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N6-甲基腺嘌呤-胰岛素样生长因子-2 mRNA结合蛋白1通过促进甾醇邻酰基转移酶1表达调节心力衰竭的机制研究
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作者 钟妮尔 王菲 +1 位作者 邓纪钊 杨光 《临床内科杂志》 2025年第3期237-242,共6页
目的 探讨胰岛素样生长因子-2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)和甾醇邻酰基转移酶1(SOAT1)在心力衰竭(HF)中的分子机制。方法 分离获取大鼠心肌细胞,将其分为对照组、缺氧模型组、sh-NC组、sh-SOAT1组、sh-METTL3组、sh-METTL3+Vector组、sh-ME... 目的 探讨胰岛素样生长因子-2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)和甾醇邻酰基转移酶1(SOAT1)在心力衰竭(HF)中的分子机制。方法 分离获取大鼠心肌细胞,将其分为对照组、缺氧模型组、sh-NC组、sh-SOAT1组、sh-METTL3组、sh-METTL3+Vector组、sh-METTL3+pcDNA-SOAT1组、sh-IGF2BP1组、sh-IGF2BP1+Vector组、sh-IGF2BP1+pcDNA-SOAT1组。对照组细胞在正常氧环境培养,其余各组均在缺氧环境培养。采用Me-RIP分析SOAT1 mRNA的N6-甲基腺嘌呤(m6A)富集水平;RIP分析验证SOAT1 mRNA与METTL3和IGF2BP1蛋白的结合情况;检测细胞活力、细胞凋亡率、活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖摄取、IL-1β及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。通过横向主动脉收缩(TAC)手术构建HF模型,将64只雄性SD大鼠随机分为假手术组、HF组、HF+LV-NC组、HF+sh-SOAT1组、HF+sh-SOAT1+METTL3组和HF+sh-SOAT1+IGF2BP1组,术后均饲养4周。采用超声心动图分析左心室的功能,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色分析梗死面积,Western blot检测SOAT1、METTL3和IGF2BP1蛋白表达水平。结果 与对照组比较,缺氧模型组SOAT1的mRNA和蛋白表达水平均显著升高,细胞活力和葡萄糖摄取水平减少,细胞凋亡率、ROS、LDH、IL-1β、TNF-α水平均升高;与sh-NC组比较,sh-METTL3组、sh-IGF2BP1组和shSOAT1组SOAT1的mRNA和蛋白表达水平均降低,细胞活力和葡萄糖摄取水平增多,细胞凋亡率、ROS、LDH、IL-1β、TNF-α水平均降低(P <0.05)。与sh-NC组比较,sh-METTL3组Anti-METTL3抗体下拉的复合物中m6A修饰的SOAT1 mRNA减少,sh-IGF2BP1组SOAT1 mRNA的半衰期更短;分别与sh-METTL3+vector组和sh-IGF2BP1+vector组比较,sh-METTL3+pcD NA-SOAT1组和shIGF2BP1+pcD NA-SOAT1组细胞活力均更低、细胞凋亡均更高(P <0.05)。动物实验结果显示,与假手术组比较,HF组大鼠心脏组织中SOAT1、METTL3和IGF2BP1蛋白表达水平均升高,心脏梗死面积增大,心脏功能发生障碍[左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴收缩率(LVFS)、左心室最大压力和dP/dt均降低,左心室舒张内径和收缩内径(LVID,d和LVID,s)]均增大;HF+sh-SOAT1组大鼠心脏梗死面积比HF+LV-NC组减小,心脏功能得到改善;而HF+sh-SOAT1+METTL3组和HF+sh-SOAT1+IGF2BP1组大鼠心脏功能障碍进一步加剧(P <0.05)。结论 IGF2BP1通过识别METTL3-m6A介导的SOAT1 mRNA促进其稳定性,上调SOAT1蛋白表达水平,从而促进HF发生与发展。 展开更多
关键词 心力衰竭 RNA N6腺苷甲基化 甾醇邻酰基转移酶1 甲基转移酶样蛋白3 胰岛素样生长因子-2 mRNA结合蛋白1
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油烟中细颗粒物致胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞氧化应激指标的影响 被引量:9
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作者 王勇 操基玉 +2 位作者 郭冬梅 冯哲伟 梁春梅 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期872-875,共4页
目的探讨油烟中的细颗粒物(PM2.5)对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的细胞毒性。方法将1只妊娠18d的SPF级ICR小鼠体内的胎鼠肺组织制成AECⅡ细胞悬液。调整细胞浓度为1×106个/ml,分别加入终浓度为0(溶剂对照,DMEM)、25、50、100、200... 目的探讨油烟中的细颗粒物(PM2.5)对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)的细胞毒性。方法将1只妊娠18d的SPF级ICR小鼠体内的胎鼠肺组织制成AECⅡ细胞悬液。调整细胞浓度为1×106个/ml,分别加入终浓度为0(溶剂对照,DMEM)、25、50、100、200μg/ml的PM2.5(来源于烹调油烟)溶液,培养12、24和48h后进行MTT试验。调整细胞浓度为5×105个/ml,分别加入终浓度为分别为0(溶剂对照,DMSO)、12.5、25和50μg/ml的PM2.5溶液,培养12、24和48h后测定上清液中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量。结果随着PM2.5染毒浓度的升高和染毒时间的延长,AECⅡ细胞存活率和SOD活力呈下降趋势,MDA含量呈上升趋势;而GSH含量仅随着PM2.5染毒浓度的升高而呈下降趋势。结论油烟中的PM2.5可降低AECⅡ的细胞活力,产生脂质过氧化作用。 展开更多
关键词 油烟细颗粒物 肺泡型上皮细胞 细胞毒性 脂质过氧化作用
原文传递
肝癌、癌旁肝组织IGF-Ⅱ、IGF-Ⅱ受体及CSF-1受体/c-fms癌基因产物的表达 被引量:3
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作者 杨冬华 刘为纹 +6 位作者 顾健人 刘尚廉 万大方 马安卿 蒋惠秋 李岱宗 李宏年 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第6期517-524,共8页
本文采用免疫组织化学(ABC)法、Western印迹法和Northern印迹法从细胞、蛋白及转录水平观察17例肝癌及癌旁肝组织中IGF-Ⅱ、IGF-Ⅱ受体和CSF-1受体/c-fms癌基因产物的表达。结果表明,肝癌组织中3种基因产物的表达水平显著高于正常肝组织... 本文采用免疫组织化学(ABC)法、Western印迹法和Northern印迹法从细胞、蛋白及转录水平观察17例肝癌及癌旁肝组织中IGF-Ⅱ、IGF-Ⅱ受体和CSF-1受体/c-fms癌基因产物的表达。结果表明,肝癌组织中3种基因产物的表达水平显著高于正常肝组织;癌旁肝组织中IGF-Ⅱ和IGF-Ⅱ受体的表达水平显著高于肝癌组织;肝癌及癌旁肝组织IGF-Ⅱ基因呈胚胎型表达特点。但是,肝癌组织中CSF-1受体基因表达则显著高于癌旁肝组织。由此提示3种基因产物异常的过量表达与肝癌细胞自分泌生长刺激机制有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 IGF CSF 受体 癌旁 肝组织
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高加速度环境作用颞下颌关节软骨基质成分与相关生长因子及炎性因子的变化 被引量:2
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作者 栗洪师 陈新 +2 位作者 冯岩 尹音 曹均凯 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第11期1663-1667,共5页
背景:强大的加速性能可产生持续性高正加速度(+Gz),使颞下颌骨关节内部受到各种方向的压力和撞击,引起微小创伤,进而引发颞下颌关节紊乱病症。目的:观察颞颌关节紊乱后软骨关节基质成分Ⅱ型胶原、多糖聚糖体、胶原酶以及胰岛素样生长因... 背景:强大的加速性能可产生持续性高正加速度(+Gz),使颞下颌骨关节内部受到各种方向的压力和撞击,引起微小创伤,进而引发颞下颌关节紊乱病症。目的:观察颞颌关节紊乱后软骨关节基质成分Ⅱ型胶原、多糖聚糖体、胶原酶以及胰岛素样生长因子1、转移生长因子β1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素2与白细胞介素3的变化。方法:建立不同持续性正高加速度(+Gz)环境和作用时间下的大鼠模型,分成阴性对照组,+5 G加速度组,+10 G加速度组。按不同+Gz值进行正高加速度模拟处理,离心5 min,4 d/周,每天连续离心5次,共持续3周;阴性对照组大鼠按相同时间和频次只在离心机的固定装置上固定5 min,不做持续高正加速度离心处理,每天离心前所有动物均空腹12 h。分离并体外培养各组大鼠的颞下颌软骨细胞,提取总蛋白,Western Blot检测。结果与结论:与阴性对照组比较,在持续性高加速度下,颞下颌关节软骨细胞的软骨基质成分Ⅱ型胶原、多糖聚糖体、胶原酶以及胰岛素样生长因子1、转移生长因子β1明显减少,肿瘤坏死因子α、白细胞介素2与白细胞介素3显著增高。结果说明在持续性高正加速度下,颞下颌关节软骨基质成分受到严重影响,修复能力下降,炎症反应增加。 展开更多
关键词 组织构建 软骨组织工程 高加速度 Ⅱ型胶原 多糖聚糖体 胶原酶 胰岛素样生长因子1 转移生长因子Β1 肿瘤坏死因子α 白细胞介素2 白细胞介素3
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哲罗鱼胰岛素样生长因子-II的原核表达与活性分析 被引量:4
5
作者 吴秀梅 徐黎明 +4 位作者 赵景壮 刘淼 曹永生 卢彤岩 尹家胜 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期243-249,共7页
在鱼类胚胎发育过程中,胰岛素样生长因子-II(insulin-like growth factors-II,IGF-II)起着关键的作用。本研究根据Gen Bank收录的鲑鳟鱼IGF-II基因序列设计引物,以哲罗鱼(Hucho taimen)肝RNA提取物为模板,利用RT-PCR方法扩增出哲罗鱼IGF... 在鱼类胚胎发育过程中,胰岛素样生长因子-II(insulin-like growth factors-II,IGF-II)起着关键的作用。本研究根据Gen Bank收录的鲑鳟鱼IGF-II基因序列设计引物,以哲罗鱼(Hucho taimen)肝RNA提取物为模板,利用RT-PCR方法扩增出哲罗鱼IGF-II基因开放阅读框。将目的基因IGF-II与原核表达载体p SUMO连接构建出重组表达载体p SUMO-IGF。将该重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中进行目的蛋白的诱导表达。SDS-PAGE电泳分析显示,约在40 k D处含有清晰的条带,与预期结果相符;目的蛋白以包涵体形式存在。对包涵体进行变性/复性后获得较纯的目的蛋白,利用ELISA和MTT方法对目的蛋白进行免疫学活性及生物学活性分析。ELISA结果显示该目的蛋白能够与商品化的抗鲑鳟鱼IGF-II的抗体发生特异性反应,并且呈现抗原浓度依赖性,该结果说明本研究获得了具有良好免疫原性的IGF-II蛋白;MTT方法测定IGF-II蛋白对鲤(Cyprinus carpio)上皮细胞(epitheliaoma papulosum cyprini,EPC)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)性腺细胞(rainbow trout gonad,RTG-2)的增殖效果来鉴定IGF-II蛋白的生物学活性,结果显示所表达的哲罗鱼IGF-II蛋白能够有效的刺激EPC细胞和RTG-2细胞增殖。该结果表明利用原核表达系统获得的哲罗鱼IGF-II蛋白具有良好的生物学活性。本研究为哲罗鱼的生长模式和生长繁殖的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-II 哲罗鱼 生物活性 MTT
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测定心衰患者血清胰岛素样生长因子Ⅱ和肾上腺髓质素的意义 被引量:5
6
作者 蔡建林 季乃军 +5 位作者 梅益斌 樊必夫 王成尧 童丽军 陈东海 李付远 《心血管康复医学杂志》 CAS 2004年第1期33-35,共3页
目的:探讨慢性心力衰竭患者血清胰岛素样生长因子Ⅱ(IGFⅡ)和肾上腺髓质素(ADM)的变化及其临床意义。方法:用放射免疫法测定了92例慢性心力衰竭(CHF)患者和40例非慢性心力衰竭患者的血清IGF Ⅱ和ADM水平,并进行对照统计分析。结果:CHF... 目的:探讨慢性心力衰竭患者血清胰岛素样生长因子Ⅱ(IGFⅡ)和肾上腺髓质素(ADM)的变化及其临床意义。方法:用放射免疫法测定了92例慢性心力衰竭(CHF)患者和40例非慢性心力衰竭患者的血清IGF Ⅱ和ADM水平,并进行对照统计分析。结果:CHF组患者血清IGFⅡ和ADM水平均显著高于对照组(P<0.01),相互间呈显著正相关(r=0.391,P<0.05)。在心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级组间,血清ADM水平依次递增(方差F检验,P<0.05),且Ⅳ级组显著高于Ⅱ级组(P<0.01)。住院期间死亡组患者血清IGFⅡ和ADM水平均显著高于好转出院组(P分别<0.01,<0.05)。结论:CHF患者血清IGF Ⅱ和ADM水平显著升高,相互间成正相关,Ⅳ级组血清ADM显著高于Ⅱ级组,死亡组血清IGFⅡ和ADM水平均显著升高。 展开更多
关键词 心力衰竭 血清 胰岛素样生长因子Ⅱ 肾上腺髓质素 IGFⅡ ADM CHF 心功能
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三维多立方烷类氯桥连的Cu(II)簇合物[Cu_3Cl_6]_∞的水热合成及其晶体结构 被引量:1
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作者 陈延民 解庆范 林碧洲 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期821-822,共2页
A new type of three-dimensional open-framework copper chloride,prepared simply by the hydrothermal treatment of CuCl2·H2O and melamine,is built up from unusual chloride bridged{Cu4Cl4}distorted cubane units con... A new type of three-dimensional open-framework copper chloride,prepared simply by the hydrothermal treatment of CuCl2·H2O and melamine,is built up from unusual chloride bridged{Cu4Cl4}distorted cubane units connected by sharing copper cations and has voids in the framework.Each Cu with six Cl atoms forms the distorted octahedron.The crystal is triclinic,Space group Pī,lattice parameters,a=6.1020(12)?,b=6.7860(14)?,c=9.0570(18)?,α=89.67(3)°,β=80.15(3)°,γ=89.45(3)°,V=369^49(13)?3,Z=2,Dc=2.417g·cm-3,F(000)=252,R1=0.0922,and wR2=0.2720. 展开更多
关键词 立方烷结构 铜(Ⅱ)簇合物 水热合成 晶体结构 [Cu3Cl6]∞ 氯桥连
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脱细胞真皮基质修复猪胆管缺损:促进血管及胆管上皮再生 被引量:4
8
作者 陈刚 白建华 +4 位作者 朱新锋 曹俊 刘其雨 赵英鹏 李立 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第43期6940-6945,共6页
背景:脱细胞真皮基质是无细胞的天然组织支架,与人体软组织十分相近,易于塑形,无毒副作用,已被用于修补尿道与输尿管。目的:观察脱细胞基质修补胆管损伤的效果。方法:将30头滇南小耳猪随机均分为3组,空白对照组切断胆管后行端端吻合,实... 背景:脱细胞真皮基质是无细胞的天然组织支架,与人体软组织十分相近,易于塑形,无毒副作用,已被用于修补尿道与输尿管。目的:观察脱细胞基质修补胆管损伤的效果。方法:将30头滇南小耳猪随机均分为3组,空白对照组切断胆管后行端端吻合,实验组人为制作胆管缺损后以脱细胞真皮基质修补,对照组人为制作胆管缺损后以膨体聚四氟乙烯修补。修补后6,24周取胆管补片及其周围组织,进行免疫组织化学与RT-PCR检测。结果与结论:免疫组织化学显示,实验组细胞角蛋白表达高于空白对照组与对照组,转化生长因子β1表达低于空白对照组与对照组。术后24周内RT-PCR检测显示,实验组总体转化生长因子β1基因表达低于空白对照组与对照组(P<0.05),总体胰岛素样生长因子2基因表达高于空白对照组(P<0.05),总体血管内皮生长因子基因表达高于空白对照组与对照组(P<0.05)。表明脱细胞基质修复胆道损伤可促进血管及胆管上皮的再生,并且不增加瘢痕的形成。 展开更多
关键词 胆管 胰岛素样生长因子Ⅱ 转化生长因子β1 组织工程 生物材料 材料相容性 脱细胞基质 胆管损伤 胰岛素样生长因子2 血管内皮生长因子A
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Toll样受体4在血管紧张素Ⅱ所致高血压小鼠血管重构中的作用 被引量:16
9
作者 康晓敏 吕宏娟 +3 位作者 王霞 王蕾 李汇华 尹洪超 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2013年第1期67-70,共4页
目的探讨Toll样受体4(TLR4)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)所致高血压小鼠血管重构中的作用。方法选择野生型C57小鼠18只,随机分为对照组、AngⅡ组和TLR4组,每组6只。AngⅡ灌注7d,于灌泵前2d至灌泵后7d小鼠尾静脉注射TLR4中和抗体。免疫组织化... 目的探讨Toll样受体4(TLR4)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)所致高血压小鼠血管重构中的作用。方法选择野生型C57小鼠18只,随机分为对照组、AngⅡ组和TLR4组,每组6只。AngⅡ灌注7d,于灌泵前2d至灌泵后7d小鼠尾静脉注射TLR4中和抗体。免疫组织化学检测胸主动脉内皮素1、增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达;流式细胞仪检测T细胞表面活化分子CD69的表达。结果与对照组比较,AngⅡ组小鼠血压、内皮素1、PCNA、ICAM-1、CD69表达明显上调,α-SMA表达明显下调(P<0.05,P<0.01)。与AngⅡ组比较,TLR4组小鼠血压、内皮素1、PCNA、ICAM-1、CD69表达明显下调,α-SMA表达明显上调(P<0.05,P<0.01)。结论 TLR4通过介导炎性反应参与AngⅡ所致高血压小鼠血管重构。 展开更多
关键词 高血压 TOLL样受体4 血管紧张素 II 免疫组织化学 胞间黏附分子1
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大肠杆菌SLT-IIvB基因的克隆和表达 被引量:6
10
作者 倪振亚 焦新安 +2 位作者 高崧 张如宽 刘秀梵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期591-597,共7页
采用聚合酶链式反应 (PCR) ,从大肠杆菌O1 38基因组DNA中分别扩增出志贺菌样毒素II型变体B的结构序列和包括信号肽的全序列两段基因 ,定向克隆进表达载体质粒pYA3334(asd+)的EcoRI、BamHI位点之间 ,构建成重组表达质粒。在大肠杆菌X62 1... 采用聚合酶链式反应 (PCR) ,从大肠杆菌O1 38基因组DNA中分别扩增出志贺菌样毒素II型变体B的结构序列和包括信号肽的全序列两段基因 ,定向克隆进表达载体质粒pYA3334(asd+)的EcoRI、BamHI位点之间 ,构建成重组表达质粒。在大肠杆菌X62 1 2(Δasd)筛选出重组质粒 pB0 和 pB1 后 ,经中间宿主X3730转化过渡 ,再导入ΔasdΔcyaΔcrp减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550 ,构建成宿主和载体之间具有平衡致死结构的SLT IIvB重组菌。SDS PAGE和Western blot分析重组菌X4550 ( pB0 )在 7 6kD左右处有一条特异性蛋白条带。动物免疫试验表明该重组菌能刺激机体产生针对SLT IIvB和沙门氏菌的特异性抗体。这为进一步研制相应的抗猪水肿病及相应沙门氏菌病的双价活疫苗奠定了重要基础。 展开更多
关键词 大肠杆菌 SLT-IIvB基因 重组疫苗载体
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p21和IGF-II在肝癌、肝硬化组织中表达的研究 被引量:6
11
作者 冯震博 吕自力 何如昆 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2003年第4期270-272,F002,共4页
目的 探讨 p2 1、IGF II在肝硬化、肝细胞癌 (HCC)中表达的意义及其与肝细胞不典型增生(LCD)的关系。方法 用免疫组化S P法检测单纯肝硬化、癌旁肝硬化及肝细胞癌 (HCC) p2 1、IGF II表达情况。结果 p2 1、IGF II在癌旁肝硬化和单纯... 目的 探讨 p2 1、IGF II在肝硬化、肝细胞癌 (HCC)中表达的意义及其与肝细胞不典型增生(LCD)的关系。方法 用免疫组化S P法检测单纯肝硬化、癌旁肝硬化及肝细胞癌 (HCC) p2 1、IGF II表达情况。结果 p2 1、IGF II在癌旁肝硬化和单纯肝硬化组织中的阳性表达率 (92 .86 %和 75 % ;6 8%和 74 % )与HCC(5 4 .5 5 %和 36 .36 % )相比差别有显著性意义 (P <0 .0 5 )。IGF II与p2 1阳性表达存在相关关系。HBsAg阳性或伴LCD改变的肝硬化 ,p2 1、IGF II阳性率均高于HBsAg阴性或不伴有LCD改变的肝硬化 (P <0 .0 5 )。结论  (1)在肝细胞癌变演化过程中 p2 1、IGF II可能发挥协同作用。 (2 )LCD可能是一群具有肿瘤增殖潜能的癌前细胞群 ,尤其有 p2 1、IGF II共同过度表达者 ,有发生HCC的高度危险。 展开更多
关键词 肝癌 肝硬化 P21蛋白 胰岛素样生长因子Ⅱ 肝细胞不典型增生
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IGF2基因印记丢失对胚胎干细胞向胰岛样细胞诱导分化的影响 被引量:5
12
作者 刘峰 彭宇环 +1 位作者 汤佳珍 姜杉 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第9期1362-1367,共6页
背景:IGF2是一种重要的胚胎有丝分裂生长促进因子,在维持细胞正常生长过程中起关键作用,其基因表达以基因组印迹方式受表观遗传调控。当IGF2发生印迹丢失时,与个体的非正常发育以及肿瘤发生存在一些联系。目的:探讨IGF2基因发生印记丢... 背景:IGF2是一种重要的胚胎有丝分裂生长促进因子,在维持细胞正常生长过程中起关键作用,其基因表达以基因组印迹方式受表观遗传调控。当IGF2发生印迹丢失时,与个体的非正常发育以及肿瘤发生存在一些联系。目的:探讨IGF2基因发生印记丢失对小鼠胚胎干细胞定向诱导分化为胰岛样细胞的影响。方法:体外诱导2种小鼠胚胎干细胞(SF1-G和SF1-1)向胰岛样细胞分化;Real-Time PCR和细胞免疫荧光检测Insulin基因的表达;聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)检测印迹基因IGF2在诱导分化前后细胞中的亲本表达;体外胰岛素释放实验检测诱导终末细胞的胰岛素释放水平。结果与结论:(1)IGF2基因印记正常(SF1-G)和印记丢失(SF1-1)的2种小鼠胚胎干细胞在诱导分化前后印迹状态没有发生改变;(2)在诱导的终末细胞中,尽管2种细胞的胰岛素释放水平差异无显著性意义,但是Insulin基因在SF1-1组中的表达水平要高于其在SF1-G组的表达水平;(3)IGF2基因印记丢失可能与诱导分化来源的终末细胞中Insulin基因的表达上调相关。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 基因组印迹 胰岛素样生长因子Ⅱ 胰岛素 组织工程 干细胞 基因印记 诱导分化 糖尿病 胰岛素释放 SF1-1 SF1-G 胰岛相关标记基因
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早孕绒毛滋养层细胞胰岛素生长因子-II mRNA表达与胚胎发育的关系 被引量:11
13
作者 周萍 邹丽 《现代妇产科进展》 CSCD 2004年第3期207-209,共3页
目的 :探讨早孕绒毛组织中IGF IImRNA表达水平的变化与胎盘、胚胎早期发育的关系。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 2 0例正常早孕妇女 (正常对照组 )、15例自然流产妇女 (自然流产组 )及 2 0例药物流产妇女 (药物流产组 )... 目的 :探讨早孕绒毛组织中IGF IImRNA表达水平的变化与胎盘、胚胎早期发育的关系。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 2 0例正常早孕妇女 (正常对照组 )、15例自然流产妇女 (自然流产组 )及 2 0例药物流产妇女 (药物流产组 )绒毛组织中IGF IImRNA的表达 ,同时用PAS染色法分别观测其绒毛组织中糖原储存水平的变化 ,并进行半定量分析和相关性分析。结果 :(1)IGF IImRNA在自然流产组、药物流产组绒毛组织中的表达水平分别为 1.19± 0 .6 7、1.4 2± 0 .6 4,明显低于正常早孕组的 2 .2 2± 0 .95 ,差异均具有显著性 (P <0 .0 5 ) ,药物流产组与自然流产组差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;(2 ) 3组绒毛组织中糖原灰度值分别为 10 6 .0 4± 12 .6 0、82 .85± 2 2 .79、85 .94± 16 .15 ,自然流产组、药物流产组与正常对照组相比差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;(3)绒毛组织中IGF IImRNA的表达强度与其糖原储存水平呈正相关 (P <0 .0 5 )。结论 :推测早孕绒毛组织IGF IImR NA的适量表达与胎盘、胚胎发育有关 ,IGF对胎盘糖原合成的调节可能是其重要作用机制之一。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-Ⅱ 妊娠初期 胚胎发育
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TGF-α与IGF-Ⅱ在血液透析中的检测及其临床意义 被引量:3
14
作者 罗南萍 杨道理 +2 位作者 孟建中 徐军 武翠华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期49-50,共2页
目的:研究多肽生长因子TGF-α与IGF-Ⅱ在长期血透(HD)患者血清及体液中的表达特征。方法:采用放射免疫分析法,检测45例维持性HD患者血清及12h尿液中TGF-α与IGF-Ⅱ的水平。结果:TGF-α水平明显低于... 目的:研究多肽生长因子TGF-α与IGF-Ⅱ在长期血透(HD)患者血清及体液中的表达特征。方法:采用放射免疫分析法,检测45例维持性HD患者血清及12h尿液中TGF-α与IGF-Ⅱ的水平。结果:TGF-α水平明显低于正常组,IGF-Ⅱ则明显高于正常组。HD后血清中两项指标水平均明显高于HD前,测定12h尿液TGF-α和IGF-Ⅱ含量均较正常对照组增高明显(P<0.05;P<0.01)。结论:尿毒症状态或血透过程透析膜等因素可激活单核细胞,导致TGF-α和IGF-Ⅱ的产生增多。 展开更多
关键词 放射免疫分析法 血液透析 TGFΑ IGF-Ⅱ
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hAFP及hTERT双启动子调控的针对人IGF-II基因的siRNA特异性抑制人肝癌细胞生长 被引量:5
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作者 汤绍辉 吴胜兰 +4 位作者 王旷靖 张良鹏 罗羽宏 曹明溶 周鸿科 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1422-1427,共6页
目的:设计并筛选高效沉默胰岛素样生长因子II(IGF-II)基因的小干扰RNA(siRNA)序列,构建由重组人甲胎蛋白(hAFP)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)双启动子调控的该siRNA表达载体,观察其对肝癌细胞生长的影响。方法:根据siRNA设计原则,参照IGF-I... 目的:设计并筛选高效沉默胰岛素样生长因子II(IGF-II)基因的小干扰RNA(siRNA)序列,构建由重组人甲胎蛋白(hAFP)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)双启动子调控的该siRNA表达载体,观察其对肝癌细胞生长的影响。方法:根据siRNA设计原则,参照IGF-II mRNA序列设计3对siRNA序列及1对阴性对照序列,转染人肝癌Huh7细胞,转染24 h后采用实时荧光定量PCR检测IGF-II mRNA表达量变化,筛选干扰效率最高的siRNA序列。采用PCR扩增出hAFP及hTERT启动子的核心序列,应用基因重组技术构建重组hAFP和hTERT双启动子调控的该siRNA表达载体。将上述siRNA表达载体转染Huh7细胞及L-02人正常肝细胞,观察IGF-II mRNA表达及细胞生长情况变化。结果:实时荧光定量PCR显示,siRNA3在25 nmol/L浓度时抑制效率最高,约90%。成功扩增hAFP及hTERT启动子核心序列,将其分别克隆入pGL3-Basic载体,构建成重组pGL3-hAFP-hTERT载体;将siRNA3克隆至pGL3-hAFP-hTERT载体,构建成重组pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3表达载体。Huh7细胞IGF-II mRNA表达量显著降低,抑制效率达86%,细胞增殖受到明显抑制,G1期细胞比例显著增加;L-02细胞上述指标无明显改变。结论:成功构建双重RNA聚合酶II启动子(hAFP及hTERT双启动子)调控的针对IGF-II基因的siRNA表达载体,即pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3;该siRNA表达载体可特异性抑制IGF-II mRNA表达及肝癌细胞生长。 展开更多
关键词 hAFP hTERT双启动子 RNA干扰 人胰岛素样生长因子II 肝细胞
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妊高征胎盘滋养细胞浸润能力的检测及胰岛素样生长因子-II、转化生长因子-β1对其的影响 被引量:8
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作者 李真 林桂兰 +1 位作者 王智 成娅 《生殖医学杂志》 CAS 2004年第4期198-201,共4页
目的 检测妊娠高血压综合征 (妊高征 )胎盘滋养细胞浸润能力 ,胰岛素样生长因子 II(IGF II)、转化生长因子 β1(TGF β1)对细胞滋养细胞侵袭力的影响。  方法 从正常及妊高征胎盘分离、纯化细胞滋养细胞行体外培养 ;用体外侵袭试验... 目的 检测妊娠高血压综合征 (妊高征 )胎盘滋养细胞浸润能力 ,胰岛素样生长因子 II(IGF II)、转化生长因子 β1(TGF β1)对细胞滋养细胞侵袭力的影响。  方法 从正常及妊高征胎盘分离、纯化细胞滋养细胞行体外培养 ;用体外侵袭试验检测正常及妊高征胎盘滋养细胞的侵袭力 ;IGF II、TGF β1对两组滋养细胞侵袭力的影响。  结果 妊高征滋养细胞较正常滋养细胞的侵袭力显著降低 (P <0 .0 5 ) ;IGF II明显促进、TGF β1明显抑制正常妊娠滋养细胞的侵袭能力(P <0 .0 5 ) ;二者对妊高征滋养细胞侵袭力的影响不显著 (P >0 .0 5 )。 结论 妊高征胎盘滋养细胞的侵袭力显著降低 ;IGF II、TGF β1可能在妊高征胎盘滋养细胞浅浸润过程中起一定作用。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-Ⅱ 转化生长因子β1 滋养细胞 浸润 妊娠高血压综合征
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肝癌胰岛素样生长因子II基因启动子P3甲基化的检测及意义 被引量:1
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作者 黄卫 杨冬华 汤绍辉 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2004年第6期708-712,共5页
 目的:建立检测肝癌胰岛素样生长因子II(IGF-II)基因启动子P3甲基化状态的方法。方法:培养三株肝癌细胞系(BEL7402、SMMC7721、HepG2),选取正常肝组织3例;提取基因组DNA,亚硫酸氢钠修饰,巢式聚合酶链反应(nestedPCR)加甲基化特异性PCR(...  目的:建立检测肝癌胰岛素样生长因子II(IGF-II)基因启动子P3甲基化状态的方法。方法:培养三株肝癌细胞系(BEL7402、SMMC7721、HepG2),选取正常肝组织3例;提取基因组DNA,亚硫酸氢钠修饰,巢式聚合酶链反应(nestedPCR)加甲基化特异性PCR(MSP)检测IGF-II基因启动子P3的甲基化状态,PCR产物经克隆、测序验证。结果:三株肝癌细胞系IGF-II基因启动子P3去甲基化,正常肝组织IGF-II基因启动子P3甲基化,目的片段无突变,甲基化修饰完全。结论:巢式PCR加甲基化特异性PCR可准确检测IGF-II基因启动子P3的甲基化状态。 展开更多
关键词 肝细胞癌 胰岛素样生长因子Ⅱ 启动子 甲基化
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乙型肝炎病毒X蛋白通过降低P4启动子甲基化水平上调人IGF-Ⅱ基因的转录 被引量:2
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作者 汤绍辉 张良鹏 +5 位作者 吴小娟 张嫚嫚 王旷靖 周鸿科 罗羽宏 曹明溶 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1633-1638,共6页
目的:构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝癌细胞株HepG2-HBx,探讨HBx对胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P4启动子甲基化水平及转录表达的影响。方法:应用基因重组技术,构建含HBx基因的重组逆转录病毒载体pBABE-puro-HBx,采用磷酸钙... 目的:构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝癌细胞株HepG2-HBx,探讨HBx对胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P4启动子甲基化水平及转录表达的影响。方法:应用基因重组技术,构建含HBx基因的重组逆转录病毒载体pBABE-puro-HBx,采用磷酸钙共沉淀法将其转染293FT包装细胞产生逆转录病毒,感染HepG2肝癌细胞,采用嘌呤霉素进行阳性克隆筛选,Western blotting鉴定表达HBx蛋白的肝癌细胞株HepG2-HBx。采用亚硫酸氢盐测序法及实时荧光定量RT-PCR检测HepG2-HBx细胞中P4启动子甲基化水平及P4mRNA表达水平变化。进一步将体外甲基化的人IGF-Ⅱ基因P4启动子驱动的荧光素酶报告载体pGL3-P4及含HBx基因的pCMV-tag2B-X质粒共转染HepG2肝癌细胞,采用亚硫酸氢盐测序法及双萤光素酶实验检测pGL3-P4载体上P4启动子甲基化水平及转录调控活性变化。结果:(1)经Western blotting鉴定,成功构建了稳定表达HBx蛋白的肝癌细胞株HepG2-HBx;(2)表达HBx蛋白的HepG2-HBx细胞中P4启动子甲基化CpG位点的比例(9.0%)明显低于对照细胞HepG2-control(25.0%)(P<0.01),而其P4 mRNA表达水平则为对照细胞HepG2-control的2.8倍;(3)共转染pCMV-tag2B-X质粒的HepG2细胞中pGL3-P4载体上P4启动子甲基化CpG位点的比例(60.8%)明显低于共转染对照质粒pCMV-tag2B的HepG2细胞(84.1%)(P<0.01),而前者P4启动子相对萤光素酶活性(14.12±0.89)则明显高于后者(4.61±0.76)(P<0.01)。结论:HBx蛋白可降低IGF-Ⅱ基因P4启动子甲基化水平,进而上调其转录表达。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒X蛋白 胰岛素样生长因子Ⅱ 启动子 DNA甲基化
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实验性大鼠多囊卵巢中胰岛素样生长因子-IImRNA的表达 被引量:2
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作者 朱辉 倪江 +1 位作者 邢志军 吴燕婉 《生殖医学杂志》 CAS 1999年第3期160-163,共4页
应用原位杂交的方法,观察实验性大鼠多囊卵巢( P C O)中胰岛素样生长因子 I I( I G F I I)m R N A 在卵巢中的分布情况。结果表明,在大鼠 P C O 中 I G F I Im R N A 主要在卵泡膜细胞中表... 应用原位杂交的方法,观察实验性大鼠多囊卵巢( P C O)中胰岛素样生长因子 I I( I G F I I)m R N A 在卵巢中的分布情况。结果表明,在大鼠 P C O 中 I G F I Im R N A 主要在卵泡膜细胞中表达,颗粒细胞表达量很少,而在正常成熟卵泡中 I G F I I在颗粒细胞表达量增多。提示 I G F I I在卵泡膜细胞和颗粒细胞中的不同表达,可能与 P C O 卵泡发育成熟障碍及优势卵泡的选择有关。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 原位杂交IGFⅡ MRNA
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IGF-Ⅱ异常活化及Bcl-2过表达与肝细胞恶性转化关系的研究 被引量:2
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作者 李敏 姚登福 +4 位作者 董志珍 钱静 李姗姗 卞银珠 赛文莉 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2009年第12期1091-1094,共4页
目的观察胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)及B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)在肝细胞癌变过程中的动态表达及变化特点。方法以2-乙酰氨基芴(2-FAA)喂饲雄性SD鼠诱发肝癌发生,分析肝细胞病理形态学改变,以免疫组织化学法观察鼠肝细胞IGF-Ⅱ和Bcl-2... 目的观察胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)及B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)在肝细胞癌变过程中的动态表达及变化特点。方法以2-乙酰氨基芴(2-FAA)喂饲雄性SD鼠诱发肝癌发生,分析肝细胞病理形态学改变,以免疫组织化学法观察鼠肝细胞IGF-Ⅱ和Bcl-2的表达与定位,并定量分析肝IGF-Ⅱ和Bcl-2蛋白水平变化。结果诱癌过程中肝细胞出现颗粒样变性、不典型增生到HCC的形成过程中IGF-Ⅱ呈梯度表达,表现为癌变组明显高于对照组和变性组(P<0.01),癌变过程中IGF-Ⅱ和Bcl-2呈阳性表达和胞内分布,肝IGF-Ⅱ与Bcl-2呈显著正相关,癌变组明显高于变性组和正常对照组(P<0.01)。结论IGF-Ⅱ异常活化和Bcl-2过表达均参与肝细胞的癌变过程,对它们的分析有助于肝癌的早期诊断和肝癌发展的监测。 展开更多
关键词 肝癌 胰岛素样生长因子2 BCL-2 免疫组化 酶联免疫吸附试验
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