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下调IL35通过上调自噬相关蛋白表达而抑制肝细胞癌侵袭和迁移 被引量:4
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作者 易言 陈青松 吴忠均 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期441-449,共9页
目的探讨白细胞介素35(interleukin 35,IL35)在肝癌中的表达及其临床意义、潜在的分子机制。方法收集手术确诊的肝细胞肝癌和癌旁组织40对。采用RT-qPCR和Western blot检测IL35在肝癌和癌旁组织中的表达,并分析IL35与各临床指标的相关性... 目的探讨白细胞介素35(interleukin 35,IL35)在肝癌中的表达及其临床意义、潜在的分子机制。方法收集手术确诊的肝细胞肝癌和癌旁组织40对。采用RT-qPCR和Western blot检测IL35在肝癌和癌旁组织中的表达,并分析IL35与各临床指标的相关性。Western blot检测IL35在肝癌细胞中的表达。慢病毒转染下调IL35。CCK-8和集落形成检测细胞增殖,Transwell实验检测侵袭和迁移,Western blot检测细胞自噬和EMT相关指标。结果IL35高表达于肝癌组织中(P<0.01);与HL7702肝细胞相比,IL35蛋白表达在Hep3B、Huh7、SMMC7721、Bel7402细胞中升高,且Hep3B表达最高(P<0.01);高表达与血管侵犯相关(P=0.0033);Transwell实验表明下调L35能有效抑制肝癌细胞侵袭和转移(P<0.01);CCK8和平板克隆实验表明,下调IL35能有效抑制肝癌细胞增殖(P<0.01);Western blot结果显示,下调IL35能促进LC3BII、Beclin1表达,抑制p62表达(P<0.01),同时促进E-cadherin表达并抑制N-cadherin、Vimentin的表达(P<0.01)。结论IL35高表达于肝细胞肝癌组织和肝癌细胞中,其表达与肝癌的血管侵犯相关;下调IL35能通过诱导自噬达到抑制肝癌细胞的侵袭和迁移的目的。 展开更多
关键词 interleukin35 il35 肝细胞癌 自噬 侵袭 迁移 上皮间质转化
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IL35^+B细胞在系统性红斑狼疮患者外周血中表达分析 被引量:2
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作者 陆玲娜 韩文伦 《浙江临床医学》 2020年第3期436-437,440,共3页
目的探讨CD19^+EBI3^+p35^+B细胞(IL35+B细胞)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中的表达及临床意义.方法选取活动期SLE患者16例、稳定期SLE患者21例及健康对照者17例.运用流式细胞术检测外周血CD19^+EBi3^+p35^+B细胞表达频率并统计分析... 目的探讨CD19^+EBI3^+p35^+B细胞(IL35+B细胞)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中的表达及临床意义.方法选取活动期SLE患者16例、稳定期SLE患者21例及健康对照者17例.运用流式细胞术检测外周血CD19^+EBi3^+p35^+B细胞表达频率并统计分析,同时分析IL35+B细胞与SLEDAI评分和C3、C4的相关性.结果(1)IL35+B细胞活动期SLE为(1.063±1.467)%,稳定期SLE为(3.458±3.124)%,健康对照为(4.639±3.047)%.活动期SLE患者IL35+B细胞表达频率低于稳定期SLE与健康对照组(P<0.01).(2)SLE患者IL35+B细胞与SLEDAI评分呈负相关,而与C3、C4呈正相关(P<0.01).结论活动期IL35+B细胞表达明显降低,且随着SLEDAI评分的升高而下降,并与C3、C4呈正相关.提示IL35+B细胞下降导致负性免疫调节机制的紊乱可能与SLE的发病机制相关. 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 il35 CD19^+EBi3^+p35^+i35B细胞
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IL35慢病毒质粒的提取 被引量:1
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作者 李婷 刘潺潺 《生物技术》 CAS 2019年第1期35-38,共4页
[目的]构建可以大规模提取IL35的新型质粒p LVX-IRES-Zs Green1-mus-IL35。[方法]质粒p LVX-IRES-Zs Green1和p UC57-mus-IL35-拼接用XhoⅠ和NotⅠ进行双酶切,将回收纯化的目的片段mus-IL35-拼接(NotⅠ/XhoⅠ)与回收纯化的载体p LVX-IRE... [目的]构建可以大规模提取IL35的新型质粒p LVX-IRES-Zs Green1-mus-IL35。[方法]质粒p LVX-IRES-Zs Green1和p UC57-mus-IL35-拼接用XhoⅠ和NotⅠ进行双酶切,将回收纯化的目的片段mus-IL35-拼接(NotⅠ/XhoⅠ)与回收纯化的载体p LVX-IRES-Zs Green1(NotⅠ/XhoⅠ)连接,连接产物命名为p LVX-IRES-Zs Green1-mus-IL35-拼接。连接产物转化DH5α感受态细胞,涂布LB Amp平板,37℃温箱培养过夜。[结果]检测慢病毒p LVX-IL35滴度为:6×10~7TU/ml,提取质粒浓度为1~2 mg/ml。鉴定引物为测序的通用引物,上游引物和下游引物离MCS区域加上目的序列,目的PCR条带大约1 600 bp,送鉴定正确菌液测序。测序结果比对正确。[结论]采用新型超量无内毒素质粒提试剂盒,可以大规模方便快速提取相关质粒。 展开更多
关键词 pLVX-IRES-ZsGreen1-mus-il35 慢病毒 PCR 质粒
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过敏性紫癜患儿血清中IL35的表达水平及临床意义
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作者 丁素珍 《健康之路》 2018年第9期13-14,共2页
目的:探究过敏性紫癜患儿血清中IL35的表达水平及临床意义。方法:选取2016年8月~2017年8月期间,在我院就诊治疗的过敏性紫癜患儿41例作为研究对象,将其全部纳入研究组,选择在我院体检无过敏性紫癜的正常儿童41例,全部纳入对照组。对所... 目的:探究过敏性紫癜患儿血清中IL35的表达水平及临床意义。方法:选取2016年8月~2017年8月期间,在我院就诊治疗的过敏性紫癜患儿41例作为研究对象,将其全部纳入研究组,选择在我院体检无过敏性紫癜的正常儿童41例,全部纳入对照组。对所有对象采集血液样本,以双抗体夹心ABC.ELISA法检验IL35的水平。结果:两组IL35检验结果对比,研究组检验均数标准差为(59.27±17.86),对照组为(80.98±23.46),两组对比有显著差异,有统计学意义(P<0.05)。结论:过敏性紫癜患儿的血清检验中,IL35的表达具有重要意义,能够为过敏性紫癜的检验提供可靠依据。 展开更多
关键词 过敏性紫癜 血清 il35 临床意义
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新型抑制性细胞因子IL-35研究进展 被引量:5
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作者 袁芳 杜小萍(综述) 鞠吉雨(审阅) 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期348-351,共4页
IL-35是一种新发现的抑制性细胞因子,是EB病毒诱导基因3(EBI3)产物和IL-12的p35亚基形成的异二聚体。IL-35可由CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)特异性产生,是Treg发挥抑制作用所必需的细胞因子。在体外,IL-35既可以扩增Treg的数量,又可以... IL-35是一种新发现的抑制性细胞因子,是EB病毒诱导基因3(EBI3)产物和IL-12的p35亚基形成的异二聚体。IL-35可由CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)特异性产生,是Treg发挥抑制作用所必需的细胞因子。在体外,IL-35既可以扩增Treg的数量,又可以抑制CD4^+CD25-效应性T细胞的增殖和Th17细胞的分化。在体内,IL-35能有效减轻胶原诱导关节炎(CIA)小鼠的症状。因此,深入研究IL-35的生物学功能和作用机制对寻找自身免疫性疾病和肿瘤新的治疗手段具有重要价值。 展开更多
关键词 IL一35 CD4+ CD25+Treg TH17细胞
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TGF⁃β1对炎症状态下人牙周膜成纤维细胞的调控作用 被引量:4
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作者 朱嘉皓 芦婷 钟良军 《口腔疾病防治》 2023年第2期94-103,共10页
目的探讨转化生长因子⁃β1(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)对在牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖(lipopolysaccharide from Porphyromonas gingivalis,Pg⁃LPS)刺激模拟炎症状态下的人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fi... 目的探讨转化生长因子⁃β1(transforming growth factor⁃β1,TGF⁃β1)对在牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖(lipopolysaccharide from Porphyromonas gingivalis,Pg⁃LPS)刺激模拟炎症状态下的人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,hPDLFs)的调控作用。方法获取hPDLFs并进行免疫组化鉴定,通过qRT⁃PCR与CCK⁃8确定Pg⁃LPS的刺激浓度。将hPDLFs分成4组:空白对照组,单纯100μg/mL Pg⁃LPS;低浓度组,1 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS;中浓度组,10 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS;高浓度组100 ng/mL TGF⁃β1+100μg/mL Pg⁃LPS。CCK⁃8检测细胞增殖情况;划痕实验与Transwell小室实验检测hPDLFs细胞迁移能力;流式细胞术检测hPDLFs的细胞周期;qRT⁃PCR检测hPDLFs的转录因子叉头盒p3(forkhead/winged helix transcription⁃al factor p3,Foxp3)、白细胞介素6(interleukin⁃6,IL⁃6)及EB病毒诱导基因3(Epstein⁃Barrvirus⁃induced gene 3,EBI3)mRNA表达;Western blot检测hPDLFs的Foxp3、IL⁃6及EBI3蛋白表达。结果免疫组化鉴定显示抗波形丝蛋白阳性及抗角蛋白阴性;Pg⁃LPS浓度为100μg/mL时,hPDLFs中IL⁃6 mRNA表达相比空白对照组显著上升(P<0.0001)且细胞增殖能力下降(P<0.0001),所以选择100μg/mL Pg⁃LPS用于模拟炎症状态。10、100 ng/mL TGF⁃β1能提高炎症状态下hPDLFs的增殖能力(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1能促进炎症状态下hPDLFs的迁移能力(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1可加快炎症状态下hPDLFs的细胞周期(P<0.0001);1、10、100 ng/mL TGF⁃β1可抑制炎症状态下hPDLFs的IL⁃6基因和蛋白表达量(P<0.0001),1、10 ng/mL TGF⁃β1可提高炎症状态下hPDLFs的EBI3基因及蛋白表达量(P<0.0001),1、10 ng/mL TGF⁃β1可提高炎症状态下hPDLFs的Foxp3基因表达量,10 ng/mL TGF⁃β1可提高Foxp3蛋白表达量(P<0.05)。结论TGF⁃β1可促进炎症状态下hPDLFs的增殖及迁移能力、上调EBI3表达,可能与转录因子Foxp3表达有关。 展开更多
关键词 转化生长因子⁃β1 牙龈卟啉单胞菌来源脂多糖 转录因子叉头盒p3 白细胞介素6 IL⁃35亚基 EB病毒诱导基因3 牙周炎 人牙周膜成纤维细胞 细胞周期 免疫治疗
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