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激活Sting信号通路对GL261小鼠肿瘤模型远隔免疫效应影响 被引量：4
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作者 方婷婷 汪步海 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期373-379,共7页
目的放疗过程中受照射病灶以外其他部位病灶消退的现象称为远隔效应,远隔效应的机制主要与免疫相关,干扰素刺激因子(stimulator of interferon genes,Sting)信号通路的激活在放疗引起免疫效应机制中起着非常重要的作用。但Sting信号通... 目的放疗过程中受照射病灶以外其他部位病灶消退的现象称为远隔效应,远隔效应的机制主要与免疫相关,干扰素刺激因子(stimulator of interferon genes,Sting)信号通路的激活在放疗引起免疫效应机制中起着非常重要的作用。但Sting信号通路的激活对诱发远隔效应的作用尚不明确。本研究探讨不同照射剂量对GL261小鼠胶质瘤模型Sting信号通路的激活,以及激活的Sting信号通路对原发及远隔部位肿瘤微环境中抗肿瘤免疫效应的影响。方法细胞实验:予GL261细胞系0、8和20Gy X射线照射后培养24h收集细胞,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-PCR)检测免疫相关因子Sting和干扰素b(interferon-b,IFNb)的表达水平;蛋白质印迹法检测GL261细胞系Sting蛋白的表达变化。体内实验:构建小鼠两侧背部肿瘤模型,令各组别小鼠的一侧肿瘤达150mm^3,分别接受0、8和20Gy的X射线照射,照射后第5日处死小鼠并取肿瘤组织。蛋白质印迹法检测接受照射的原位肿瘤及远隔肿瘤组织内Sting蛋白表达水平,并利用ELISA试剂盒检测原位及远隔肿瘤组织中IFNb蛋白表达水平,最后通过流式细胞术检测原位及远隔肿瘤组织微环境内树突状细胞(dendritic cells,DC)及效应T(CD8a+T)细胞浸润情况。结果在体外细胞水平研究中,RT-PCR检测发现,8和20Gy照射后细胞内Sting表达较0Gy组呈增加趋势,P>0.05;8和20Gy照射后IFNb表达量分别为4.01±0.16、4.19±0.44,较对照组增加,F=39.751,P<0.001。蛋白质印迹结果提示,8、20Gy照射后细胞内Sting蛋白表达量分别为1.53±0.12、2.31±0.03,均较对照组增加,F=74.835,P<0.001。在体内小鼠动物模型研究中,蛋白质印迹检测发现,8Gy照射组原位组织(1.99±0.11)及远隔组织(1.36±0.05)中Sting蛋白表达量均较对照组增加,P值分别为<0.001和0.002;20Gy照射组原位(0.347±0.006)及远隔组织(0.177±0.008)Sting蛋白表达较对照组减少,均P<0.001。进一步使用ELISA试剂盒检测发现,仅8Gy照射组小鼠原位肿瘤组织中IFNb蛋白表达〔(111.74±13.96)pg/mL〕较对照组〔(68.84±2.40)pg/mL〕增高,F=4.345,P<0.05。流式细胞术检测发现,8Gy照射组小鼠原位肿瘤组织中DC〔(3.48±0.43)%〕及CD8a+T〔(5.28±0.77)%〕细胞浸润量均较对照组增加,F=6.793,P<0.05;而20Gy照射组原位肿瘤组织中DC及CD8a+T细胞浸润较对照组差异无统计学意义,P>0.05。结论 8Gy X射线照射能激活GL261小鼠模型中的Sting信号通路,促进免疫相关因子的表达,最终通过引起原位及远隔部位肿瘤组织中DC、CD8a+T细胞浸润增加达到增强其抗肿瘤免疫的作用。 展开更多
关键词 放射治疗 GL261 小鼠脑胶质瘤细胞 STING 干扰素刺激因子 ifnb 干扰素Β
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