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基于基因表达芯片和实验验证葛根素降低膀胱尿路上皮癌T24细胞IL6表达及抑制细胞增殖的作用 被引量：1
1
作者 马雨阳 许浩 +5 位作者 潘登 王海跞 徐鹏 王靖凯 庞昆 韩从辉 《中南药学》 CAS 2024年第5期1186-1193,共8页
目的探讨葛根素抑制膀胱尿路上皮癌T24细胞增殖的作用机制及潜在作用靶点。方法CCK8实验验证葛根素对T24细胞的增殖抑制作用。火山图和热图对芯片数据进行质量控制。对基因表达芯片实验得到的差异表达基因列表进行KEGG、GO通路富集分析... 目的探讨葛根素抑制膀胱尿路上皮癌T24细胞增殖的作用机制及潜在作用靶点。方法CCK8实验验证葛根素对T24细胞的增殖抑制作用。火山图和热图对芯片数据进行质量控制。对基因表达芯片实验得到的差异表达基因列表进行KEGG、GO通路富集分析、蛋白质相互作用(PPI)和上游转录因子预测,得到关键作用靶点及通路并进行相关验证。结果葛根素抑制T24细胞的增殖活力,这种抑制作用和浓度成正比,半数抑制浓度为218μmol·L^(-1)。KEGG通路富集分析显示差异基因主要富集在细胞生长和增殖相关通路,GO通路富集分析显示差异基因主要富集在蛋白质折叠、DNA复制和肿瘤细胞坏死相关通路。PPI分析得到关键作用靶点IL6。IL6在病理分期Ⅲ、Ⅳ期的表达明显高于Ⅱ期,并且PCR实验证明葛根素可降低T24细胞中IL6的表达。GSEA分析显示IL6与上皮细胞增殖相关。上游转录因子预测得到CENPA,分子对接结果显示葛根素和CENPA之间对接良好。结论葛根素能抑制T24细胞的增殖活力,其作用机制可能是葛根素和CENPA结合,降低IL6的表达进而影响蛋白质折叠、DNA复制、肿瘤细胞坏死和增殖相关通路,最终抑制T24细胞增殖。 展开更多
关键词 膀胱尿路上皮癌 葛根素 il6 T24细胞 细胞增殖
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HL60-IL6单核细胞活化反应法在注射用肝水解肽和注射用辅酶Ⅰ热原检测中的应用研究 被引量：4
2
作者 王灿 王鸣人 +2 位作者 郑璐侠 邵泓 陈钢 《中国药师》 CAS 2019年第12期2288-2291,共4页
目的:探讨HL60-IL6单核细胞活化反应法在注射用肝水解肽和注射用辅酶Ⅰ热原检测中的应用。方法:参照2015年版中国药典通则1193,确定注射用肝水解肽和注射用辅酶Ⅰ热原测定限值及最小有效稀释浓度。采用细胞增殖抑制试验、IL-6 ELISA试... 目的:探讨HL60-IL6单核细胞活化反应法在注射用肝水解肽和注射用辅酶Ⅰ热原检测中的应用。方法:参照2015年版中国药典通则1193,确定注射用肝水解肽和注射用辅酶Ⅰ热原测定限值及最小有效稀释浓度。采用细胞增殖抑制试验、IL-6 ELISA试剂盒干扰试验和热原干扰试验分别探讨对HL60细胞生长、对IL-6和热原测定无影响的供试品浓度,进而确定适用于注射用肝水解肽和注射用辅酶Ⅰ体外热原测定的HL60-IL6方法。用该方法对1个厂家7批注射用肝水解肽、1个厂家6批注射用辅酶Ⅰ进行热原测定。结果:注射用肝水解肽和注射用辅酶Ⅰ最小有效稀释浓度分别为0.003 mg·ml^-1和0.0002 mg·ml^-1;对HL60细胞增殖无影响的最高浓度分别为1 mg·ml^-1和10 mg·ml^-1,对IL-6和热原测定无影响的最高浓度均为0.1 mg·ml^-1。根据以上实验结果确定了适合该方法的注射用肝水解肽和注射用辅酶Ⅰ浓度均为0.1 mg·ml^-1。用该方法对1个厂家7批注射用肝水解肽、1个厂家6批注射用辅酶Ⅰ供试品进行热原测定,结果均为阴性。结论:HL60-IL6方法适用于注射用肝水解肽和注射用辅酶Ⅰ热原测定。 展开更多
关键词 单核细胞活化反应法 HL60-il6 注射用肝水解肽 注射用辅酶Ⅰ
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重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38在大肠杆菌中的表达及其细胞毒性 被引量：1
3
作者 彭超 李岩松 +1 位作者 何晶龙 郭德军 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第1期14-19,29,共7页
目的 在大肠杆菌中表达、纯化重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38,并检测其细胞毒性。方法以PHis-hIL6(T22)-PE38质粒为模板,PCR扩增hIL6(T22)-PE38基因,插入表达载体pET-28a(+)的NcoⅠ和XhoⅠ多克隆位点,构建重组表达质粒,分别转化至大肠杆菌... 目的 在大肠杆菌中表达、纯化重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38,并检测其细胞毒性。方法以PHis-hIL6(T22)-PE38质粒为模板,PCR扩增hIL6(T22)-PE38基因,插入表达载体pET-28a(+)的NcoⅠ和XhoⅠ多克隆位点,构建重组表达质粒,分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)、Rosettablue(DE3)和BL21(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达,并对表达条件进行优化。表达产物经亲和层析纯化后,检测其细胞毒性。结果重组表达质粒pET-28a-hIL6(T22)-PE38经双酶切和测序证明构建正确。表达的重组毒素相对分子质量约56 000,在大肠杆菌Rosettablue(DE3)中表达量最高。最适诱导表达条件为:1 mmol/L IPTG 28℃诱导4 h。重组毒素能选择性地杀伤人骨髓瘤细胞U266和鼠骨髓瘤细胞SP2/0,体外对U266和SP2/0细胞的IC50分别为0.5～1.0和1.0～1.5μg/ml。结论重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38在大肠杆菌中成功获得可溶性表达,纯化的蛋白可明显选择性杀伤U266和SP2/0细胞。 展开更多
关键词 免疫毒素类 il6(T22)-PE38 原核细胞 基因表达 细胞毒性
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慢性乙型重型肝炎中TNF-α,IL1β,IL6与病毒含量关系的研究 被引量：3
4
作者 邬小萍 易冬英 黄建生 《江西医学院学报》 CAS 2006年第1期16-18,共3页
目的探讨细胞因子TNF-α,IL1β,IL6在慢性乙型重型肝炎中与病毒含量的关系及其在重型肝炎中的作用和临床意义。方法60例慢性乙型重型肝炎中的血清标本进行HBVDNA和TNF-α,IL1β,IL6的测定,方法分别采用荧光定量PCR和ELISA法,并进行临床... 目的探讨细胞因子TNF-α,IL1β,IL6在慢性乙型重型肝炎中与病毒含量的关系及其在重型肝炎中的作用和临床意义。方法60例慢性乙型重型肝炎中的血清标本进行HBVDNA和TNF-α,IL1β,IL6的测定,方法分别采用荧光定量PCR和ELISA法,并进行临床观察。结果慢性乙型重型肝炎中病毒载量不同组之间TNF-α,IL1β,IL6有显著性区别P<0.05病毒载量高时TNF-α活性值较高而IL1,βIL6则表现活性值低;另存活组病人TNF-α低,IL1,IL6升高较死亡组,P<0.05。结论慢性乙型重型肝炎中病毒含量一定程度上影响着细胞因子的变化,影响病情预后,对临床有一定的指导意义。 展开更多
关键词 慢性乙型重型肝炎 TNF-α IL1β il6 HBVDNA
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染色体1q12区段IL6R基因多态性与儿童哮喘易感性的研究 被引量：1
5
作者 李增清 杨东新 +6 位作者 周真 赵小琴 赵慧 谢丹宇 郭素华 胡兢晶 王波 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第24期4684-4686,4726,共4页
目的:检测染色体1q12区段IL6R基因多态性与儿童发生支气管哮喘易感性的关系。方法:150名支气管哮喘患儿为支气管哮喘组。150名健康儿童为对照组。采用质谱单核苷酸多态性(SNP)技术,对两组儿童的IL6R基因进行分析。结果:两组IL6基因位点... 目的:检测染色体1q12区段IL6R基因多态性与儿童发生支气管哮喘易感性的关系。方法:150名支气管哮喘患儿为支气管哮喘组。150名健康儿童为对照组。采用质谱单核苷酸多态性(SNP)技术,对两组儿童的IL6R基因进行分析。结果:两组IL6基因位点的分布符合Hardy-Weinburg平衡定律。两组IL6R基因rs4845374位点的基因型与等位基因相比较,无明显差异(X2值分别为3.442和3.701;P值分别为0.179和0.088)。两组IL6R基因rs2228145位点的基因型与等位基因相比较,差异均有统计学意义(X2值分别为6.635和9.200;P值分别为0.036和0.003)。IL6R基因rs2228145位点基因型的变异等位基因T、C与支气管哮喘存在密切联系,CC、TT型出现支气管哮喘的风险均比CT型高。结论:IL6R基因rs4845374位点与儿童支气管哮喘无相关性,而rs2228145位点多态性与儿童支气管哮喘有相关性。 展开更多
关键词 il6R 基因多态性 哮喘 儿童
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HL60-IL6法在注射用胶原酶和尿激酶热原检测中的应用研究 被引量：2
6
作者 王灿 王鸣人 +2 位作者 郑璐侠 邵泓 陈钢 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期455-459,共5页
目的探讨HL60-IL6单核细胞活化反应法在注射用胶原酶和尿激酶热原检测中的应用。方法参照中国药典2015年版通则1193,确定注射用胶原酶和尿激酶最小有效稀释浓度。通过细胞增殖抑制试验、热原干扰试验和白介素-6(interleukin-6,IL-6)干... 目的探讨HL60-IL6单核细胞活化反应法在注射用胶原酶和尿激酶热原检测中的应用。方法参照中国药典2015年版通则1193,确定注射用胶原酶和尿激酶最小有效稀释浓度。通过细胞增殖抑制试验、热原干扰试验和白介素-6(interleukin-6,IL-6)干扰试验探讨对HL60细胞生长,对热原和IL-6测定无影响的供试品浓度,进而确定适用于注射用胶原酶和尿激酶体外热原测定的HL60-IL6方法。用该方法对2批注射用胶原酶、19批注射用尿激酶供试品进行热原测定。结果注射用胶原酶最小有效稀释浓度为0.04U·mL^-1,当浓度≤60U·mL^-1时对HL60细胞生长无影响,浓度≤6 U·mL^-1时对IL-6和热原测定无影响。注射用尿激酶最小有效稀释浓度为100 U·mL^-1,当浓度≤1 000 U·mL^-1时对HL60细胞生长无影响,浓度≤500U·mL^-1时对IL-6和热原测定无影响。因此,适合HL60-IL6单核细胞活化反应法的注射用胶原酶和尿激酶浓度分别为6,500U·mL^-1。用该方法对供试品进行热原测定,结果均未检出热原。结论 HL60-IL6方法适用于注射用胶原酶和尿激酶热原测定。 展开更多
关键词 HL60-il6单核细胞活化反应法 胶原酶 尿激酶
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利用小干涉RNA抑制肿瘤细胞MCF-7中NF-IL6的表达 被引量：2
7
作者 李晓荣 李平 +4 位作者 杨尧 李晓明 彭丽 曹诚 马清钧 《生物技术通讯》 CAS 2005年第5期479-481,共3页
RNA干扰被证明是一项能有效而特异地抑制基因表达的新技术。转录因子NF-IL6特异地在肿瘤组织中过量表达,许多报道表明抑制它的功能对肿瘤治疗有利。构建能够沉默转录因子NF-IL6表达的小干涉RNA(siRNA)质粒,转染肿瘤MCF-7细胞后,用Wester... RNA干扰被证明是一项能有效而特异地抑制基因表达的新技术。转录因子NF-IL6特异地在肿瘤组织中过量表达,许多报道表明抑制它的功能对肿瘤治疗有利。构建能够沉默转录因子NF-IL6表达的小干涉RNA(siRNA)质粒,转染肿瘤MCF-7细胞后,用Western印迹法和荧光素酶活性实验检测NF-IL6表达水平和转录活性的改变。结果发现NF-IL6的表达水平被下调80%,转录激活能力降低了60%,转染细胞内部出现大量空洞,细胞增殖停滞。 展开更多
关键词 小干涉RNA NF-il6 蛋白表达 转录活性 肿瘤
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以pMSEx-1作为共转染质粒观察人NF-IL6过量表达对NIH3T3细胞成瘤性的影响 被引量：1
8
作者 朱敏生 刘定干 李载平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期93-95,共3页
我们曾以ｐＳＶ２ｎｅｏ作为共转染质粒观察到ＮＦＩＬ６具有转化基因活性。本文以ｐＭＥＳｘ１（含ｎｅｏ抗性基因）质粒作为共转染质粒，发现能表达有义ＮＦＩＬ６的ＮＩＨ３Ｔ３转染子，可同时出现转化形态的克隆和扁平形态... 我们曾以ｐＳＶ２ｎｅｏ作为共转染质粒观察到ＮＦＩＬ６具有转化基因活性。本文以ｐＭＥＳｘ１（含ｎｅｏ抗性基因）质粒作为共转染质粒，发现能表达有义ＮＦＩＬ６的ＮＩＨ３Ｔ３转染子，可同时出现转化形态的克隆和扁平形态的克隆，二者比例６∶４，且ＮＦＩＬ６的表达状态相似。我们提出，ＮＦＩＬ６在ＮＩＨ３Ｔ３细胞表现为转化基因活性时，作用方式具有随机性。本文还提出。 展开更多
关键词 pMSEx-1 NF-il6 转化基因 肿瘤发生
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IL4和IL6基因多态性与胃癌风险的相关性研究 被引量：9
9
作者 吴少锋 《解放军预防医学杂志》 CAS 2018年第3期386-389,共4页
目的研究IL4和IL6基因多态性与胃癌风险的相关性。方法选择2016年6月至2017年6月于陕西中医药大学第二附属医院就诊的符合入选条件的胃癌患者共300例(病例组),以及健康对照人群300例(对照组),分别采集血样。采用Mass ARRAY方法对rs2243... 目的研究IL4和IL6基因多态性与胃癌风险的相关性。方法选择2016年6月至2017年6月于陕西中医药大学第二附属医院就诊的符合入选条件的胃癌患者共300例(病例组),以及健康对照人群300例(对照组),分别采集血样。采用Mass ARRAY方法对rs2243250、rs2227284、rs2243267、rs1800796、rs2069837和rs2069840六个位点进行基因分型,用SPSS 19.0在线软件计算基因多态性与胃癌患病风险的相关性。结果 6个候选SNP位点全都符合哈德-温伯格平衡(P-HWE>0.05),通过比较病例组和对照组的最小等位基因频率发现,rs1800796和rs2069837的最小等位基因G与胃癌风险增加具有相关性(P<0.05)。通过比较两组间的基因型频率差异发现,rs2243267和rs1800796的GC和GG基因型,rs2069837的AG和GG基因型,均与胃癌患病风险增加相关(P<0.05)。引入遗传模型分析后发现,rs2243267、rs1800796和rs2069837在三个遗传模型下都与胃癌风险增加具有相关性(P<0.05);而rs2069840仅在显性模型下与胃癌风险增加具有相关性(P<0.05)。此外,单体型分析显示由rs1800796、rs2069837和rs2069840三个位点组成的GAC单体型与胃癌患病风险增加具有相关性(P<0.05)。结论 IL4基因rs2243267位点和IL6基因的rs1800796、rs2069837、rs2069840位点以及其组成的单体型GAC可能与胃癌风险增加具有相关性。 展开更多
关键词 胃癌 IL4 il6 单核苷酸多态性 关联分析
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IL6/IL6R系统介导重组IL6-PE40外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞的新策略
10
作者 崔建舞 奚永志 +7 位作者 郑黎燕 刘爽 刘楠 屠敏 郭斯启 陈兴国 金荔 孔繁华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期1048-1049,共2页
关键词 白血病 il6/il6R 重组il6-PE40外毒素融合蛋白
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TNFa、IL6与肝储备功能关系的探讨 被引量：5
11
作者 吴泽建 雷正明 +1 位作者 黎靖 甘西仑 《泸州医学院学报》 2001年第6期483-485,共3页
目的 :探讨外周血中TNFa、IL6与肝功能之间的关系 ,了解TNFa、IL6预测肝储备功能的方法可行性。方法 :采用放射免疫分析法测量 84例肝脏外科疾病的病人 (梗阻性黄疸 5 9例 ;肝硬化门脉高压 10例 ;肝癌 15例 )。外周血中TNFa和IL6的浓度... 目的 :探讨外周血中TNFa、IL6与肝功能之间的关系 ,了解TNFa、IL6预测肝储备功能的方法可行性。方法 :采用放射免疫分析法测量 84例肝脏外科疾病的病人 (梗阻性黄疸 5 9例 ;肝硬化门脉高压 10例 ;肝癌 15例 )。外周血中TNFa和IL6的浓度。同时病人行常规肝功检测。结果 :肝病组外周血清中TNFa、IL6的浓度比对照显著升高 ,肝病组为TNFa13 .35± 5 .14(fmol l) ;IL6为 2 40 .6 2± 70 .17(pg l)对照组TNF为 6 .2 1± 2 .0 3(fmol l) ,IL为 93.75± 40 .5 7(pg l)肝病组与对照组比较 ,TNFa和IL6的P值均 <0 .0 1;肝功能越差TNFa越高 ,且在肝功A级、B级、C级三级间两两比较亦有差异P <0 .0 5。结论 展开更多
关键词 肝脏储备功能 细胞因子 相关性 TNFA il6 肝脏疾病 肝功能
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渐渗系IL6的遗传评价和渗入片段的鉴定 被引量：2
12
作者 王为 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2009年第5期394-398,共5页
用海岛棉3-79的6号染色体渐渗系(简称IL6)和背景亲本TM-1构建了F2、F2:3群体,在2年的田间重复实验中调查了18个重要农艺性状,作遗传评价。并获得F2群体的分子数据,进行QTL定位和单标记分析。结果表明:亲本IL6中的渐渗片段,组成有3-79的... 用海岛棉3-79的6号染色体渐渗系(简称IL6)和背景亲本TM-1构建了F2、F2:3群体,在2年的田间重复实验中调查了18个重要农艺性状,作遗传评价。并获得F2群体的分子数据,进行QTL定位和单标记分析。结果表明:亲本IL6中的渐渗片段,组成有3-79的6号染色体,3-79的非6号染色体和大部分的TM-1片段。IL6的产量、品质性状都优于受体亲本TM-1,遗传分析也发现产量、品质性状增效基因位点来自IL6,说明所渗入片段起着关键作用。亲本农艺性状表现和遗传分析结果表明,IL6渗入片段含有总铃数、单株铃数、衣分、果枝数、比强度、麦克隆值等性状的主基因。而QTL定位和单标记分析结果显示,IL6渗入片段含有单株铃数、衣分、果枝数、株高、子指、整齐度等性状的QTLs。 展开更多
关键词 渐渗系il6 农艺性状 遗传分析 QTL鉴定
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新型重组IL6D24PE40KDEL外毒素融合蛋白的理化分析
13
作者 崔建武 郭斯启 +3 位作者 孙玉英 刘楠 梁飞 奚永志 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期825-828,共4页
为了对构建成功的新型重组IL6D2 4 PE4 0KDEL外毒素融合蛋白的部分物化表征进行分析鉴定 ,采用Edman法、SDS PAGE法、胰蛋白酶消化的MALDI TOF MS质谱法、蛋白印迹法和MTT法分别测定该融合蛋白的N 末端 6个氨基酸、相对分子量、肽谱、... 为了对构建成功的新型重组IL6D2 4 PE4 0KDEL外毒素融合蛋白的部分物化表征进行分析鉴定 ,采用Edman法、SDS PAGE法、胰蛋白酶消化的MALDI TOF MS质谱法、蛋白印迹法和MTT法分别测定该融合蛋白的N 末端 6个氨基酸、相对分子量、肽谱、抗原特异性以及靶向杀伤生物学活性。结果表明 :所构建表达纯化的新型重组IL6D2 4 PE4 0KDEL外毒素融合蛋白N末端 6个氨基酸序列为Met Ile Asp Lys Gln Ile ,而IL 6缺失 2 4个氨基酸后的原序列为Ile Asp Lys Gln Ile ,由于采用了大肠杆菌表达系统 ,因此在N末端第 1位多出了 1个Met,经12 %SDS PAGE蛋白电泳和凝胶成像系统分析计算 ,其相对分子量为 5 8.75kD ,与理论值 5 6.9kD相比误差在5 %之内。MALTI TOF MS质谱测定共获得 10个与理论预测值相符的肽段 ,经瑞士生物信息研究所的EXPASY分子生物服务网站的Peptident数据库搜索证明 ,在分子量为 5 7kD左右的范围内未检索到与上述条件相符的已知蛋白 ,证明本融合蛋白为全新蛋白 ,与预测的目的蛋白相符。WB实验显示IL6D2 4 PE4 0KDEL外毒素融合蛋白能与IL 6及PEA抗体特异性结合。MTT生物活性测定表明 ,该融合蛋白对表达IL 6R的多发性骨髓瘤细胞系U2 66产生特异性杀伤 ,而对不表达IL6R的CEM淋巴细胞系无任何杀伤。结论 展开更多
关键词 外毒素融合蛋白 il6D24-PE40KDEL 纯化鉴定
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新型重组IL6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白的表达优化及下游纯化
14
作者 崔建武 罗卫东 +3 位作者 梁飞 刘楠 孙玉英 奚永志 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2005年第6期454-458,共5页
目的优化提高重组IL6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白在原核细胞中的表达量,并建立有效的下游纯化路线。方法对IL6D24-PE40KDEL的受体菌、菌体生长状态及诱导表达时间等进行优化,经反复筛选确定了高效简捷的纯化路线:即将Q型强离子交换树脂... 目的优化提高重组IL6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白在原核细胞中的表达量,并建立有效的下游纯化路线。方法对IL6D24-PE40KDEL的受体菌、菌体生长状态及诱导表达时间等进行优化,经反复筛选确定了高效简捷的纯化路线:即将Q型强离子交换树脂与DEAE弱离子交换树脂相结合的两步纯化法。结果宿主工程菌HB101的优化表达条件为2%接种量,30℃培养3h,42℃再诱导4h,可使目标蛋白的表达量由最初的13.5%提高到23.8%;经12%SDS-PAGE蛋白电泳证实,特异性表达产物为包涵体形式,占包涵体蛋白的40%,分子量约为60kD,与所预测的IL6D24-PE40KDEL融合蛋白的分子量相吻合。两步纯化法可获得纯度>95%的IL6D24-PE40KDEL融合蛋白,纯化蛋白的回收率为8.7%,经Western-blot实验证明,它可同PEA多抗和IL6单抗特异性的结合。MTT试验检测证实,该融合蛋白能特异性的杀伤高表达IL6R的U266多发性骨髓瘤细胞,ID50为180ng/ml;而对IL6R的T淋巴白血病细胞CEM则无杀伤,ID50>1000ng/ml。结论获得了高表达重组IL6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白的菌株并建立了高效简捷的下游纯化路线,融合蛋白能特异性的杀伤表达IL6R的多发性骨髓瘤细胞系U266。 展开更多
关键词 毒素融合蛋白 重组 il6D24-PE40KDEL 蛋白/表达优化 蛋白/纯化
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IL6基因内含子3多态性与仔猪腹泻、生长和公猪繁殖性状的关联分析 被引量：7
15
作者 查安东 邢桂玲 +4 位作者 高晓雯 张龙 狄生伟 王希彪 牛步月 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1674-1682,共9页
旨在研究猪IL6基因的多态性及其与猪经济性状相关的关联性,寻找与仔猪腹泻、生长和公猪繁殖性状相关的分子标记。利用PCR扩增在IL6基因的内含子3,检测到1个SNP位点g.1704674C>T,该SNP可引起HpaⅡ酶切位点的改变。通过PCR-RFLP检测28... 旨在研究猪IL6基因的多态性及其与猪经济性状相关的关联性,寻找与仔猪腹泻、生长和公猪繁殖性状相关的分子标记。利用PCR扩增在IL6基因的内含子3,检测到1个SNP位点g.1704674C>T,该SNP可引起HpaⅡ酶切位点的改变。通过PCR-RFLP检测281头民猪仔猪、182头长白仔猪、215头杜洛克公猪以及69头大白公猪IL6基因的多态性,分析多态位点与仔猪腹泻、生长和公猪繁殖性状的关联性;利用Real-time PCR技术分析IL6基因在LPS刺激民猪外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)后的表达模式。结果表明,在民猪仔猪中,CC型个体的腹泻指数显著高于TT型个体(P<0.05),CC型个体的14、21、28、35日龄体重及日增重均显著低于TC型个体(P<0.05),且CC型个体的21日龄体重也显著低于TT型个体(P<0.05);在长白仔猪中,TT型个体的出生重显著高于CC型个体(P<0.05),7日龄体重显著高于TC型个体(P<0.05);在杜洛克公猪中,TT和TC基因型个体射精量显著大于CC基因型个体(P<0.05);在大白公猪中,CC基因型个体精子密度显著大于TC基因型个体(P<0.05)。PBMC受LPS刺激12和24h后,IL6基因表达量均显著升高(P<0.01或P<0.05)。综上表明,IL6基因g.1704674C>T位点对仔猪腹泻、生长以及公猪繁殖都有一定的影响,可作为猪育种过程中一个潜在的分子标记。 展开更多
关键词 il6 SNP 仔猪腹泻 生长 公猪繁殖
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血液净化治疗对有机磷中毒患者CHE、CK-MB及IL6水平的影响 被引量：4
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作者 胡自廷 张清学 +5 位作者 王建军 戴成才 孙杰 刘杰 崔涛 赵曙光 《分子诊断与治疗杂志》 2022年第9期1586-1589,共4页
目的分析血液净化治疗对有机磷中毒患者胆碱酯酶(CHE)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)及白介素-6(IL-6)水平的影响。方法选取2015年1月至2022年1月于太和县人民医院治疗的102例有机磷中毒患者的临床资料,根据不同治疗方式将其分为观察组(n=53,... 目的分析血液净化治疗对有机磷中毒患者胆碱酯酶(CHE)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)及白介素-6(IL-6)水平的影响。方法选取2015年1月至2022年1月于太和县人民医院治疗的102例有机磷中毒患者的临床资料,根据不同治疗方式将其分为观察组(n=53,血液净化治疗)、对照组(n=49,常规治疗)。比较两组临床疗效、炎性因子[IL-6、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)]、心肌酶谱[CK-MB、肌酸激酶(CK)、肌钙蛋白(cTnI)]、CHE水平以及并发症。结果观察组临床总有效率(94.34%)高于对照组临床总有效率(80.43%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组IL-6、PCT、CRP水平均出现下降,其中观察组下降更为明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组CK、CK-MB、cTnI均出现下降,CHE水平上升,其中观察组变化更为明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组并发症总发生率(11.32%)低于对照组总发生率(28.57%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论有机磷中毒患者采取血液净化治疗疗效确切,可有效降低患者的IL-6、PCT、CRP水平,改善患者的CK、CK-MB、cTnI及CHE水平,且具有一定的安全性,值得临床应用推广。 展开更多
关键词 血液净化治疗 CHE 炎性因子 CK-MB il6
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基于miR⁃224⁃5P调控的IL6ST/JAK/STAT信号通路在糖尿病视网膜病变发生发展中的作用 被引量：4
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作者 赵鑫 杨静 辛向阳 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第5期357-362,共6页
目的探讨miR⁃224⁃5P在糖尿病视网膜病变(DR)患者中的表达变化及其在高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE⁃19)中的作用和机制。方法抽取DR患者及健康人群各6名的外周血,RT⁃qPCR检测miR⁃224⁃5P相对表达量。将正常培养的ARPE⁃19细胞随机... 目的探讨miR⁃224⁃5P在糖尿病视网膜病变(DR)患者中的表达变化及其在高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE⁃19)中的作用和机制。方法抽取DR患者及健康人群各6名的外周血,RT⁃qPCR检测miR⁃224⁃5P相对表达量。将正常培养的ARPE⁃19细胞随机分成高糖组(给予30 mmol·L^(-1)高糖)、高糖+miR⁃224⁃5P mimics组(转染100 nmol·L^(-1) miR⁃224⁃5P mimics后给予30 mmol·L^(-1)高糖)、高糖+miR⁃224⁃5P inhibitor组(转染100 nmol·L^(-1) miR⁃224⁃5P inhibitor后给予30 mmol·L^(-1)高糖)、高糖+OE⁃IL6ST组(转染100 nmol·L^(-1) OE⁃IL6ST后给予30 mmol·L^(-1)高糖)和高糖+miR⁃224⁃5P mimics+OE⁃IL6ST组(转染100 nmol·L^(-1) miR⁃224⁃5P mimics和100 nmol·L^(-1) OE⁃IL6ST后给予30 mmol·L^(-1)高糖),CCK⁃8检测细胞活力,Transwell检测细胞迁移率,双荧光素酶实验验证miR⁃224⁃5P与IL6ST的靶向关系,Western blot检测IL6ST、P⁃JAK及P⁃STAT蛋白表达,ELISA检测细胞中IL⁃1β、IL⁃6及TNF⁃α蛋白表达水平。通过过表达IL6ST进一步验证miR⁃224⁃5P是否通过IL6ST/JAK/STAT通路发挥作用。结果DR患者外周血中miR⁃224⁃5P mRNA相对表达量显著低于健康人群(P<0.001)。与高糖组相比,高糖+miR⁃224⁃5P mimics组细胞活力、细胞迁移率增高,高糖+miR⁃224⁃5P inhibitor组细胞活力、细胞迁移率降低(均为P<0.001)。双荧光素酶实验检测结果证实IL6ST是miR⁃224⁃5P调控的靶基因。与高糖组相比,高糖+miR⁃224⁃5P mimics组细胞的IL6ST蛋白表达水平降低,P⁃JAK和P⁃STAT蛋白表达水平升高(均为P<0.05);高糖+miR⁃224⁃5P inhibitor组细胞的IL6ST蛋白表达水平升高(P<0.05),P⁃JAK和P⁃STAT蛋白表达水平降低(均为P<0.05)。与高糖组相比,高糖+miR⁃224⁃5P mimics组细胞的IL⁃1β、IL⁃6及TNF⁃α蛋白表达水平均下降(均为P<0.01),高糖+miR⁃224⁃5P inhibitor组细胞的IL⁃1β、IL⁃6及TNF⁃α蛋白表达水平均显著上升(均为P<0.01)。高糖+miR⁃224⁃5P mimics+OE⁃IL6ST组细胞活力和细胞迁移率均较高糖+miR⁃224⁃5P mimics组显著降低(均为P<0.001)。与高糖+OE⁃IL6ST组相比,高糖+miR⁃224⁃5P mimics+OE⁃IL6ST组细胞的P⁃JAK和P⁃STAT蛋白表达水平均升高(均为P<0.001);与高糖+miR⁃224⁃5P mimics组相比,高糖+miR⁃224⁃5P mimics+OE⁃IL6ST组细胞的P⁃JAK和P⁃STAT蛋白表达水平均降低(均为P<0.001)。结论miR⁃224⁃5P在DR患者血液中表达降低,过表达miR⁃224⁃5P可降低高糖引起的炎症因子表达,并可通过IL6ST/JAK/STAT信号通路增加高糖诱导的ARPE⁃19细胞活力及细胞迁移率,从而调控DR的发生和发展。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 miR⁃224⁃5P il6ST/JAK/STAT通路
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HL60-IL6单核细胞活化反应测定法在细菌内毒素工作标准品效价测定中的应用 被引量：1
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作者 王鸣人 段徐华 +3 位作者 王灿 郑璐侠 邵泓 陈钢 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第20期1711-1716,共6页
目的将HL60-IL6单核细胞活化反应测定法应用于细菌内毒素工作标准品的效价测定中。方法将细菌内毒素国家标准品作为标准品,细菌内毒素工作标准品作为待标品,按《美国药典》<1033>生物检定方法验证指导原则进行方法学验证,验证指... 目的将HL60-IL6单核细胞活化反应测定法应用于细菌内毒素工作标准品的效价测定中。方法将细菌内毒素国家标准品作为标准品,细菌内毒素工作标准品作为待标品,按《美国药典》<1033>生物检定方法验证指导原则进行方法学验证,验证指标包括专属性、相对准确度、精密度、线性和范围。采用经验证的HL60-IL6单核细胞活化反应测定法对细菌内毒素工作标准品进行效价测定,并比较与其标示量的一致性。结果专属性考察结果符合可接受标准。相对偏差的置信区间均在-11%~12%内,直线回归方程斜率在0.8~1.25内,中间精密度均低于20%,线性相关系数为0.967,大于0.95,均符合可接受标准。相对效价水平范围为0.64~1.56。采用经验证的HL60-IL6法进行7次效价测定结果的平均值为每支81.9 EU,置信区间为每支75.04~89.36 EU,与标示值(每支80 EU)一致。结论采用HL60-IL6法进行内毒素工作标准品效价测定的结果与其标示量一致,该法可用于细菌内毒素工作标准品的效价测定。 展开更多
关键词 HL60-il6法 细菌内毒素标准品 效价测定 生物检定方法验证 《美国药典》
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粪钙卫蛋白、IL6、IgA联合检测在溃疡性结肠炎诊疗中的价值 被引量：3
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作者 汪雯 杨军平 肖亮 《江西医药》 CAS 2023年第7期781-785,共5页
目的本研究拟从炎症状态、细胞免疫、体液免疫水平,探讨粪钙卫蛋白(Fecal Calprotectin,FC)、IL6、IgG、IgA、T淋巴细胞亚群检测在溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)诊疗中的价值。方法选取2019年12月至2022年12月江西中医药大学附... 目的本研究拟从炎症状态、细胞免疫、体液免疫水平,探讨粪钙卫蛋白(Fecal Calprotectin,FC)、IL6、IgG、IgA、T淋巴细胞亚群检测在溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)诊疗中的价值。方法选取2019年12月至2022年12月江西中医药大学附属医院肛肠科溃疡性结肠炎确诊病例103例,其中UC活动组46例,UC缓解组57例;另选同期正常对照组50例。检测FC、IL6、IgG、IgA、T淋巴细胞亚群,比较各组检测指标之间的差异及相关性,Logistic回归分析各检测指标与疾病进展的影响,ROC曲线分析各检测指标的疗效价值。结果UC对照组、UC缓解组、UC活动组比较,3组间年龄及性别差异无统计学意义(P>0.05);UC活动组中FC、IL6、IgA、CD3^(+)CD4^(+)(%)、CD3^(+)CD8^(+)(%)水平与UC缓解组、对照组差异有统计学意义(P<0.05),UC缓解组与对照组中仅FC比较差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析发现FC、IL6、IgA是溃疡性结肠炎进展的独立影响因素;比较活动组与缓解组ROC曲线发现,FC与IgG、CD3^(+)CD4^(+)(%)、CD3^(+)CD8^(+)(%)之间AUC比较差异有统计学意义(P<0.05),其余各指标间差异无统计学意义(P>0.05),选取FC、IL6、IgA联合检测,发现诊疗价值明显提升,除FC外,FC^(+)、IL6^(+)、IgA与IL6、IgG、IgA、CD3^(+)CD4^(+)(%)、CD3^(+)CD8^(+)(%)相比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论粪钙卫蛋白在溃疡性结肠炎的诊断和评估中具有较好的价值,FC联合IgA、IL6三项同时检测,能有效评估溃疡性结肠炎的进展程度,有助于该疾病的早期干预和预防。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 粪钙卫蛋白 il6 IGA
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IL6_(23)-PE40重组毒素的表达和对肿瘤细胞的杀伤效果 被引量：1
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作者 柳增善 朱平 +1 位作者 孟锐奇 王晓玉 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第11期972-975,共4页
目的 :以IL 6作为导向载体 ,PE4 0作为杀伤毒素 ,构建重组毒素对肿瘤细胞具有特异的杀伤功能 .方法 :通过构建IL6 (2 3 ) PE4 0重组毒素质粒 ,经大肠杆菌高效表达 ,纯化表达产物 ,进行细胞的毒性试验 .结果 :表达产物具有杀伤骨髓瘤细... 目的 :以IL 6作为导向载体 ,PE4 0作为杀伤毒素 ,构建重组毒素对肿瘤细胞具有特异的杀伤功能 .方法 :通过构建IL6 (2 3 ) PE4 0重组毒素质粒 ,经大肠杆菌高效表达 ,纯化表达产物 ,进行细胞的毒性试验 .结果 :表达产物具有杀伤骨髓瘤细胞、急性髓样白血病细胞 ,胃癌细胞 ,肝癌细胞和喉癌细胞的毒性 ,当重组毒素浓度为 0 .6 μg·L-1 时可杀伤 5 0 %的SP2 / 0细胞 ,而对其他细胞无毒性 .结论 :表达的重组毒素可特异杀伤骨髓瘤细胞等 5种肿瘤细胞 ,而对试验中其他 5种肿瘤细胞及 展开更多
关键词 il6(23)PE40 重组毒素 肿瘤细胞
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