnRHR基因5′-UTR端310bp处有1个A→C的突变位点.分析INHA基因G262A与GnRHR基因A310C互作效应时发现,基因型的互作效应在大白猪中极显著(P<0.01),在长白猪中达到了显著水平(P<0.05).基因互作型效应最大的是AGDD基因互作型,最小的是GGEE基因互作型.分析INHA基因A852G与GnRHR基因A310C互作效应时发现,各基因型互作对总产仔数、产活仔数影响不显著(P﹥0.05). 展开更多
关键词 猪 inha基因 GnRHR基因 产仔数 互作效应
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马关无角山羊卵巢颗粒细胞INHA基因siRNA的筛选与鉴定 被引量：2
9
作者 富国文 王绍卿 +3 位作者 祁会彩 滕晓红 达永仙 樊月圆 《中国草食动物科学》 CAS 2016年第1期15-18,共4页
为了研究INHA基因在马关无角山羊卵泡发育中的作用,设计并化学合成了3条针对INHA基因的si RNA,脂质体法转染至马关无角山羊的卵巢颗粒细胞,Real-time PCR技术和WesternBlot技术对其干扰效率进行了筛选。结果表明:si RNA-2对INHA基因m RN... 为了研究INHA基因在马关无角山羊卵泡发育中的作用,设计并化学合成了3条针对INHA基因的si RNA,脂质体法转染至马关无角山羊的卵巢颗粒细胞,Real-time PCR技术和WesternBlot技术对其干扰效率进行了筛选。结果表明:si RNA-2对INHA基因m RNA表达抑制率达到了94.3%,对蛋白表达的抑制率达到了93.4%,是INHA基因沉默的最佳干扰质粒,可为今后研究INHA基因的功能提供基础。 展开更多
关键词 马关无角山羊 inha基因 SI RNA
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乌湖杂交羊GnRHR与INHA基因多态性及其互作效应对产羔数的影响 被引量：2
10
作者 刘海霞 韩大勇 +3 位作者 朱爱文 闫伟 王步忠 蔡子健 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第3期780-788,共9页
试验旨在探究GnRHR和INHA基因遗传变异及其互作效应对绵羊产羔数的影响。参考GenBank发布的绵羊GnRHR基因(登录号:AH004943)和牛INHA基因(登录号:U16237)的DNA序列设计引物,采用PCR-SSCP技术检测GnRHR和INHA基因在乌湖羊、湖羊、乌骨绵... 试验旨在探究GnRHR和INHA基因遗传变异及其互作效应对绵羊产羔数的影响。参考GenBank发布的绵羊GnRHR基因(登录号:AH004943)和牛INHA基因(登录号:U16237)的DNA序列设计引物,采用PCR-SSCP技术检测GnRHR和INHA基因在乌湖羊、湖羊、乌骨绵羊中的遗传多态性,分析多态位点与产羔数的相关性,以及GnRHR和INHA基因间互作效应。结果显示,乌湖羊和湖羊群体GnRHR和INHA基因均存在多态位点,分别检测到GG、GC、CC和AA、AB、BB基因型,乌骨绵羊因样本较少,未发现多态位点。测序发现,GnRHR基因编码区198 bp处发生G→C突变,导致甘氨酸变为精氨酸,为错义突变;INHA基因877 bp处发生T→C突变,为同义突变(仍为天冬氨酸)。遗传学分析显示,GG和AA为优势基因型,G和A为优势等位基因;χ2适合性检验显示,试验羊群体GnRHR和INHA基因型分布处于Hardy-Weinberg平衡(P>0.05);分析GnRHR与INHA基因互作效应发现,基因互作效应在乌湖羊和湖羊群体差异显著(P<0.05),ABCC互作基因型互作效应最大,AAGG互作基因型互作效应最小。乌湖羊ABCC互作基因型的平均产羔数比AAGG互作基因型多1.68只,湖羊ABCC互作基因型产羔数比AAGG互作基因型多1.32只,ABCC互作基因型比AB和CC基因型的产羔数都高,表明互作效应与羊产羔数呈正相关。本研究认为,INHA基因T877C位点与GnRHR基因G198C位点互作基因型与绵羊产羔数紧密关联,对试验羊群体产羔数影响显著。 展开更多
关键词 乌湖羊 GnRHR基因 inha基因 PCR-SSCP 产羔性状 互作效应
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多位点酶切联合SSCP方法检测结核杆菌inhA基因突变 被引量：2
11
作者 华正豪 陈澍 +1 位作者 张文宏 翁心华 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第1期39-41,共3页
目的 建立一种简便而有效的方法检测结核分枝杆菌异烟肼耐药基因inhA突变。方法 收集结核杆菌临床菌株48株,其中异烟肼敏感株25株,耐药株23株。抽提临床菌株DNA和H37Rv标准株DNA,聚合酶链反应(PCR)方法扩增inhA基因,产物纯化后用限制性... 目的 建立一种简便而有效的方法检测结核分枝杆菌异烟肼耐药基因inhA突变。方法 收集结核杆菌临床菌株48株,其中异烟肼敏感株25株,耐药株23株。抽提临床菌株DNA和H37Rv标准株DNA,聚合酶链反应(PCR)方法扩增inhA基因,产物纯化后用限制性内切酶Hae Ⅱ酶切,酶切片段用单链多态构象分析(SS-CP)方法检测其单链构象。发现单链构象改变的PCR产物进行DNA测序。结果 48株菌株中,25株敏感株中未见inhA基因单链构象差异,23株耐药株中inhA基因突变率为21.8％。新发现的错义突变有:A26E、R27K、V28A、Q32A、L54V和S72T。结论 应用限制性内切酶Hae Ⅱ改良的聚合酶链反应—单链多态构象分析(PCR—SSCP)技术适用于结核临床菌株inhA基因突变的筛选。inhA基因突变位点呈多样性。 展开更多
关键词 多位点酶切 SSCP 联合检测 结核杆菌 inha基因 基因突变 耐药基因 异烟肼
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耐多药结核杆菌分离林KatG及inhA基因变异的研究 被引量：2
12
作者 朱中元 陈贻平 +3 位作者 陈允凤 王海波 张贵琛 邵寒霜 《海南医学》 CAS 1999年第4期264-266,共3页
目的用直接测序法研究临床分离的多耐药结核杆菌的katG和inhA的基因变异机理。方法用未见报还katG和inhA基因中的片须为引物，PCR法扩增产物，克隆后大量制备质粒，经全自动测序系统测定其DNA序列。结果15株耐INH≥1ug/ml的细菌均有kat... 目的用直接测序法研究临床分离的多耐药结核杆菌的katG和inhA的基因变异机理。方法用未见报还katG和inhA基因中的片须为引物，PCR法扩增产物，克隆后大量制备质粒，经全自动测序系统测定其DNA序列。结果15株耐INH≥1ug/ml的细菌均有katG突变，主要为点突变。其中14株有463位和315位AA密码子改变。13个变异位点中，9个未见文献报告。关于inhA变异，在18个耐INH≥1ug/ml的菌株中，全部出现inhA基因变异，主要为点突变和缺失，其中又以单个位点变异为主。各菌株之间变异不同。耐式菌株中，katG和inhA同时出现变异的比例较大。结论结核杆菌耐药基因变异机理复杂，我国分离的多耐药结核菌株与国外的菌株上述二基因变异特点不同。 展开更多
关键词 结核杆菌 多耐药 KATG inha 突变
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结核分支杆菌耐异烟肼基因inhA突变的测序研究 被引量：1
13
作者 朱中元 邵寒霜 +1 位作者 陈允凤 王海波 《海南医学院学报》 CAS 2000年第4期196-198,共3页
目的 :对多耐药株结核分支杆菌的inhA基因进行测序分析。方法 :inhA片段为引物 ,聚合酶链反应扩增产物 ,克隆后制备质粒 ,直接测定DNA序列。结果 :在17个耐异烟肼菌株中 ,11株出现inhA基因变异 ,突变率为64.7%。主要为碱基置换和缺失 ,... 目的 :对多耐药株结核分支杆菌的inhA基因进行测序分析。方法 :inhA片段为引物 ,聚合酶链反应扩增产物 ,克隆后制备质粒 ,直接测定DNA序列。结果 :在17个耐异烟肼菌株中 ,11株出现inhA基因变异 ,突变率为64.7%。主要为碱基置换和缺失 ,各菌株变异不同。katG和inhA同时出现变异的比例高。结论 :结核菌的耐异烟肼 (INH)和乙胺丁醇 (EMB)变异与inhA突变有关 。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 异烟肼 基因突变 inha基因 耐药性
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反刍动物INHA基因编码区生物信息学分析 被引量：1
14
作者 李婷 张英杰 +2 位作者 刘月琴 李雪梅 李兰会 《中国草食动物科学》 CAS 2014年第S1期96-98,共3页
利用生物信息学的方法分析了反刍动物绵羊、水牛、藏羚羊、白犀牛、山羊的INHA基因编码序列(coding sequence,CDS),并对该基因的核苷酸歧异度、遗传分化和净遗传距离、疏水性/亲水性、蛋白质二级结构、氨基酸序列进行了分析和预测。结... 利用生物信息学的方法分析了反刍动物绵羊、水牛、藏羚羊、白犀牛、山羊的INHA基因编码序列(coding sequence,CDS),并对该基因的核苷酸歧异度、遗传分化和净遗传距离、疏水性/亲水性、蛋白质二级结构、氨基酸序列进行了分析和预测。结果表明,在反刍动物的基因序列中,核苷酸歧异度、净遗传距离大小决定了物种间亲缘关系的远近。INHA蛋白表现为疏水性,蛋白质二级结构主要结构元件是无规卷曲和延伸链,INHA蛋白呈碱性。 展开更多
关键词 物种 inha基因 生物信息学分析 遗传多样性
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INHA基因干扰对马关无角山羊卵巢颗粒细胞的影响
15
作者 富国文 王绍卿 +2 位作者 滕晓红 达永仙 樊月圆 《家畜生态学报》 北大核心 2016年第8期12-15,49,共5页
为了揭示INHA基因在马关无角山羊卵泡发育过程中的作用,为山羊多胎性状的研究提供理论依据,以高繁殖力地方品种--马关无角山羊的卵巢颗粒细胞为研究对象,采用siRNA技术,对卵巢颗粒细胞所分泌的糖蛋白激素基因INHA进行了干扰,Western blo... 为了揭示INHA基因在马关无角山羊卵泡发育过程中的作用,为山羊多胎性状的研究提供理论依据,以高繁殖力地方品种--马关无角山羊的卵巢颗粒细胞为研究对象,采用siRNA技术,对卵巢颗粒细胞所分泌的糖蛋白激素基因INHA进行了干扰,Western blot法检验了干扰后INHA蛋白的表达量,Real-time PCR法检测了干扰后凋亡家族主要基因、主要生长因子及激素受体的mRNA表达量变化。Western blot结果显示,干扰48h后的INHA蛋白的表达量极显著低于正常组和阴性对照组(negative control,NC)(P<0.01);Real-time PCR结果显示,凋亡促进基因Bax在转染后,表达量极显著低于正常组和NC组(P<0.01),凋亡抑制基因bcl-2和bcl-xl基因在转染后,表达量极显著高于正常组和NC组(P<0.01);主要生长因子IGF-1和IGF-2基因在转染后,mRNA的表达量明显减少(P<0.01),其中IGF-1的表达量降低最为明显;激素受体FSHR和LHR基因mRNA的表达量极显著低于正常组和NC组(P<0.01)。由此推测,INHA基因可能是通过影响卵巢颗粒细胞凋亡/增殖,进而影响了卵泡的发育。 展开更多
关键词 inha基因 卵巢颗粒细胞 SIRNA技术 马关无角山羊
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绵羊INHA基因的生物信息学分析
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作者 李婷 张英杰 +1 位作者 刘月琴 孟丽娜 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第5期36-38,227,共4页
为了对绵羊INHA基因进行生物信息学分析,试验对从GenBank中检索到的8个物种的INHA基因同源序列进行系统进化分析,并对绵羊INHA基因的理化性质、编码蛋白二级结构、信号肽、跨膜结构以及蛋白质亚细胞定位进行分析。结果表明:绵羊INHA基... 为了对绵羊INHA基因进行生物信息学分析,试验对从GenBank中检索到的8个物种的INHA基因同源序列进行系统进化分析,并对绵羊INHA基因的理化性质、编码蛋白二级结构、信号肽、跨膜结构以及蛋白质亚细胞定位进行分析。结果表明:绵羊INHA基因与山羊、牛、猪亲缘关系很近;其编码的蛋白是一个疏水性不稳定蛋白,分子质量为73 098.2 u,包含857个氨基酸;蛋白的二级结构由39个α-螺旋(14.72%)、15个β-转角(5.66%)、156个无规则卷曲(58.87%)、55个延伸链(20.75%)和3个跨膜结构区域组成;该蛋白定位于细胞核,不含信号肽。 展开更多
关键词 绵羊 inha基因 生物信息学 序列 蛋白
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高山美利奴羊INHA基因多态性生物信息学分析及与产羔数关联分析 被引量：5
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作者 陈来运 袁超 +4 位作者 郭健 孙晓萍 刘建斌 牛春娥 杨博辉 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期1035-1041,共7页
本研究旨在研究高山美利奴羊INHA基因外显子多态性及其与产羔数的相关性。本实验通过比对高山美利奴羊全基因组测序结果中不同个体INHA外显子,分析高山美利奴羊INHA基因的单核苷酸多态性,应用生物信息学软件分析高山美利奴羊INHA基因突... 本研究旨在研究高山美利奴羊INHA基因外显子多态性及其与产羔数的相关性。本实验通过比对高山美利奴羊全基因组测序结果中不同个体INHA外显子,分析高山美利奴羊INHA基因的单核苷酸多态性,应用生物信息学软件分析高山美利奴羊INHA基因突变前后不同等位基因的m RNA二级结构、蛋白质的二级结构及三级结构。通过上述分析,将引起高山美利奴羊INHA编码氨基酸变化的位点作为该基因的特异性候选位点,通过直接测序法分析高山美利奴羊特异性候选位点INHA基因多态性,并分析其与产羔数的相关性。结果发现,高山美利奴羊INHA基因外显子区域存在3个SNPs,分别为T206A (Met→Lys)、T387A(Thr→Thr)、G900A (Pro→Pro);INHA基因3个SNPS都改变了RNA的最小自由能以及二级结构,错义突变T206A (Met→Lys)引起蛋白质二级结构和三级结构的改变;高山美利奴羊INHA基因T206A突变表现出3种基因型分别命名为TT、TA、AA,基因型与产羔数关联分析发现TT、TA基因型个体的产羔数极显著高于TT基因型个体(p<0.01)。本研究初步表明INHA基因是影响高山美利奴羊产羔数的一个主效基因。 展开更多
关键词 高山美利奴羊 inha 多态性 生物信息学 产羔数
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幼年与成年湖羊超数排卵及卵巢CYP17A1、INHA和FSHR基因表达差异研究 被引量：3
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作者 杨晶 郭晓飞 +5 位作者 张金龙 李义海 董春晓 李芮芃 杨升 张效生 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第17期54-57,共4页
为了研究幼年与成年湖羊的超数排卵及卵巢基因表达差异,试验以4周龄幼年母羊(Lamb组)和2岁龄成年母羊(Adult组)湖羊为研究对象,对其进行超数排卵处理,观测试验羊卵巢的表型差异;采用放射免疫法测定试验羊血清繁殖激素水平;以实时荧光定... 为了研究幼年与成年湖羊的超数排卵及卵巢基因表达差异,试验以4周龄幼年母羊(Lamb组)和2岁龄成年母羊(Adult组)湖羊为研究对象,对其进行超数排卵处理,观测试验羊卵巢的表型差异;采用放射免疫法测定试验羊血清繁殖激素水平;以实时荧光定量PCR法测定试验羊卵巢组织CYP17A1、INHA和FSHR基因相对表达量。结果表明:超数排卵处理后,Lamb组母羊卵巢形成的卵泡数量为(70.40±6.11)个,显著高于Adult组的(21.40±2.87)个(P<0.05);Adult组母羊卵细胞直径和发情率显著高于Lamb组(P<0.05)。Adult组母羊血清繁殖激素水平与Lamb组比较差异不显著(P>0.05)。Lamb组母羊卵巢组织CYP17A1、INHA和FSHR基因的相对表达量均极显著高于Adult组(P<0.01)。说明幼年母羊通过提高卵巢组织内与雌激素合成相关的基因表达水平,而使其对外源超数排卵激素较敏感。 展开更多
关键词 羊 超数排卵 卵巢组织 CYP17A1基因 inha基因 FSHR基因 基因表达
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INHA基因的克隆表达以及多克隆抗体的制备 被引量：1
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作者 李月 吴英松 +2 位作者 杨学习 谢美娟 李明 《热带医学杂志》 CAS 2009年第3期245-248,260,共5页
目的INHA的表达、纯化,以及多克隆抗体的制备。方法利用基因重组技术获得INHA基因以及去信号肽的INHA基因,将其都分别构建到原核表达系统并分离纯化得到相对分子质量为58000的带有组氨酸标签的重组INHA融合蛋白。用分离纯化后的INHA融... 目的INHA的表达、纯化,以及多克隆抗体的制备。方法利用基因重组技术获得INHA基因以及去信号肽的INHA基因,将其都分别构建到原核表达系统并分离纯化得到相对分子质量为58000的带有组氨酸标签的重组INHA融合蛋白。用分离纯化后的INHA融合蛋白作为抗原免疫,获得抗INHA的多克隆抗体。结果成功地获得INHA基因,并且以包涵体的形式表达于大肠杆菌中,用间接酶联免疫吸附(ELISA)方法,Westernblot检测结果显示,该抗体能特异性地与INHA的抗原以及胎盘组织产生明显免疫亲和反应。结论建立原核高效稳定INHA表达系统,获得具有生物学活性的蛋白,为进一步获得高特异性的抗体奠定基础。 展开更多
关键词 inha抗体 克隆表达 酶联免疫吸附反应 WESTERN BLOT
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耐异烟肼结核分枝杆菌及其katG、inhA基因的突变 被引量：5
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作者 文书 林璋礼 +2 位作者 刘丁发 周青 林翀 《中国热带医学》 CAS 2019年第8期723-726,共4页
目的探讨耐异烟肼结核分枝杆菌及其katG与inhA基因突变的特征,为临床选择抗结核药物治疗提供实验室参考。方法回顾性分析2015年1月1日-2017年1月1日在上海交通大学附属同仁医院海南分院的260例患者标本,对213例进行结核分枝杆菌分离培养... 目的探讨耐异烟肼结核分枝杆菌及其katG与inhA基因突变的特征,为临床选择抗结核药物治疗提供实验室参考。方法回顾性分析2015年1月1日-2017年1月1日在上海交通大学附属同仁医院海南分院的260例患者标本,对213例进行结核分枝杆菌分离培养,对47例进行博奥芯片法检测,再对213例培养所得菌株进行博奥芯片检测,对博奥芯片检测的47例痰标本进行结核分枝杆菌分离培养;对101株结核分杆菌进行katG与inhA基因检测。结果培养法和博奥芯片结核分枝杆菌检出率分别为36.6%(78/213)和48.9%(23/47);培养法和博奥芯片耐多药结核分枝杆菌检出率分别为41.0%(32/78)和47.8%(11/23);博奥芯片法和比例法耐异烟肼符合率98.7%(77/78);男性结核分枝杆菌阳性率45.9%高于女性阳性率29.2%;检测katG基因和inhA基因,3个基因区域都发生突变,突变发生率大小依次为katG315(AGC→ACC)密码子(32株,54.2%)、katG315(AGC→AAC)密码子(16株,27.1%)、inhA-15(C→T)(10株,16.9%)。24株(23.8%,24/101)对异烟肼无突变但对利福平发生突变;43株也同时耐利福平(42.6%,43/101)。突变频率较高的突变位点是315,突变频率为81.4%(48/59),1株(1.7%,1/59)为双位点联合突变且突变频率最低。结论结核分枝杆菌katG和inhA基因突变与耐INH相关,这为临床及时准确诊断、及早使用抗结核药物联合治疗提供了帮助。 展开更多
关键词 耐异烟肼结核分枝杆菌 KATG inha 基因突变
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