产IMP-4型金属β-内酰胺酶多药耐药产酸克雷伯菌耐药基因分析 被引量：7

1

作者 陈惠玲 叶惠芬 +2 位作者 周小棉 熊剑辉 吴俊 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1512-1515,共4页

目的了解产IMP-4型获得性金属β-内酰胺酶产酸克雷伯菌耐药基因存在的状况。方法分别采用K-B法、双纸片增效法、Etest法、聚合酶链反应(PCR)及序列分析方法检测其产金属β-内酰胺酶(MBLs)表型及相关的耐药基因。结果多药耐药产酸克雷伯... 目的了解产IMP-4型获得性金属β-内酰胺酶产酸克雷伯菌耐药基因存在的状况。方法分别采用K-B法、双纸片增效法、Etest法、聚合酶链反应(PCR)及序列分析方法检测其产金属β-内酰胺酶(MBLs)表型及相关的耐药基因。结果多药耐药产酸克雷伯菌除对阿米卡星、多黏菌素B敏感外,对碳青酶烯类、三代、四代头孢菌素、头孢西丁、氟喹诺酮类、头孢哌酮/舒巴坦、复方新诺明、阿莫西林/克拉维酸、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、利福平等均耐药;金属β-内酰胺酶基因型别为IMP-4型(blaIMP-4)、intⅠ1、qacEΔ1-sul1、aadA1、AmpC(blaADC)、CTX-M-14基因阳性。结论产酸克雷伯菌的多药耐药与整合子相关,且携带有多种耐药基因。 展开更多

关键词 imp-4基因型 金属Β-内酰胺酶 产酸克雷伯菌

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新生儿携带IMP-4肺炎克雷伯菌的分子分型特征

2

作者 梁军荣 潘新年 +4 位作者 黄维真 梁志坤 张清 闫芳 潘慧敏 《广西医学》 CAS 2019年第9期1095-1097,共3页

目的 分析新生儿产IMP-4肺炎克雷伯菌的分子分型特征。方法从南宁市两家医院住院的新生儿中分离获得49株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,筛选出10株携带IMP-4的肺炎克雷伯菌。采用多位点序列分型技术对10株肺炎克雷伯菌进行序列分析,PCR检测... 目的 分析新生儿产IMP-4肺炎克雷伯菌的分子分型特征。方法从南宁市两家医院住院的新生儿中分离获得49株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌,筛选出10株携带IMP-4的肺炎克雷伯菌。采用多位点序列分型技术对10株肺炎克雷伯菌进行序列分析,PCR检测β-内酰胺酶耐药基因,并使用eBURST软件进行亲缘分析。结果10株携带IMP-4的肺炎克雷伯菌共有6个序列型,4株序列型为20,2株序列型为1473。所有菌株均检测到耐药基因SHV-11及TEM-1。10株菌株有1个主要克隆复合群(包括序列型20、序列型37、序列型234),属于以序列型11为祖先的复合体。结论南宁市两家医院新生儿携带IMP-4的肺炎克雷伯菌基因序列型别具有多样性,其中序列型20是主要型别,其曾在一家医院新生儿中出现医院感染的暴发。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 imp-4 医院感染 新生儿 多位点序列分型

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检出一株产IMP-4型金属酶放射根瘤菌

3

作者 陈振华 刘文恩 《南昌大学学报（医学版）》 CAS 2011年第12期106-106,共1页

金属β-内酰胺酶简称金属酶,产IMP-4型金属酶细菌多见于鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌和柠檬酸杆菌属。笔者从1例住院患者支气管分泌物中分离出一株产IMP-4型金属酶的放射根瘤菌,报告如下。

关键词 imp-4 金属酶 放射根瘤菌

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KPC-2及IMP-4酶介导肠杆菌科细菌碳青霉烯类耐药研究 被引量：30

4

作者 陈金云 傅鹰 +6 位作者 杨青 史可人 王海萍 王燕飞 阮陟 俞云松 李珺 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期419-426,共8页

目的探讨我院肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制及其流行特点。方法收集杭州市富阳区第一人民医院2013年1月至2014年8月分离的对碳青霉烯类抗生素（厄他培南）敏感性下降的肠杆菌科细菌，采用K-B纸片法及E-test法进行药敏试验... 目的探讨我院肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制及其流行特点。方法收集杭州市富阳区第一人民医院2013年1月至2014年8月分离的对碳青霉烯类抗生素（厄他培南）敏感性下降的肠杆菌科细菌，采用K-B纸片法及E-test法进行药敏试验，改良Hodge试验、EDTA抑制试验及超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）表型筛选试验进行耐药表型筛选；采用PCR法及测序技术检测耐药基因、KPC基因周围序列和肺炎克雷伯菌7个管家基因，多位点序列分型进行7个管家基因的序列分析；运用PFGE对鉴定为同一菌种的细菌进行同源性分析；采用S1-PFGE联合Southern杂交对已明确的碳青霉烯耐药基因进行基因定位。结果共收集到19株厄他培南敏感性下降的肠杆菌科细菌，所有菌株呈多重耐药现象，且同一菌株常携带有多种耐药基因，其中blaKPC-2、blaIMP-4、blaSHV-1、blaCTX-M-65、blaCTX-M-15、blaTEM-1、rmtB为最常见共同携带的耐药基因。PFGE结果提示14株肺炎克雷伯菌呈多克隆分布，MLST分型以ST11型为主。11株肺炎克雷伯菌和1株大肠埃希菌产KPC-2酶，blaKPC-2基因分别定位于4种大小不同的质粒上（大小分别约为95kb、140kb、200kb及240kb），所有菌株blaKPC-2。周围基因结构从上游至下游均为ISKpn8、blaKPC-2和ISKpn6-like元件；1株产酸克雷伯菌和1株肺炎克雷伯菌产IMP-4型碳青霉烯酶，blaIMP-4。基因定位于大小约为300kb的质粒上。结论KPC-2型及IMP-4型碳青霉烯酶是造成我院肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因；我院碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（CRKP）菌株呈多克隆散在播散的流行特点，未发现优势克隆。 展开更多

关键词 碳青霉烯酶 碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌 KPC-2酶 imp-4酶

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醋栗番茄NHX4基因及其启动子序列的克隆与分析 被引量：2

5

作者 李红婷 魏露阳 +1 位作者 孙亚东 朱路英 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第14期4511-4519,共9页

本研究在醋栗番茄基因组鸟枪序列的基础上,基于同源序列的保守性,克隆了醋栗番茄液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白4基因(SpNHX4)的cDNA序列,对其响应盐胁迫的表达模式进行了分析。通过染色体步行法克隆了该基因的启动子区域,并通过生物学软... 本研究在醋栗番茄基因组鸟枪序列的基础上,基于同源序列的保守性,克隆了醋栗番茄液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白4基因(SpNHX4)的cDNA序列,对其响应盐胁迫的表达模式进行了分析。通过染色体步行法克隆了该基因的启动子区域,并通过生物学软件对该基因编码的蛋白和启动子序列进行分析。结果显示,SpNHX4的c DNA序列包含1 611 bp的开放阅读框,编码536个氨基酸。SpNHX4多肽链中疏水性氨基酸占多数,具有12个明显的跨膜结构区,符合跨膜蛋白的特征。荧光定量PCR结果显示,在NaCl胁迫条件下,SpNHX4在醋栗番茄根、茎和叶中的表达均上调,其中在叶中的表达量变化最为显著。通过PlantCARE软件对SpNHX4上游1 857 bp的启动子序列进行顺式元件预测,发现该启动子区域包含番茄典型的TATA-box"TTTTA"序列和CAAT-box转录增强子序列"CCAAT"。此外,还存在多个与激素、逆境、光诱导相关的元件。这些结果为进一步研究SpNHX4的功能和转录调控机制提供资料。 展开更多

关键词 醋栗番茄 液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白4 基因克隆 启动子 生物信息学分析

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耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌的耐药机制和同源性研究 被引量：19

6

作者 衣美英 李杰 +4 位作者 王靖 贾红兵 李春英 张悦娴 鄢盛恺 《中国感染与化疗杂志》 CAS 北大核心 2012年第4期297-301,共5页

目的研究肺炎克雷伯菌对耐碳青霉烯类抗生素的耐药机制和同源性。方法对卫生部中日友好医院从2006年1月至2011年2月临床标本中分离的肺炎克雷伯菌,用V1TEK-Ⅱ全自动微生物分析仪和常规方法进行菌种鉴定和药敏试验,筛选对碳青霉烯类抗生... 目的研究肺炎克雷伯菌对耐碳青霉烯类抗生素的耐药机制和同源性。方法对卫生部中日友好医院从2006年1月至2011年2月临床标本中分离的肺炎克雷伯菌,用V1TEK-Ⅱ全自动微生物分析仪和常规方法进行菌种鉴定和药敏试验,筛选对碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌;用三维试验和改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;用PCR扩增碳青霉烯酶基因,并对扩增产物测序,确定其基因型;接合试验研究其传播机制;通过基因外重复回文(REP)-PCR分析其同源性。结果共检测得4株耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌,其中2株菌对所测试的所有抗菌药物均耐药。1株菌产IMP-4型金属酶;未检测出其他碳青霉烯酶基因。转移接合试验呈阴性;REP-PCR显示4株菌属于3个不同的克隆型。结论该院出现碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌,属于不同克隆型,耐药机制复杂,产IMP-4型金属酶是其对碳青霉烯类抗生素耐药的原因之一。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯类抗生素 imp-4基因 耐药性

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碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的表型和基因型分析 被引量：1

7

作者 李岷 魏源华 +1 位作者 史恒芳 曹慧玲 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期623-624,共2页

目的研究本院碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌的表型和基因型。方法用纸片扩散法进行药物敏感试验,改良Hodge试验和EDTA协同试验检测耐药表型,设计通用引物行PCR检测KPC、IMP、VIM、NDM-1和OXA-23耐药基因,并测序分析。结果 14株肺炎克雷... 目的研究本院碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌的表型和基因型。方法用纸片扩散法进行药物敏感试验,改良Hodge试验和EDTA协同试验检测耐药表型,设计通用引物行PCR检测KPC、IMP、VIM、NDM-1和OXA-23耐药基因,并测序分析。结果 14株肺炎克雷伯菌呈现高度耐药性,有13株携带KPC-2基因,1株携带IMP-4基因,未检测出VIM、NDM-1和OXA-23基因。结论本院产碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌主要为KPC-2和IMP-4基因型。 展开更多

关键词 碳青霉烯酶 肺炎克雷伯菌 通用引物 KPC-2 imp-4

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一株高度耐碳青霉烯类药物的肺炎克雷伯菌耐药性研究 被引量：1

8

作者 王旭明 李天娇 莫成锦 《中国热带医学》 CAS 2011年第12期1467-1468,共2页

目的了解从临床患者病灶中分离到的一株高度耐碳青霉烯类药物的肺炎克雷伯菌的耐药机制。方法药敏试验采用微量肉汤稀释法与etest法,碳青霉烯酶表型检测采用改良Hodge试验和双纸片增效法,其基因型测定采用多组碳青霉烯耐药相关基因引物... 目的了解从临床患者病灶中分离到的一株高度耐碳青霉烯类药物的肺炎克雷伯菌的耐药机制。方法药敏试验采用微量肉汤稀释法与etest法,碳青霉烯酶表型检测采用改良Hodge试验和双纸片增效法,其基因型测定采用多组碳青霉烯耐药相关基因引物PCR并测序,由北京大学临床药理研究所负责完成。结果药敏测试结果除对阿米卡星和多粘菌素敏感外,对临床常用亚胺培南(mic>32ug/ml)、美罗培南(mic>32ug/ml)、一至四代的头孢菌素类、硅诺酮类以及庆大霉素、头孢西丁、氨曲南、复方新诺明、四环素、美满霉素、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/棒酸、头孢哌酮/舒巴坦,均表现为耐药。碳青霉烯酶表型检测试验改良Hodge试验阳性,双纸片增效法阳性,碳青霉烯耐药基因为blaIMP-4。结论产IMP-4型金属β内酰胺酶的肺炎克雷伯菌已证实在我院存在,其泛耐药性,应引起我们足够的重视。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 imp-4型金属β内酰胺酶 改良HODGE试验 双纸片增效法 药物敏感试验

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Carba NP碳青霉烯酶检测方法在医院感染监测中的应用 被引量：8

9

作者 朱雄 袁敏 +5 位作者 刘佳 龚林 陈霞 禹蕙兰 陈海 李娟 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期5721-5724,共4页

目的研究Carba NP法检测3株产酶菌株同源性及耐药机制,探讨Carba NP碳青霉烯酶检测方法在医院感染监测中的应用价值,为临床治疗提供参考依据。方法于2012年7月-2013年1月采用Carba NP法对检出3株产碳青霉烯酶克雷伯菌属细菌进行鉴定、... 目的研究Carba NP法检测3株产酶菌株同源性及耐药机制,探讨Carba NP碳青霉烯酶检测方法在医院感染监测中的应用价值,为临床治疗提供参考依据。方法于2012年7月-2013年1月采用Carba NP法对检出3株产碳青霉烯酶克雷伯菌属细菌进行鉴定、药物敏感性、菌株特征及药物敏感谱;PCR扩增和测序碳青霉烯酶的基因型;PFGE电泳探讨3株菌的亲缘关系。结果菌株1为肺炎克雷伯菌,产碳青霉烯酶酶KPC-2;菌株2为肺炎克雷伯菌,产碳青霉烯酶IMP-4,菌株3为产酸克雷伯菌,同时产KPC-2和IMP-4;PFGE结果表明该3株菌不是近源的克隆株,提示KPC-2和IMP-4基因元件在该病房的跨种属传播。结论 Carba NP能早期迅速准确的检出菌株是否产碳青霉烯酶,为产碳青霉烯酶菌株的医院感染提供早期线索,在医院感染监测、控制中有重要应用价值,结合PCR及测序,PFGE的结果能在医院获得性感染控制方面发挥积极的作用。 展开更多

关键词 碳青霉烯酶 CARBA NP法 医院感染 KPC-2基因 imp-4基因

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2株耐碳青霉烯类植生拉乌尔菌耐药基因检测分析 被引量：3

10

作者 鲁勇 汪一萍 +2 位作者 马坚 应建飞 俞燕红 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期815-817,821,共4页

目的研究耐碳青霉烯类抗菌药物的植生拉乌尔菌耐药机制。方法收集2014年10月-2015年03月临床分离的两株来自痰液标本耐碳青霉烯类植生拉乌尔菌,采用Vitek2-compact全自动微生物分析仪进行细菌鉴定,并用16SrRNA进行菌株确认,采用E-test... 目的研究耐碳青霉烯类抗菌药物的植生拉乌尔菌耐药机制。方法收集2014年10月-2015年03月临床分离的两株来自痰液标本耐碳青霉烯类植生拉乌尔菌,采用Vitek2-compact全自动微生物分析仪进行细菌鉴定,并用16SrRNA进行菌株确认,采用E-test进行药敏试验,用PCR扩增检测碳青霉烯酶(KPC、GES、IMI、NDM、VIM、IMP、SIM、OXA-48)、超广谱β内酰胺酶(TEM、SHV、CTX-M、VEB、PER)、质粒介导的喹诺酮耐药基因(qnrA、qnrB、qnrS、aac(6')-Ib-cr)以及Ⅰ类整合子可变区结构,Southern杂交方法检测2株菌株质粒相关情况。结果 1号菌株携带blaKPC-2和qnrB4耐药基因,Ⅰ类整合子基因盒种类为arr-3-dfrA27;2号菌株携带blaIMP-4、blaTEM-1、blaCTX-M-3、blaSHV-12、qnrS1和aac(6')-Ib-cr等耐药基因,但无相关整合子基因盒结构。质粒分析发现blaKPC-2和blaIMP-4均位于54kb-60kb可结合质粒上。结论两株耐碳青霉烯类泛耐药植生拉乌尔菌分别产KPC-2和IMP-4型碳青霉烯酶,需加强耐药监测,避免多重耐药菌播散。 展开更多

关键词 植生拉乌尔菌 碳青霉烯酶 质粒 KPC-2 imp-4

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早期应用AICAR对缺氧缺血性脑病新生大鼠的保护作用

11

作者 容志惠 刘伟 +2 位作者 李文斌 蔡保欢 刘东 《医药导报》 CAS 2016年第9期943-946,共4页

目的在新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)发病的不同时期应用单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)激活剂5-氨基咪唑-甲酰胺核苷酸转甲酰酶(AICAR),观察其保护作用,探讨其作用机制。方法新生大鼠160只,分为假手术组、模型对照组、AICAR30 min组、A... 目的在新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)发病的不同时期应用单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)激活剂5-氨基咪唑-甲酰胺核苷酸转甲酰酶(AICAR),观察其保护作用,探讨其作用机制。方法新生大鼠160只,分为假手术组、模型对照组、AICAR30 min组、AICAR24 h组和AICAR72 h组,各32只。采用Cresyl violet染色法比较手术后不同时间点(30 min,24 h,72 h)给予AICAR(500 mg·kg-1)对脑组织保护作用的差异;采用Foot-faults法评估大鼠远期预后;蛋白质印迹法检测脑组织中P-AMPK及三磷酸腺苷(ATP)的表达变化。结果假手术组与模型对照组大脑存活面积比例分别为(100.0±0.1)%和(45.3±6.3)%(P<0.05);手术后30 min、24 h给予AICAR治疗均有不同程度的保护作用,且手术后30 min治疗效果优于24 h(P<0.05),手术后72 h给予AICAR没有发现明显的保护作用(P>0.05)。早期给予AICAR治疗后可增加P-AMPK活性至假手术组约3倍,ATP含量可升至接近假手术组水平(P<0.05)。结论 HIE发病早期补充AICAR可调控AMPK信号通路,增加ATP含量,保护受损的神经元。 展开更多

关键词 5-氨基咪唑-甲酰胺核苷酸转甲酰酶 单磷酸腺苷激活的蛋白激酶 脑病 缺血性 缺氧 神经元

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