PRV感染小鼠三叉神经节细胞后通过RIG-Ⅰ信号通路调控Ⅰ型干扰素分泌

1

作者 廖正波 汤德元 +7 位作者 曾智勇 王彬 黄涛 陈旭 袁盛林 何松 周飘 毛茵茗 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第2期255-265,共11页

为探究伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)感染小鼠三叉神经节(TG)细胞后对其抗病毒免疫信号通路及Ⅰ型干扰素因子(IFN-Ⅰ)的影响。本试验使用1 MOI PRV接种感染TG原代细胞,使用106.29TCID50PRV滴鼻感染小鼠,使用实时荧光定量PCR(qP... 为探究伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)感染小鼠三叉神经节(TG)细胞后对其抗病毒免疫信号通路及Ⅰ型干扰素因子(IFN-Ⅰ)的影响。本试验使用1 MOI PRV接种感染TG原代细胞,使用106.29TCID50PRV滴鼻感染小鼠,使用实时荧光定量PCR(qPCR)、Western blot和ELISA等技术检测小鼠TG原代细胞不同攻毒时间点及体内攻毒组和对照组的基因转录、蛋白表达及IFN-α和IFN-β的分泌情况。结果显示,PRV感染小鼠TG原代细胞后引起RIG-I、MAVS和IRF3的基因及蛋白表达变化,诱导了体内外IRF3和IκBα的磷酸化。ELISA结果显示,PRV感染后可调控小鼠TG原代细胞及小鼠TG内IFN-α和IFN-β的分泌。使用siRNA干扰TG细胞内RIG-Ⅰ表达后Western blot检测RIG-Ⅰ信号通路相关蛋白表达结果及IFN-α和IFN-β的分泌情况。结果显示,siRIG-Ⅰ成功干扰TG细胞内RIG-Ⅰ蛋白表达,并引起下游MAVS和IRF3等蛋白表达发生变化,同时调控TG细胞内IFN-α和IFN-β的分泌。研究结果表明,PRV感染可诱导小鼠TG原代细胞及小鼠TG内RIG-Ⅰ的表达,并通过RIG-Ⅰ-MAVS-IRF3信号轴调控TG细胞内IFN-Ⅰ的抗病毒免疫反应,以及PRV会抑制TG内IRF3表达,并在感染后期显著上调IFN-β的表达,这可能是PRV在感染后期导致小鼠快速死亡的重要原因。本试验揭示了PRV感染小鼠TG细胞后通过RIG-Ⅰ-MAVS-IRF3信号通路调控IFN-Ⅰ的部分抗病毒免疫机制,以及发现IRF3蛋白在体内外不同的变化趋势,为后续深入研究奠定了基础。 展开更多

关键词 PRV RIG-Ⅰ IRF3 信号通路 Ⅰ型干扰素 小鼠

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1,25二羟基维生素D_(3)通过抑制cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号通路降低双链DNA诱导的小鼠外周血单个核细胞中炎症因子分泌

2

作者 黄诒洁 杭倩如 +5 位作者 徐腾姣 张威 翁于格 林奕哲 何小解 丁艳 《中国热带医学》 北大核心 2025年第5期630-636,共7页

目的探讨1,25二羟基维生素D3(1,25(OH)2D_(3))是否通过抑制cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号通路使双链DNA(double strands DNA,dsDNA)诱导的小鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)中的炎症因子IFN-α、IFN-β分泌减少,... 目的探讨1,25二羟基维生素D3(1,25(OH)2D_(3))是否通过抑制cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号通路使双链DNA(double strands DNA,dsDNA)诱导的小鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)中的炎症因子IFN-α、IFN-β分泌减少,探寻1,25(OH)_(2)D_(3)治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosue,SLE)的新靶点。方法取10只8周龄雌性C57BL/6小鼠,10%水合氯醛麻醉小鼠,腹主动脉取血,分离PBMCs,将其分为2组,第1组为dsDNA(0、20、40、80μg/L)诱导组,其中0μg/L的为对照组,筛选dsDNA最佳作用剂量。第2组PBMCs首先使用诱导dsDNA(40μg/L)处理,然后再用1,25(OH)_(2)D_(3)(10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)μmol/L)进行治疗,其中空白组为未经1,25(OH)_(2)D_(3)处理的0μg/L dsDNA的小鼠PBMCs,对照组为未经1,25(OH)_(2)D_(3)处理的40μg/L dsDNA的小鼠PBMCs。48 h后,采用CCK8检测各组PBMCs的细胞活力,ELISA法检测各组PBMCs中IFN-α和IFN-β的分泌水平,Western blot检测各组小鼠PBMCs中cGAS、pTBK1、pSTING、pIRF3的蛋白表达水平,观察1,25(OH)_(2)D_(3)对cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号的蛋白表达及IFN-α、IFN-β分泌的影响。结果dsDNA剂量依赖性地使PBMCs的细胞活力显著下降(P<0.01),在40μg/L的dsDNA时,细胞活力差异较显著性,且dsDNA剂量依赖性地促进炎症因子IFN-α和IFN-β的分泌(P<0.01),小鼠PBMCs中cGAS、pTBK1、pSTING、pIRF3的表达水平较对照组上调(P<0.05)。在1,25(OH)_(2)D_(3)治疗dsDNA诱导PBMCs的细胞组中,1,25(OH)_(2)D_(3)剂量依赖性地使dsDNA处理的PBMCs细胞活力显著提升(P<0.01),降低了炎症因子IFN-α和IFN-β的分泌(P<0.01),在加入1,25(OH)_(2)D_(3)治疗的dsDNA处理的PBMCs中cGAS、pTBK1、pSTING、pIRF3、IFN-Ⅰ的表达水平较对照组下调(P<0.05)。结论1,25(OH)2D3可负反馈调节dsDNA激活PBMCs中的cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号通路且降低炎症因子的IFN-α和IFN-β的分泌。 展开更多

关键词 1 25二羟基维生素D3 系统性红斑狼疮 cGAS/STING/IFN-Ⅰ 干扰素-α 干扰素-Β

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猪繁殖与呼吸综合征病毒天然免疫逃逸机制研究进展 被引量：4

3

作者 刘爱军 黄晓兵 +3 位作者 章杭建 周彩琴 安慧婷 张传亮 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1831-1840,共10页

天然免疫是抗病毒免疫反应的前线,也是适应性免疫的桥梁。猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)进化出多种策略逃逸宿主的天然免疫从而建立持续性感染,这是控制PRRSV感染的最大障碍之一... 天然免疫是抗病毒免疫反应的前线,也是适应性免疫的桥梁。猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)进化出多种策略逃逸宿主的天然免疫从而建立持续性感染,这是控制PRRSV感染的最大障碍之一。在抗病毒天然免疫中,Ⅰ型干扰素、干扰素刺激基因(interferon-stimulated genes,ISGs)和其他抗病毒蛋白是主要的执行者,细胞自噬和细胞程序化死亡是重要的组成部分,非编码RNA是关键的调节因子。近年来PRRSV天然免疫逃逸的机制研究不断涌现,极大扩展了我们对PRRSV与宿主之间相互作用网络的理解。本文概述了PRRSV抑制Ⅰ型干扰素产生及其信号转导、拮抗ISGs和其他抗病毒蛋白的最新研究成果,并重点总结了PRRSV通过调控细胞自噬、细胞程序性死亡以及非编码RNA等逃逸天然免疫的研究进展,以期为后续研究及抗PRRSV疫苗和药物研发提供思路。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征 天然免疫 免疫逃逸 Ⅰ型干扰素 自噬 细胞程序化死亡 非编码RNA

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清肺解毒颗粒调控Ⅰ型干扰素通路抗RSV效应的机制研究 被引量：1

4

作者 孙亚磊 高静 +6 位作者 苏凯奇 郭宇 李昌原 代婷 吴明莉 袁斌 冯晓东 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2564-2568,共5页

目的:基于Ⅰ型干扰素通路探究清肺解毒颗粒(QJG)发挥抗呼吸道合胞病毒(RSV)的效应机制。方法:将40只BALB/c雌性小鼠随机分为对照组(Con组),模型组(RSV组),RSV+清肺解毒颗粒组(RSV+QJG组),RSV+IFN-α阻滞剂组(RSV+IFN-α Inh组),RSV+IFN... 目的:基于Ⅰ型干扰素通路探究清肺解毒颗粒(QJG)发挥抗呼吸道合胞病毒(RSV)的效应机制。方法:将40只BALB/c雌性小鼠随机分为对照组(Con组),模型组(RSV组),RSV+清肺解毒颗粒组(RSV+QJG组),RSV+IFN-α阻滞剂组(RSV+IFN-α Inh组),RSV+IFN-α阻滞剂+清肺解毒颗粒组(RSV+IFN-α Inh+QJG组)。除Con组外,其余各组小鼠给予RSV毒株,其中RSV+IFN-α Inh组、RSV+IFN-α Inh+QJG组在两次滴鼻造模前分别给予IFN-α阻滞剂。在感染后治疗组采用QJG给药治疗。观察各组小鼠的一般状态,并在治疗3 d后处死取材。HE染色法观察肺组织的病理改变并评分,ELISA方法检测小鼠血清中IFN-α/β的水平,Q-PCR检测小鼠肺组织RIG-Ⅰ、MAVS、RSV-F、RSV-G等基因的转录水平,免疫荧光、Western Blot检测RSV-F、IRF3、OAS1、MX1等蛋白表达水平。结果:与RSV组比较,QJG药物治疗能够显著抑制肺组织RSV水平,同时改善肺组织炎性损伤(P<0.01)。与RSV组比较,RSV+QJG组小鼠肺组织中RIG-Ⅰ、MAVS、p-IRF3、IFN-α/β、OAS1、MX1等基因的表达水平显著升高(P<0.01,P<0.05)。IFN-α阻滞剂的干预能够影响QJG的抗病毒效应及IFN-α、OAS1、MX1升高水平(P<0.01,P<0.05)。结论:QJG可能通过调控Ⅰ型干扰素通路从而发挥抗RSV的效应。 展开更多

关键词 清肺解毒颗粒 呼吸道合胞病毒 Ⅰ型干扰素通路 IFN-α阻滞剂

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天然生物活性分子抗伪狂犬病病毒感染的研究进展

5

作者 代宇 刘宜雨 叶超 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期3591-3609,共19页

伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)是疱疹病毒科水痘病毒属的成员,主要引起以母猪流产、仔猪神经和呼吸道症状为特征的伪狂犬病,对生猪养殖生产造成极大的威胁。疫苗免疫是预防猪伪狂犬病最重要的措施,但因病毒发生变异和具有潜伏... 伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)是疱疹病毒科水痘病毒属的成员,主要引起以母猪流产、仔猪神经和呼吸道症状为特征的伪狂犬病,对生猪养殖生产造成极大的威胁。疫苗免疫是预防猪伪狂犬病最重要的措施,但因病毒发生变异和具有潜伏感染特性,导致传统疫苗防治效果不佳。因此,临床上急需新的药物制剂辅助疫苗免疫来防治该病。研究发现,天然植物类多糖及黄酮、酚、酸等小分子物质能够通过直接抑制病毒感染过程或者通过调节免疫反应抑制PRV感染。另外,宿主抗病毒蛋白I型干扰素及其下游干扰素刺激基因对PRV的感染也具有显著的抑制作用,抗菌肽和防御素等宿主防御肽对PRV的感染也有较好的抑制作用。另外,研究人员最近发现,细菌和真菌的提取物及其代谢产物也具有抗PRV的作用,未来有望将细菌和真菌及其产物应用于病毒病的防控和治疗。本文重点讨论了近年天然生物活性分子抗PRV感染的相关研究进展,以期为抗PRV感染药物的研发提供重要参考。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 植物源抗病毒分子 宿主防御肽 I型干扰素 干扰素刺激基因 细菌代谢物 真菌代谢物

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黄芩苷对呼吸道合胞病毒感染大鼠Ⅰ型干扰素及SOCS1/3表达的影响 被引量：27

6

作者 张沛 彭洪军 +2 位作者 高春林 任献国 夏正坤 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期328-332,共5页

目的:通过研究黄芩苷对呼吸道合胞病毒(RSV)感染大鼠肺组织Ⅰ型干扰素(Ⅰ-IFN)及SOCS1/3蛋白的干预作用,探讨其抗RSV感染的可能机制。方法:构建呼吸道合胞病毒感染的动物模型,采用ELISA法检测大鼠体内Ⅰ型干扰素和炎性因子IL-6和IL-12... 目的:通过研究黄芩苷对呼吸道合胞病毒(RSV)感染大鼠肺组织Ⅰ型干扰素(Ⅰ-IFN)及SOCS1/3蛋白的干预作用,探讨其抗RSV感染的可能机制。方法:构建呼吸道合胞病毒感染的动物模型,采用ELISA法检测大鼠体内Ⅰ型干扰素和炎性因子IL-6和IL-12的表达量的变化,采用RT-PCR法检测大鼠肺组织SOCS1/3表达量的变化。结果:模型组大鼠肺组织病理表现为间质性肺炎,各给药组肺组织病变较模型组改善;黄芩苷低、中、高剂量组IFN-α的水平高于模型组(P<0.05);预防组、黄芩苷高剂量组、利巴韦林组IFN-β的水平高于模型组(P<0.01);黄芩苷中、高剂量组SOCS1表达量低于模型组(P<0.05,P<0.01),黄芩苷高剂量组SOCS3表达量低于模型组(P<0.05);黄芩苷中、高剂量组,预防组IL-6表达低于模型组(P<0.01),黄芩苷高剂量组IL-12表达低于模型组(P<0.01)。结论:黄芩苷可上调RSV感染大鼠体内Ⅰ-IFN的表达,并可能通过下调IL-6和IL-12的水平来抑制SOCS1/3的表达,发挥抗病毒作用,推测其为黄芩苷抗RSV感染的机制之一。 展开更多

关键词 黄芩苷 呼吸道合胞病毒 大鼠模型 I型干扰素 细胞因子信号传导抑制蛋白1 细胞因子信号 传导抑制蛋白3

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斜带石斑鱼IFN-γ基因的克隆与表达分析 被引量：9

7

作者 黄贝 陈善楠 +1 位作者 黄文树 聂品 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期269-275,共7页

IFN-γ在天然免疫和适应性免疫应答中均发挥着重要的作用。由于低等脊椎动物IFN-γ与哺乳动物IFN-γ相似性非常低,硬骨鱼类的IFN-γ近年来才得到鉴定。本研究报道了斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)的IFN-γ基因,并对其表达进行了分析... IFN-γ在天然免疫和适应性免疫应答中均发挥着重要的作用。由于低等脊椎动物IFN-γ与哺乳动物IFN-γ相似性非常低,硬骨鱼类的IFN-γ近年来才得到鉴定。本研究报道了斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)的IFN-γ基因,并对其表达进行了分析。斜带石斑鱼IFN-γcDNA全长为867 bp,编码200个氨基酸。其基因组全长为5 104 bp,由4个外显子、3个内含子组成。氨基酸序列比对显示斜带石斑鱼IFN-γ与高等脊椎动物IFN-γ的序列相似性较低,仅为32.5%～39%,与其他硬骨鱼类的IFN-γ相似性为38.0%～68.5%。序列分析结果显示,斜带石斑鱼IFN-γ分子C末端中存在IFN-γ的特征序列以及核定位基序。二级结构分析结果显示斜带石斑鱼IFN-γ序列中包含6个α螺旋结构,其排列与高等脊椎动物的IFN-γ类似。应用荧光定量PCR检测了IFN-γ基因在Poly I:C诱导后的表达变化。发现在肾、脾、鳃、头肾、皮肤和胸腺组织中,Poly I:C能显著诱导IFN-γ的表达,在胸腺中上调倍数最高,其次为头肾、脾、肾、皮肤和鳃,而在脑和心脏组织中没有显著变化。据此推测,IFN-γ在斜带石斑鱼抵抗病毒感染的过程中起有十分重要的作用。 展开更多

关键词 Ⅱ型干扰素 IFN-Γ 基因表达 斜带石斑鱼

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苦参碱、γ干扰素对大鼠肺纤维化干预作用 被引量：15

8

作者 刘涛 谢敏 +1 位作者 王浩凌 凌伟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期592-596,共5页

目的:探讨苦参碱、γ干扰素(IFN-γ)对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用及其可能的机制。方法:SD雄性大鼠60只,分为健康对照组、肺纤维化模型组、苦参碱干预组、IFN-γ干预组,各组分别于7d、14d、28d处死5只,行HE染色及Masson染色... 目的:探讨苦参碱、γ干扰素(IFN-γ)对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用及其可能的机制。方法:SD雄性大鼠60只,分为健康对照组、肺纤维化模型组、苦参碱干预组、IFN-γ干预组,各组分别于7d、14d、28d处死5只,行HE染色及Masson染色半定量判断肺组织肺泡炎及肺纤维化程度。免疫组化测肺组织TGF-β1、CTGF、I型胶原及Ⅲ型胶原的蛋白水平表达。结果:苦参碱干预组、IFN-γ干预组大鼠肺泡炎、肺纤维化程度均较模型组好转。与模型组相比,苦参碱、IFN-γ都能够抑制肺组织中的TGF-β1、CTGF、I型胶原及Ⅲ型胶原的表达(P<0.05)。结论:苦参碱及IFN-γ对大鼠肺纤维化模型均有一定的疗效,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1和CTGF的表达来减少Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原的生成。 展开更多

关键词 肺纤维化 转化生长因子Β1 结缔组织生长因子 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 苦参碱 Γ干扰素

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IFN-λ在免疫调节和肿瘤治疗领域的研究进展 被引量：2

9

作者 李润美 郑雅文 任秀宝 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期634-637,共4页

IFN-λ(Ⅲ型IFN)是最新发现的IFN家族新成员,在生物学活性上与Ⅰ型干扰素有很多相似之处,如抗病毒和抗增殖活性。此外,IFN-λ还具有独特的免疫调节活性。本综述总结了目前关于IFN-λ免疫调节活性的信息以及它在肿瘤治疗中的意义。IFN-... IFN-λ(Ⅲ型IFN)是最新发现的IFN家族新成员,在生物学活性上与Ⅰ型干扰素有很多相似之处,如抗病毒和抗增殖活性。此外,IFN-λ还具有独特的免疫调节活性。本综述总结了目前关于IFN-λ免疫调节活性的信息以及它在肿瘤治疗中的意义。IFN-λ独特的免疫调节活性在临床应用中具有潜在的价值,或许能成为肿瘤治疗领域新的选择。 展开更多

关键词 IFN-λ Ⅲ型IFN Ⅰ型干扰素 免疫调节活性 肿瘤

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犬瘟热病毒H蛋白与RIG-I互作抑制β干扰素转录活性的研究 被引量：1

10

作者 毕振威 王文杰 +5 位作者 钱晶 王晶宇 谭业平 夏兴霞 诸玉梅 王永山 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1279-1286,共8页

为研究犬瘟热病毒(CDV)H蛋白对β干扰素信号通路的影响,构建不同CDV毒株H蛋白真核表达质粒以及CDV H蛋白不同截短体真核表达质粒,分别与β-IFN-Luc基因报告质粒和内参质粒pRL-TK共转染细胞,用双荧光素酶报告基因试剂盒检测CDV H蛋白对... 为研究犬瘟热病毒(CDV)H蛋白对β干扰素信号通路的影响,构建不同CDV毒株H蛋白真核表达质粒以及CDV H蛋白不同截短体真核表达质粒,分别与β-IFN-Luc基因报告质粒和内参质粒pRL-TK共转染细胞,用双荧光素酶报告基因试剂盒检测CDV H蛋白对仙台病毒(SeV)诱导β干扰素的影响以及RIG-I(N)、MAVS、TBK1和IKK-i等信号分子在H蛋白介导的β干扰素转录活性的作用,通过激光共聚焦试验和GST-pull down试验检测CDV H蛋白与RIG-I(N)的相互作用。结果,CDV2野毒株H蛋白能够特异地抑制SeV感染诱发的β干扰素转录活性,而且这种抑制作用与RIG-I(N)激活相关。激光共聚焦试验显示,CDV2野毒株H蛋白与RIG-I(N)在细胞质中存在共定位现象;GST-pull down试验证明了CDV2野毒株H蛋白与RIG-I(N)存在直接的相互作用;H蛋白截短表达试验证明其N端结构域(1-462 bp)是抑制β干扰素转录活性的关键结构域。本项目的成功开展为深入研究CDV H蛋白抗宿主天然免疫机制奠定了基础,对该病的预防和治疗具有重要意义。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 H蛋白 RIG-I Β干扰素 相互作用

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猪繁殖与呼吸综合征病毒对Ⅰ型干扰素及信号分子mRNA转录的抑制效应 被引量：3

11

作者 闫晓霞 谢丽君 +3 位作者 刘欢欢 曾梦颖 高洪 严玉霖 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期98-102,共5页

为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)体外感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)后对Ⅰ型干扰素(IFN)及其信号分子mR NA转录的抑制效应,本研究选用PRRSV血清抗体和抗原均为阴性的4周龄健康仔猪3头,无菌分离PAMs,分为对照组和PRRSV感染组(PRRSV组),... 为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)体外感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)后对Ⅰ型干扰素(IFN)及其信号分子mR NA转录的抑制效应,本研究选用PRRSV血清抗体和抗原均为阴性的4周龄健康仔猪3头,无菌分离PAMs,分为对照组和PRRSV感染组(PRRSV组),分别在培养6 h、12 h、24 h、36 h、48 h和60 h收集PAMs。并采用MTS检测各组细胞活力和荧光定量PCR检测IFN-α/β及其信号分子mR NA转录水平的动态变化。结果显示,与对照组相比PRRSV感染组细胞活力明显下降(p<0.01);IFN-αmR NA转录水平在6 h^36 h逐渐降低,36 h时与对照组相比差异极显著(p<0.01),48 h后转录水平有所上调,但仍显著低于对照组(p<0.01或p<0.05);IFN-βmR NA转录量在24 h、36 h、48 h和60 h显著低于对照组(p<0.01或p<0.05);MDA5、RIG-I、MAVS和IRF3 mR NA转录量在12 h显著下调(p<0.01)。这些结果表明,PRRSV能够导致PAMs活力降低,并通过抑制MDA5、RIG-I、MAVS和IRF3基因的转录水平从而抑制Ⅰ型IFN的产生。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪肺泡巨噬细胞 I型干扰素 信号分子

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赤眼鳟Mx1基因的cDNA克隆及表达特性 被引量：1

12

作者 王静安 李耀国 +3 位作者 赵鑫 金生振 陈开健 肖调义 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期756-763,共8页

为探究赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)是否存在Mx1(Myxovirus resistance)基因及参与抗病毒免疫反应,研究利用RACE技术获得了赤眼鳟Mx1基因(ScMx1)的cDNA全长序列,并对其进行了生物信息学分析;采用荧光定量PCR技术,检测了ScMx1在赤... 为探究赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)是否存在Mx1(Myxovirus resistance)基因及参与抗病毒免疫反应,研究利用RACE技术获得了赤眼鳟Mx1基因(ScMx1)的cDNA全长序列,并对其进行了生物信息学分析;采用荧光定量PCR技术,检测了ScMx1在赤眼鳟健康组织中的表达情况以及感染GCRV后ScMx1和ScIFN-Ⅰ的表达特征。结果表明,Sc Mx1的c DNA全长为3000 bp,包含5′非编码区124 bp,开放阅读框1893 bp,3′非编码区983 bp,共编码630个氨基酸。预测的ScMx1蛋白包含GTP酶结合区域、中央核心结构域和GTP酶效应结构域。ScMx1与青鱼Mx1的相似性最高(97%),与ScMx的相似性仅为50%。ScMx1在所检测的10种组织中均有表达,其中在脾脏中表达量最高。经GCRV感染开始至168h,ScMx1和ScIFN-Ⅰ在肝脏和体肾中的表达量持续上调;在脾脏和头肾中于感染后72h达到峰值。相关性分析显示脾脏中ScMx1和ScIFN-Ⅰ的表达水平呈显著相关(r=0.94,P=0.018)。研究发现赤眼鳟存在Mx1基因,且可能参与了抗GCRV免疫应答反应。 展开更多

关键词 赤眼鳟 Mx1 基因克隆 IFN-I GCRV 组织表达

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HSP70抑制剂PFTμ对干扰素γ诱导的iNOS表达的研究 被引量：4

13

作者 袁小媚 雷寒 夏勇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期390-394,共5页

目的观察热休克蛋白70抑制剂PFTμ对干扰素γ(IFN-γ)诱导的RAW 264.7细胞一氧化氮(NO)的生成及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达的作用。方法采用IFN-γ诱导的RAW 264.7细胞株建立细胞炎症反应模型,采用Griess试剂法测定细胞NO释放量;采用... 目的观察热休克蛋白70抑制剂PFTμ对干扰素γ(IFN-γ)诱导的RAW 264.7细胞一氧化氮(NO)的生成及诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达的作用。方法采用IFN-γ诱导的RAW 264.7细胞株建立细胞炎症反应模型,采用Griess试剂法测定细胞NO释放量;采用Western blot法测定相应目的蛋白的表达;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析iNOS mRNA表达的变化。建立小鼠心脏缺血/再灌注(I/R)模型,分为对照组和给药组,测定小鼠心肌梗死面积的变化。结果 PFTμ可抑制IFN-γ诱导的RAW264.7细胞NO的生成、i NOS蛋白及mRNA表达。其作用机制可能是通过部分抑制RAW264.7细胞核内的IRF-1蛋白表达。PFTμ可减少缺血/再灌注小鼠心脏梗死面积(P<0.05)。结论PFTμ可通过部分抑制细胞核内IRF-1蛋白表达而发挥抗炎症反应的作用。 展开更多

关键词 热休克蛋白 干扰素Γ 一氧化氮 诱生型一氧化氮合酶 PFTμ 缺血/再灌注损伤

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二甲双胍治疗系统性红斑狼疮的临床疗效及其对Ⅰ型干扰素诱导基因表达的影响 被引量：1

14

作者 龙新纯 覃璇 王文娟 《标记免疫分析与临床》 CAS 2021年第11期1925-1929,共5页

目的探究二甲双胍治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的临床疗效及其对Ⅰ型干扰素(IFN)诱导基因表达的影响。方法研究对象选取我院2020年1月至2021年2月期间收治入院的SLE患者96例,采用随机数字法将其分为对照组和... 目的探究二甲双胍治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的临床疗效及其对Ⅰ型干扰素(IFN)诱导基因表达的影响。方法研究对象选取我院2020年1月至2021年2月期间收治入院的SLE患者96例,采用随机数字法将其分为对照组和观察组,每组48例。对照组患者给予激素、免疫抑制剂等常规治疗,在此基础上,观察组患者联合二甲双胍治疗12周。比较两组患者的治疗总有效率、同时比较两组患者治疗前后的SLE疾病活动指数(SLEDAI)、24 h尿蛋白定量(UAE)、血肌酐(Scr)、免疫学相关指标水平、Ⅰ型IFN诱导基因表达水平及不良反应发生率。结果观察组的治疗总有效率(95.83%)明显高于对照组(79.17%)(χ^(2)=4.67,P=0.03)。治疗后,观察组患者的SLEDAI评分、血清Scr、UAE、IgA、IgG和IgM水平均明显低于对照组(P<0.05);观察组患者的血清C3、C4水平均明显高于对照组(P<0.05)。同时,治疗后,观察组患者Ⅰ型IFN诱导基因MX1、OAS1、ISG15、LY6E的mRNA表达水平均明显低于对照组(P<0.05)。观察组与对照组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论二甲双胍治疗SLE的临床疗效显著,能有效控制疾病的活动度,同时能降低Ⅰ型IFN诱导基因的表达水平,值得在临床推广。 展开更多

关键词 二甲双胍 SLE 临床研究 Ⅰ型IFN诱导基因

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MID2对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的调控作用 被引量：1

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作者 周立坤 董鑫媛 +6 位作者 李家辉 崔志莹 赵士杰 徐婕 陈静 张宜娜 夏平安 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4735-4744,共10页

本试验旨在研究MID2(midline 2)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)复制的调控作用。首先用PRRSV BJ-4毒株感染MARC-145细胞,通过RT-qPCR和Western blot技术分别检测MID2的mRNA转录... 本试验旨在研究MID2(midline 2)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)复制的调控作用。首先用PRRSV BJ-4毒株感染MARC-145细胞,通过RT-qPCR和Western blot技术分别检测MID2的mRNA转录水平和蛋白表达水平,发现PRRSV感染能够上调MID2的表达。为了进一步探究MID2对PRRSV复制的影响,本研究过表达或沉默MID2表达,再接种PRRSV,通过RT-qPCR和Western blot技术,检测PRRSV ORF7的转录水平及N蛋白的表达水平,结果显示MID2能够抑制PRRSV复制。随后将pCMV-Flag-MID2和pGL3-IFN-β-Luc真核表达质粒共转染到HEK293T细胞中,通过双荧光素酶报告基因试验检测IFN-β的启动子活性,结果表明MID2能够正调控I-IFN信号通路。最后将MID2与RIG-I的真核表达质粒共转染到HEK293T细胞中,通过Co-IP试验发现MID2和RIG-I存在相互作用,且MID2能够以剂量依赖的方式促进RIG-I的表达,增强RIG-I介导的I-IFN信号通路。以上结果说明,MID2可能通过与RIG-I互作,促进RIG-I的表达,并激活I-IFN信号通路,从而抑制PRRSV复制。本研究首次发现MID2通过正调控I-IFN信号通路抑制PRRSV复制。 展开更多

关键词 MID2 猪繁殖与呼吸综合征病毒 i-ifn RIG-I

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加味五痹汤(肺痹)干预流感病毒感染诱导RIG-I/IFN-I信号通路作用机制研究 被引量：1

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作者 刘光华 高畅 +2 位作者 刘娟 岳志军 吴振起 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第1期52-55,I0003,共5页

目的:观察加味五痹汤(肺痹)对流感病毒(IV)感染的BALB/c小鼠肺组织病理炎症及诱导RIG-I/IFN-I信号通路的作用机制。方法:SPF级BALB/c小鼠24只,随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、加味五痹汤(肺痹)组(C组)、奥司他韦组(D组),除A组外,其... 目的:观察加味五痹汤(肺痹)对流感病毒(IV)感染的BALB/c小鼠肺组织病理炎症及诱导RIG-I/IFN-I信号通路的作用机制。方法:SPF级BALB/c小鼠24只,随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、加味五痹汤(肺痹)组(C组)、奥司他韦组(D组),除A组外,其余3组以IV FM1-6-E2滴鼻造模。于造模后第7天进行取材,镜下观察小鼠肺组织病理切片,采用qPCR法检测RIG-ImRNA的表达、ELISA法测定血清中IFN-α/β含量、Western-blot法检测NF-κB蛋白的表达。结果:IV感染后B组小鼠肺组织出现水肿、肺泡隔增厚与炎性细胞浸润,各治疗组肺部炎症有不同程度减轻。IV感染组小鼠肺组织内RIG-I的mRNA水平显著升高,与B组相比,C组RIG-I的mRNA表达量升高(P<0.05);感染组NF-κB蛋白表达增高,各治疗组可下调其表达;感染组血清中的IFN-α/β含量增高(P<0.05),治疗组能明显升高IFN-α/β含量(P<0.05),且C组与D组比较有差异性(P<0.05)。结论:加味五痹汤(肺痹)具有抗IV感染的作用,增加RIG-I和IFN-α/β含量及抑制NF-κB表达是其作用机制之一,且RIG-I/IFN-I可能是其信号通路的作用靶点。 展开更多

关键词 流感病毒 加味五痹汤(肺痹) RIG/IFN-I

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疏风饮抗I型超敏反应实验研究 被引量：2

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作者 陈兴 关洪全 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2008年第3期35-36,共2页

目的研究疏风饮抗I型超敏反应的作用机制。方法应用卵白蛋白造成I型超敏反应动物模型,采用ELISA法测定疏风饮对大鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)及免疫球蛋白E(IgE)含量的影响。结果疏风饮可增加模型大鼠血清IFN-γ含量... 目的研究疏风饮抗I型超敏反应的作用机制。方法应用卵白蛋白造成I型超敏反应动物模型,采用ELISA法测定疏风饮对大鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)及免疫球蛋白E(IgE)含量的影响。结果疏风饮可增加模型大鼠血清IFN-γ含量(P<0.05),降低模型大鼠血清IL-4、IgE含量(P<0.01)。疏风饮组和扑尔敏组比较无显著差异(P>0.05);疏风饮组IFN-γ/IL-4高于模型组,有显著差异(P<0.05),而和扑尔敏组比较无显著差异(P>0.05)。结论疏风饮防治皮肤I型超敏反应性疾病(急性荨麻疹)的作用机制可能与其通过对某些细胞因子的调节,对机体内Th1/Th2平衡产生影响有关。 展开更多

关键词 疏风饮 I型超敏反应 白细胞介素-4 干扰素-γ 免疫球蛋白E 大鼠

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IFN-γ在大鼠胸段脊髓内的分布 被引量：2

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作者 胡格 欧阳五庆 +5 位作者 杨增岐 赵友琴 李育良 陈树林 孙志宏 赵慧英 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期38-40,共3页

为进一步探讨免疫 -神经 -内分泌三大系统之间的关系 ,用免疫组织化学 SP法 ,对大鼠胸段脊髓内 IFN-γ样免疫反应产物的分布进行了研究。结果表明 ,IFN-γ样免疫反应产物广泛分布于胸段脊髓各板层。其中背角 、 、 层 ,胸髓中间带外侧... 为进一步探讨免疫 -神经 -内分泌三大系统之间的关系 ,用免疫组织化学 SP法 ,对大鼠胸段脊髓内 IFN-γ样免疫反应产物的分布进行了研究。结果表明 ,IFN-γ样免疫反应产物广泛分布于胸段脊髓各板层。其中背角 、 、 层 ,胸髓中间带外侧核 ,腹角 层内可见到较高密度的阳性胞体和树突。中间带和腹角内的阳性胞体的树突还伸向外侧索和腹索 。 展开更多

关键词 IFN-Γ 胸段脊髓 免疫-神经-内分泌网络 免疫组织化学SP法 大鼠 分布

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CVB对OL细胞和OL/BDV细胞I型IFN信号转导途径的影响

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作者 翟爱霞 颜冬梅 +4 位作者 王海萍 卜桐 崔乐乐 考文萍 张凤民 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2019年第4期46-51,共6页

探讨柯萨奇病毒(coxsackievirus, CVB)对人类少突胶质细胞(oligodendrocyte, OL)和博尔纳病病毒(Borna disease virus, BDV)持续感染的OL细胞(OL/BDV)中I型干扰素(interferon, IFN)、microRNA-155(miR-155)表达以及干扰素调节因子(inter... 探讨柯萨奇病毒(coxsackievirus, CVB)对人类少突胶质细胞(oligodendrocyte, OL)和博尔纳病病毒(Borna disease virus, BDV)持续感染的OL细胞(OL/BDV)中I型干扰素(interferon, IFN)、microRNA-155(miR-155)表达以及干扰素调节因子(interferon regulatory factor, IRF)7细胞定位的影响。CVB感染OL细胞和OL/BDV细胞0、2、4、6、12和24 h,qPCR检测I型IFN mRNA和miR-155表达水平。OL细胞和OL/BDV细胞分别转染IRF7-EGFP质粒,CVB感染4 h,观察IRF7细胞定位情况。CVB感染OL细胞2、4、12和24 h,IFN-αmRNA和miR-155表达水平显著增加,IFN-βmRNA表达水平在4、12和24 h显著增加;CVB感染OL/BDV细胞IFN-α和IFN-βmRNA表达水平除0 h均显著增加,但miR-155表达仅在12和24 h显著增加。CVB感染OL细胞和OL/BDV细胞4 h,IRF7绿色荧光蛋白由细胞浆转移至细胞核内。综上所述,CVB可诱导OL细胞和OL/BDV细胞I型IFN、miR-155的表达,促进IRF7入核,从而激活I型IFN信号转导途径。 展开更多

关键词 柯萨奇病毒 OL细胞 OL/BDV细胞 I型IFN信号转导途径 microRNA-155

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嘌呤核苷磷酸化酶与系统性红斑狼疮发病的相关性研究

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作者 钱捷 戴岷 +5 位作者 周诗雨 韩晓 万年红 马健阳 沈南 李宁丽 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期441-445,共5页

嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)介导嘌呤降解,异常时会影响DNA合成。本研究探讨PNP与SLE发病的相关性。检测了诊断明确的42例系统性红斑狼疮患者和48例正常对照者PBMC、12例狼疮肾炎患者肾穿样本和10例肾癌患者癌旁正常肾脏样本中PNP的表达格局... 嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)介导嘌呤降解,异常时会影响DNA合成。本研究探讨PNP与SLE发病的相关性。检测了诊断明确的42例系统性红斑狼疮患者和48例正常对照者PBMC、12例狼疮肾炎患者肾穿样本和10例肾癌患者癌旁正常肾脏样本中PNP的表达格局,继而分析了PNP与SLE患者的临床表现。由于I型干扰素通路的异常活化在SLE发病中起重要作用,因此本研究还分析了PNP表达与干扰素积分的相关性。结果表明:与正常人相比,狼疮病人PBMC和肾脏组织中PNP表达水平均显著性降低。进一步通过干扰素积分相关性分析发现,狼疮肾炎患者肾脏组织PNP的表达水平与干扰素积分呈负相关,提示PNP可能参与I型干扰素通路的调节。本研究表明狼疮患者PNP表达异常,可能参与SLE的发病。 展开更多

关键词 PNP 系统性红斑狼疮 I型干扰素

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