【目的】探明贵州黑山羊(Guizhou Black Goats)干扰素-epsilon基因结构与功能,为羊传染病的防治及开发新型抗病毒药物提供理论依据。【方法】提取贵州黑山羊肝脏总RNA,通过RT-PCR扩增贵州黑山羊IFN-ε基因(GZHSY-IFN-ε)并测序,采用生...【目的】探明贵州黑山羊(Guizhou Black Goats)干扰素-epsilon基因结构与功能,为羊传染病的防治及开发新型抗病毒药物提供理论依据。【方法】提取贵州黑山羊肝脏总RNA,通过RT-PCR扩增贵州黑山羊IFN-ε基因(GZHSY-IFN-ε)并测序,采用生物信息学分析基因序列和预测蛋白结构。【结果】GZHSY-IFN-ε基因编码区长度为582 bp,编码194个氨基酸,贵州黑山羊与山羊、绵羊、羚牛、大羚羊IFN-ε的核苷酸序列同源性依次为99.7%、99.1%、99.1%、97.9%,氨基酸序列同源性依次为99.0%、97.9%、97.9%、94.8%;重组表达质粒p ET-28a-IFN-ε的双酶切结果正确;阳性菌株经诱导后,重组蛋白大小约39 ku,以可溶性蛋白形式表达,与抗His标签鼠单克隆抗体发生特异性反应;IFN-ε蛋白为不稳定亲水蛋白,有信号肽,无跨膜结构,亚细胞定位主要为胞外。IFN-ε蛋白存在16个磷酸化位点,无糖基化位点。二级结构主要为α-螺旋,与IL10RB、IFNAR^(2)、IFNAR1等蛋白存在相互作用。【结论】首次成功克隆贵州黑山羊IFN-ε基因序列,构建pET-28a-IFN-ε重组质粒并成功表达,具有良好的免疫原性。展开更多
目的研究细胞程序性死亡配体-1(programmed cell death protein ligand-1,PD-L1)功能抑制调控免疫活化影响ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化发生发展的机制。方法将24只ApoE^(-/-)小鼠随机分为正常组,高脂组和高脂^(+)抗PD-L1单抗组,通过高...目的研究细胞程序性死亡配体-1(programmed cell death protein ligand-1,PD-L1)功能抑制调控免疫活化影响ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化发生发展的机制。方法将24只ApoE^(-/-)小鼠随机分为正常组,高脂组和高脂^(+)抗PD-L1单抗组,通过高胆固醇饲料喂养建立动脉粥样硬化(atherosclerosis)模型。实验动物饲养70 d后,分离各组实验动物血管(主动脉根部至腹主动脉)及肝脏组织,进行油红O染色;HE染色检测肝组织病理改变;ELISA检测血清中总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-c)、低密度脂蛋白(LDL-c)和炎症因子(IFN-γ、TNF-α、IL-1β)含量。流式细胞计数检测肝脏淋巴细胞(CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)IFN-γ^(+)和CD8^(+)IFN-γ^(+)T细胞)。RT-PCR检测肝脏组织IFN-γ、TNF-α、IL-1β、CD4和CD8表达。结果与高脂组比较,给予抗PD-L1单抗后促血管壁及肝脏脂质累积并上调血清及肝组织CHO、TG、LDL-c和HDL-c含量。高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗促血清和肝组织谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)含量升高,但是对碱性磷酸酶(AKP)含量没有影响。高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗促血清和肝脏组织IFN-γ、TNF-α和IL-1β含量升高。高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗抑制CD4表达及促CD8表达。高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗促肝脏CD8^(+)T和CD8^(+)IFN-γ^(+)T细胞活化,但是对CD4^(+)IFN-γ^(+)T细胞活化没有影响。结论高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗通过活化肝脏CD8^(+)IFN-γ^(+)T细胞损伤肝脏功能加重动脉粥样硬化。展开更多
目的:系统评价不明原因复发性流产(URPL)患者外周血或绒毛组织中IFN-γ水平的变化。方法:在PubMed、Web of science、Cochrane Library、中国知网及万方等数据库中检索相关文献,使用固定效应模型或随机效应模型进行meta分析。结果:最终...目的:系统评价不明原因复发性流产(URPL)患者外周血或绒毛组织中IFN-γ水平的变化。方法:在PubMed、Web of science、Cochrane Library、中国知网及万方等数据库中检索相关文献,使用固定效应模型或随机效应模型进行meta分析。结果:最终纳入29篇文献,共2603例患者。非孕期URPL组外周血清IFN-γ水平高于健康非妊娠组(SMD=0.39,95%CI:0.18~0.60,P=0.001)。孕早期URPL组外周血清IFN-γ水平高于健康早孕组(SMD=1.30,95%CI:1.16~1.45,P=0.000)。孕早期URPL组外周血血浆IFN-γ水平高于健康早孕组(SMD=2.07,95%CI:1.81~2.33,P=0.000)。孕早期URPL组外周血清IFN-γ水平高于健康非妊娠组(SMD=3.86,95%CI:3.39~4.33,P=0.000)。孕早期URPL组绒毛组织中IFN-γmRNA水平高于健康早孕组(SMD=0.74,95%CI:0.39~1.10,P=0.000)。结论:与健康女性相比,URPL患者的外周血或绒毛膜绒毛组织中IFN-γ水平较高。高水平的IFN-γ可能与URPL患者疾病的发生和妊娠丢失有关。展开更多
文摘目的研究细胞程序性死亡配体-1(programmed cell death protein ligand-1,PD-L1)功能抑制调控免疫活化影响ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化发生发展的机制。方法将24只ApoE^(-/-)小鼠随机分为正常组,高脂组和高脂^(+)抗PD-L1单抗组,通过高胆固醇饲料喂养建立动脉粥样硬化(atherosclerosis)模型。实验动物饲养70 d后,分离各组实验动物血管(主动脉根部至腹主动脉)及肝脏组织,进行油红O染色;HE染色检测肝组织病理改变;ELISA检测血清中总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-c)、低密度脂蛋白(LDL-c)和炎症因子(IFN-γ、TNF-α、IL-1β)含量。流式细胞计数检测肝脏淋巴细胞(CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)IFN-γ^(+)和CD8^(+)IFN-γ^(+)T细胞)。RT-PCR检测肝脏组织IFN-γ、TNF-α、IL-1β、CD4和CD8表达。结果与高脂组比较,给予抗PD-L1单抗后促血管壁及肝脏脂质累积并上调血清及肝组织CHO、TG、LDL-c和HDL-c含量。高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗促血清和肝组织谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)含量升高,但是对碱性磷酸酶(AKP)含量没有影响。高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗促血清和肝脏组织IFN-γ、TNF-α和IL-1β含量升高。高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗抑制CD4表达及促CD8表达。高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗促肝脏CD8^(+)T和CD8^(+)IFN-γ^(+)T细胞活化,但是对CD4^(+)IFN-γ^(+)T细胞活化没有影响。结论高脂饲养条件下给予抗PD-L1单抗通过活化肝脏CD8^(+)IFN-γ^(+)T细胞损伤肝脏功能加重动脉粥样硬化。
文摘目的:系统评价不明原因复发性流产(URPL)患者外周血或绒毛组织中IFN-γ水平的变化。方法:在PubMed、Web of science、Cochrane Library、中国知网及万方等数据库中检索相关文献,使用固定效应模型或随机效应模型进行meta分析。结果:最终纳入29篇文献,共2603例患者。非孕期URPL组外周血清IFN-γ水平高于健康非妊娠组(SMD=0.39,95%CI:0.18~0.60,P=0.001)。孕早期URPL组外周血清IFN-γ水平高于健康早孕组(SMD=1.30,95%CI:1.16~1.45,P=0.000)。孕早期URPL组外周血血浆IFN-γ水平高于健康早孕组(SMD=2.07,95%CI:1.81~2.33,P=0.000)。孕早期URPL组外周血清IFN-γ水平高于健康非妊娠组(SMD=3.86,95%CI:3.39~4.33,P=0.000)。孕早期URPL组绒毛组织中IFN-γmRNA水平高于健康早孕组(SMD=0.74,95%CI:0.39~1.10,P=0.000)。结论:与健康女性相比,URPL患者的外周血或绒毛膜绒毛组织中IFN-γ水平较高。高水平的IFN-γ可能与URPL患者疾病的发生和妊娠丢失有关。
