目的:以白细胞介素6(interleukin-6, IL-6)/信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)信号环路为基础,研究甲型流感病毒(influenza A virus, IAV)所致巨噬细胞炎性损伤的机制,同时探讨麻杏...目的:以白细胞介素6(interleukin-6, IL-6)/信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)信号环路为基础,研究甲型流感病毒(influenza A virus, IAV)所致巨噬细胞炎性损伤的机制,同时探讨麻杏石甘汤含药血清的干预效果。方法:RAW264.7和BV2细胞分为正常对照组、Janus激酶(Janus kinase, JAK)/STAT信号通路激活剂组和抑制剂组、模型对照组、奥司他韦组、抗病毒颗粒组及麻杏石甘汤组。在进行IAV造模及相应血清干预后继续培养24和48 h,对2种细胞下列指标进行检测分析:细胞培养上清液中IL-6含量的检测采用ELISA法;细胞内IL-6和STAT3的mRNA表达采用RT-qPCR法进行检测;以Western blot法对细胞内STAT3的蛋白表达进行检测;细胞中磷酸化STAT3(p-STAT3)表达用免疫荧光法检测;Pearson相关分析分别对2种细胞p-STAT3蛋白的表达与IL-6含量的相关性进行评价。构建2种细胞共培养模型,检测细胞培养上清液中IL-6的含量。对STAT3与麻杏石甘汤主要成分进行分子对接。结果:2种细胞培养上清液中IL-6含量、细胞内IL-6和STAT3 mRNA表达、胞内STAT3和p-STAT3蛋白表达均在流感病毒刺激后升高(P<0.05,P<0.01),细胞p-STAT3表达与IL-6分泌水平呈现正相关。在共培养模型中,IL-6分泌水平升高(P<0.01)。麻杏石甘汤能降低IL-6的分泌水平,降低IL-6和STAT3 mRNA的表达水平,使STAT3和p-STAT3在细胞中的表达水平下降(P<0.05,P<0.01),抑制IL-6在共培养模型中的分泌水平。STAT3与甘草苷、苦杏仁苷和麻黄碱均具有较好的结合活性。结论:IAV可引起巨噬细胞炎性损伤,其机制可能与激活IL-6/STAT3信号环路有关,麻杏石甘汤可通过调控该信号环路,缓解IAV的致病作用。展开更多
