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猪IL-15单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立
1
作者 王飞燕 刘超凡 +5 位作者 张亚楠 周晓甜 任静 袁晨 李潭清 宋勤叶 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3442-3452,共11页
旨在制备猪白细胞介素-15(IL-15)的单克隆抗体(McAb),建立IL-15-ELISA定量检测方法。首先构建猪IL-15原核表达载体pET-28a-IL-15,应用大肠杆菌原核表达系统表达该重组蛋白,随后用其免疫6周龄的雌性BALB/c小鼠,在加强免疫后第3天,分离小... 旨在制备猪白细胞介素-15(IL-15)的单克隆抗体(McAb),建立IL-15-ELISA定量检测方法。首先构建猪IL-15原核表达载体pET-28a-IL-15,应用大肠杆菌原核表达系统表达该重组蛋白,随后用其免疫6周龄的雌性BALB/c小鼠,在加强免疫后第3天,分离小鼠脾细胞,将脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选阳性杂交瘤细胞,并对其分泌的IL-15单克隆抗体进行鉴定;然后基于单克隆抗体建立IL-15夹心ELISA方法。结果显示:获得9株分泌抗IL-15 McAb的杂交瘤细胞(1E8、1F4、2D3、2C10、2F3、2D10、3F4、3D4、3D5),分泌的抗体均为IgG2bκ型。以制备的单抗2D10和2C10分别为捕获抗体及酶标抗体建立的夹心ELISA最低可检测31.25 ng·mL^(-1)的IL-15蛋白,与其它细胞因子或蛋白(IL-1、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、Gzms-B、IFN-γ、TNF-α)无交叉反应,批内和批间重复的变异系数分别为2.56%和3.39%。该夹心ELISA可定量检测血清、组织液和细胞培养物等样品中的IL-15。综上,成功制备了猪IL-15单克隆抗体,建立了定量检测IL-15的双抗体夹心ELISA方法,为IL-15相关研究提供了重要工具。 展开更多
关键词 猪il-15 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA 定量检测
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IL-15激动剂在实体瘤免疫治疗中的研究进展
2
作者 刘姝彤(综述) 刘宝瑞 刘芹(审阅) 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第10期1090-1097,共8页
白细胞介素-15(IL-15)是4-α螺旋束细胞因子家族成员,主要由活化的单核细胞和树突状细胞(DC)分泌等,可通过调控NK细胞和T细胞的发育、稳态及功能,目前已经成为肿瘤免疫治疗的研究热点。然而,由于IL-15的靶向性不足、体内半衰期短及潜在... 白细胞介素-15(IL-15)是4-α螺旋束细胞因子家族成员,主要由活化的单核细胞和树突状细胞(DC)分泌等,可通过调控NK细胞和T细胞的发育、稳态及功能,目前已经成为肿瘤免疫治疗的研究热点。然而,由于IL-15的靶向性不足、体内半衰期短及潜在的毒性作用等限制了其在实体瘤免疫治疗中的广泛应用。本文聚焦IL-15激动剂的结构改造与功能优化,重点剖析其在实体瘤治疗中进行的靶向性优化、长循环及多功能设计等改造策略,总结其在临床研究中与免疫检查点抑制剂(ICI)、过继细胞疗法等联合应用的最新研究进展,为推动IL-15激动剂的临床转化提供了新的思路与理论依据。 展开更多
关键词 il-15 激动剂 实体瘤 免疫治疗 联合疗法
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潞党参对光老化小鼠皮肤中IL-6、TNF-α、IL-15含量及IL-15、IL-15R共表达的影响 被引量：13
3
作者 王明月 刘春艳 +3 位作者 张宇 张小卿 马贤德 吴景东 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第6期143-146,I0023,共5页
目的研究潞党参对光老化小鼠皮肤组织中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-15及IL-15与IL-15R共表达的影响。方法将40只小鼠随机分成4组,分别是空白对照组、模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药剂量组。对空白对照组采取正常饲养,对阳性对照组(V... 目的研究潞党参对光老化小鼠皮肤组织中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-15及IL-15与IL-15R共表达的影响。方法将40只小鼠随机分成4组,分别是空白对照组、模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药剂量组。对空白对照组采取正常饲养,对阳性对照组(VE组)、中药剂量组和模型对照组制备光老化模型。模型对照组和空白对照组给生理盐水,中药剂量组给相应剂量药液,阳性对照组(VE组)给予维生素E滴剂,于造模前30 min灌胃。造模完成后,采用酶联免疫吸附法(Elisa法)检测组织中IL-6、TNF-α、IL-15含量的表达水平,采用免疫荧光双标记法检测IL-15与IL-15R共表达的水平。结果酶联免疫吸附法中,比照空白对照组,模型对照组皮肤组织中IL-6、TNF-α、IL-15含量的表达水平显著上升(P<0.01);比照模型对照组,中药剂量组皮肤组织中IL-6、TNF-α、IL-15含量的表达水平显著下降(P<0.01)。免疫荧光双标记法中,IL-15和IL-15R在各个组中均有阳性表达,其中在模型组中的表达水平最高,在中药剂量组的表达水平较模型对照组中表达水平低。结论潞党参在皮肤光老化过程中具有保护作用。 展开更多
关键词 潞党参 光老化 il-6 TNF-α il-15 il-15R
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sIL-15Rα与脾细胞孵育后对小鼠黑色素瘤细胞生长的免疫调节作用
4
作者 顾艳宏 王榕生 +1 位作者 束永前 徐强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期847-849,共3页
目的:研究可溶性IL-15Rα与脾细胞共同孵育后对小鼠黑色素瘤细胞生长的免疫调节作用。方法:制备小鼠脾细胞,分成两组,一组加入可溶性重组IL-15Rα(sIL-15Rα),另外一组不加,培养48 h后,分离两组的贴壁细胞和非贴壁细胞,流式细胞术(FCM)... 目的:研究可溶性IL-15Rα与脾细胞共同孵育后对小鼠黑色素瘤细胞生长的免疫调节作用。方法:制备小鼠脾细胞,分成两组,一组加入可溶性重组IL-15Rα(sIL-15Rα),另外一组不加,培养48 h后,分离两组的贴壁细胞和非贴壁细胞,流式细胞术(FCM)分析CD4、CD8、B220、CD11c、CD1a的表达;并把上述4组细胞(即脾细胞非贴壁细胞组,脾细胞贴壁细胞组,脾细胞+sIL-15Rα非贴壁细胞组,脾细胞+sIL-15Rα贴壁细胞组)和黑色素瘤细胞一起分别注射到小鼠腹部皮下,观察小鼠腹部皮下肿瘤生长抑制情况,对照组只注射小鼠黑色素瘤细胞。结果:脾细胞+sIL-15Rα贴壁细胞组小鼠黑色素瘤的生长速度显著小于其他各组;FCM分析,此组细胞主要成分可能为树突状细胞(DC)。结论:sIL-15Rα与脾细胞共同孵育后,可能通过DC的作用,对黑色素瘤的生长进行免疫调节,从而抑制瘤细胞的生长。 展开更多
关键词 sil-15Rα il-15 树突细胞 黑色素瘤
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IL-15的免疫调节功能及其相关疾病研究进展 被引量：2
5
作者 聂亚丹 贺毅 +4 位作者 孙作厘 杨健 罗燕婷 刘明霞 王海霞 《生理科学进展》 CAS 北大核心 2024年第3期240-247,共8页
IL-15作为免疫调控的关键分子,主要由髓系细胞分泌产生。IL-15在T细胞、自然杀伤细胞和记忆CD8+T细胞稳态和功能方面发挥重要作用,因其具有广泛表达、严格分泌的特性在多种免疫相关疾病中体现出良好的治疗潜能。IL-15与IL-15受体特异性... IL-15作为免疫调控的关键分子,主要由髓系细胞分泌产生。IL-15在T细胞、自然杀伤细胞和记忆CD8+T细胞稳态和功能方面发挥重要作用,因其具有广泛表达、严格分泌的特性在多种免疫相关疾病中体现出良好的治疗潜能。IL-15与IL-15受体特异性结合后,激活下游JAK/STAT、Ras/Raf/MAPK及PI3K/AKT等多种信号通路,通过诱导细胞增殖、分化和凋亡,从而发挥抗肿瘤、抗感染等生物学效应。本文主要综述了IL-15在肿瘤、自身免疫疾病和神经精神疾病等中的作用与相关机制,并总结了以IL-15为潜在治疗靶点的小分子激动剂和抑制剂,以期为深入探究IL-15在免疫系统疾病中的发病机制和药物研究提供科学依据。 展开更多
关键词 il-15 il-15受体 肿瘤 自身免疫疾病 神经精神疾病 激动剂 抑制剂
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IL-2和IL-15协同调节T细胞的增殖和LAK细胞的杀伤活性 被引量：10
6
作者 党娜娜 范桂香 +5 位作者 朱勇 刘雪松 贾卫 王薇 袁育康 金伯泉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期175-177,182,共4页
目的　探讨IL 2和IL 1 5在免疫调控和应答中的协同作用。方法　IL 2、IL 1 5和IL 2 +IL 1 5组刺激CTLL细胞的增殖 ,3 H TdR掺入法测cpm值 ;IL 2、IL 1 5和IL 2 +IL 1 5组诱导PBMC中NK和LAK细胞的发育 ,4h51 Cr释放实验检测对K5 6 2和LiB... 目的　探讨IL 2和IL 1 5在免疫调控和应答中的协同作用。方法　IL 2、IL 1 5和IL 2 +IL 1 5组刺激CTLL细胞的增殖 ,3 H TdR掺入法测cpm值 ;IL 2、IL 1 5和IL 2 +IL 1 5组诱导PBMC中NK和LAK细胞的发育 ,4h51 Cr释放实验检测对K5 6 2和LiBr细胞的杀伤活性。结果　IL 2和IL 1 5都能诱导CTLL细胞的增殖和NK、LAK细胞的杀伤活性 ,IL 2和IL 1 5可明显协同上调CTLL的增殖和LAK细胞的杀伤活性。结论　IL 2和IL 1 5在免疫调控和应答中有一定的协同作用 。 展开更多
关键词 il-2 il-15 协同调节 T细胞 增殖 LAK细胞 杀伤活性
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细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ及TGF-β在慢性乙型肝炎病毒感染者外周血中的表达及临床意义的研究 被引量：13
7
作者 李彩东 林静 +3 位作者 陈锡莲 杨勇卫 靳克俭 吴斌 《国际检验医学杂志》 CAS 2016年第1期3-5,共3页
目的探讨HBV感染者外周血细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β的表达水平变化的及临床意义。方法选择肝癌患者60例(HCC组)、肝硬化患者60例(LC组)、慢性乙型肝炎患者60例(CHB组)、慢性乙型肝炎病毒携带者60例(ASC组)和健康对照者40例... 目的探讨HBV感染者外周血细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β的表达水平变化的及临床意义。方法选择肝癌患者60例(HCC组)、肝硬化患者60例(LC组)、慢性乙型肝炎患者60例(CHB组)、慢性乙型肝炎病毒携带者60例(ASC组)和健康对照者40例(健康对照组),采用酶联免疫法检测细胞因子表达水平,运用聚合酶链反应检测HBV DNA载量,同时检测各项生化指标。结果随着患者病情加重,细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β表达水平均呈逐渐升高的趋势,且在肝硬化患者中达到最大值。与健康对照组相比,不同临床类型HBV感染者细胞因子表达水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β在CHB患者外周血HBV DNA高载量组表达水平最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β可能参与了乙型肝炎的肝脏炎性损伤过程,且其表达水平与病毒量具有一定相关性。 展开更多
关键词 乙型肝炎 il-15 il-16 IFN-Γ TGF-Β 临床意义
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IL-2+IL-15组合培养方案对乳腺癌患者外周血中NK细胞体外扩增的效果 被引量：10
8
作者 王晓梦 于津浦 +3 位作者 李慧 于文文 任秀宝 曹水 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期654-660,共7页
目的:观察IL-2+IL-15组合体外培养方案对于NK、NKT和T细胞亚群的比例、表型、杀伤肿瘤细胞活性与黏附活性的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科2012年5月至2012年7月期间收治的5例乳腺癌患者的外... 目的:观察IL-2+IL-15组合体外培养方案对于NK、NKT和T细胞亚群的比例、表型、杀伤肿瘤细胞活性与黏附活性的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采集天津医科大学附属肿瘤医院生物治疗科2012年5月至2012年7月期间收治的5例乳腺癌患者的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),用IL-2+IL-15联合培养方案进行培养,观察培养15 d后细胞的扩增倍数和淋巴细胞亚群比例变化,流式细胞术检测细胞免疫表型、细胞表面受体的表达,LDH释放法和CD107a释放法检测不同细胞亚群对于HLA匹配或不匹配的靶肿瘤细胞系的杀伤活性,活细胞工作站检测总扩增产物对于不同靶肿瘤细胞系的黏附作用。结果:与扩增前相比,IL-2+IL-15培养方案扩增15 d后,NK细胞[(36.74±17.10)%vs(16.34±3.12)%,P<0.05]、NKT细胞[(24.88±12.34)%vs(4.06±2.05)%,P<0.05]比例显著增加,CD4+T细胞和Treg细胞比例显著降低(P<0.05),CD8+T细胞比例显著升高(P<0.05);NK细胞表面活化受体NKp30[(92.38±7.19)%vs(32.14±17.64)%,P<0.05]、NKp44[(74.26±16.28)%vs(1.94±1.60)%,P<0.05]、NKG2D[(98.58±1.28)%vs(66.50±24.84)%,P<0.05]的表达率均显著升高,CD16表达率显著降低[(85.12±7.66)%vs(95.60±2.53)%,P<0.05];NKT细胞、T细胞表面活化受体DNAM-1和NKG2D明显升高(P<0.05)。总扩增产物、NK细胞和NKT细胞对HLA不匹配的靶肿瘤细胞的杀伤率均显著高于HLA匹配靶细胞系的杀伤(P<0.05);在共孵育至84 min时,与HLA匹配的靶肿瘤细胞系相比,总扩增产物细胞与HLA不匹配的靶细胞系黏附结合数目显著增多[(4.80±0.53)vs(2.25±0.35)个,P<0.05]。结论:IL-2+IL-15组合方案在扩增NK细胞的同时,也能够有效扩增NKT细胞,即可以扩增CD56+细胞群。并且,扩增产物主要以不受HLA限制的NK细胞杀伤活性为主来杀伤肿瘤细胞。 展开更多
关键词 il-2 il-15 NK细胞 扩增 乳腺癌
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猪IL-15与PRRS病毒GP5基因核酸疫苗免疫效力 被引量：16
9
作者 石娜 尹杰超 +2 位作者 Dante Zarlenga 李广兴 任晓峰 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期97-102,共6页
通过分子克隆技术构建了表达猪白细胞介素(IL)-15及猪繁殖呼吸综合症(PRRSV)病毒GP5基因重组核酸疫苗。以小鼠为试验模型,利用猪IL-15作为分子佐剂并检测其对表达PRRS病毒GP5基因核酸疫苗的免疫增强作用。结果表明,猪IL-15与GP5试验组... 通过分子克隆技术构建了表达猪白细胞介素(IL)-15及猪繁殖呼吸综合症(PRRSV)病毒GP5基因重组核酸疫苗。以小鼠为试验模型,利用猪IL-15作为分子佐剂并检测其对表达PRRS病毒GP5基因核酸疫苗的免疫增强作用。结果表明,猪IL-15与GP5试验组小鼠抗体水平和T淋巴细胞亚群数量均高于PBS对照组及GP5基因单独免疫组,表明猪IL-15对核酸疫苗可有效增强PRRS病毒GP5基因的免疫效果,证实了其佐剂效应。 展开更多
关键词 猪il-15 PRRSV GP5基因 疫苗
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斯氏艾美耳球虫MIC-5与兔IL-15基因在真核细胞中的共表达 被引量：7
10
作者 孟庆玲 乔军 +3 位作者 才学鹏 田广孚 闫鸿斌 骆学农 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期4096-4101,共6页
【目的】构建能在真核细胞中共表达斯氏艾美耳球虫微线蛋白5(MIC-5)和兔IL-15重组载体,为进一步研究抗斯氏艾美耳球虫的免疫调节性DNA疫苗奠定基础。【方法】将斯氏艾美耳球虫MIC-5和兔IL-15基因,克隆到真核双表达载体pBudce4.1中,应用... 【目的】构建能在真核细胞中共表达斯氏艾美耳球虫微线蛋白5(MIC-5)和兔IL-15重组载体,为进一步研究抗斯氏艾美耳球虫的免疫调节性DNA疫苗奠定基础。【方法】将斯氏艾美耳球虫MIC-5和兔IL-15基因,克隆到真核双表达载体pBudce4.1中,应用脂质体介导法将构建的重组质粒pB-MIC-5-IL-15转染BHK-21细胞。在转染后,用RT-PCR法和间接免疫荧光试验(IFA)分别检测MIC-5和IL-15基因在BHK-21细胞中的转录和表达情况。【结果】在重组质粒pB-MIC-5-IL-15转染BHK-21细胞24 h后即可检测到MIC-5、IL-15基因进行了转录;在转染36、48、72h后,MIC-5和IL-15基因可同时在BHK-21细胞中表达。【结论】成功构建了含有斯氏艾美耳球虫MIC-5和兔IL-15基因的重组载体,实现了两种基因在真核细胞中的共表达,为抗斯氏艾美耳球虫的免疫调节性DNA疫苗研制奠定了基础。 展开更多
关键词 斯氏艾美耳球虫 MIC-5 兔il-15 共表达
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强直性脊柱炎患者血清MMP-3和IL-15水平的表达及临床意义 被引量：13
11
作者 武树朋 王静 +2 位作者 李芳 朱广婷 聂深钰 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第14期2729-2731,共3页
目的:研究强直性脊柱炎(AS)患者血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和白细胞介素-15(IL-15)水平的表达及临床意义。方法:选取从2015年1月至2016年9月在我院就诊的AS患者50例。根据Bath强直性脊柱炎疾病活动性指数(BASDAI)将患者分为A组(指数≥... 目的:研究强直性脊柱炎(AS)患者血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和白细胞介素-15(IL-15)水平的表达及临床意义。方法:选取从2015年1月至2016年9月在我院就诊的AS患者50例。根据Bath强直性脊柱炎疾病活动性指数(BASDAI)将患者分为A组(指数≥6)28例,B组(指数<6)22例。此外,按照Bath强直性脊柱炎功能指数(BASFI)将患者分为Ⅰ组(指数≥6)29例,Ⅱ组(指数<6)21例。另取同期健康体检者30例记为对照组。分别对比A、B组以及Ⅰ、Ⅱ组与对照组的血清MMP-3和IL-15水平,并作相关性分析。结果:A组MMP-3、IL-15水平均显著高于B组及对照组,而B组又显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Ⅰ组MMP-3、IL-15水平均显著高于Ⅱ组与对照组,而Ⅱ组又显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。经相关性分析可得,AS患者BASDAI、BASFI与MMP-3、IL-15均呈显著正相关(P<0.05)。结论:血清MMP-3和IL-15在AS患者中高表达,且在疾病的发生发展中具有重要作用,可作为临床判断AS患者病情严重程度的血清学指标。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 血清学指标 MMP-3 il-15
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慢性HBV感染者血清IL-15和IL-16水平与HBV DNA载量的关系及临床意义探讨 被引量：8
12
作者 李彩东 陈锡莲 +2 位作者 李惠军 田鹏飞 吴斌 《实用肝脏病杂志》 CAS 2015年第6期663-664,共2页
目的探讨HBV感染者外周血IL-15和IL-16水平变化及其与HBV DNA载量的相关性。方法选择肝癌(HCC组)60例,肝硬化(LC组)60例,慢性乙型肝炎(CHB组)60例,乙型肝炎病毒携带者(ASC组)60例和健康人40例,采用酶联免疫法检测IL-15和IL-16水平,采用... 目的探讨HBV感染者外周血IL-15和IL-16水平变化及其与HBV DNA载量的相关性。方法选择肝癌(HCC组)60例,肝硬化(LC组)60例,慢性乙型肝炎(CHB组)60例,乙型肝炎病毒携带者(ASC组)60例和健康人40例,采用酶联免疫法检测IL-15和IL-16水平,采用聚合酶链反应法检测HBV DNA载量。结果随着患者病情加重,血清IL-15和IL-16水平均呈逐渐升高的趋势,且在肝硬化患者中达到最大值,分别是(222.89±96.95)ng/ml和(109.77±11.96)ng/ml,显著高于其他各组(P<0.01);与健康人比,各种HBV感染者血清细胞因子水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);在CHB患者,外周血HBV DNA高载量组IL-15和IL-16水平最高,分别是(86.67±15.92)ng/ml和(41.64±7.30)ng/ml,显著高于低载量组(P<0.05)。结论 IL-15和IL-16可能参与了乙型肝炎的肝脏炎性损伤过程。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 il-15 il-16 HBV DNA
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IL-2、IL-15对NK细胞亚群表型和功能的调节作用 被引量：9
13
作者 张赟 韩卫宁 +2 位作者 贾卫 曹云新 金伯泉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期6-9,共4页
目的　探讨IL 2和IL 15对NK细胞亚群表型和功能的调节作用。方法　采用双色免疫荧光染色和流式细胞仪分析 ,比较IL 2和IL 15对新鲜分离外周血单个核细胞 (PBMC)中NK细胞及经混合淋巴细胞培养 (MLC)活化的NK细胞表型的调节作用 ;用 4h51... 目的　探讨IL 2和IL 15对NK细胞亚群表型和功能的调节作用。方法　采用双色免疫荧光染色和流式细胞仪分析 ,比较IL 2和IL 15对新鲜分离外周血单个核细胞 (PBMC)中NK细胞及经混合淋巴细胞培养 (MLC)活化的NK细胞表型的调节作用 ;用 4h51 Cr释放实验检测IL 2和IL 15对NK细胞杀伤水平的影响。结果　在PBMC培养中 ,当IL 2或IL 15最终为5 0U mL时 ,能明显上调PBMC中CD5 6 +NK细胞的比例 ,且IL 15对CD5 6 bright亚群增殖的促进作用强于IL 2 ;在MLC中 ,当IL 2或IL 15为 5 0U mL时 ,能够促进MLC活化的NK细胞比率的增加 ,NK细胞亚群由CD5 6 dim为主转变成CD5 6 bright为主 ,此诱导作用IL 2强于IL 15。IL 2和IL 15都能上调PBMC和MLC中NK细胞杀伤水平 ,并呈剂量依赖关系 ,在PBMC中 ,当IL 15为5 0U mL时 ,IL 15对NK细胞杀伤水平的促进作用强于IL 2 ;而在MLC中当IL 2为 5 0U mL时 ,对NK细胞杀伤水平的促进作用高于IL 15。在PBMC中 ,同时加入 5 0U mL的IL 15和IL 2 ,NK细胞杀伤率高于单独加入IL 15或IL 2。结论　IL 15促进PBMC中NK细胞向CD5 6 bright亚群分化和杀伤水平强于IL 2 ,而IL 2促进同种异体抗原诱导的活化NK细胞向CD5 6 bright亚群分化和杀伤水平则高于IL 15。这种反应格局的差别 。 展开更多
关键词 il-2 il-15 NK细胞 表型 细胞毒
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IL-2、IL-7和IL-15联合对T细胞的体外扩增效应 被引量：5
14
作者 董隽 杨素霞 +2 位作者 李煜 高江平 张旭 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第6期1590-1594,共5页
为了建立一种快速有效的体外T细胞扩增方法,本研究比较了不同培养条件对T细胞增殖及其功能和特性的影响。取外周血T细胞,用自体的树突状细胞(DC)和EB病毒转化的B细胞进行周期性刺激,用细胞增殖试验、PI和AnnexinV双标记流式细胞术、Cr... 为了建立一种快速有效的体外T细胞扩增方法,本研究比较了不同培养条件对T细胞增殖及其功能和特性的影响。取外周血T细胞,用自体的树突状细胞(DC)和EB病毒转化的B细胞进行周期性刺激,用细胞增殖试验、PI和AnnexinV双标记流式细胞术、Cr释放测定及ELISPOT试验分别测定不同培养条件下细胞的增殖程度、IFN-γ分泌细胞的频率、抗原特异性T细胞的杀伤活力、细胞的凋亡状态和分化能力。结果显示:T细胞在周期性刺激后,用CD3/28微珠的短期扩增效应最好,但多轮刺激后联合应用IL-2,IL-7和IL-15对细胞的扩增最强。Cr释放试验表明,CD3/28微珠扩增的T细胞不具有杀伤活力,高浓度IL-2诱导的T细胞杀伤活性最强,其次为联合应用IL-2,IL-7和IL-15。ELISPOT显示不同培养条件诱导出的分泌IFN-γ的T细胞频率从高到低依此为高浓度IL-2>联合应用IL-2,IL-7和Il-15>低浓度的IL-2>CD3/28微珠。细胞表型分析显示高浓度IL-2和联合应用IL-2,IL-7和Il-15扩增的细胞含有较高比例的CD3+CD8+T细胞。对细胞的凋亡测定表明联合应用IL-2,IL-7和IL-15获得的T细胞的存活率最高,处于凋亡早期的细胞比例最低。细胞增殖试验显示联合应用IL-2,IL-7和IL-15扩增的细胞分化能力最强。结论:本研究建立了一种快速有效地体外扩增T细胞的方法,其中联合应用IL-2,IL-7和IL-15对T细胞的扩增最显著,获得的T细胞存活率最高,分化能力最强,该细胞同时也含有较高频率的IFN-γ分泌细胞且表现出较强的杀伤活力。 展开更多
关键词 过继性免疫治疗 il-2 il-7 il-15 T细胞 体外扩增
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重组质粒pcDNA3.1-IL-15转染对小鼠骨髓DC上表面分子的表达及功能的影响 被引量：5
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作者 李艳佳 齐凤英 +1 位作者 左连富 张建慧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期222-225,共4页
　目的: 探讨重组质粒pcDNA3. 1 IL- 15对小鼠骨髓树突状细胞(DC)表面共刺激分子的表达及免疫功能的影响。方法: 构建真核表达质粒pcDNA3. 1 IL- 15, 以其转染小鼠骨髓DC。用流式细胞仪检测转染的DC表面CD40、CD80及CD86的表达, 并分析... 　目的: 探讨重组质粒pcDNA3. 1 IL- 15对小鼠骨髓树突状细胞(DC)表面共刺激分子的表达及免疫功能的影响。方法: 构建真核表达质粒pcDNA3. 1 IL- 15, 以其转染小鼠骨髓DC。用流式细胞仪检测转染的DC表面CD40、CD80及CD86的表达, 并分析转染的DC刺激脾淋巴细胞中CD4+、CD8+ T细胞亚群的变化。用MTT比色法检测转染的DC刺激T细胞增殖的作用。用ELISA法检测T细胞产生IFN- γ的水平。结果: pcDNA3. 1- IL- 15转染的DC表面CD40、CD80及CD86的表达均有不同程度的升高。重组质粒转染的DC可诱导小鼠脾淋巴细胞中CD4+、CD8+ T细胞增殖, 但CD4+ /CD8+ T细胞的比值降低。结论: 重组质粒pcDNA3. 1 -IL- 15转染可提高DC表面共刺激分子的表达并增强其免疫功能。 展开更多
关键词 il-15 树突状细胞 疫苗 免疫功能
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放射治疗对肺癌患者外周血中IL-12、IL-15及NK细胞的影响 被引量：3
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作者 白璐 张晶晶 +3 位作者 高东奇 刘承一 李文鑫 李青山 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期641-644,共4页
目的探讨接受放射治疗的肺癌患者在放射治疗不同阶段IL-12、IL-15以及NK活细胞比率的变化。方法对我科收治的30例肺癌放疗患者分别在放疗前、放疗后通过ELISA检测IL-12、IL-15水平,应用MACS检测NK活细胞比率。结果IL-12、IL-15水平在放... 目的探讨接受放射治疗的肺癌患者在放射治疗不同阶段IL-12、IL-15以及NK活细胞比率的变化。方法对我科收治的30例肺癌放疗患者分别在放疗前、放疗后通过ELISA检测IL-12、IL-15水平,应用MACS检测NK活细胞比率。结果IL-12、IL-15水平在放疗前、放疗后(2000cGy、4000cGy、6000cGy)随着放疗剂量的增加逐渐升高(P<0.05)。NK活细胞比率在放疗前、放疗后(2000cGy、4000cGy、6000cGy)未见明显变化(P>0.05)。结论放射治疗对肺癌患者外周血中的NK细胞活性无明显影响,但可提高肺癌患者外周血中细胞因子IL-12、IL-15的水平,进一步激活患者的免疫功能。 展开更多
关键词 肺癌 放疗 il-12 il-15 NK细胞
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不同IL-15转染对NCI-H446HLA-Ⅰ和HLA-Ⅱ表达及NK敏感性的影响 被引量：3
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作者 丁军颖 王润田 +5 位作者 张征峥 杨志强 韩志鹏 李铁民 邓郁青 王平 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期468-470,共3页
目的探讨不同形式IL15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCIH446细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达及NK杀伤敏感性的影响。方法在本室已构建的3种细胞模型(转染IL15成熟肽基因的NCIH446/IL15mp细胞、转染原型IL15基因的NCIH446/IL15细胞和转染以... 目的探讨不同形式IL15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCIH446细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达及NK杀伤敏感性的影响。方法在本室已构建的3种细胞模型(转染IL15成熟肽基因的NCIH446/IL15mp细胞、转染原型IL15基因的NCIH446/IL15细胞和转染以IL2信号肽替代IL15信号肽的改型IL15基因的NCIH446/IL2spIL15mp细胞)基础上[1],以野生株细胞为对照,流式细胞分析仪(Fluorescenceactivatedcellsorter,FACS)分析这3种细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定它们对NK杀伤的敏感性。结果野生株NCIH446细胞表面阳性表达HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子;转染IL15成熟肽基因或改型IL15基因后,这两种分子的表达均被抑制为阴性;转染原型IL15基因后,这两种分子的表达均被显著上调。5名不同健康志愿者的外周血单个核细胞(PBMC)对野生株NCIH446细胞的平均NK杀伤率最低,对NCIH446/IL15、NCIH446/IL15mp和NCIH446/IL2spIL15mp细胞的平均NK杀伤率依次升高。结论转染不同形式IL15基因对NCIH446细胞的免疫生物学特性影响不同。转染IL15成熟肽基因或改型IL15基因,抑制NCIH446细胞表面HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达;转染原型IL15基因,上调这两种分子的表达;转染不同形式IL15基因均可增强NCIH446细胞对NK杀伤的敏感性,但程度不同:以改型IL15者最高,IL15成熟肽者次之,原型IL15者最低。 展开更多
关键词 il-15 基因转染 NCI-H446 HLA-Ⅰ HLA-Ⅱ NK杀伤敏感性
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重组HBcAg激活p38MAPK信号通路增加髓源性树突状细胞IL-15的分泌 被引量：4
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作者 张鑫 周振华 +3 位作者 李曼 高亚婷 孙学华 高月求 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期289-294,共6页
目的探讨重组人乙型肝炎病毒核心抗原(rhHBcAg)诱导髓源性树突状细胞(mDC)分泌白细胞介素15(IL-15)的机制。方法采用人单核细胞磁珠负分选试剂盒分选外周血单核细胞,采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IL-4和肿瘤坏死因子α(TNF... 目的探讨重组人乙型肝炎病毒核心抗原(rhHBcAg)诱导髓源性树突状细胞(mDC)分泌白细胞介素15(IL-15)的机制。方法采用人单核细胞磁珠负分选试剂盒分选外周血单核细胞,采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IL-4和肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导分化为mDC,10μg/m L rhHBcAg刺激mDC 1~6 d;分别用25μmol/L磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路抑制剂LY294002、1μmol/L p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)信号通路抑制剂SB203580、100 nmol/L c-Jun N末端激酶(JNK)信号通路抑制剂SP600125和150 nmol/L胞外信号调节激酶(ERK)信号通路抑制剂U0126预处理1 h,再给予10μg/m L rhHBcAg刺激48 h。之后收集细胞和细胞培养上清,实时定量PCR检测IL-15 mRNA水平,ELISA检测IL-15蛋白水平,Western blot法检测PI3K/Akt和MAPK信号通路分子磷酸化水平。结果与rhHBcAg未刺激组比较,rhHBcAg刺激组IL-15 mRNA和蛋白水平显著升高;与rhHBcAg刺激组比较,p38抑制剂预处理组IL-15水平明显降低,但PI3K/Akt、JNK和ERK抑制剂预处理组IL-15水平未见显著性改变。结论rhHBcAg通过p38MAPK信号通路上调外周血mDC IL-15的分泌。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎病毒感染 树突状细胞 乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg) 白细胞介素15(il-15) p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)
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慢性HBV感染者血清IL-15和外周血iNKT细胞水平变化及相关性研究 被引量：8
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作者 张鑫 黄凌鹰 +5 位作者 周振华 李曼 高亚婷 孙学华 金树根 高月求 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2017年第9期1016-1021,共6页
目的探讨慢性乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者血清IL-15和外周血恒定自然杀伤T(invariant nature killer T,i NKT)细胞水平的变化。方法收集54例慢性HBV感染者和15名健康者外周血,分离血清和外周血单个核细胞(PBMC);ELISA法检测... 目的探讨慢性乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者血清IL-15和外周血恒定自然杀伤T(invariant nature killer T,i NKT)细胞水平的变化。方法收集54例慢性HBV感染者和15名健康者外周血,分离血清和外周血单个核细胞(PBMC);ELISA法检测血清中IL-15水平;流式细胞术检测i NKT细胞占T细胞的比例,PMA、BFA和ionomycin处理PBMC后,流式细胞术检测i NKT分泌的IFN-γ和TNF-α水平,并利用Pearson法进行相关性分析。结果与正常对照者相比,免疫清除期患者血清中IL-15水平明显升高(P<0.05),免疫耐受期患者高于正常对照者,低于免疫清除组,差异无统计学意义(P>0.05);免疫清除期和免疫耐受期患者血清ALT水平和HBV DNA载量与IL-15水平无明显相关性(P>0.05)。免疫清除期患者外周血i NKT细胞比例显著降低,免疫耐受期患者略升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。免疫耐受期和清除期患者外周血i NKT细胞分泌IFN-γ和TNF-α的细胞比例略有升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。免疫耐受期和免疫清除期患者i NKT细胞分泌IFN-γ水平与IL-15水平呈正相关;免疫耐受期和免疫清除期患者i NKT细胞分泌TNF-α水平与IL-15水平无相关性(P>0.05)。结论慢性HBV感染者血清中IL-15水平升高,且外周血i NKT细胞数量减少,且不同感染状态患者血清IL-15水平和外周血i NKT细胞数量呈动态变化。 展开更多
关键词 il-15 慢性HBV感染 INKT细胞
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IL-2、IL-15增强免疫编辑后NK细胞NKG2D的表达及其对鼻咽癌CNE2细胞的杀伤活性 被引量：8
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作者 梅家转 刘桂举 +1 位作者 冯睿婷 郭坤元 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期379-382,共4页
目的:观察IL-2、IL-15对免疫编辑后NK细胞NKG2D的表达及其对鼻咽癌CNE2细胞杀伤活性的影响。方法:抗CD56磁珠纯化NK细胞后分为4组:(1)编辑前NK细胞组:加入100 U/ml IL-2;(2)单纯编辑组:NK细胞与CNE2细胞10∶1混合,加入100U/ml IL-2;(3)I... 目的:观察IL-2、IL-15对免疫编辑后NK细胞NKG2D的表达及其对鼻咽癌CNE2细胞杀伤活性的影响。方法:抗CD56磁珠纯化NK细胞后分为4组:(1)编辑前NK细胞组:加入100 U/ml IL-2;(2)单纯编辑组:NK细胞与CNE2细胞10∶1混合,加入100U/ml IL-2;(3)IL-2再培养组:纯化编辑后的NK细胞,加入1 000 U/ml IL-2;(4)IL-15再培养组:纯化编辑后的NK细胞,加入10 ng/ml IL-15。24 h后,流式细胞仪检测各组NK细胞表面NKG2D的表达;LDH释放测定法测定效靶比20∶1时各组NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性。结果:编辑前NK细胞组、单纯编辑组、IL-2再培养组、IL-15再培养组NK细胞表面NKG2D的表达率分别为(97.63±0.83)%、(53.50±1.25)%、(94.47±1.00)%、(98.07±0.21)%。IL-2、IL-15再培养组NK细胞NKG2D的表达分别比单纯编辑组有显著的增加(P<0.01),该4组NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性分别为(35.90±3.27)%、(4.70±2.30)%、(31.70±3.56)%、(40.18±2.94)%,IL-2再培养组、IL-15再培养组明显提高编辑后NK细胞对CNE2细胞的杀伤活性(P<0.01),IL-15的作用强于IL-2。结论:高剂量IL-2、IL-15可以上调免疫编辑后NK细胞表面NKG2D的表达,恢复编辑后NK细胞对鼻咽癌细胞CNE2的杀伤活性,IL-15的作用强于IL-2。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 自然杀伤细胞 NKG2D配体 免疫编辑 il-2 il-15
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