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IK6过表达慢病毒载体的构建及其在THP1细胞系中的表达和生物学特征 被引量：1
1
作者 张娜 刘亚楠 +3 位作者 肖敏 丁潇怡 周剑峰 李春蕊 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期903-908,共6页
本研究旨在构建人IK6基因过表达的慢病毒载体,观察其在THP1细胞株中的表达及对其生物学特征的影响,为研究该基因在白血病中的作用提供基础。采用RT-PCR方法获得目的基因,并与线性化慢病毒载体pGCFU重组构建慢病毒载体pGC-FU-IK6-GFP,通... 本研究旨在构建人IK6基因过表达的慢病毒载体,观察其在THP1细胞株中的表达及对其生物学特征的影响,为研究该基因在白血病中的作用提供基础。采用RT-PCR方法获得目的基因,并与线性化慢病毒载体pGCFU重组构建慢病毒载体pGC-FU-IK6-GFP,通过菌落PCR鉴定、测序比对分析,确定克隆的正确性。使用Lipofectamine 2000,将慢病毒载体pGC-FU-IK6-GFP转染293T细胞,测定病毒滴度后转染THP1细胞株,用流式细胞仪检测转染效率,RT-PCR检测靶细胞内IK6 mRNA表达,Western blot检测IK6-GFP融合蛋白,进一步观察THP1生物学特征的改变。结果表明,利用RT-PCR方法获得IK6目的基因并连接到线性化的慢病毒载体上,成功构建具有Amp抗性的pGC-FU-IK6-GFP质粒并转染293T细胞,获得滴度为2.0×109TU/ml的病毒。用目的质粒转染THP1细胞,转染效率可达90%。在靶细胞中检测到IK6 mRNA表达和IK6-GFP融合蛋白表达。IK6能够促进靶细胞克隆形成并且具有抑制凋亡的作用,而对细胞周期无显著影响。结论:成功构建IK6过表达的慢病毒载体,使IK6在THP1细胞株中稳定表达。对靶细胞生物学研究发现IK6极为可能干扰了正常Ikaros蛋白的抑癌作用,并存在潜在的抗凋亡作用,进而在一定程度上促进白血病细胞生长,但对细胞周期无明显影响。该研究为进一步探讨IK6在急性髓系白血病的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 ik6基因 慢病毒载体 293T细胞 THP1细胞 ik6
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IKZF1基因IK6亚型在成人急性淋巴细胞白血病中的表达及临床意义 被引量：9
2
作者 袁田 赵邢力 +11 位作者 张丽霞 李庆华 田征 唐克晶 王迎 林冬 李巍 刘兵城 周春林 王敏 王建祥 秘营昌 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期539-543,共5页
本研究通过检测IKZF1基因在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓细胞中的表达亚型,探讨IK6功能缺陷亚型患者的临床特征及预后。应用巢式RT-PCR方法检测79例初诊ALL患者IKZF1基因表达亚型,统计IK6亚型阳性患者比例,分析IK6阳性患者年龄... 本研究通过检测IKZF1基因在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓细胞中的表达亚型,探讨IK6功能缺陷亚型患者的临床特征及预后。应用巢式RT-PCR方法检测79例初诊ALL患者IKZF1基因表达亚型,统计IK6亚型阳性患者比例,分析IK6阳性患者年龄、性别、白细胞计数、融合基因、危险分层特点,比较IK6阳性组与IK6阴性组患者总生存率、无病生存率的差异。结果表明:在ALL患者中检测到IKZF1基因表达的功能亚型为IK1、IK2/3,功能缺陷亚型主要为IK4、IK6、IK8、IK9;表达IK6亚型患者占B-ALL患者的34.4%,占T-ALL患者的22.2%;B-ALL中IK6阳性组患者BCR/ABL1阳性率及高危组患者比例均高于IK6阴性组(P=0.027,P=0.048),而两组的年龄、性别、白细胞计数无显著性差异,T-ALL中IK6阳性组与IK6阴性组的年龄、性别、白细胞计数、危险分层均无显著性差异,在Ph染色体阴性的B-ALL患者中,IK6阳性组的总生存率和无病生存率均低于IK6阴性组(P=0.009,P=0.002)。结论:在成人ALL中IKZF1基因IK6表达亚型为主要功能缺陷亚型,IK6亚型的表达可作为Ph染色体阴性的B-ALL患者预后危险因素,指导成人ALL治疗。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 IKZF1基因 ik6亚型
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IKZF1IK6亚型致急性淋巴细胞白血病耐药机制研究
3
作者 林佩璜 王梅爱 +1 位作者 庄树铨 蔡志明 《医学检验与临床》 2022年第6期1-6,共6页
目的:研究BIM基因在IK6亚型(IK6)及非IK6亚型(IK6)急性淋巴细胞白血病细胞耐化疗药物中的调控机制。方法:利用巢式PCR鉴定急性淋巴细胞白血病细胞Nalm6和RS4;11的IKZF1亚型;通过Alamarblue法、流式细胞术等检测适当浓度的柔红霉素下对... 目的:研究BIM基因在IK6亚型(IK6)及非IK6亚型(IK6)急性淋巴细胞白血病细胞耐化疗药物中的调控机制。方法:利用巢式PCR鉴定急性淋巴细胞白血病细胞Nalm6和RS4;11的IKZF1亚型;通过Alamarblue法、流式细胞术等检测适当浓度的柔红霉素下对两种细胞的活性和凋亡的影响;利用甲基化检测和实时荧光定量PCR对促凋亡基因BIM的甲基化程度和表达水平进行检测。结果:柔紅霉素对IK6^(-)Nalm6和IK6^(+)RS4;11细胞增殖均有浓度依赖的抑制作用,且对二者均有显著的致凋亡作用,相较于Nalm6,RS4;11对柔红霉素显示出更高的耐药性。柔红霉素处理后,Nalm6中的BIM甲基化水平显著性降低,BIMmRNA表达水平显著升高(P<0.05),而二者在RS4;11中未见显著性改变(P>0.05)。结论:IK6的存在可能会诱导BIM基因甲基化水平增加以抵御柔红霉素引起的BIM甲基化水平的降低从而使急性淋巴细胞白血病细胞对柔红霉素耐药。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 柔红霉素 IKZF1 ik6
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艾芮克签约Miss为形象代言人IK6水晶游戏键盘发布
4
《电子竞技》 2015年第7期52-53,共2页
4月11日,专业电竞外设品牌艾芮克在杭州召开了新品发布会,公布了多款键鼠外设新品。艾芮克在2014年发布的一款漂亮而实用的产品——IK6水晶游戏键盘,以其漂亮的外观、超高的性能受到玩家的好评。这次新品发布会带来了IK6的背光版本。孔... 4月11日,专业电竞外设品牌艾芮克在杭州召开了新品发布会,公布了多款键鼠外设新品。艾芮克在2014年发布的一款漂亮而实用的产品——IK6水晶游戏键盘,以其漂亮的外观、超高的性能受到玩家的好评。这次新品发布会带来了IK6的背光版本。孔雀蓝,荧光红,水晶紫五档亮度调节,透明下盖设计,窄边框无上盖,后现代设计理念。 展开更多
关键词 艾芮 ik6 MISS 晶紫 后现代设计 亮度调节 幻彩 键程 键帽 现代设计理念
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IKZF1基因在BCR/ABL融合基因阳性急性淋巴细胞白血病中的表达及机制探讨 被引量：3
5
作者 刘锋 温静 +3 位作者 李光 戴进前 杜明珠 宋艳萍 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第4期603-607,共5页
目的:探讨IKZF1基因在急性淋巴细胞白血病中的表达特点及可能机制,进一步明确急性淋巴细胞白血病的发病机理。方法:收取80例急性淋巴细胞白血病患者的外周血标本,其中21例BCR/ABL融合基因阳性,均为B细胞急性淋巴细胞白血病。RT-PCR技术... 目的:探讨IKZF1基因在急性淋巴细胞白血病中的表达特点及可能机制,进一步明确急性淋巴细胞白血病的发病机理。方法:收取80例急性淋巴细胞白血病患者的外周血标本,其中21例BCR/ABL融合基因阳性,均为B细胞急性淋巴细胞白血病。RT-PCR技术检测IKZF1基因、RAG1基因及RAG2基因的表达;提取细胞DNA,PCR技术检测IKZF1基因的缺失突变;二代测序了解IKZF1基因断裂点区域的碱基序列。结果:RT-PCR结果显示80例急性淋巴细胞白血病中19例表达IK6亚型,其中17例为BCR/ABL融合基因阳性B细胞急性淋巴细胞白血病,2例为BCR/ABL融合基因阴性B细胞急性淋巴细胞白血病。即IK6亚型的表达主要在B细胞急性淋巴细胞白血病中,且主要与BCR/ABL融合基因有关。PCR实验证实了BCR/ABL融合基因阳性B细胞急性淋巴细胞白血病中IKZF1基因发生了缺失突变。二代测序发现IK6亚型由IKZF1基因2号内含子和6号内含子异常断裂后拼接形成,断裂点处存在重组激活基因蛋白能靶向作用的cRSS序列。结论:IK6亚型的表达主要在B细胞急性淋巴细胞白血病中。IK6亚型的表达在急性淋巴细胞白血病中与BCR/ABL融合基因有关。IK6亚型的表达在BCR/ABL融合基因阳性急性淋巴细胞白血病中与重组激活基因蛋白靶向作用导致IKZF1基因2号和6号内含子断裂可能相关。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 BCR/ABL IKZF1 ik6 cRSS 重组激活基因蛋白
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成人B细胞性急性淋巴细胞白血病RAG1表达特点及临床意义 被引量：3
6
作者 韩旗 顾岩 +3 位作者 高雨乔 李建勇 陈宝安 葛峥 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期735-740,共6页
目的:探讨成人B细胞性急性淋巴细胞白血病(B-ALL)中RAG1基因的表达特点及其临床意义。方法:应用实时定量PCR方法检测104例初发、22例复发成人B-ALL患者和30例正常对照者RAG1基因的表达,分析基因表达特点及其与临床和实验室参数之间的关... 目的:探讨成人B细胞性急性淋巴细胞白血病(B-ALL)中RAG1基因的表达特点及其临床意义。方法:应用实时定量PCR方法检测104例初发、22例复发成人B-ALL患者和30例正常对照者RAG1基因的表达,分析基因表达特点及其与临床和实验室参数之间的关系。结果:初发、复发成人B-ALL患者RAG1基因表达水平均高于正常对照者(3.94 vs 1.23)(P<0.001);(5.86 vs1.23)(P<0.01)。6例初发与复发患者成对标本分析显示,RAG1表达水平在疾病复发时显著高于初发(13.65 vs2.31)(P<0.01)。IKZF1基因外显子3-6缺失的异构体Ikaros isoform 6(Ik6)阳性患者RAG1基因表达水平显著高于Ik6阴性患者(5.30 vs2.11)(P<0.05)。RAG1高表达组LDH水平大于1 000 U/L患者的比例显著高于低表达组(42.2%vs20.5%)(P<0.05)。结论:RAG1基因表达上调在成人B-ALL发生发展中尤其在复发过程中可能起重要作用,其上调与IKZF1基因缺失相关。监测RAG1表达水平的变化可能为临床预测成人B-ALL患者疾病进展提供帮助。 展开更多
关键词 RAG1基因 成人B细胞性急性淋巴细胞白血病 ik6临床意义
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