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Comparison of direct fecal smear microscopy,culture,and polymerase chain reaction for the detection of Blastocystis sp.in human stool samples 被引量:3
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作者 Herbert J Santos Windell L Rivera 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2013年第10期780-784,共5页
Objective:To compare the sensitivity and specificity of direct fecal smear microscopy,culture,and polymerase chain reaction in the detection of Blastocystis sp.in human stool.Methods:Human stool samples were collected... Objective:To compare the sensitivity and specificity of direct fecal smear microscopy,culture,and polymerase chain reaction in the detection of Blastocystis sp.in human stool.Methods:Human stool samples were collected from a community in San Isidro,Rodriguez,Rizal,Philippines.These samples were subjected to direct fecal smear microscopy,culture and polymerase chain reaction to detect the presence of Blastocystis sp.Results:Of the 110 stool samples collected,28(25%)were detected positive for the presence of Blastocystis sp.by two or more tests.Culture method detected the highest number of Blastocystis-positive stool samples(n=36),followed by PCR of DNA extracted from culture(n=26),PCR of DNA extracted from stool(n=10),and direct fecal smear(n=9).Compared to culture,the sensitivity of the other detection methods were 66.7%for PCR from culture and 19.4%for both PCR from stool and direct fecal smear.Specificity of the methods was high,with PCR from culture and direct fecal smear having97.3%,while PCR from stool at 95.9%.Conclusions:In this study,in vitro culture is the best method for detecting Blastocystis sp.in human stool samples. 展开更多
关键词 BLASTOCYSTIS sp. DIRECT FECAL smear CULTURE Polymerase chain reaction(PCR) human stool Sensitivity Specificity
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Efficiency of Plating Media and Enrichment Broths for Isolating <i>Salmonella</i>Species from Human Stool Samples: A Comparison Study 被引量:2
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作者 Apichai Srijan Boonchai Wongstitwilairoong +1 位作者 Ladaporn Bodhidatta Carl Mason 《Open Journal of Medical Microbiology》 2015年第4期231-236,共6页
A comparative study was performed to evaluate best practice culture media and enrichment broths for recovering Salmonella species from human stool samples. A total of 1297 human stools were collected and processed in ... A comparative study was performed to evaluate best practice culture media and enrichment broths for recovering Salmonella species from human stool samples. A total of 1297 human stools were collected and processed in this study. Evaluation of agar media was carried out by direct plating (DP), 1096 stool samples were inoculated on Modified Semisolid Rappaport-Vassiliadis (MSRV), Xylose-Lysine-Deoxycolate (XLD), MacConkey (MAC), and Hektoen Enteric (HE) agars. Evaluation of enrichment broths were carried out by enrichment all 1297 stool samples in Selenite broth (SB), Rappaport-Vassiliadis (RV) broth, and Buffered Peptone Water (BPW), followed by plating on MSRV, MAC, and HE agars. A total of 102 Salmonella-positive stools by DP, 85.3% (87/102) were recovered utilizing MSRV while recovery from XLD, MAC, and HE agars were 34.3% (35/102), 34.3% (35/102), and 29.4% (30/102) respectively. A total 299/1297 stools samples were Salmonella-positive on at least one plating medium after enrichment procedure were 77.3% (177/299) for SB, 86.0% (197/299) and 78.6% (180/299) for RV and BPW respectively. All Salmonella isolated in this study was nontyphi Salmonella. Presently, the data suggest that the use of MSRV over MAC, HE, and XLD agars for isolation nontyphi Salmonella species from human stools is more efficacious. Additionally, use of MSRV in combination with MAC and HE agars following enrichment in RV broth enhances recovery of nontyphi Salmonella species. However, RV broth is inhibitory to typhi Salmonella, thus use of MSRV medium in combination with MAC, HE or XLD agars in direct plating following enrichment in non-selective BPW is an alternate method for recovery of both typhi and nontyphi Salmonella species contaminated in human stool samples. 展开更多
关键词 human stool Specimens Culture MEDIA SALMONELLA Isolation ENRICHMENT
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Field Evaluation of a Transport Medium and Enrichment Broth for Isolation of Campylobacter Species from Human Diarrheal Stool Samples
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作者 Apichai Srijan Ladaporn Bodhidatta +3 位作者 Carl J. Mason Gaysorn Bunyarakyothin Wipavadee Jiarakul Niyada Vithayasai 《Open Journal of Medical Microbiology》 2013年第1期48-52,共5页
Campylobacter continues to be a major cause of bacteriamediated diarrheal diseases, both for Thai citizens and travelers to Thailand. For field epidemiological studies, appropriate methods for storage, intralaboratory... Campylobacter continues to be a major cause of bacteriamediated diarrheal diseases, both for Thai citizens and travelers to Thailand. For field epidemiological studies, appropriate methods for storage, intralaboratory transport of patients specimens and use of enrichment culture to isolate this organism is critical. Study A, represents patient stool specimens collected in Bangkok and processed for Campylobacter culture within three hours after collection. Study B, represents stool specimens collected from patients in northeast and Southern regions of Thailand in modified CaryBlair transport medium. These specimens were transported and processed for Campylobacter in Bangkok at varying intervals ranging from 1 to 7 days. Of 900 diarrheal samples examined in study A, a total of 158 were Campylobacter positive through culture. Of these, 145 and 141 isolates were cultured by direct plating and enrichment plating respectively (P = 0.5839). From 1,168 diarrheal stool samples examined in study B, 184 were positive for Campylobacter. Direct and enrichment plating resulted in 139 and 168 culture isolates;respectively (P = 0.0003). Samples from study B delayed in processing for 1 to 3 days, resulted in 46 and 50 isolated by direct and enrichment plating;respectively (P = 0.4545). However, among samples delayed in processing for 4 to 7 days, a total of 128 Campylobacter isolates were cultured, having cultured 93 and 118 isolates through direct and enrichment plating;respectively (P = 0.0003). At present these studies demonstrate that enrichment culture has no benefit when stool specimen collection and immediate processing occur and when there is a processing delay period of 1 - 3 days. However, enrichment culture was beneficial in instances where transport and processing was delayed 4 - 7 days. 展开更多
关键词 humans DIARRHEA Microbiology stool Specimen Preservation Transportation Culture Media CAMPYLOBACTER ISOLATION ENRICHMENT
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正常人粪便中酪酸梭菌的分离与分子鉴定 被引量:3
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作者 杨金梅 张德纯 +1 位作者 刘明方 李科 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2013年第9期1032-1035,1039,共5页
目的肠道益生菌在人体内发挥重要的生理作用,探明肠道益生菌群的作用对人体有着十分重要的意义。运用TSN培养基,从健康正常人的粪便中分离培养、筛选出1株肠道菌株。方法从健康正常人粪便中分离与纯化肠道细菌,获得一株具有特殊作用的细... 目的肠道益生菌在人体内发挥重要的生理作用,探明肠道益生菌群的作用对人体有着十分重要的意义。运用TSN培养基,从健康正常人的粪便中分离培养、筛选出1株肠道菌株。方法从健康正常人粪便中分离与纯化肠道细菌,获得一株具有特殊作用的细菌,通过对该菌的细菌培养、菌落形态观察、革兰染色镜检、分离纯化培养、生化试验并结合16S rDNA方法进行了鉴定。结果该菌为革兰阳性梭状芽胞杆菌,属于梭菌属,分离培养出的1株菌株为酪酸梭菌亚种JMY1。结论本实验为进一步研究酪酸梭菌的作用及其是否对结肠癌发挥作用奠定了实验基础并提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 正常人 粪便 酪酸梭菌 分离 分子鉴定
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从兰州急性腹泻儿童中检出人博卡病毒4型 被引量:3
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作者 向静瑶 马鑫 +3 位作者 郭延青 段招军 李宇宁 李丹地 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期42-45,共4页
为了解兰州地区病毒性腹泻患儿中人博卡病毒4(HBoV4)的流行情况,收集兰州大学第一医院2012年7月至2013年6月5岁以下腹泻患儿的粪便标本331份,采用巢式PCR方法检测HBoV。将HBoV阳性序列与GenBank中相关序列进行比较分析,发现1例罕见HBoV... 为了解兰州地区病毒性腹泻患儿中人博卡病毒4(HBoV4)的流行情况,收集兰州大学第一医院2012年7月至2013年6月5岁以下腹泻患儿的粪便标本331份,采用巢式PCR方法检测HBoV。将HBoV阳性序列与GenBank中相关序列进行比较分析,发现1例罕见HBoV4。该株与泰国株(GenBank登录号:JQ267789)核苷酸和氨基酸的同源性为98.9%、98.7%,与美国株(GenBank登录号:GQ506568)核苷酸和氨基酸的同源性为97.6%、97.4%,为典型的HBoV4,是我国首次在腹泻患儿粪便中发现。由进化树及同源性推测HBoV4可能存在两种不同的亚型。上述结果表明,我国首次在腹泻患儿粪便中检出HBoV4,且属于HBoV4两种可能亚型中的一种亚型。 展开更多
关键词 人博卡病毒4型 急性腹泻 基因型
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散发性大肠癌组织及粪便脱落细胞p53蛋白的检测 被引量:4
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作者 范如英 李世荣 +1 位作者 武子涛 吴霞 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期443-445,共3页
为了解大肠癌组织及粪便脱落细胞中 p5 3蛋白表达对大肠癌诊断的临床意义 ,采用 S- P法对 38例大肠癌患者的癌组织及其中的 30例患者的粪便脱落细胞 p5 3蛋白进行检测。大肠癌组织中 p5 3蛋白阳性表达率为 39.47% (15 / 38) ,p5 3蛋白... 为了解大肠癌组织及粪便脱落细胞中 p5 3蛋白表达对大肠癌诊断的临床意义 ,采用 S- P法对 38例大肠癌患者的癌组织及其中的 30例患者的粪便脱落细胞 p5 3蛋白进行检测。大肠癌组织中 p5 3蛋白阳性表达率为 39.47% (15 / 38) ,p5 3蛋白阳性与癌组织的分化程度及是否存在淋巴结转移均无相关性 (P>0 .0 5 )。粪便脱落细胞 p5 3蛋白阳性表达率为 36 .6 7%(11/ 30 ) ,脱落细胞与相应患者的癌组织中的 p5 3表达一致率为 83.33% (2 5 / 30 )。表明粪便中脱落细胞 p5 3蛋白的表达忠实反映了相应癌组织的 p5 3突变情况 ,对其检测有望成为大肠癌诊断及筛查的无创分子途径。同时表明粪便中脱落细胞核保持了肿瘤抗原决定簇的主要结构及生物特征 ,进行免疫细胞化学检测是可行的 。 展开更多
关键词 散发性大肠癌 粪便脱落细胞 P53蛋白 检测 癌组织 结直肠肿瘤
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改良ELISA一步法检测小儿粪便轮状病毒 被引量:9
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作者 梁业丽 许昌 张飞凌 《河北医药》 CAS 2005年第3期192-193,共2页
目的 探讨改良ELISA一步法检测小儿腹泻粪便的轮状病毒 ,为临床提供可靠的诊断依据。方法 应用快速轮状病毒抗原酶标诊断试剂盒 (RotaFast)进行改良的ELISA一步法检测小儿腹泻粪便轮状病毒抗原 695例。结果 经检测小儿腹泻粪便 695... 目的 探讨改良ELISA一步法检测小儿腹泻粪便的轮状病毒 ,为临床提供可靠的诊断依据。方法 应用快速轮状病毒抗原酶标诊断试剂盒 (RotaFast)进行改良的ELISA一步法检测小儿腹泻粪便轮状病毒抗原 695例。结果 经检测小儿腹泻粪便 695例 ,阳性率达 75 .97% ( 5 2 8/695 )。结论 改良ELISA一步法检测小儿粪便轮状病毒 ,具有快速、敏感 ,方法简单 。 展开更多
关键词 轮状病毒 ELISA 小儿腹泻 改良 粪便 诊断依据 临床 结论 准确 敏感
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深圳宝安地区婴幼儿腹泻大便中轮状病毒检出率及临床意义 被引量:8
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作者 刘爱胜 陈荣贵 +2 位作者 郭强忠 王春燕 施俊柱 《现代检验医学杂志》 CAS 2012年第2期134-136,共3页
目的主要了解宝安地区婴幼儿腹泻大便中人类轮状病毒(HRV)感染情况,分析其发病特征,为临床诊断和治疗及预防提供可靠的依据。方法采集2009年1月~2010年12月医院门诊和住院部送栓的腹泻婴幼儿大便标本共2179例(〈7个月254例,7~1... 目的主要了解宝安地区婴幼儿腹泻大便中人类轮状病毒(HRV)感染情况,分析其发病特征,为临床诊断和治疗及预防提供可靠的依据。方法采集2009年1月~2010年12月医院门诊和住院部送栓的腹泻婴幼儿大便标本共2179例(〈7个月254例,7~12个月886例,1~3岁692例,3~5岁215例,5~10岁132例),其中男性1265例,女性914例。采用胶体金法对所收集的大便标本进行HRV抗原检测,并对各组结果进行Y2检验统计分析。结果在2179例腹泻婴幼儿标本中,人类A群轮状病毒感染总阳性率为30.98%(675/2179);其中男性32.33%(409/1265),女性29.10%(266/914),性别之间阳性率差异无统计学意义(r^2=0.89,P〉0.05);不同年龄组之间,半岁~1岁之间的婴幼儿感染率最高(45.4%),明显高于其他年龄组,与6个月以下组、1~3岁组、3~5岁组和5~10岁组感染率(12.2%,29.6%,9.1%和11.6%)相比,差异有统计学意义(χ^2=29.3,P〈o.01),1岁~3岁组的婴幼儿感染率(29.6%)高于除了半岁~1岁组外的其他年龄组(χ^2=17.5,P〈O.05),除了半岁~3岁外的其他年龄组之间感染率差异无统计学意义(χ^2=1.47,P〉0.05);感染的季节性分布特征是第四季度HRV感染率(43.8%)明显高于第一、二、三季度感染率(18.3%,10.7%和13.2%),差异有统计学意义(χ^2=24.2,P〈O.01),第一季度HRV感染率(18.3%)高于第二、三季度HRV感染率,差异有统计学意义(χ^2=7.16,P〈O.05)。结论每年的第四季度是人类A群轮状病毒曝发流行季节,高发人群主要集中在7个月~1岁大小的婴幼儿。加强腹泻婴幼儿大便中人类轮状病毒常规检测,对临床早诊断、旱治疗和预防并发症有着重要意义。 展开更多
关键词 婴幼儿 腹泻 大便 人类轮状病毒
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从少量人源粪便中分离隐孢子虫用于全基因组测序的研究
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作者 陈红双 郝雅如 +2 位作者 张唯哲 李贺 杨凤坤 《热带医学杂志》 CAS 2023年第3期292-295,316,共5页
目的直接从少量人源粪便样本中分离、纯化隐孢子虫卵囊,提取并扩增DNA,使其浓度和纯度符合全基因组测序(WGS)要求。方法2013年12月-2014年10月收集来自美国佛罗里达州、爱达荷州和缅因州11份少量人源隐孢子虫粪便样本,每份200 mg,使用... 目的直接从少量人源粪便样本中分离、纯化隐孢子虫卵囊,提取并扩增DNA,使其浓度和纯度符合全基因组测序(WGS)要求。方法2013年12月-2014年10月收集来自美国佛罗里达州、爱达荷州和缅因州11份少量人源隐孢子虫粪便样本,每份200 mg,使用免疫磁珠分离(IMS)进行纯化卵囊;2014年8-12月收集来自美国农业部52份牛源隐孢子虫粪便样本作为对照,每份2000 mg,采用饱和蔗糖、氯化铯密度梯度离心法和IMS等方法纯化卵囊。均使用QIAamp DNA Mini试剂盒提取基因组DNA,然后采用REPLI-g MIDI试剂盒进行全基因组扩增(WGA);最后通过定量PCR(qPCR)对WGA产物进行评估。结果11份人源隐孢子虫WGA产物的DNA浓度为68.00~257.80 ng/μL。qPCR对隐孢子虫小亚基rRNA基因(SSU rRNA)扩增显示,11个分离株的循环数阈值(Ct)范围为8.92~19.23,Ct值越小表明隐孢子虫基因组DNA浓度越高;其中有6个分离株Ct<15,54.54%的分离株满足WGS要求。52份牛源隐孢子虫WGA产物的DNA浓度为27.20~1333.30 ng/μL,WGA产物qPCR的Ct值范围为6.48~32.09,其中29个分离株Ct值<15,55.76%的分离株满足WGS要求。直接对少量人源粪便样本使用IMS纯化和对大量牛源样本多步骤纯化后通过WGA,符合WGS要求的样本量之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论直接对临床上少量人源隐孢子虫粪便样本进行IMS纯化卵囊,可使隐孢子虫基因组DNA浓度和纯度达到测序要求,该方法可用于临床少量样本的全基因组测序。 展开更多
关键词 人源隐孢子虫 粪便样品 全基因组扩增 定量PCR 全基因组测序
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检测粪便DNA中hMLH1基因甲基化对老年性结直肠癌早期诊断的意义 被引量:2
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作者 蔡克银 徐梅华 王晓 《华南国防医学杂志》 CAS 2017年第12期814-817,共4页
目的通过检测老年结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者粪便DNA中人类错配修复基因1(human mutl homolog 1,hMLH1)甲基化水平,探讨其临床价值,为老年CRC患者的早期无创诊断探索新途径。方法选取作者医院自2015-06/2016-09月确诊的30例... 目的通过检测老年结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者粪便DNA中人类错配修复基因1(human mutl homolog 1,hMLH1)甲基化水平,探讨其临床价值,为老年CRC患者的早期无创诊断探索新途径。方法选取作者医院自2015-06/2016-09月确诊的30例年龄在60岁以上的CRC患者为观察组,选择同期的30例60岁以上且体检正常者为对照组。分别提取两组患者的粪便DNA,采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)技术检测其hMLH1基因的甲基化状态;同时,收集观察组患者的外周血,检测血清中的癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA);分别比较观察组患者hMLH1基因甲基化检出率与CEA检出率,以及观察组与对照组甲基化检出率的差异性;分析观察组患者hMLH1基因甲基化与患者年龄、性别、肿瘤位置的相关性。结果观察组患者hMLH1基因甲基化检出率为63.33%(19/30)显著高于对照组的6.67%(2/30)(χ~2=21.172,P<0.01);观察组患者MSP法甲基化检出率63.33%显著高于传统CEA检测法的检出率36.67%(11/30)(χ~2=4.67,P<0.05);CRC患者hMLH1基因甲基化与患者年龄、性别、肿瘤位置均无显著相关性(P>0.05)。结论观察组患者粪便DNA中hMLH1基因甲基化检出率较高,明显优于传统的血清CEA检测,可作为早期无创诊断老年性CRC的重要手段。 展开更多
关键词 粪便 脱氧核糖核酸 人类错配修复基因1 甲基化 老年性结直肠癌 早期诊断
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粪便样本中高纯度人源DNA富集提取方法 被引量:1
11
作者 吴帅帅 武云晖 《生物化工》 2021年第6期29-33,共5页
粪便肠脱落细胞DNA的提取是影响基因检测技术在结直肠癌筛查领域应用的关键。目的:通过对提取过程、试剂进行研究,开发高纯度人源DNA富集提取方法。方法:对粪便样本提取前均质化方式进行优化,并使用PVP高分子交联剂预处理均质化粪便上... 粪便肠脱落细胞DNA的提取是影响基因检测技术在结直肠癌筛查领域应用的关键。目的:通过对提取过程、试剂进行研究,开发高纯度人源DNA富集提取方法。方法:对粪便样本提取前均质化方式进行优化,并使用PVP高分子交联剂预处理均质化粪便上清。结果:颠倒混匀均质化方式可以显著降低微生物DNA的比例,实现人源DNA的相对富集;PVP高分子交联剂可以有效去除多糖、蛋白、胆盐等杂质,减少粪便DNA的PCR抑制;结直肠癌患者粪便DNA与癌组织样本DNA的重亚硫酸盐转化测序(BSP)结果中的甲基化特征一致。结论:优化后的粪便DNA富集提取产物PCR检测结果准确性良好,该提取方法可行性高。 展开更多
关键词 人源DNA富集 粪便DNA提取 SFRP2基因甲基化 结直肠癌筛查
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