盐霉素钠体外抗虹鳟IHNV和IPNV的活性研究

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作者 邵轶智 李林芳 +2 位作者 赵景壮 卢彤岩 徐黎明 《水产学杂志》 2024年第5期20-27,共8页

本研究用10.0μmol/L、5.0μmol/L、1.0μmol/L和0.5μmol/L盐霉素钠(SAL-Na)处理大鳞大麻哈鱼胚胎细胞(Chinook salmon embryo cells,CHSE-214)和胖头鱥上皮瘤细胞(Epithelioma papulosum cyprini,EPC),用感染复数(Multiplicity of inf... 本研究用10.0μmol/L、5.0μmol/L、1.0μmol/L和0.5μmol/L盐霉素钠(SAL-Na)处理大鳞大麻哈鱼胚胎细胞(Chinook salmon embryo cells,CHSE-214)和胖头鱥上皮瘤细胞(Epithelioma papulosum cyprini,EPC),用感染复数(Multiplicity of infection,MOI)为0.1的传染性胰脏坏死病病毒(Infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)或传染性造血器官坏死病毒(Infectious hematopotietic necrosis virus,IHNV)感染CHSE-214或EPC细胞,用5.0μmol/L SAL-Na处理CHSE-214细胞,将MOI为0.1的IPNV和IHNV共同感染细胞,48 h后收集细胞和上清液,测量细胞中病毒载量和上清液中病毒滴度,探究IHNV和IPNV单独感染及混合感染细胞时SAL-Na对病毒增殖的影响。结果表明,IHNV感染细胞时,0.5μmol/L、1.0μmol/L、5.0μmol/L和10.0μmol/L SAL-Na均能抑制病毒增殖;IPNV感染细胞时,5.0μmol/L和10.0μmol/L SAL-Na能抑制病毒增殖;IHNV和IPNV混合感染细胞时,5.0μmol/L SAL-Na可同时抑制二者增殖。在IHNV和IPNV单独感染或者共同感染的情况下,盐霉素钠均可抑制病毒的增殖,表明其可作为IHN和IPN防治的潜在药物。 展开更多

关键词 传染性造血器官坏死病毒(ihnv) 传染性胰脏坏死病毒(IPNV) 盐霉素钠 大鳞大麻哈鱼胚胎细胞(CHSE-214) 胖头鱥上皮瘤细胞(EPC)

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重组虹鳟IFN-γ2的原核表达及抗IHNV活性分析 被引量：5

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作者 曹永生 徐黎明 +3 位作者 赵景壮 刘淼 张奇亚 卢彤岩 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1586-1594,共9页

为获得虹鳟IFN-γ2(rt IFN-γ2)抗传染性造血器官坏死病毒(IHNV)活性的相关数据,实验根据NCBI已发表序列设计引物,提取经植物血凝素刺激后的虹鳟头肾细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增471 bp的该基因完整开放阅读框。将该基因重组至原核表... 为获得虹鳟IFN-γ2(rt IFN-γ2)抗传染性造血器官坏死病毒(IHNV)活性的相关数据,实验根据NCBI已发表序列设计引物,提取经植物血凝素刺激后的虹鳟头肾细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增471 bp的该基因完整开放阅读框。将该基因重组至原核表达载体p ET32a中,并转化大肠杆菌Rosetta,进行诱导表达,SDS-PAGE结果显示,目的蛋白以包涵体形式表达,大小约为38.4 ku。重组蛋白经复性、纯化后在CHSE-214细胞上进行抗IHNV活性分析,结果显示,rt IFN-γ2在CHSE-214细胞上抗IHNV活性为6.63×106U/mg。Real-time PCR结果显示,rt IFN-γ2免疫后,虹鳟头肾、脾、肝中IRF-1、IRF-2、IFN-I、IFN-γ和Mx表达水平均显著提高,总体而言免疫后2天机体抗病毒状态弱于免疫后1天。攻毒保护实验结果显示,免疫后1天进行IHNV攻击时,鱼死亡率为40%,而免疫后2天进行IHNV攻击时,鱼死亡率达到80%。研究表明,原核表达系统制备的重组虹鳟IFN-γ2不仅具有体外抗IHNV活性,更能激发虹鳟的抗病毒状态,从而为虹鳟抵抗IHNV感染提供一定的保护力。 展开更多

关键词 虹鳟IFN-γ2 原核表达 抗ihnv活性 抗病毒状态 保护率

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香菇多糖提取物体外抗IHNV的机制 被引量：4

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作者 任广明 徐黎明 +2 位作者 赵景壮 尹家胜 卢彤岩 《水产学杂志》 CAS 2017年第5期13-17,共5页

本研究以虹鳟性腺细胞(rainbow trout gonad cell,RTG)为细胞模型,采用MTT法体外测定香菇多糖提取物的细胞毒性及其对传染性造血器官坏死病毒(IHNV)直接灭活、预防与生物合成的影响,探讨香菇多糖提取物抗IHNV的作用机制。结果显示:香菇... 本研究以虹鳟性腺细胞(rainbow trout gonad cell,RTG)为细胞模型,采用MTT法体外测定香菇多糖提取物的细胞毒性及其对传染性造血器官坏死病毒(IHNV)直接灭活、预防与生物合成的影响,探讨香菇多糖提取物抗IHNV的作用机制。结果显示:香菇多糖提取物对RTG细胞没有毒性作用。浓度为100μg/m L时,香菇多糖提取物对IHNV的直接灭活能力为52.48%,预防效果为50.38%,抑制IHNV生物合成的能力达84.41%。结果表明:香菇多糖提取物具有一定的抗IHNV作用,该作用主要与抑制IHNV在细胞内的生物合成有关。 展开更多

关键词 香菇多糖提取物 抗ihnv 抗病毒机制

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传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)分离株病原学研究及全基因组序列分析 被引量：2

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作者 焦雪 吉尚雷 +3 位作者 张培军 冷东泽 茆安亭 李月红 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期39-42,共4页

为初步了解东北地区某虹鳟养殖场的一株传染性造血器官坏死病病毒株的病原学特征,将该病毒株进行虹鳟鱼苗人工回接感染试验。结果显示,一周内人工感染试验鱼均出现明显的临床症状。将病死虹鳟鱼苗研磨过滤除菌后接种到胖头鱼肌肉细胞系(... 为初步了解东北地区某虹鳟养殖场的一株传染性造血器官坏死病病毒株的病原学特征,将该病毒株进行虹鳟鱼苗人工回接感染试验。结果显示,一周内人工感染试验鱼均出现明显的临床症状。将病死虹鳟鱼苗研磨过滤除菌后接种到胖头鱼肌肉细胞系(FHM),出现了特征性病变(CPE),用传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)4组水生动物病毒的6对特异性引物对该毒株进行race-PCR,扩增其全长。结果显示,该病毒基因组全长为11 132 nt,基因组序列中4种核苷酸G、A、T、C含量分别为24.28%、28.67%、19.46%、27.59%。将序列与多株GenBank中已发表的IHNV毒株相应基因进行比较。结果显示,分离株G基因与韩国株ChYa07和PcKw11同源性较高,分别为97.8%和97.5%,其进化树分析结果显示,CJ-13株与韩国株和日本株在遗传进化关系上较近。 展开更多

关键词 传染性造血器官坏死病病毒(ihnv) 流行病原学 全序列

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分泌IHNV－B病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量：1

5

作者 赵志壮 牛鲁祺 刘长明 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期231-232,共2页

分泌ＩＨＮＶ－Ｂ病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立赵志壮，牛鲁祺（中国水产科学研究院黑龙江水产研究所，哈尔滨１５００７６）刘长明（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，１５０００１）关键词传染性造血器官坏死症病毒中国本溪株，... 分泌ＩＨＮＶ－Ｂ病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立赵志壮，牛鲁祺（中国水产科学研究院黑龙江水产研究所，哈尔滨１５００７６）刘长明（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，１５０００１）关键词传染性造血器官坏死症病毒中国本溪株，单克隆抗体，杂交瘤ＥＳＴＡＢＬＩＳ... 展开更多

关键词 单克隆抗体 杂交瘤 ihnv-B 虹鳟鱼

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从河口及海洋环境中筛选具有抗病毒IHNV能力的细菌

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作者 郗艳娟 吴新民 《河北渔业》 2004年第4期22-23,共2页

关键词 河口环境 海洋环境 筛选方法 抗病毒ihnv能力 细菌

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国内养殖鱼类和进境鱼卵中传染性造血器官坏死病毒(IHNV)的检测及基因分析 被引量：21

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作者 刘荭 范万红 +5 位作者 史秀杰 陈超 吕建强 何俊强 高隆英 江育林 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期544-549,共6页

用传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)的反转录聚合酶链及该方法在来自国内养殖场的患病牙鲆和虹鳟及进口的匙吻鲟鱼卵中检测出IHNV,同时对扩增出的IHNV的DNA片段进行了序列分析。结果表明,从国内养殖的牙鲆和虹鳟中分离出的IHNV与IHNV的... 用传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)的反转录聚合酶链及该方法在来自国内养殖场的患病牙鲆和虹鳟及进口的匙吻鲟鱼卵中检测出IHNV,同时对扩增出的IHNV的DNA片段进行了序列分析。结果表明,从国内养殖的牙鲆和虹鳟中分离出的IHNV与IHNV的标准株RB-1株在序列上都具有98.1%的同源性,推导出在氨基酸序列上分别具有97%和99%的同源性。从进口匙吻鲟鱼卵中分离的IHNV与RB-1株在序列上都具有92.5%的同源性,推导出氨基酸序列有93%的同源性。系统发育树分析结果表明,从国内发病的养殖虹鳟中分离出的IHNV与进口匙吻鲟鱼卵中检测到的IHNV在进化上关系较为密切。 展开更多

关键词 传染性造血器官坏死病毒 检测 基因分析

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应用ELISA方法快速检测IHNV—B病毒 被引量：12

8

作者 赵志壮 牛鲁祺 刘长明 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期60-63,共4页

采用酶联免疫吸附试验(ELISA)快速诊断病毒性疾病,由于具有灵敏度高、特异性强和简便等优点,已在医学和兽医学上得到了广泛的应用。在鱼类病毒检测方面,Dixon,P.F.和Hill,B.J.用ELI-SA方法(1983)快速检测传染性胰脏坏死症病毒(IPNV)和(1... 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)快速诊断病毒性疾病,由于具有灵敏度高、特异性强和简便等优点,已在医学和兽医学上得到了广泛的应用。在鱼类病毒检测方面,Dixon,P.F.和Hill,B.J.用ELI-SA方法(1983)快速检测传染性胰脏坏死症病毒(IPNV)和(1984)几种鱼类弹状病毒,江育林等(1990)曾报道用此技术快速检测IPN病毒,1990年在我国本溪虹鳟鱼苗中分离出一株弹状病毒,暂称之为传染性造血器官坏死症病毒中国本溪株(IHNV-B),由于该病毒对虹鳟(rainbow trout)鱼苗危害极为严重,为预防和控制其蔓延,本文报道了应用ELISA方法对感染的鱼苗、鱼卵和细胞培养物中的IHNV-B病毒进行快速检测,可用目测或酶标检测仪来判定结果。 展开更多

关键词 虹鳟 检测 病毒 ELISA

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传染性造血器官坏死病毒(IHNV)实时荧光环介导等温扩增快速检测方法的建立 被引量：2

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作者 陈进会 唐大运 +5 位作者 黄伟 邱杨 刘建丽 叶蕾 石磊 李红梅 《中国动物检疫》 CAS 2013年第12期53-58,共6页

建立了一套基于环介导等温扩增技术(LAMP)的实时荧光检测方法,用于IHNV的检测。根据IHNV的保守基因glyG,设计合成3套LAMP引物,LAMP反应在63℃下进行,引入环引物后,第3套LAMP引物显示出良好的扩增效率。以ESE-Quant tube scanner为恒温... 建立了一套基于环介导等温扩增技术(LAMP)的实时荧光检测方法,用于IHNV的检测。根据IHNV的保守基因glyG,设计合成3套LAMP引物,LAMP反应在63℃下进行,引入环引物后,第3套LAMP引物显示出良好的扩增效率。以ESE-Quant tube scanner为恒温反应及检测平台,对IHNV进行实时荧光检测,反应在40 min内可得出结果。本研究建立的IHNV实时荧光LAMP法检测限达到3.6 pg。特异性试验表明仅IHNV发生特异性扩增,而SVCV、VHSV、HRV、PFRV以及IPNV均不发生反应。所建立的恒温实时荧光检测法操作简单、反应迅速,同时具有较高的灵敏度和特异性。引入的ESE-Quant tube scanner平台设备要求低,同时使扩增过程数字化和自动化,适合IHNV的现场检测和大规模疫病的监控。 展开更多

关键词 传染性造血器官坏死病毒 环介导等温扩增 恒温实时荧光 ESE Quanttube SCANNER

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人参提取液体外抑制IHNV作用效果研究

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作者 茆安婷 尹玉伟 +4 位作者 代静 郭曦尧 程义 李东 李月红 《中国兽药杂志》 2018年第2期31-35,共5页

探究人参提取液体外抑制CCB细胞感染IHNV的能力,构建体外CCB细胞模型,运用RTCA技术和MTT法测得不同浓度人参提取液对IHNV抑制作用曲线,并从阻断病毒复制和杀灭病毒两方面讨论人参提取液作用效果。结果表明,4%人参提取液对IHNV具有明显... 探究人参提取液体外抑制CCB细胞感染IHNV的能力,构建体外CCB细胞模型,运用RTCA技术和MTT法测得不同浓度人参提取液对IHNV抑制作用曲线,并从阻断病毒复制和杀灭病毒两方面讨论人参提取液作用效果。结果表明,4%人参提取液对IHNV具有明显抑制作用,能够在16 h内保护细胞不受IHNV病毒的侵染,其中2 h时对病毒灭活抑制率最高达到51.5%,1~12 h内对病毒复制有持续抑制作用。研究可为IHVN防治药物的研发提供新的思路及参考。 展开更多

关键词 人参提取液 ihnv 抑制

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两种检测传染性造血器官坏死病(IHNV)方法的比较 被引量：1

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作者 罗靳 薄尔琳 +1 位作者 郭楠 郭欣硕 《河北渔业》 2015年第8期48-51,71,共5页

传染性造血器官坏死病(IHNV)是一种危害极其严重的鱼类疾病。本实验用一步RT-PCR法和套式PCR法对IHNV的基因进行扩增,通过扩增片段的琼脂糖电泳分析,来判定病鱼是否携带IHNV。实验结果表明,通过一步法RT-PCR可扩增出IHNV的693bp片段;通... 传染性造血器官坏死病(IHNV)是一种危害极其严重的鱼类疾病。本实验用一步RT-PCR法和套式PCR法对IHNV的基因进行扩增,通过扩增片段的琼脂糖电泳分析,来判定病鱼是否携带IHNV。实验结果表明,通过一步法RT-PCR可扩增出IHNV的693bp片段;通过套式PCR法可扩增出IHNV的786bp片段和323bp片段。两种方法均能够检测待测样品中含有IHNV。比较发现一步RT-PCR法比套式PCR法更加快速、简便、敏感,减少了被污染机会。 展开更多

关键词 传染性造血器官坏死病(ihnv) 一步RT-PCR法 套式PCR法 方法比较

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虹鳟鱼造血器官坏死病病毒(IHNV)m基因的表达及免疫原性分析 被引量：2

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作者 安红艳 孙红岩 +3 位作者 高洁 梁思源 李全振 赵宝华 《河北师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2016年第5期434-438,共5页

根据NCBI中报道的造血器官坏死病病毒(IHNV)m基因序列设计特异性引物,提取病变组织中的RNA后,通过RT-PCR扩增得到m基因,大小约为570bp.与pET-22b连接,构建表达质粒pET-22b-m,转化大肠杆菌BL21(DE3)得到重组菌株BL21(DE3)(pET-22b-m).挑... 根据NCBI中报道的造血器官坏死病病毒(IHNV)m基因序列设计特异性引物,提取病变组织中的RNA后,通过RT-PCR扩增得到m基因,大小约为570bp.与pET-22b连接,构建表达质粒pET-22b-m,转化大肠杆菌BL21(DE3)得到重组菌株BL21(DE3)(pET-22b-m).挑取阳性克隆子,IPTG诱导,经SDS-PAGE验证,在21.6ku处有目的蛋白表达;Western blot表明目的蛋白与相应抗体具有很好的反应性;免疫小鼠后,经ELISA测定血清中抗体效价,为1∶128 000;虹鳟鱼攻毒试验,发现重组菌株BL21(DE3)(pET-22b-m)表达的蛋白对虹鳟的最高保护率为68%.本试验结果为研制造血器官坏死病病毒基因工程疫苗奠定了坚实的基础. 展开更多

关键词 造血器官坏死病病毒 基质蛋白M 基因表达 免疫原性

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传染性造血器官坏死病毒(IHNV)研究进展 被引量：3

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作者 胡潜 李强 张显昱 《现代农业科技》 2014年第7期273-277,共5页

对IHNV的特点、发病症状及流行特点进行了简单的概述,详细归纳总结了IHNV的检测技术、宿主对IHNV的防御机制以及具体防治措施,同时对IHNV未来的防治发展方向进行了展望,以期更好地控制IHNV引起的鱼类流行病的发生。

关键词 生物学特性 流行特点 检测 防治

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虹鳟感染IHNV的组织学和血液细胞学规律研究 被引量：1

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作者 王琦 张亚亚 +3 位作者 谈龙飞 李久艳 牛明强 王建福 《畜牧兽医杂志》 2019年第6期16-20,共5页

传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)感染是造成鲑鳟鱼类肝肾等造血组织病变坏死,组织缺血性急性死亡的重要原因,危害十分严重。为了阐明虹鳟感染IHNV发病后造血组织和血液细胞学变化规律,选择不同规格和发病程度的虹鳟进行了组织学和血液... 传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)感染是造成鲑鳟鱼类肝肾等造血组织病变坏死,组织缺血性急性死亡的重要原因,危害十分严重。为了阐明虹鳟感染IHNV发病后造血组织和血液细胞学变化规律,选择不同规格和发病程度的虹鳟进行了组织学和血液细胞学变化规律研究。结果表明:发病虹鳟肝脏组织严重贫血且水肿呈土黄色,石蜡切片,HE染色后可观察到病鱼肝脏组织大范围坏死,坏死细胞胞浆内可见嗜酸性病毒包涵体,出现不同程度的炎性细胞浸润。肾脏、肠上皮组织、心肌这些组织都发生不同程度坏死。发病鱼血细胞密度明显少于未发病鱼,而且红细胞沉降快、脆性高、比容相对较小。IHNV感染对虹鳟组织和血细胞造成了十分严重的影响。 展开更多

关键词 虹鳟 传染性造血器官坏死病病毒 石蜡切片 血液细胞学

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香豆素联合传染性造血器官坏死病毒灭活疫苗对虹鳟的免疫效果

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作者 邓倩 刘哲 +5 位作者 潘玉财 权金强 宋国林 卢军浩 赵桂研 王建福 《水生生物学报》 北大核心 2025年第6期32-41,共10页

为开发安全有效的疫苗以预防虹鳟传染性造血器官坏死病毒(IHNV)暴发。研究重点开发了以香豆素为佐剂的IHNV灭活疫苗,疫苗安全性实验证明IHNV病毒液已被完全灭活。实验分为对照组、疫苗组和香豆素+疫苗组。疫苗注射剂量为150μL,对照组... 为开发安全有效的疫苗以预防虹鳟传染性造血器官坏死病毒(IHNV)暴发。研究重点开发了以香豆素为佐剂的IHNV灭活疫苗,疫苗安全性实验证明IHNV病毒液已被完全灭活。实验分为对照组、疫苗组和香豆素+疫苗组。疫苗注射剂量为150μL,对照组注射同等剂量的磷酸盐缓冲溶液(PBS),在疫苗接种14d(D14)后进行IHNV攻毒实验,并在D7、D14、D15、D21、D30进行虹鳟脾脏和血清的样本采集。IHNV攻毒后显示,香豆素+疫苗的存活率为66%,而单一灭活疫苗和对照组的分别为62%和24%。组织病理学分析显示,IHNV攻毒后香豆素+疫苗组脾脏组织损伤最小,出现轻微的炎症反应,而对照组出现严重的黑色素巨噬细胞中心(MMC)和组织炎症(TI)。此外,在D7—D30,香豆素+疫苗组血清的总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)活性水平显著高于疫苗组和对照组(P<0.05)。在D7—D14,香豆素+疫苗组血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)水平被显著升高;而IHNV攻毒后(D15—D30),香豆素+疫苗组GPT和GOT水平显著低于对照组(P<0.05)。在接种疫苗和攻毒后,香豆素+疫苗组中脾脏的MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ和IFN-γ基因被显著上调(P<0.05);同时,香豆素+疫苗组CD4、CD8、IgT、C3、VIG1和Mx1基因表达量显著高于疫苗组和对照组(P<0.05)。结果表明,灭活疫苗联合佐剂香豆素是预防IHNV感染的有效方法,有助于进一步控制虹鳟养殖中的IHNV暴发。 展开更多

关键词 香豆素 疫苗 虹鳟 免疫效果 ihnv

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复方中草药对虹鳟肠道抗氧化能力及免疫相关基因表达的影响

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作者 孙满强 黄进强 +4 位作者 李永娟 王琪 赵璐 郭治家 刘康康 《大连海洋大学学报》 北大核心 2025年第5期809-820,共12页

为探究复方中草药对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)肠道抗氧化能力及免疫相关基因表达的影响,将黄芪、当归、党参、麦冬、甘草等10味中草药等比例配伍后,分别以0%(对照)、1%、2%、3%质量比添加至基础饲料中投喂虹鳟(体质量为30.0 g±0.5... 为探究复方中草药对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)肠道抗氧化能力及免疫相关基因表达的影响,将黄芪、当归、党参、麦冬、甘草等10味中草药等比例配伍后,分别以0%(对照)、1%、2%、3%质量比添加至基础饲料中投喂虹鳟(体质量为30.0 g±0.5 g)。在持续投喂7、21、35 d后,以及IHNV攻毒后的12 d,分别采集虹鳟肠道样品,用于检测抗氧化指标,并运用qRT-PCR技术分析免疫相关基因的表达情况。结果表明:与对照组相比,虹鳟肠道的总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和酸性磷酸酶(ACP)活性随复方中草药添加比例的递增呈先上升后下降的趋势,在2%组时达到峰值,且显著高于对照组(P<0.05);而谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性与丙二醛(MDA)含量呈先下降后上升的趋势,且MDA含量在2%组时显著低于对照组(P<0.05);IHNV攻毒后,T-AOC、T-SOD、CAT和ACP活性显著升高,MDA含量与ALT和AST活性显著降低(P<0.05);荧光定量PCR分析显示,在IHNV攻毒前,添加1%本研究复方中草药,虹鳟肠道jak1、myd88、irf7基因表达均显著上调(P<0.05),mx1和mda5基因表达无显著性上调(P>0.05);添加2%中草药时,免疫相关基因il-8基因表达显著上调(P<0.05),il-1β、mx1、myd88、mda5基因表达无显著性变化(P>0.05);在IHNV攻毒后,添加1%复方中草药后,il-1β、mx1、mda5、lgp2、irf3和irf7基因表达显著上调(P<0.05)。研究表明,添加2%复方中草药能够有效提高虹鳟抗氧化酶活性和调节免疫相关基因的表达,对增强虹鳟免疫力和抗IHNV能力具有显著效果。本研究结果为进一步解析中草药提高虹鳟抗病天然免疫应答的机制提供了基础数据,同时为中草药在水产养殖病害防控中的开发与应用提供了有益参考。 展开更多

关键词 虹鳟 肠道 复方中草药 免疫 ihnv

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传染性造血器官坏死病毒G蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体制备

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作者 马淑兄 李长忠 +4 位作者 王璐 贾春艳 陈艳霞 马成林 金文杰 《青海大学学报》 2025年第4期52-58,64,共8页

针对由传染性造血器官坏死病毒(infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)引发的鱼类重大传染病,通过原核表达系统制备IHNV关键抗原G蛋白,可开发其特异性多克隆抗体。本文利用基因工程技术构建了重组质粒pET-28a-G,转化至大肠杆菌... 针对由传染性造血器官坏死病毒(infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)引发的鱼类重大传染病,通过原核表达系统制备IHNV关键抗原G蛋白,可开发其特异性多克隆抗体。本文利用基因工程技术构建了重组质粒pET-28a-G,转化至大肠杆菌Top10感受态细胞,经IPTG诱导后获得IHNV G蛋白;再对该蛋白用盐酸胍复性后采用镍柱亲和层析法进行纯化,纯化的蛋白与弗氏佐剂混合免疫小鼠;最后采用间接ELISA法检测抗体效价及Western blot验证抗体特异性。结果表明:通过基因工程可成功构建pET-28a-G原核表达质粒,获得的IHNV G蛋白在大肠杆菌中能成功表达,大小52.51 kDa;纯化的IHNV G蛋白与弗氏佐剂混合免疫小鼠4次后,可制备出多克隆抗体,抗体效价达到1∶128000,且能特异性识别IHNV G重组蛋白。研究结果表明,原核表达的IHNV G重组蛋白具有较强的免疫原性,可诱导小鼠产生较高效价的抗体,制备的多克隆抗体具有良好的反应性和特异性,为后续胶体金检测方法的开发、G单克隆抗体制备、疫苗研制等奠定基础。 展开更多

关键词 ihnv G蛋白 原核表达载体 多克隆抗体

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鱼类传染性造血器官坏死病毒RT-LAMP检测方法的建立及应用 被引量：9

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作者 刘淼 徐黎明 +6 位作者 卢彤岩 赵景壮 曹永生 刘红柏 尹家胜 张金凤 冯剑 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1065-1071,共7页

将逆转录环介导的等温扩增技术(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)引入到鱼类的传染性造血器官坏死病病毒(infectious haematopoietic necrosis virus,IHNV)检测中,建立了简单、快速、灵敏的IHNV... 将逆转录环介导的等温扩增技术(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)引入到鱼类的传染性造血器官坏死病病毒(infectious haematopoietic necrosis virus,IHNV)检测中,建立了简单、快速、灵敏的IHNV检测方法。针对IHNV的聚合酶蛋白基因(polymerase protein,L)设计特异性引物,以IHNV基因组RNA为模板,在反转录酶和Bst DNA聚合酶的作用下进行RT-LAMP,反应产物添加SYBR Green I荧光染料后,肉眼观察阳性样本表现为荧光绿色,阴性样本表现为红棕色。2%琼脂糖凝胶电泳检测结果与可视化检测结果一致。该方法实现了检测结果的可视化。特异性分析显示该方法不与传染性胰脏坏死病毒(infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)及病毒性出血性败血症病毒(viral haemorrhagic septicaemia virus,VHSV)发生交叉反应,并且可检测不低于10 pfu的IHNV RNA。本研究所建立的IHNV RT-LAMP可视化检测方法具有灵敏度高、特异性好、成本低、不依赖任何专门的仪器设备的优点,其检测结果直观可视化,可实现现场高通量快速检测。 展开更多

关键词 传染性造血器官坏死病毒(ihnv) 聚合酶蛋白 RT-LAMP 可视化检测

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传染性造血器官坏死病病毒高效RT-PCR检测方法的建立 被引量：9

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作者 徐黎明 刘红柏 +1 位作者 徐进 卢彤岩 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1164-1168,共5页

传染性造血器官坏死病毒（Infectious haematopoietic necrosis virus，IHNV），属弹状病毒科（Rhabdoviridae），诺拉弹状病毒属（Novirhabdovirus），IHNV是该属代表种。IHNV病毒粒子含有一条全长约为11kb的线状、反义、单股RNA。

关键词 传染性造血器官坏死病毒(ihnv) 聚合酶蛋白 RT-PCR检测

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