本研究探讨不同浓度的IL-6在弥漫大B淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的作用,以及是否通过JAK/STAT3信号通路介导细胞的凋亡增殖与侵袭迁移能力。使用人DLBCL细胞系OCI-LY8作为模型,通过药物干预IL-6或转染质粒敲除STAT3...本研究探讨不同浓度的IL-6在弥漫大B淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的作用,以及是否通过JAK/STAT3信号通路介导细胞的凋亡增殖与侵袭迁移能力。使用人DLBCL细胞系OCI-LY8作为模型,通过药物干预IL-6或转染质粒敲除STAT3基因。通过CCK8法检测细胞活力,并使用流式细胞术测定各组细胞的凋亡率,研究IL-6对DLBCL细胞增殖凋亡能力的影响。使用Transwell小室和划痕实验,检测细胞侵袭和迁移能力,研究不同浓度IL-6对DLBCL转移能力的作用。使用Western blotting检测JAK,STAT3以及其下游凋亡相关的B细胞淋巴瘤2(B cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)和生存素(survivin)蛋白的表达情况。Western blotting结果显示IL-6可以有效激活JAK/STAT3通路,并上调抗凋亡蛋白Bcl-2和生存素,下调促凋亡蛋白Bax,从而抑制OCI-LY8凋亡。此外,IL-6通过激活STAT3也能提高OCI-LY8的侵袭与迁移能力。而IL-6的作用在IL-6抑制剂LMT-28处理或STAT3敲除后被逆转。IL-6能通过激活JAK/STAT3信号通路,增强DLBCL细胞株OCI-LY8的侵袭和迁移能力,并增强其抗凋亡能力。这些发现揭示IL-6在DLBCL发生中的作用,为DLBCL的治疗提供了新的靶点和理论依据。展开更多
目的:观察复方五凤草液治疗结核性溃疡的临床疗效,并基于干扰素-γ(INF-γ)/信号转导和转录激活因子1(STAT1)、白细胞介素-4(IL-4)/信号转导和转录激活因子6(STAT6)信号通路和卡介苗(BCG)诱导巨噬细胞极化模型探讨其作用机制。方法:(1)...目的:观察复方五凤草液治疗结核性溃疡的临床疗效,并基于干扰素-γ(INF-γ)/信号转导和转录激活因子1(STAT1)、白细胞介素-4(IL-4)/信号转导和转录激活因子6(STAT6)信号通路和卡介苗(BCG)诱导巨噬细胞极化模型探讨其作用机制。方法:(1)临床试验:将135例结核性溃疡患者分为观察组、中医对照组和西医对照组。在规范抗结核治疗基础上,观察组予复方五凤草液,中医对照组予康复新液,西医对照组予异烟肼液局部外用治疗,观察周期28 d。分别观察三组患者安全性指标、创面愈合总有效率、创面组织病理学形态及创面组织、创面组织中Ifnr、Il4、Stat1、Stat6 m RNA的表达,填写中医评分量表(Traditional Chinese Medicine Syndrome Score Scale,TCMSSS)病例报告表(Case Report Form,CRF)。(2)细胞实验:建立BCG诱导THP-1巨噬细胞模型,分别予不同药物处理后分为BCG组、BCG+康复新液组、BCG+异烟肼液组、BCG+复方五凤草液组。镜下观察各组BCG菌落情况,收集细胞上清液并离心,Western blot、RT-q PCR技术检测IFN-γ、IL-4、STAT1、STAT6的蛋白和m RNA表达,流式细胞术检测药物对CD11b、CD86、CD163、CD206百分率的影响。结果:(1)临床试验:治疗期间,3组患者安全性指标无明显差异;观察组总有效率(95.56%)高于中医对照组(82.22%)、西医对照组(75.56%);治疗28 d后,与中、西医对照组比较,观察组创面组织病理学形态改善更为明显,观察组患者Ifnr、Stat1 m RNA的表达低于中、西医对照组,Il4、Stat6 m RNA的表达高于中、西医对照组;与中、西医对照组比较,观察组中医证候积分显著降低。(2)细胞实验:THP-1巨噬细胞在感染BCG后吞噬泡明显增多,自噬小体增多;各组药物干预后胞内结核分枝杆菌的存活率降低。与对照组相比,BCG组M1型巨噬细胞所占比例较多,另3组M2型巨噬细胞所占比例较多。其中,BCG+复方五凤草液组中M2巨噬细胞占比显著高于其他3组。BCG+复方五凤草液组IFN-γ、STAT1表达下调,IL-4、STAT6表达上调,CD86百分率明显降低,CD206的百分率显著增加。结论:复方五凤草液治疗结核性溃疡临床疗效显著,其作用机制可能与抑制病原菌,干预IFN-γ/STAT1、IL-4/STAT6信号通路以介导M1/M2巨噬细胞极化平衡有关。展开更多
目的:以白细胞介素6(interleukin-6, IL-6)/信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)信号环路为基础,研究甲型流感病毒(influenza A virus, IAV)所致巨噬细胞炎性损伤的机制,同时探讨麻杏...目的:以白细胞介素6(interleukin-6, IL-6)/信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)信号环路为基础,研究甲型流感病毒(influenza A virus, IAV)所致巨噬细胞炎性损伤的机制,同时探讨麻杏石甘汤含药血清的干预效果。方法:RAW264.7和BV2细胞分为正常对照组、Janus激酶(Janus kinase, JAK)/STAT信号通路激活剂组和抑制剂组、模型对照组、奥司他韦组、抗病毒颗粒组及麻杏石甘汤组。在进行IAV造模及相应血清干预后继续培养24和48 h,对2种细胞下列指标进行检测分析:细胞培养上清液中IL-6含量的检测采用ELISA法;细胞内IL-6和STAT3的mRNA表达采用RT-qPCR法进行检测;以Western blot法对细胞内STAT3的蛋白表达进行检测;细胞中磷酸化STAT3(p-STAT3)表达用免疫荧光法检测;Pearson相关分析分别对2种细胞p-STAT3蛋白的表达与IL-6含量的相关性进行评价。构建2种细胞共培养模型,检测细胞培养上清液中IL-6的含量。对STAT3与麻杏石甘汤主要成分进行分子对接。结果:2种细胞培养上清液中IL-6含量、细胞内IL-6和STAT3 mRNA表达、胞内STAT3和p-STAT3蛋白表达均在流感病毒刺激后升高(P<0.05,P<0.01),细胞p-STAT3表达与IL-6分泌水平呈现正相关。在共培养模型中,IL-6分泌水平升高(P<0.01)。麻杏石甘汤能降低IL-6的分泌水平,降低IL-6和STAT3 mRNA的表达水平,使STAT3和p-STAT3在细胞中的表达水平下降(P<0.05,P<0.01),抑制IL-6在共培养模型中的分泌水平。STAT3与甘草苷、苦杏仁苷和麻黄碱均具有较好的结合活性。结论:IAV可引起巨噬细胞炎性损伤,其机制可能与激活IL-6/STAT3信号环路有关,麻杏石甘汤可通过调控该信号环路,缓解IAV的致病作用。展开更多
文摘目的:观察复方五凤草液治疗结核性溃疡的临床疗效,并基于干扰素-γ(INF-γ)/信号转导和转录激活因子1(STAT1)、白细胞介素-4(IL-4)/信号转导和转录激活因子6(STAT6)信号通路和卡介苗(BCG)诱导巨噬细胞极化模型探讨其作用机制。方法:(1)临床试验:将135例结核性溃疡患者分为观察组、中医对照组和西医对照组。在规范抗结核治疗基础上,观察组予复方五凤草液,中医对照组予康复新液,西医对照组予异烟肼液局部外用治疗,观察周期28 d。分别观察三组患者安全性指标、创面愈合总有效率、创面组织病理学形态及创面组织、创面组织中Ifnr、Il4、Stat1、Stat6 m RNA的表达,填写中医评分量表(Traditional Chinese Medicine Syndrome Score Scale,TCMSSS)病例报告表(Case Report Form,CRF)。(2)细胞实验:建立BCG诱导THP-1巨噬细胞模型,分别予不同药物处理后分为BCG组、BCG+康复新液组、BCG+异烟肼液组、BCG+复方五凤草液组。镜下观察各组BCG菌落情况,收集细胞上清液并离心,Western blot、RT-q PCR技术检测IFN-γ、IL-4、STAT1、STAT6的蛋白和m RNA表达,流式细胞术检测药物对CD11b、CD86、CD163、CD206百分率的影响。结果:(1)临床试验:治疗期间,3组患者安全性指标无明显差异;观察组总有效率(95.56%)高于中医对照组(82.22%)、西医对照组(75.56%);治疗28 d后,与中、西医对照组比较,观察组创面组织病理学形态改善更为明显,观察组患者Ifnr、Stat1 m RNA的表达低于中、西医对照组,Il4、Stat6 m RNA的表达高于中、西医对照组;与中、西医对照组比较,观察组中医证候积分显著降低。(2)细胞实验:THP-1巨噬细胞在感染BCG后吞噬泡明显增多,自噬小体增多;各组药物干预后胞内结核分枝杆菌的存活率降低。与对照组相比,BCG组M1型巨噬细胞所占比例较多,另3组M2型巨噬细胞所占比例较多。其中,BCG+复方五凤草液组中M2巨噬细胞占比显著高于其他3组。BCG+复方五凤草液组IFN-γ、STAT1表达下调,IL-4、STAT6表达上调,CD86百分率明显降低,CD206的百分率显著增加。结论:复方五凤草液治疗结核性溃疡临床疗效显著,其作用机制可能与抑制病原菌,干预IFN-γ/STAT1、IL-4/STAT6信号通路以介导M1/M2巨噬细胞极化平衡有关。
