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单纯疱疹病毒II型gD糖蛋白在真核细胞中的表达
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作者 邵文爱 李晓眠 李康生 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第1期26-27,共2页
目的:构建真核表达质粒pcDNA3/gD,并在体外COS-7细胞中进行表达。方法:体外PCR扩增出gD糖蛋白基因,克隆入真核表达质粒pcDNA3中。PCR、酶切和测序证实插入的gD基因正确后,转染COS-7细胞,用原位ELISA鉴定表达蛋白。结果:构建了pcDNA3/gD... 目的:构建真核表达质粒pcDNA3/gD,并在体外COS-7细胞中进行表达。方法:体外PCR扩增出gD糖蛋白基因,克隆入真核表达质粒pcDNA3中。PCR、酶切和测序证实插入的gD基因正确后,转染COS-7细胞,用原位ELISA鉴定表达蛋白。结果:构建了pcDNA3/gD真核表达质粒,经原位ELISA证实,转染COS-7细胞表达的gD蛋白能和gD单克隆抗体ID3和DL11结合,证明该蛋白具有天然gD蛋白的抗原性。结论:构建的重组真核表达质粒pcDNA3/gD能够在COS-7细胞中表达。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒Ⅱ型 gd糖蛋白 真核表达
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FERROMAGNETICALLY COUPLED Gd(III)Cu(II)Gd(III)TRINUCLEAR COMPLEXES
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作者 Ming Ming MIAO Dai Zheng LIAO +1 位作者 Zone Hui JIANG and Geng Lin WANG (Department of Chemistry.Nankai University,Tianjin.300071) 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 1995年第6期533-536,共4页
Three new heterotrinuclear complexes have been synthesized and characterized, namely {[Gd(L)(2)](2)[Cu(pbaOH)]}(ClO4)(4), where pbaOH denotes 2-hydroxy-1,3-propylenebis(oxamato), L stands for 1,10-phenanthroline (phen... Three new heterotrinuclear complexes have been synthesized and characterized, namely {[Gd(L)(2)](2)[Cu(pbaOH)]}(ClO4)(4), where pbaOH denotes 2-hydroxy-1,3-propylenebis(oxamato), L stands for 1,10-phenanthroline (phen), 5-nitro-1,10-phenanthroline (NO2-phen) or 2,2'-bipyridyl (bpy). The temperature dependence of the magnetic susceptibility of ([Gd(phen)(2)(ClO4)](2)[Cu(pbaOH)])(ClO4)(2) has been studied in the 4-300K range, giving the exchange integral J = 6.69 cm(-1). This indicates a weak ferromagnetic interaction between the copper(II) and gadolinium(III) ions. 展开更多
关键词 ii)gd iiI)TRINUCLEAR COMPLEXES CU
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以Ⅱ型单纯疱疹病毒gD为免疫原的circRNA疫苗制备及药效分析 被引量:1
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作者 张绥欣 郑小迪 +5 位作者 倪鹏 汪众 刘彪 汪洋 胡翰 刘滨磊 《生物工程学报》 北大核心 2025年第4期1354-1371,共18页
为研究以Ⅱ型单纯疱疹病毒gD胞外域(ectodomain)为免疫原的circRNA疫苗诱导BALB/c小鼠出现的特异性免疫反应,并进行免疫研究评价,为单纯疱疹病毒mRNA疫苗的研发提供实验依据和技术参考,本研究通过PCR技术和同源重组技术,从pT7AMP-gD Ect... 为研究以Ⅱ型单纯疱疹病毒gD胞外域(ectodomain)为免疫原的circRNA疫苗诱导BALB/c小鼠出现的特异性免疫反应,并进行免疫研究评价,为单纯疱疹病毒mRNA疫苗的研发提供实验依据和技术参考,本研究通过PCR技术和同源重组技术,从pT7AMP-gD Ectodomain质粒中获得gD基因,将gD基因克隆至pUC57载体,获得重组pUC57-circ-gD质粒并进行测序鉴定。进行PCR获得后续实验模板DNA后,以单纯疱疹病毒囊膜糖蛋白gD Ectodomain为免疫原,并同时将模板DNA进行体外转录(in vitro transcription,IVT)及环化,将得到的pUC57-circ-gD mRNA进行RNase R酶酶切验证、反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)成环验证,以确定是否成环;转染293T细胞,72 h后收集细胞上清,进行蛋白免疫印迹法(Western blotting,WB)以鉴定蛋白表达;采用脂质纳米颗粒(lipidnanoparticles,LNP)对合成的mRNA以微流控包封法进行包封;包封后,将其应用于模型动物BALB/c小鼠中实验,在第21、35天于眼底静脉丛采血,第49天麻醉后摘除眼球采血,后续进行酶联免疫吸附法(enzyme linkedimmunosorbent assay,ELISA)抗体检测,并对病毒中和抗体进行测定,在第49天取脾脏,后续通过固相酶联免疫斑点技术(enzyme-linked immunospot,ELISpot)检测细胞因子IFN-γ的分泌情况。结果表明成功构建了重组质粒,测序结果正确;RNase R酶切验证后证实了环状RNA的存在,mRNA转染293T细胞后Western blotting验证有清晰的特异性条带;对疫苗进行质量检测,通过尺寸排阻高效液相色谱法(size exclusion chromatography-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)检测到疫苗的纯度约为90%,测量mRNA-LNP的粒径为82.76 nm,包封率达到98%左右;小鼠进行3次免疫后,在观察期内小鼠体重的增加和良好的存活率证明了该疫苗的安全性;在免疫后的小鼠血清中,IgG抗体滴度增加;在脾脏细胞中,检测到分泌特异性IFN-γ的T细胞数量升高。后续ELISA、中和抗体检测、ELISpot实验及攻毒实验说明pUC57-circ-gD mRNA免疫原性及持久性良好,并且可以抵御病毒的攻击。本研究为circRNA疫苗相关研究提供了参考。 展开更多
关键词 Ⅱ型单纯疱疹病毒 gd胞外域基因 环状RNA mRNA疫苗 免疫原性
原文传递
酚氧桥联希夫碱Gd~ⅢCu~Ⅱ双核配合物磁学性质理论研究 被引量:1
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作者 黄仁义 罗树常 +2 位作者 刘秋秋 王双凤 梅红 《山东化工》 CAS 2018年第6期13-16,共4页
采用DFT-BS方法,选择GGA、混合泛函、meta-GGA方法和不同基组对酚氧桥联席夫碱Gd~ⅢCu~Ⅱ双核配合物[Cu(valaepy)_2Gd(O_2NO)_3]磁学性质进行研究。结果表明,在B3P86/TZVP(Gd为SARC2-DKH-QZVP)水平下计算的数值与实验值最吻合。分子磁... 采用DFT-BS方法,选择GGA、混合泛函、meta-GGA方法和不同基组对酚氧桥联席夫碱Gd~ⅢCu~Ⅱ双核配合物[Cu(valaepy)_2Gd(O_2NO)_3]磁学性质进行研究。结果表明,在B3P86/TZVP(Gd为SARC2-DKH-QZVP)水平下计算的数值与实验值最吻合。分子磁轨道分析表明,分子磁轨道主要由Gd~Ⅲ离子的4f轨道、Cu~Ⅱ离子3d_(x^2-y^2)的轨道、席夫碱中酚氧桥联配位O原子的p轨道组成。自旋布居分析表明,Gd~Ⅲ以自旋极化为主,Cu~Ⅱ以自旋离域为主。 展开更多
关键词 DFT-BS 酚氧桥 席夫碱 gdiiICuii双核配合物 磁学性质
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基于GD Language的透明纸卷盘自动装载控制分析
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作者 汤尤佳 《机电工程技术》 2011年第3期29-31,90,共4页
为了学习GD language编程语言,以便更好的运用MICRO-Ⅱ控制系统,提高卷烟包装机的设计能力,对ZB47硬盒硬条包装机透明纸自动装载过程进行了研究。通过分析整个控制系统的硬件组成和GD language软件控制逻辑,可见利用GD language编程语... 为了学习GD language编程语言,以便更好的运用MICRO-Ⅱ控制系统,提高卷烟包装机的设计能力,对ZB47硬盒硬条包装机透明纸自动装载过程进行了研究。通过分析整个控制系统的硬件组成和GD language软件控制逻辑,可见利用GD language编程语言可以很好控制各种硬件设备,并在高速卷烟包装机上实现逻辑,运动,过程,以及报警等方面的控制。 展开更多
关键词 透明纸包装机 透明纸 MICRO—Ⅱ gd编程语言
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