三种中药单体化合物对3T3-L1脂肪细胞线粒体功能影响的初步研究

1

作者 赵志伟 张若男 杨丹凤 《天津药学》 2025年第4期391-396,共6页

目的探讨三种中药单体化合物〔欧前胡素(IMP)、异鼠李素-3O-新橙皮苷(ISO)、胡黄连苷Ⅰ(PIN)〕对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化后线粒体功能的影响。方法首先通过传统鸡尾酒法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,之后分别采用10μmol/L... 目的探讨三种中药单体化合物〔欧前胡素(IMP)、异鼠李素-3O-新橙皮苷(ISO)、胡黄连苷Ⅰ(PIN)〕对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化后线粒体功能的影响。方法首先通过传统鸡尾酒法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,之后分别采用10μmol/L IMP、ISO和PIN作为药物处理组,用荧光倒置显微镜观察脂肪细胞中脂滴生成情况;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测脂肪细胞线粒体发生相关基因(PGC-1α、Tfam、Nrf1、Tomm5、Opa1)的mRNA表达情况以及线粒体DNA拷贝数。结果与空白对照组相比,IMP组、ISO组、PIN组脂滴形态变小、数量增加;与空白对照组比较,三种药物处理组的脂肪细胞线粒体形成相关基因(PGC-1α、Tfam、Nrf1)、线粒体动力相关基因(Tomm5、Opa1)的表达水平均显著上调(P<0.01),脂肪细胞线粒体DNA拷贝数亦显著增多(P<0.05,P<0.01)。结论IMP、ISO和PIN三种中药单体化合物可以提高3T3-L1脂肪细胞中线粒体相关功能。 展开更多

关键词 欧前胡素 异鼠李素-3O-新橙皮苷 胡黄连苷Ⅰ 3T3-L1脂肪细胞 线粒体

暂未订购

健脾益肾化痰方通过VEGFA-PI3K-AKT-FOXO1通路下调人肺鳞癌细胞PD-L1表达的机制考察

2

作者 方以峻 熊常州 +3 位作者 王志光 覃慧敏 刘柱 廖文滔 《中国医院药学杂志》 北大核心 2025年第11期1228-1235,共8页

目的:明确健脾益肾化痰方降低人肺鳞癌PD-L1表达的分子机制。方法:通过流式细胞仪检测给药后人肺鳞癌SK-MES-1细胞的凋亡情况;CCK-8法检测给药后人肺鳞癌SK-MES-1细胞的存活率;荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot免疫印迹实验检测给药... 目的:明确健脾益肾化痰方降低人肺鳞癌PD-L1表达的分子机制。方法:通过流式细胞仪检测给药后人肺鳞癌SK-MES-1细胞的凋亡情况;CCK-8法检测给药后人肺鳞癌SK-MES-1细胞的存活率;荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot免疫印迹实验检测给药后人肺鳞癌SK-MES-1细胞中VEGFA、PI3K、AKT、FOXO1、PD-L1相关基因和蛋白的表达。结果:与对照组相比,健脾益肾化痰方中、高剂量组细胞凋亡率均上升(P<0.01),表明健脾益肾化痰方能促进肺鳞癌细胞凋亡,其凋亡趋势与剂量浓度呈正相关;与对照组相比,健脾益肾化痰方低、中、高剂量组细胞存活率皆显著降低(P<0.01),表明健脾益肾化痰方可有效抑制人肺鳞癌细胞的增殖;与对照组相比,健脾益肾化痰方各剂量组皆能不同程度地降低SK-MES-1细胞中VEGFA、PI3K、AKT、PD-L1基因和蛋白的表达,同时健脾益肾化痰方中、高剂量能够显著提升FOXO1 mRNA和蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:健脾益肾化痰方大鼠含药血清能够诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞株发生凋亡、抑制癌细胞增殖、降低癌细胞PD-L1表达水平,其作用机制可能与该方通过VEGF-PI3K-AKT-FOXO1通路抑制人肺鳞癌细胞PD-L1表达,逆转免疫逃逸相关。 展开更多

关键词 健脾益肾化痰方 肺鳞癌 程序性死亡配体1 免疫逃逸

原文传递

大鼠大脑皮质发育过程中FLnI-L1表达谱分析

3

作者 李运动 蔡明登 +2 位作者 姚茂金 袁小兵 张晓艳 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第34期3370-3377,共8页

基因组中存在大量重复序列,这些重复序列究竟具有何种生物学功能以及通过何种方式发挥功能目前仍然是一个未解之谜.许多重复序列来源于转座元件在基因组中的整合,long interspersed elements(LINE-1,L1)逆转座子是哺乳动物基因组中非常... 基因组中存在大量重复序列,这些重复序列究竟具有何种生物学功能以及通过何种方式发挥功能目前仍然是一个未解之谜.许多重复序列来源于转座元件在基因组中的整合,long interspersed elements(LINE-1,L1)逆转座子是哺乳动物基因组中非常重要的一类转座元件,由其来源的DNA序列占基因组的17%,并且L1可能通过多种方式影响基因组.虽然目前基因组中仍然有少数L1保留转座能力,大部分L1由于积累了大量的突变而失去了转座能力.正常组织中L1究竟呈现怎样的表达状况,是否发挥不依赖转座作用的功能,目前尚缺乏最基本的了解.通过采用高通量测序方法,我们在转录组水平研究了大鼠不同发育期大脑皮质中一类不具备转座活性的全长非完整L1(FLn I-L1)的表达模式,分析了FLnI-L1的表达与邻近基因的关系.同时,通过全基因组水平分析与FLn I-L1表达趋势一致的基因,我们推测FLnI-L1可能参与调控与神经发育有关的信号通路.本研究揭示了大鼠大脑皮质发育过程中FLn I-L1的表达模式,为进一步研究L1的生物学功能奠定了基础. 展开更多

关键词 FLn i-l1 转座 高通量测序 脑皮质 神经发育

原文传递

^(125)I标记单抗用于MDA-MB-231荷瘤鼠中PD-L1表达的SPECT显像研究

4

作者 何淑华 汪洋 +3 位作者 郑小北 刘玉侠 贾丽娜 张岚 《同位素》 CAS 2024年第6期568-574,共7页

为监测肿瘤中程序性死亡蛋白配体(PD-L1)的表达水平,本研究采用Iodogen法构建了靶向PD-L1的^(125)I-Atezolizumab。考察反应时间对标记率的影响,评价其在PBS和胎牛血清中的稳定性。研究^(125)I-Atezolizumab在大鼠体内的药时曲线,乳腺癌... 为监测肿瘤中程序性死亡蛋白配体(PD-L1)的表达水平,本研究采用Iodogen法构建了靶向PD-L1的^(125)I-Atezolizumab。考察反应时间对标记率的影响,评价其在PBS和胎牛血清中的稳定性。研究^(125)I-Atezolizumab在大鼠体内的药时曲线,乳腺癌MDA-MB-231细胞和肿瘤模型中对PD-L1的靶向性。结果显示,室温反应5 min,^(125)I-Atezolizumab的标记率大于98%;^(125)I-Atezolizumab在PBS和胎牛血清中孵育48 h,放化纯度仍大于90%;^(125)I-Atezolizumab在大鼠体内的清除半衰期为(12.1±1.9)h。^(125)I-Atezolizumab免疫活性保持良好(IF=52%),乳腺癌细胞对其有特异性摄取;对MDA-MB-231荷瘤鼠的SPECT/CT显像结果显示,实验组肿瘤处具有较高的放射性摄取,对照组肿瘤对^(125)I-Atezolizumab的摄取可被Atezolizumab显著抑制,说明^(125)I-Atezolizumab与PD-L1靶点的结合具有特异性。初步研究结果表明,^(125)I-Atezolizumab标记方法简单高效、体外性质稳定,对PD-L1显像特异,具有用于肿瘤PD-L1表达水平监测的潜力,值得开展进一步研究。 展开更多

关键词 程序性死亡蛋白配体1(PD-L1) ^(125)I标记 ^(125)I-Atezolizumab SPECT/CT

在线阅读 下载PDF 职称材料

PD-L1基因实时荧光定量RT-PCR法的建立及在大鼠肝移植中的应用 被引量：2

5

作者 巫姜 李涛 +4 位作者 赵晋明 王俊华 刘向伟 林仁勇 温浩 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期1-5,9,共6页

目的建立real-time R T-qPCR(实时荧光定量R T-PCR)检测大鼠PD-L1的方法,应用该方法检测大鼠移植肝中PD-L1 mR NA的水平。方法两袖套法复制大鼠肝移植耐受组(BN→BN)及排斥组(LEW→BN)模型,术后7 d处死受体,检测肝功能ALT和AST水平,HE... 目的建立real-time R T-qPCR(实时荧光定量R T-PCR)检测大鼠PD-L1的方法,应用该方法检测大鼠移植肝中PD-L1 mR NA的水平。方法两袖套法复制大鼠肝移植耐受组(BN→BN)及排斥组(LEW→BN)模型,术后7 d处死受体,检测肝功能ALT和AST水平,HE染色病理分析排斥程度,Trizol法提取移植肝总RNA并反转录为cDNA;选β-actin作为内参,复制SYBR GreenⅠreal-time RT-qPCR检测法。利用该方法检测移植肝中PD-L1和β-actin的初始模板量,PD-L1/β-actin计算PD-L1 mRNA的相对表达量。结果异基因LEW→BN组出现急性排斥反应,ALT、AST排斥组均高于耐受组(均P<0.05)。RAI评分排斥组高于耐受组(均P<0.05)。PD-L1扩增效率为98.8%,相关系数为0.996;溶解曲线为特异单峰;变异系数小于2.0%;移植肝中PD-L1 mRNA相对表达为耐受组([0.95±0.10)×10-2]高于排斥组([0.81±0.09)×10-2],差异有统计学意义(t=2.62,P=0.026)。结论成功建立了大鼠源PD-L1的real-time R T-qPCR检测方法,耐受组PD-L1的高表达提示其可能有利于大鼠移植肝的存活,为研究肝移植免疫耐受奠定了理论基础。 展开更多

关键词 肝移植 PD-L1 实时荧光定量RT-PCR SYBR GreenI

暂未订购

放射免疫分子探针^(131)I-PD-L1 mAb的制备及体内显像实验 被引量：2

6

作者 庞小溪 廖栩鹤 +3 位作者 杜毓菁 张炳晔 刘萌 王荣福 《标记免疫分析与临床》 CAS 2018年第10期1536-1541,共6页

目的研制新型放射免疫分子探针^(131)I-PD-L1 m Ab,在探索分子探针理化性质及体内安全性的基础上,开展荷瘤裸鼠在体靶向显像研究。方法优化放射性核素碘-131[^(131)I]标记抗人PD-L1单克隆抗体(m Ab)的标记条件,测定分子探针^(131)I-PD-L... 目的研制新型放射免疫分子探针^(131)I-PD-L1 m Ab,在探索分子探针理化性质及体内安全性的基础上,开展荷瘤裸鼠在体靶向显像研究。方法优化放射性核素碘-131[^(131)I]标记抗人PD-L1单克隆抗体(m Ab)的标记条件,测定分子探针^(131)I-PD-L1 m Ab在不同环境下的稳定性,并观察其急性毒性反应与致热原。静脉单次给药后,按不同时间点抽血测放射性计数,根据非房室统计矩模型进行曲线拟合并计算药动学参数。建立荷U87裸鼠模型,进行体内肿瘤靶向性显像研究。结果分子探针^(131)I-PD-L1 m Ab的标记率为(80. 21±2. 98)%,放射化学纯度达(96. 51±1. 10)%。^(131)I-PD-L1 m Ab的放化纯在72h内均大于92%,放射稳定性良好,且亲水性较强(Lg P=-2. 51±0. 39)。该探针无急性毒性反应及致热原。半衰期T1/2与血药浓度-时间曲线下面积AUC0-inf分别为15. 53 h与814. 16 kbq/m L×h。荷瘤裸鼠体内显像结果显示:荷U87实验组的肿瘤部位可见清晰显影,144h时肿瘤/非肿瘤(T/NT)比值达10. 32±0. 78(n=3);而阻断组的肿瘤部位未见明显放射性浓聚,T/NT比值分别为1. 14±0. 20(n=3)。结论^(131)I-PD-L1 m Ab标记简单,放化纯高,稳定性良好,特异性显像效果良好,体内应用安全,有望进一步应用于肿瘤的放射免疫显像与治疗研究。 展开更多

关键词 PD-L1 碘-131[^131I] 分子探针 分子影像 肿瘤免疫

暂未订购

川芎嗪对3T3-L1增殖分化及分泌Leptin、PAI-1的影响

7

作者 刘新迎 周联 王培训 《新中医》 CAS 2016年第9期230-232,共3页

目的:研究川芎嗪(Tetramethylpyrazine,TMP)对小鼠前脂肪细胞3T3-L1增殖分化和分泌瘦素(Leptin)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的影响。方法:培养3T3-L1细胞,并分别用川芎嗪5μg/m L、50μg/m L、100μg/m L 3个浓度进行干预,四甲基偶... 目的:研究川芎嗪(Tetramethylpyrazine,TMP)对小鼠前脂肪细胞3T3-L1增殖分化和分泌瘦素(Leptin)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的影响。方法:培养3T3-L1细胞,并分别用川芎嗪5μg/m L、50μg/m L、100μg/m L 3个浓度进行干预,四甲基偶氮唑盐(MTT)测定3T3-L1的增殖;油红O进行染色以及染色比色法测定细胞分化程度;酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养上清中Leptin、PAI-1含量。结果:川芎嗪100μg/m L浓度组能明显抑制3T3-L1细胞的增殖,差异有统计学意义(P<0.01);3个浓度组对细胞分化均无明显影响;TMP 3个浓度组对Leptin的分泌和50μg/m L、100μg/m L浓度组对PAI-1的分泌均有明显抑制作用,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:川芎嗪对脂肪细胞的调节作用以影响其分泌功能为主。 展开更多

关键词 川芎嗪 前脂肪细胞(3T3-L1) 增殖分化 瘦素(Leptin) 纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)

原文传递

关岭牛MyoDⅠ基因启动子报告质粒的构建及活性验证 被引量：10

8

作者 李飞 许厚强 +3 位作者 陈伟 陈祥 刘敏 桓聪聪 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期459-466,共8页

为了克隆关岭牛MyoDⅠ基因启动子并验证其启动活性,根据GenBank中牛的MyoDⅠ基因序列设计PCR引物,用PCR技术扩增牛MyoDⅠ基因的启动子,构建重组克隆载体pUCmT-MyoDⅠ;并通过PCR扩增、限制性酶切、测序及生物信息学分析对阳性克隆进行鉴... 为了克隆关岭牛MyoDⅠ基因启动子并验证其启动活性,根据GenBank中牛的MyoDⅠ基因序列设计PCR引物,用PCR技术扩增牛MyoDⅠ基因的启动子,构建重组克隆载体pUCmT-MyoDⅠ;并通过PCR扩增、限制性酶切、测序及生物信息学分析对阳性克隆进行鉴定;构建报告质粒pGL3-MyoDⅠ,并将其转染小鼠C2C12、3T3-L1细胞系,检测其24h后的双荧光素酶活性。实验结果获得了关岭牛MyoDⅠ基因启动子,其序列长度为993bp,并成功构建了MyoDⅠ启动子报告质粒;双荧光素酶活性检测表明pGL3-MyoDⅠ在小鼠C2C12细胞中的表达是pGL3空载体40.65倍,在小鼠3T3-L1细胞中的表达是空载体的1.13倍,MyoDⅠ启动子在小鼠C2C12细胞中的表达高于3T3-L1细胞(**p<0.01)。结果表明关岭牛MyoDⅠ基因启动子具有启动活性,在小鼠骨骼肌细胞中特异性表达。 展开更多

关键词 MyoDⅠ基因 启动子 荧光素酶 C2C12 3T3-L1

在线阅读 下载PDF 职称材料

卵巢功能调控相关蛋白在不同发育阶段卵泡中的表达及其意义 被引量：3

9

作者 张利群 姚兰 +2 位作者 潘袁 赵芸鹤 蔡知天 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1121-1124,共4页

目的:检测卵巢功能调控相关蛋白在不同发育阶段卵泡中的表达,探讨其在卵泡发育及卵巢功能调控中的作用及其意义。方法:选取包含原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡、成熟卵泡、闭锁卵泡及白体的育龄期女性卵巢组织,采用免疫组织化学法分析乙... 目的:检测卵巢功能调控相关蛋白在不同发育阶段卵泡中的表达,探讨其在卵泡发育及卵巢功能调控中的作用及其意义。方法:选取包含原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡、成熟卵泡、闭锁卵泡及白体的育龄期女性卵巢组织,采用免疫组织化学法分析乙二醛酶I(Glyoxalase I)、泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)、热休克蛋白27(HSP27)和血清淀粉样蛋白P(SAP)在不同阶段卵泡中的表达情况,并比较卵泡中其表达强度。结果:Glyoxalas I和UCH-L1在次级卵泡、成熟卵泡的颗粒细胞及卵泡膜细胞中呈强表达,表达强度高于其在原始卵泡及初级卵泡胞质中的表达;HSP27在原始卵泡及初级卵泡细胞质中呈强表达,表达强度高于其在在次级卵泡和成熟卵泡颗粒细胞及卵泡膜细胞中的表达;Glyoxalase I和HSP27在闭锁卵泡中呈强表达,表达强度高于其在生长卵泡中的表达;SAP在原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡均表达,表达强度无明显差异;4种蛋白在白体中均不表达。结论:UCH-L1强表达和HSP27弱表达与卵泡成熟发育有关;Glyoxalase I强表达及HSP27强表达与卵泡闭锁及卵巢功能衰退有关。 展开更多

关键词 乙二醛酶I 泛素羧基末端水解酶L1 热休克蛋白27 血清淀粉样蛋白P 卵泡发育

暂未订购

3GPP HARQ简述 被引量：4

10

作者 付琳 周亮 《成都信息工程学院学报》 2002年第2期93-96,共4页

介绍了链路层用于差错控制的常用技术———前向纠错编码 (FEC)和自动重传请求 (ARQ)结合的技术 ,即混合ARQ。主要介绍HARQ的 3种基本类型 (编码方案 )和ARQ的 3个标准重传协议 ,最后简要给出了 3GPPHARQ的两种应用方式。

关键词 3GPP HARQ 第三代移动通信协作伙伴项目 混合ARQI 无线链路控制层 前向纠错编码 自动重传请求 差错控制

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于区间模型的一级指令Cache缺失损失分析

11

作者 穆雅莉 杨兵 喻明艳 《计算机工程》 CAS CSCD 2012年第7期273-275,278,共4页

一级指令Cache的平均缺失损失被量化为下一级存储系统的访问时间,在进行处理器性能瓶颈分析中简单的量化会引起较大的误差。针对该问题,应用区间模型分析影响一级指令Cache平均缺失损失的前端因素,并用模拟实验进行分析研究,结果表明,... 一级指令Cache的平均缺失损失被量化为下一级存储系统的访问时间,在进行处理器性能瓶颈分析中简单的量化会引起较大的误差。针对该问题,应用区间模型分析影响一级指令Cache平均缺失损失的前端因素,并用模拟实验进行分析研究,结果表明,除下一级存储系统的访问时间外,取指带宽、取指队列的大小、一级指令Cache缺失率及程序特性,会对一级指令Cache平均缺失损失产生影响。 展开更多

关键词 超标量处理器 一级指令Cache 缺失损失 区间模型

在线阅读 下载PDF 职称材料

Poly（I：C）不同处理方式对脂肪细胞固有免疫应答的影响

12

作者 刘国伟 渠明翠 +6 位作者 罗桓宇 刘志超 刘国燕 杨灿 王方超 宋向凤 于莉莉 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期28-33,共6页

目的研究多聚肌苷-多聚胞苷酸钠盐[polyinosinic polycytidylic acid，Poly（I∶C）]的不同处理方式对3T3-L1脂肪细胞固有免疫应答的影响。方法将Poly（I∶C）通过外源直接加入和转染两种方式处理3T3-L1前脂肪细胞与成熟脂肪细胞，通过... 目的研究多聚肌苷-多聚胞苷酸钠盐[polyinosinic polycytidylic acid，Poly（I∶C）]的不同处理方式对3T3-L1脂肪细胞固有免疫应答的影响。方法将Poly（I∶C）通过外源直接加入和转染两种方式处理3T3-L1前脂肪细胞与成熟脂肪细胞，通过实时荧光定量PCR检测炎症因子，包括肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF-ɑ）、白细胞介素6（interleukin 6，IL-6）与Ⅰ型干扰素（typeⅠinterferon，包括IFN-α和IFN-β）在mRNA水平的表达；另外通过ELISA的方法检测炎症因子与Ⅰ型干扰素在蛋白水平的表达变化。结果与对照组相比，两种Poly（I∶C）的处理方式都提高了炎症因子和Ⅰ型干扰素在mRNA水平的表达，但是转染的方式显著提高了炎症因子和Ⅰ型干扰素在mRNA水平的表达，同时在蛋白水平也发现转染方式显著促进炎症因子和Ⅰ型干扰素的分泌；在分化成熟的3T3-L1脂肪细胞中也发现了转染方式增强了Poly（I∶C）的固有免疫应答。外源直接加入刺激了Toll样受体3（Toll-like receptor 3，TLR3）的表达，而转染方式刺激了TLR3、黑色素瘤分化相关蛋白5（melanoma differentiation related proteins 5，MDA5）和维甲酸诱导基因Ⅰ（retinoic acid induced gene I，RIG-Ⅰ）受体的表达。结论通过对于Poly（I∶C）的不同处理方式刺激脂肪细胞产生的免疫应答的研究，发现转染方式相比较直接处理方式，显著提高了Poly（I∶C）引发的炎症反应。 展开更多

关键词 脂肪细胞 Poly(I:C) 模式识别受体 3T3-L1

原文传递