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土壤解磷菌RQ3-01的筛选及初步鉴定 被引量:6
1
作者 赵咏梅 李婷雨 阮倩 《陕西农业科学》 2021年第4期19-21,34,共4页
为从土壤中筛选出具有解磷能力的菌株,采用透明圈法筛选菌株,采用钼锑抗比色法测定可溶性磷含量,并对菌株进行形态学,生理生化和分子生物学鉴定。结果表明,采用无机磷培养基初筛出9株具有解无机磷能力的菌株,透明圈法复筛表明,RQ3-0菌... 为从土壤中筛选出具有解磷能力的菌株,采用透明圈法筛选菌株,采用钼锑抗比色法测定可溶性磷含量,并对菌株进行形态学,生理生化和分子生物学鉴定。结果表明,采用无机磷培养基初筛出9株具有解无机磷能力的菌株,透明圈法复筛表明,RQ3-0菌株解无机磷能力最强,D/d值为1.78;采用钼锑抗比色法测出RQ3-01菌株的解无机磷和有机磷能力分别达到22.313 mg·L^(-1)和20.266 mg·L^(-1),通过形态学鉴定和生理生化鉴定显示,RQ3-01菌株是革兰氏阴性菌,不产芽孢,呈杆状,吖啶橙染色呈黄绿色荧光,氧化酶实验呈阳性。经16SrDNA的扩增与测序检测,RQ3-01菌株的碱基对为1391 bp,核糖体数据库比对显示,RQ3-01菌株与荧光假单胞菌相似100%。所以,从土壤中筛选出来的具有解无机磷能力的RQ3-01菌株是荧光假单胞菌。 展开更多
关键词 无机磷 RQ3-01菌株 钼锑抗比色法 16SrDNA
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分枝杆菌Mycobacterium sp.NwIB-01 3-甾酮-9α-羟基化酶基因的克隆、异源表达及分离纯化 被引量:5
2
作者 范书玥 魏巍 +1 位作者 王风清 魏东芝 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期2014-2021,共8页
3-甾酮-9α-羟基化酶(KSH)是微生物甾体降解途径中的关键酶,在甾体药物制备中有重要价值。以本实验室从土壤中自行筛选的分枝杆菌Mycobacterium sp.NwIB-01为出发菌株,利用红平红球菌Rhodococcus erythropolis SQ1已报道的ksh序列与已... 3-甾酮-9α-羟基化酶(KSH)是微生物甾体降解途径中的关键酶,在甾体药物制备中有重要价值。以本实验室从土壤中自行筛选的分枝杆菌Mycobacterium sp.NwIB-01为出发菌株,利用红平红球菌Rhodococcus erythropolis SQ1已报道的ksh序列与已全基因组测序的分枝杆菌序列数据库进行比对分析,根据同源基因设计简并引物获得部分ksh序列,通过染色体步移扩增出全长ksh(命名为M.S.-ksh),该基因与耻垢分枝杆菌M.smegmatis mc2155的ksh同源性为85%。构建pET32-ksh表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得高表达重组转化子菌株,经IPTG低温诱导,SDS-PAGE电泳分析,目的蛋白主要为可溶性表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上,用Ni2+亲和层析柱纯化,纯度达90%以上。本研究为利用基因工程菌进行工业化生产甾体药物奠定了基础。 展开更多
关键词 分枝杆菌NwIB-01 3-甾酮--羟基化酶 甾体降解 异源表达 分离纯化
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产黄青霉S-3-25的硫酸二乙酯诱变突变株3d10-01的次级代谢产物研究 被引量:4
3
作者 乔桦 陈波 +3 位作者 朱天骄 张国刚 李长伟 崔承彬 《国际药学研究杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期871-877,共7页
目的阐明产黄青霉S-3-25的硫酸二乙酯(DES)诱变突变株3d10-01的次级代谢产物及其抗肿瘤活性。方法利用各种色谱技术分离纯化代谢产物。根据理化和波谱数据鉴定化合物结构。采用MTT法测试其抗肿瘤活性。采用HPLCUV检测方式确定所得化合... 目的阐明产黄青霉S-3-25的硫酸二乙酯(DES)诱变突变株3d10-01的次级代谢产物及其抗肿瘤活性。方法利用各种色谱技术分离纯化代谢产物。根据理化和波谱数据鉴定化合物结构。采用MTT法测试其抗肿瘤活性。采用HPLCUV检测方式确定所得化合物是否为突变株新产。结果从突变株发酵产物中分离鉴定了2,4-二羟基-3,5,6-三甲基苯甲酸甲酯(1),6-羟甲基-2,2-二甲基-苯并二氢吡喃-4-酮(2),regiolone(3),(3S,4S)-3,4-二氢-3,4,8-三羟基-2H-萘酮(4),脑苷脂C(5),脑苷脂D(6)和dankasterone A(7)7个化合物。化合物1、4和7对受试5种癌细胞均有较强抑制作用;2、3和6对受试HL-60细胞有一定抑制活性。HPLC-UV的检测结果表明,化合物1~4和7为原始菌不产而突变株新产的次级代谢产物。结论化合物1~7均为首次从产黄青霉发酵产物中分离得到。化合物1~4、6和7对部分受试肿瘤细胞的抑制活性为首次研究并报道。 展开更多
关键词 极地深海来源真菌 产黄青霉S-3-25 硫酸二乙酯(DES)诱变 突变株3d10-01 抗肿瘤活性
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蔬菜玉米新组合——糯玉01-3
4
作者 彭玉华 《中国农村科技》 2002年第5期22-22,共1页
糯玉01-3系中国农业科学院油料作物研究所育成的优质纯白糯玉米新组合。 特征特性 属早熟糯玉米组合,出苗至开始采收鲜穗一般70~80天。在2000~2001年试验中,春播总叶数19片,秋播17片;
关键词 蔬菜玉米 栽培 特征 特性 糯玉01-3
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蔬菜玉米新组合──糯01-3
5
作者 彭玉华 《农村实用技术与信息》 2002年第3期20-20,共1页
关键词 蔬菜玉米 新组合 01-3 玉米 糯玉米 栽培要点
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采用随机突变方法对β-琼胶酶YM01-3活性位点的研究 被引量:1
6
作者 曲雯雯 吴蕾蕾 +2 位作者 周顺 史晓翀 张晓华 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期2000-2005,共6页
【背景】琼胶酶是一种多糖水解酶,在保健食品、医药、科研及化妆品等行业极具价值。本实验室发现来源自嗜琼胶卵链菌(Catenovulumagarivorans)的β-琼胶酶YM01-3具有较高的酶活性,在最适条件下的比酶活可达到1.14×10~4U/mg。【目... 【背景】琼胶酶是一种多糖水解酶,在保健食品、医药、科研及化妆品等行业极具价值。本实验室发现来源自嗜琼胶卵链菌(Catenovulumagarivorans)的β-琼胶酶YM01-3具有较高的酶活性,在最适条件下的比酶活可达到1.14×10~4U/mg。【目的】探讨不同位点的突变对β-琼胶酶YM01-3酶活力的作用,发现影响其酶活力的新位点。【方法】通过易错PCR在短芽孢杆菌(Bacillus brevis)表达系统中构建随机突变文库,从约10 000个克隆中筛选出227株有效突变体,从中选取80株进行测序。【结果】对突变体序列进行分析和定点突变验证发现,137位和237位氨基酸发生突变后酶活力丧失90%以上。【结论】位于催化腔内的137位和237位氨基酸,对于维持β-琼胶酶YM01-3酶活力具有重要作用。该研究结果为β-琼胶酶的催化机理研究及分子改造提供了借鉴。 展开更多
关键词 β-琼胶酶YM01-3 随机突变 定点突变
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新型鸭呼肠孤病毒I3-σB/σC蛋白疫苗的制备与免疫研究
7
作者 刘喆 罗烈柱 +3 位作者 周新瑞 黄允真 高诗敏 孙敏华 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第11期1445-1452,共8页
新型鸭呼肠孤病毒感染(NDR)是由NDRV引起的雏鸭高发病率和高病死率的传染病,主要导致患病鸭肝脾坏死。为开发安全高效的新型疫苗预防NDRV感染,通过构建NDRV-CD株σB/σC蛋白原核表达质粒p ET28a-NDRV-I3-σB/σC,重组蛋白经纯化后,联合... 新型鸭呼肠孤病毒感染(NDR)是由NDRV引起的雏鸭高发病率和高病死率的传染病,主要导致患病鸭肝脾坏死。为开发安全高效的新型疫苗预防NDRV感染,通过构建NDRV-CD株σB/σC蛋白原核表达质粒p ET28a-NDRV-I3-σB/σC,重组蛋白经纯化后,联合赛比克ISA 201 VG双相佐剂制备基于I3-01载体的亚单位疫苗,选取1日龄雏鸭分为I3-σB免疫组、I3-σC免疫组、全病毒灭活组及对照组进行免疫保护评价。结果显示,I3-σC免疫组一免后抗体效价极显著高于对照组,间隔13 d二免后抗体效价持续升高,并显著高于I3-σB免疫组及全病毒灭活组。二免后间隔14 d攻毒,并于攻毒后7 d测定各组肝脾病毒载量及第1~7天的排毒量,I3-σC免疫组肝脾病毒载量及肛拭子排毒量均显著低于I3-σB免疫组和全病毒灭活组;I3-σC免疫组肝脾无病变,保护效果最优。结果表明,I3-σC蛋白疫苗通过诱导高效中和抗体及抑制病毒复制,优于I3-σB蛋白疫苗和灭活疫苗的免疫效力。该试验为NDRV亚单位疫苗开发提供了理论依据,未来需优化免疫程序并探索多价疫苗策略以提升应用潜力。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒CD株 i3-01载体 i3-σB/σC蛋白疫苗 免疫攻毒
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产黄青霉S-3-25的硫酸二乙酯诱变突变株3d10-01的次级代谢产物研究Ⅱ
8
作者 乔桦 徐锐 +7 位作者 杨郁 岳贤琳 王紫临 陈波 朱天骄 崔承彬 张国刚 李长伟 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2024年第4期1-11,共11页
目的 阐明产黄青霉Penicillium chrysogenum S-3-25的硫酸二乙酯(DES)诱变突变株3d10-01的大米固体培养基发酵次级代谢产物及其细胞毒活性。方法 利用各种色谱技术分离纯化次级代谢产物,根据理化和波谱数据(核磁共振、质谱技术)鉴定化... 目的 阐明产黄青霉Penicillium chrysogenum S-3-25的硫酸二乙酯(DES)诱变突变株3d10-01的大米固体培养基发酵次级代谢产物及其细胞毒活性。方法 利用各种色谱技术分离纯化次级代谢产物,根据理化和波谱数据(核磁共振、质谱技术)鉴定化合物结构,采用3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT)法评价细胞毒活性。结果 从真菌S-3-25硫酸二乙酯(DES)诱变突变株3d10-01的大米固体培养基发酵产物中分离鉴定了17个化合物:dehydroaustinol(1)、dehydroaustin(2)、austinol(3)、austinolide(4)、11-acetoxyisoaustinone(5)、penipyridone F(6)、penipyridone C(7)、penipyridone D(8)、1-羟基-3-甲基呫吨酮(9)、1,5-二羟基-3-甲基呫吨酮(10)、nidulalin B(11)、(4S,4a R,9a R)-4a-carbomethoxy-1,4,4a,9atetrahydro-4,8-dihydroxy-6-methylxanthone(12)、(4R,4a S,9a R)-1,9a-dihydronidulalin A(13)、1-羟基-3-羟甲基呫吨酮(14)、1,7-二羟基-3-甲基呫吨酮(15)、(S)-2-methyl-3-[(Z)-benzylidene] hexahydropyrrolo [1,2-a]pyrazine-1,4-dione(16)及pestalasin A(17)。其中化合物1、3、5、6、9、10、15对受试HL60细胞的半抑制浓度(IC50)分别为1.7、15.0、16.6、26.5、2.0、6.9和28.4μmol/L,此外化合物1对受试K562细胞和He La细胞的IC50分别为24.2和25.4μmol/L。结论 从极地深海来源真菌产黄青霉S-3-25的硫酸二乙酯(DES)诱变突变株3d10-01的大米固体培养基发酵产物中分离得到17个单体化合物,其中化合物10、16为新天然产物,未见有文献数据的报道。化合物1、3、5、6、9、10、15对受试HL60细胞有较强的抑制活性;化合物1还对K562和He La细胞有较强的抑制活性。 展开更多
关键词 海洋来源真菌 产黄青霉 硫酸二乙酯(DES)诱变 突变株3d10-01 细胞毒
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GFC-3-01型手车式开关柜短路着火事故分析
9
作者 杨国才 《华北电力技术》 CAS 北大核心 1992年第3期44-45,52,共3页
1 事故经过 1990年3月8日在启动0号给水泵合48号开关时,40号开关插头短路着火。因发现及时,处理迅速,未扩大事故。经检查发现是40号开关根下插头瓷瓶处发生弧光短路,下插头三个支持瓷瓶侧铁板烧出直径为100mm一个孔,上、下插头中间隔板... 1 事故经过 1990年3月8日在启动0号给水泵合48号开关时,40号开关插头短路着火。因发现及时,处理迅速,未扩大事故。经检查发现是40号开关根下插头瓷瓶处发生弧光短路,下插头三个支持瓷瓶侧铁板烧出直径为100mm一个孔,上、下插头中间隔板变形。三个下插头全部甩出(在电动力的作用下)。A、B相两个插头已烧碎,C相插头变色。 展开更多
关键词 手车式开关柜 GFC-3-01 着火事故 给水泵 铁板烧 电源开关 开关跳闸 灭磁开关 主汽门 电流互感器
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基于ESP8266-01的无线温湿度调节系统设计 被引量:3
10
作者 侯老二 龙欢 《仪器仪表与分析监测》 2017年第3期5-10,共6页
设计了一种基于ESP8266-01为无线传输模块与Arduino UNO R3为主控模块所构成的无线式(WiFi)远程温湿度调节系统。其中DHT11传感器把所测得的数据缓存到Arduino UNO R3,当温湿度超过上限及时报警,保证工作人员的安全。同时Arduino UNO R... 设计了一种基于ESP8266-01为无线传输模块与Arduino UNO R3为主控模块所构成的无线式(WiFi)远程温湿度调节系统。其中DHT11传感器把所测得的数据缓存到Arduino UNO R3,当温湿度超过上限及时报警,保证工作人员的安全。同时Arduino UNO R3用端口TX发送给无线传输模块,ESP8266-01再用无线方式传输温湿度值给装有TCP/UDP调试助手软件的移动设备,实现移动设备及时查看功能,且移动设备还可控制继电器总开关和调节LED亮度。该设计具有较大的应用前景。 展开更多
关键词 ARDUINO UNO R3 ESP8266-01 DHT11 温湿调节系统 TCP/UDP调试
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甲基转移酶样3对巨核细胞系花生四烯酸代谢通路的影响和机制
11
作者 张嘉祺 刘雯雯 +2 位作者 王茜婷 陈夏欢 刘梅林 《中国心血管杂志》 北大核心 2025年第1期75-85,共11页
目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)对人成巨核细胞白血病细胞(MEG-01)花生四烯酸(AA)代谢通路的影响和相关机制。方法构建METTL3差异表达的MEG-01,分为正常对照(Blank)组、METTL3过表达(OE)组和过表达阴性对照(OE-NC)组、METTL3敲低(KD)组... 目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)对人成巨核细胞白血病细胞(MEG-01)花生四烯酸(AA)代谢通路的影响和相关机制。方法构建METTL3差异表达的MEG-01,分为正常对照(Blank)组、METTL3过表达(OE)组和过表达阴性对照(OE-NC)组、METTL3敲低(KD)组和敲低阴性对照(KD-NC)组。采用定量聚合酶链反应(qPCR)法和免疫印迹(Western blot)法检测各组METTL3、YTH结构域家族蛋白(YTHDF1、YTHDF2)以及参与AA代谢的关键基因前列腺素内过氧化物合酶1/环氧合酶-1(PTGS1/COX-1)、前列腺素内过氧化物合酶2/环氧合酶-2(PTGS2/COX-2)、血栓素A合酶1(TBXAS1)、前列腺素I_(2)合酶(PTGIS)和前列腺素I_(2)受体(PTGIR)的表达量变化。采用酶联免疫吸附分析(ELISA)法测定细胞培养上清中AA代谢产物前列腺素H_(2)(PGH_(2))和血栓素B_(2)(TXB_(2))的水平。采用蛋白稳定性实验和RNA结合蛋白质免疫沉淀(RIP)实验验证YTHDF1与COX-1 mRNA的结合情况。结果qPCR和Western blot检测显示,OE组YTHDF1、PTGS1/COX-1的mRNA和蛋白水平较OE-NC组升高,KD组较KD-NC组降低(均为P<0.05)。ELISA测定显示,细胞培养上清中OE组PGH_(2)、TXB_(2)的含量高于OE-NC组,KD组TXB_(2)的含量低于KD-NC组(均为P<0.05)。蛋白稳定性实验和RIP实验证实,METTL3通过YTHDF1参与COX-1 mRNA的翻译调控。结论METTL3可能通过促进N6-甲基腺苷(m6A)修饰介导的COX-1 mRNA翻译效率,调控巨核细胞系的AA代谢通路。 展开更多
关键词 甲基转移酶样3 N6-甲基腺苷甲基化 MEG-01细胞 花生四烯酸 心血管疾病
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绅宝9—3Vector
12
作者 俞庆伟 《轿车情报》 2002年第12期46-51,共6页
关键词 绅宝9-3vector轿车 设计特点 工程技术 制动性 操纵性 技术装备
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靶向STAT3信号通路小分子抑制剂的设计、合成及其生物活性
13
作者 何琴 张焕 +2 位作者 杜旭泽 郭焘宁 叶发青 《温州医科大学学报》 CAS 2019年第5期333-338,343,共7页
目的:以嘌呤类STAT3小分子抑制剂S3I-V4-01为先导,设计并合成一系列新型目标化合物,通过初步的体外细胞实验检测其生物活性,以筛选出活性更优的化合物。方法:通过亲核取代反应合成了一系列目标化合物,运用荧光素酶报告基因法检测目标化... 目的:以嘌呤类STAT3小分子抑制剂S3I-V4-01为先导,设计并合成一系列新型目标化合物,通过初步的体外细胞实验检测其生物活性,以筛选出活性更优的化合物。方法:通过亲核取代反应合成了一系列目标化合物,运用荧光素酶报告基因法检测目标化合物对STAT3信号转导通路的影响,利用MTT实验检测目标化合物对人表皮鳞癌细胞A431和非小细胞肺癌细胞A549增殖的抑制作用。结果:本研究共合成8个终产物(Z2~Z5及H2~H5),其中,优势化合物H3能有效抑制STAT3磷酸化,阻断STAT3信号转导通路,抑制A431和A549的细胞增殖。结论:化合物H3比S3I-V4-01具有更强的p-STAT3抑制能力和抗肿瘤细胞增殖能力,并且可以在H3结构上进行优化,以进一步提高生物活性。 展开更多
关键词 STAT3 小分子抑制剂 S3I-V4-01 抗肿瘤
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HS055L-3HF01电源实物背面图、HS308-4N01电源实物正面图、HS308-4N01电源实物背面图
14
作者 刘春 《家电检修技术》 2014年第4期31-31,共1页
关键词 电源 HS055L-3HF01 HS308-4N01 实物 308
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Saab 9-3 Vector 2.0TS
15
作者 阮锦程 《汽车杂志》 2008年第12期124-124,共1页
轻巧的直列4缸涡轮增压引擎,加上结构简单的前轮驱动,装在美丽的08款9—3身上,应该是最能代表Saab精神的车型。
关键词 增压引擎 汽车 产品介绍 “Saab 9-3 vector 2.0TS”
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HS488-4N01电源实物背面图、HSO55L-3HFO1电源实物正面图
16
作者 李城 《家电检修技术》 2014年第3期36-36,共1页
关键词 电源 HS488-4N01 HSO55L-3HFO1 实物
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色氨酸代谢限速酶IDO1及其抑制剂的研究 被引量:2
17
作者 刘鑫 杨青 《生命的化学》 CAS CSCD 2016年第6期774-782,共9页
吲哚胺2,3-双加氧化酶1(indoleamine 2,3dioxygenase 1,IDO1)是肝脏以外催化色氨酸沿着犬尿氨酸途径(KP)分解代谢的限速酶。IDO1过度活化引起犬尿氨酸途径上具有神经毒性的产物的蓄积,是导致神经紊乱和神经退行性疾病的重要原因。IDO1... 吲哚胺2,3-双加氧化酶1(indoleamine 2,3dioxygenase 1,IDO1)是肝脏以外催化色氨酸沿着犬尿氨酸途径(KP)分解代谢的限速酶。IDO1过度活化引起犬尿氨酸途径上具有神经毒性的产物的蓄积,是导致神经紊乱和神经退行性疾病的重要原因。IDO1又是免疫耐受酶,在诱导母胎免疫耐受和肿瘤免疫逃逸中均发挥重要作用,被视为新的免疫检查点。IDO1与阿尔茨海默病,肿瘤免疫逃逸等疾病的相关性已被证实,因此IDO1抑制剂作为极具潜能的药物受到日益广泛的关注。 展开更多
关键词 吲哚胺2 3-双加氧酶I(ID01) 抑制剂 阿尔茨海默病 肿瘤免疫逃逸 免疫检查点
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印制板组装件返工返修三防漆去除方法研究 被引量:1
18
作者 田翔文 周强 +3 位作者 洪元 周旭 周玥 朱博宇 《电子测试》 2023年第1期36-41,共6页
高可靠电子产品为应对潮湿、盐雾、高温等恶劣的环境,一般要求喷涂三防漆,应用较多的为TS01-3聚氨酯清漆。印制板组装件返工返修过程中该三防漆去除十分困难,严重影响了产品的可靠性,大大降低了产品生产效率。因此,如何实现返工返修过... 高可靠电子产品为应对潮湿、盐雾、高温等恶劣的环境,一般要求喷涂三防漆,应用较多的为TS01-3聚氨酯清漆。印制板组装件返工返修过程中该三防漆去除十分困难,严重影响了产品的可靠性,大大降低了产品生产效率。因此,如何实现返工返修过程中三防漆膜的良好去除是亟待解决的问题。本文以喷涂TS01-3聚氨酯清漆的印制板组装件为研究对象,通过去漆试验初步选定可操作的去漆方法,而后通过高低温试验、湿热试验等进一步验证该去漆方法对产品可靠性的影响。试验结果表明,某公司高效快速去膜剂在实现该三防漆的良好去除的同时保证产品的可靠性。 展开更多
关键词 TS01-3聚氨酯清漆 三防漆去除 返工返修
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