目的探讨DNA分化抑制因子(inhibitor of DNA differentiation,Id)Id1/Id3在子宫内膜癌中的表达及对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及粘附等生物学行为的作用。方法 Western blot方法检测4例子宫内膜癌组织及相应的癌旁组织中的Id1/Id3...目的探讨DNA分化抑制因子(inhibitor of DNA differentiation,Id)Id1/Id3在子宫内膜癌中的表达及对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及粘附等生物学行为的作用。方法 Western blot方法检测4例子宫内膜癌组织及相应的癌旁组织中的Id1/Id3的表达;将子宫内膜癌RL-952和HEC-1-B两株细胞各分为未处理细胞组、空白病毒组、启动子病毒组和Id1/Id3双敲低组。通过qRT-PCR检测不同腺病毒载体感染细胞后MMP2、CXCR4和P21 mRNA表达量,Western blot检测MMP2、CXCR4、P21蛋白表达情况;通过MTT增殖试验、Transwell侵袭实验、细胞划痕实验和细胞粘附实验检测Id1/Id3表达改变后,对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、移行和粘附能力的影响。结果 Id1/Id3在子宫内膜癌组织中较癌旁组织表达增高(P<0.05);双敲低Id1/Id3,子宫内膜癌细胞中MMP2、CXCR4的mRNA水平和蛋白水平明显降低(P<0.05),P21的mRNA水平和蛋白水平则明显升高(P<0.05),RNAi组与其他3组细胞相比均有显著性差异;Id1/Id3双敲低组子宫内膜癌RL-952和HEC-1-B株细胞增殖能力、侵袭能力、迁移能力和粘附能力均抑制(P<0.05)。结论 Id1/Id3在子宫内膜癌患者组织中高表达,并可通过升调MMP2、CXCR4和降调P21的表达促进子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及粘附作用,靶向Id1/Id3治疗可能成为预防和治疗子宫内膜癌的新方案。展开更多
目的:细胞分化抑制子Id1(inhibitor of differentiation or inhibitor of DNA binding)蛋白与肿瘤的发生、侵袭及远处转移有关。本研究主要观测人前列腺癌组织中Id1蛋白的表达,并分析其应用价值。方法:采用免疫组化SP法检测43例前列腺癌...目的:细胞分化抑制子Id1(inhibitor of differentiation or inhibitor of DNA binding)蛋白与肿瘤的发生、侵袭及远处转移有关。本研究主要观测人前列腺癌组织中Id1蛋白的表达,并分析其应用价值。方法:采用免疫组化SP法检测43例前列腺癌(prostate cancer,PC)、12例前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)和2例正常前列腺组织中Id1蛋白的表达。结果:Id1蛋白在正常前列腺组织中无表达;BPH组织中无或弱表达(5/12);所有前列腺癌组织都有阳性表达(43/43),而且大多数以中、高度表达为主(与BPH相比,P<0.01);前列腺癌中Id1的表达水平与Gleason分级成正比(rs=0.63P<0.01)。结论:人前列腺癌组织中,Id1蛋白有过度表达,且与前列腺癌的Gleason分级呈正相关,表明与癌组织的恶性程度有关。Id1蛋白有可能作为判断前列腺癌发展的一种新的肿瘤标志。展开更多
目的:通过构建人卵巢癌SKOV3 Id1特异性siRNA慢病毒载体及其裸鼠移植瘤模型,观察沉默分化抑制因子(inhibitor of differentiation-1,Id1)表达对卵巢癌SKOV3生长的影响。方法:根据Id1基因序列设计并合成的siRNA片段转染SKOV3细胞,将转染...目的:通过构建人卵巢癌SKOV3 Id1特异性siRNA慢病毒载体及其裸鼠移植瘤模型,观察沉默分化抑制因子(inhibitor of differentiation-1,Id1)表达对卵巢癌SKOV3生长的影响。方法:根据Id1基因序列设计并合成的siRNA片段转染SKOV3细胞,将转染细胞分为四组:cell+lv-shRNA-Id1(实验组)、cell+lv-shRNA-NC(质粒对照组)、cell+lv-control(空病毒对照组)、cell(空白对照组),筛选出稳定转染的SKOV3细胞克隆,48小时后检测细胞生长活性。将40只裸鼠随机分为四组,分别接种上述转染成功的细胞,30天后称取瘤体重量,计算抑瘤率;然后通过Western blotting法检测移植瘤中Id1蛋白的表达。结果:在体外试验中,实验组的细胞生长活性显著低于空白对照组,具有统计学意义(P<0.05),三对照组间无明显差异(P>0.05);体内实验显示,实验组平均瘤重均低于其他三对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),三对照组间瘤重差异无统计学意义(P>0.05);实验组、质粒对照组、空病毒组抑瘤率分别为45.98%、4.84%、4.50%;Western blotting结果显示,实验组中Id1表达较对照组明显下调(P<0.05)。结论:沉默Id1基因能抑制卵巢癌细胞的生长,有望成为卵巢癌治疗新靶点。展开更多
目的构建转录因子E2-2基因腺病毒载体,观测内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)过表达E2-2基因对DNA结合抑制因子-1(inhibitor of DNA binding/differentiation,ID1)表达的影响。方法分离、培养并鉴定小鼠骨髓EPCs。RT-PCR...目的构建转录因子E2-2基因腺病毒载体,观测内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)过表达E2-2基因对DNA结合抑制因子-1(inhibitor of DNA binding/differentiation,ID1)表达的影响。方法分离、培养并鉴定小鼠骨髓EPCs。RT-PCR法扩增E2-2基因CDs全长DNA,克隆入载体pTG19-T后,亚克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建pAdTrack/E2-2重组载体,与pAdEasy-1骨架质粒同源重组形成重组病毒pAd/E2-2,经293细胞包装,获具高效感染力的重组pAd/E2-2病毒。将该病毒感染EPCs,倒置显微镜观测经感染的EPCs的GFP表达情况。CCK-8(cell count kit-8)法检测病毒pAd/E2-2对EPCs生长、增殖的影响。RT-PCR、Western blot分别检测经感染的EPCs中E2-2与ID1基因及其编码蛋白的表达情况,并予以定量分析。结果分离、培养并鉴定到小鼠骨髓EPCs。克隆到2013 bp的E2-2基因,并获得高效感染力的重组pAd/E2-2病毒。CCK-8法检测表明,与对照比较,过表达E2-2的EPCs的生长、增殖速度减慢,48h开始变得尤为明显(P<0.01);RT-PCR、Western blot及定量分析结果显示,E2-2能下调ID1的表达,与对照比较,差异具统计学意义(P<0.01)。结论分离、培养并鉴定小鼠骨髓EPCs,克隆出E2-2基因,证实E2-2能明显抑制EPCs的生长、增殖,并能下调ID1基因的表达。展开更多
目的:含双螺旋环的Id1(inhibitor of DNA binding or inhibitor of differentiation),在器官组织中的表达具有组织特异性。近年研究显示其高表达与某些肿瘤的发生、发展密切相关。本研究检测了肾正常组织、肾良性囊肿和肾癌中Id1蛋白的...目的:含双螺旋环的Id1(inhibitor of DNA binding or inhibitor of differentiation),在器官组织中的表达具有组织特异性。近年研究显示其高表达与某些肿瘤的发生、发展密切相关。本研究检测了肾正常组织、肾良性囊肿和肾癌中Id1蛋白的表达,并分析其表达量与肾癌细胞分化类型的相关性。方法:用免疫组化SP法检测10例肾癌旁正常组织、38例肾细胞癌和10例肾良性囊肿组织中Id1的表达。用JD801形态图像分析系统对图像进行定量分析。结果:Id1蛋白在正常肾组织中在肾小管上皮细胞内高表达;在肾良性囊肿组织中表达量明显减少;在肾癌细胞中均阳性表达(38/38)。颗粒细胞癌中Id1的表达水平最高,其次为混合细胞癌,透明细胞癌表达量较少。结论:人正常肾小管上皮细胞内高表达Id1;良性囊肿组织中Id1表达减少;肾癌组织中Id1蛋白有广泛表达,且分化差的癌细胞类型表达量高,表明Id1与肾癌细胞的恶性度和预后密切相关。展开更多
文摘目的探讨DNA分化抑制因子(inhibitor of DNA differentiation,Id)Id1/Id3在子宫内膜癌中的表达及对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及粘附等生物学行为的作用。方法 Western blot方法检测4例子宫内膜癌组织及相应的癌旁组织中的Id1/Id3的表达;将子宫内膜癌RL-952和HEC-1-B两株细胞各分为未处理细胞组、空白病毒组、启动子病毒组和Id1/Id3双敲低组。通过qRT-PCR检测不同腺病毒载体感染细胞后MMP2、CXCR4和P21 mRNA表达量,Western blot检测MMP2、CXCR4、P21蛋白表达情况;通过MTT增殖试验、Transwell侵袭实验、细胞划痕实验和细胞粘附实验检测Id1/Id3表达改变后,对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、移行和粘附能力的影响。结果 Id1/Id3在子宫内膜癌组织中较癌旁组织表达增高(P<0.05);双敲低Id1/Id3,子宫内膜癌细胞中MMP2、CXCR4的mRNA水平和蛋白水平明显降低(P<0.05),P21的mRNA水平和蛋白水平则明显升高(P<0.05),RNAi组与其他3组细胞相比均有显著性差异;Id1/Id3双敲低组子宫内膜癌RL-952和HEC-1-B株细胞增殖能力、侵袭能力、迁移能力和粘附能力均抑制(P<0.05)。结论 Id1/Id3在子宫内膜癌患者组织中高表达,并可通过升调MMP2、CXCR4和降调P21的表达促进子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、迁移及粘附作用,靶向Id1/Id3治疗可能成为预防和治疗子宫内膜癌的新方案。
文摘目的:细胞分化抑制子Id1(inhibitor of differentiation or inhibitor of DNA binding)蛋白与肿瘤的发生、侵袭及远处转移有关。本研究主要观测人前列腺癌组织中Id1蛋白的表达,并分析其应用价值。方法:采用免疫组化SP法检测43例前列腺癌(prostate cancer,PC)、12例前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)和2例正常前列腺组织中Id1蛋白的表达。结果:Id1蛋白在正常前列腺组织中无表达;BPH组织中无或弱表达(5/12);所有前列腺癌组织都有阳性表达(43/43),而且大多数以中、高度表达为主(与BPH相比,P<0.01);前列腺癌中Id1的表达水平与Gleason分级成正比(rs=0.63P<0.01)。结论:人前列腺癌组织中,Id1蛋白有过度表达,且与前列腺癌的Gleason分级呈正相关,表明与癌组织的恶性程度有关。Id1蛋白有可能作为判断前列腺癌发展的一种新的肿瘤标志。
文摘目的:含双螺旋环的Id1(inhibitor of DNA binding or inhibitor of differentiation),在器官组织中的表达具有组织特异性。近年研究显示其高表达与某些肿瘤的发生、发展密切相关。本研究检测了肾正常组织、肾良性囊肿和肾癌中Id1蛋白的表达,并分析其表达量与肾癌细胞分化类型的相关性。方法:用免疫组化SP法检测10例肾癌旁正常组织、38例肾细胞癌和10例肾良性囊肿组织中Id1的表达。用JD801形态图像分析系统对图像进行定量分析。结果:Id1蛋白在正常肾组织中在肾小管上皮细胞内高表达;在肾良性囊肿组织中表达量明显减少;在肾癌细胞中均阳性表达(38/38)。颗粒细胞癌中Id1的表达水平最高,其次为混合细胞癌,透明细胞癌表达量较少。结论:人正常肾小管上皮细胞内高表达Id1;良性囊肿组织中Id1表达减少;肾癌组织中Id1蛋白有广泛表达,且分化差的癌细胞类型表达量高,表明Id1与肾癌细胞的恶性度和预后密切相关。
