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PKC-HuR通路在方药治疗溃疡性结肠炎中的调控机制分析
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作者 希林古丽·吾守尔 吾夏尔·吾提克尔 +1 位作者 库热西·玉努斯 卡思木江·阿西木江 《现代生物医学进展》 2025年第11期1761-1769,共9页
目的:研究PKC-HuR通路在方药治疗溃疡性结肠炎(UC)中的调控机制,揭示其在炎症反应中的生物学作用及其可能的分子机制。方法:通过葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Sodium,DSS)建立UC模型,使用Q-PCR、ELISA和Western Blot等方法检测各组TNF... 目的:研究PKC-HuR通路在方药治疗溃疡性结肠炎(UC)中的调控机制,揭示其在炎症反应中的生物学作用及其可能的分子机制。方法:通过葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Sodium,DSS)建立UC模型,使用Q-PCR、ELISA和Western Blot等方法检测各组TNF-α、IFN-γ、TGF-β1的表达水平及HUR蛋白的表达。实验分为正常组、UC模型组、药物干预组和抑制剂组。结果:Q-PCR数据显示,与正常组(TNF-α:0.664±0.258;IFN-γ:0.382±0.363)相比,UC模型组TNF-α(2.880±3.273)和IFN-γ(1.402±1.598)显著升高。药物干预组TNF-α(1.528±1.679)和IFN-γ(0.530±0.576)水平较模型组明显降低。ELISA结果显示,UC模型组TGF-β1水平为108.099±3.692 ng/mL,而药物干预组为95.467±4.764 ng/mL。Western Blot结果表明,UC模型组HUR蛋白表达显著高于正常组,药物干预组HUR/β-Actin比值(0.7433)低于模型组(0.8494)。结论:方药通过调控PKC-HuR通路,显著降低UC模型中炎症因子的表达,抑制HUR蛋白的过度表达,显示出其在抗炎和缓解结肠炎症中的有效性。这一机制为方药治疗溃疡性结肠炎提供了分子机制上的支持,具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 蛋白激酶C hur蛋白 炎症 药物治疗
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中医药干预HuR转录后调控的抗肿瘤作用研究进展
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作者 杨柳青 李伟霞 +4 位作者 王晓艳 张明亮 张辉 吴娅丽 唐进法 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第8期1413-1418,共6页
癌症是导致死亡的主要原因之一,药物治疗很大程度上提高了抗肿瘤治疗效果,但存在不良反应大,长期使用易产生耐药性等问题,迫切需要寻求新的药物作用靶点。人类抗原R(human antigen R,HuR)作为RNA结合蛋白,通过转录后调控mRNA稳定性,促... 癌症是导致死亡的主要原因之一,药物治疗很大程度上提高了抗肿瘤治疗效果,但存在不良反应大,长期使用易产生耐药性等问题,迫切需要寻求新的药物作用靶点。人类抗原R(human antigen R,HuR)作为RNA结合蛋白,通过转录后调控mRNA稳定性,促进肿瘤发生、发展、转移的整个过程,且HuR在肿瘤组织中普遍高表达,使其成为肿瘤治疗的新靶点,并作为疗效和预后评估的标准。中药复方及中药所含多种化学成分能够通过调控HuR功能活性,进而抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制血管生成,抑制免疫逃逸以及逆转肿瘤耐药。该文总结了HuR在肿瘤进展中的调控作用,并分析中药活性成分调控HuR发挥抗肿瘤作用的机制,以期为肿瘤治疗提供新的思路,为靶向HuR的抗肿瘤新药研发提供参考。 展开更多
关键词 肿瘤 人类抗原R 转录后调控 MRNA稳定性 中药 分子机制
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牙龈卟啉单胞菌上调HuR抑制hsa_circ_0057552促进食管鳞癌发展
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作者 杨睿 谷变利 +4 位作者 石林林 李硕轩 郎耀武 左志向 高社干 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第11期1678-1686,共9页
已有研究表明,牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)感染与食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)不良预后显著相关,虽然部分环状RNA(circular RNA,circRNA)已被证实具有抑制ESCC发生发展的功能,但其在P... 已有研究表明,牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)感染与食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)不良预后显著相关,虽然部分环状RNA(circular RNA,circRNA)已被证实具有抑制ESCC发生发展的功能,但其在P.gingivalis感染相关ESCC中的调控机制尚未阐明。本研究通过RT-qPCR检测发现,P.gingivalis感染下调ESCC细胞及组织中hsa_circ_0057552的表达,且下调呈感染时间和剂量依赖性特点。同时放线菌素D实验结果显示,P.gingivalis感染降低了ESCC细胞中hsa_circ_0057552的稳定性(P<0.05)。通过体外功能试验及体内小鼠荷瘤模型发现,hsa_circ_0057552过表达可显著抑制ESCC细胞的增殖、迁移、侵袭能力及肿瘤生长(P<0.05)。此外,PCR阵列结合RT-qPCR和Western印迹结果表明,P.gingivalis感染在RNA和蛋白质水平上均显著上调人类抗原R(human antigen R,HuR)的表达(P<0.05)。机制研究表明,敲降HuR显著增加了hsa_circ_0057552的表达(P<0.01),而过表达hsa_circ_0057552不影响HuR。最终RT-qPCR结果显示,si-HuR逆转了P.gingivalis对hsa_circ_0057552的抑制作用。本研究揭示,P.gingivalis调控HuR/hsa_circ_0057552,可能是其促进食管鳞癌进展的新机制,为P.gingivalis感染相关的食管鳞癌治疗提供了新的分子标志物。 展开更多
关键词 食管鳞癌 牙龈卟啉单胞菌 人类抗原R hsa_circ_0057552
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RNA结合蛋白HuR对NF-κB抑制因子α转录后调控机制的初步研究 被引量:6
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作者 于文燕 马小娟 +5 位作者 孙宏卫 买买提祖农·买苏尔 马瑞斌 柯颖 刘玉新 马琪 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期688-694,共7页
目的:探讨RNA结合蛋白HuR对NF-κB抑制因子α(IκB-α)转录后调控机制。方法:构建IκB-αmRNA 3'UTR报告基因真核表达质粒,并转染3T3细胞;体外生物素标记IκB-αmRNA 3'UTR并进行RNA pull-down;过表达及干扰HuR后,qPCR检测其对I... 目的:探讨RNA结合蛋白HuR对NF-κB抑制因子α(IκB-α)转录后调控机制。方法:构建IκB-αmRNA 3'UTR报告基因真核表达质粒,并转染3T3细胞;体外生物素标记IκB-αmRNA 3'UTR并进行RNA pull-down;过表达及干扰HuR后,qPCR检测其对IκB-αmRNA稳定性的影响,Western bltting检测其对IκB-α蛋白表达的影响。结果:(1)IκB-αmRNA 3'UTR报告基因真核表达质粒构建成功;(2)报告基因检测:共转染pcDNA3-HA-HuR质粒及IκB-αmRNA 3'UTR报告基因质粒后与对照组相比其数值明显增高;(3)用生物素标记的IκB-αmRNA3'UTR探针进行RNA pull-down,可以检测到特异性结合的HuR蛋白;(4)过表达HuR,IκB-αmRNA稳定性无明显变化,蛋白表达明显上调;干扰HuR表达后,IκB-αmRNA稳定性无明显变化,蛋白表达明显下调。结论:(1)HuR可以与IκB-αmRNA 3'UTR特异性结合并参与调节IκB-αmRNA 3'UTR的功能;(2)HuR对IκB-αmRNA稳定性无明显影响,其主要调控IκB-α蛋白表达,使其表达上调。 展开更多
关键词 hur蛋白 NF-κB抑制因子α 转录后调控
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HuR和COX-2蛋白表达与宫颈癌手术预后的关系 被引量:6
5
作者 王敏 彭宣荣 朱彦丽 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第15期1618-1620,共3页
目的探讨和评价HuR和COX-2蛋白表达与宫颈癌手术预后的关系。方法采用免疫组化方法检测101例原发性宫颈癌组织中HuR及COX-2蛋白的表达;采用Kaplan-Meier法分析二者表达与宫颈癌预后的关系。结果 101例宫颈癌组织中HuR蛋白的阳性表达率为... 目的探讨和评价HuR和COX-2蛋白表达与宫颈癌手术预后的关系。方法采用免疫组化方法检测101例原发性宫颈癌组织中HuR及COX-2蛋白的表达;采用Kaplan-Meier法分析二者表达与宫颈癌预后的关系。结果 101例宫颈癌组织中HuR蛋白的阳性表达率为47.50%(48/101),HuR蛋白的阳性表达率在不同的临床分期、癌灶大小及有无淋巴结转移的宫颈癌组织中比较,差异均有统计学意义(P<0.05),而在不同年龄、不同病理类型及组织学分级的宫颈癌组织中差异无统计学意义(P>0.05)。HuR蛋白阴性患者的5年累积生存率均高于HuR蛋白阳性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。101例宫颈癌组织中COX-2蛋白的阳性表达率为59.40%(60/101),COX-2蛋白的阳性表达率在不同的临床分期、组织学分级、淋巴结转移及不同病理类型的宫颈癌组织比较,差异有统计学意义(P<0.05),但在不同年龄、不同癌灶大小的宫颈癌组织比较差异无统计学意义(P>0.05)。COX-2蛋白阴性患者的5年累积生存率高于COX-2蛋白阳性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。HuR蛋白的表达与COX-2蛋白的表达呈正相关(r=0.383,P=0.000)。结论宫颈癌手术预后与HuR蛋白、COX-2蛋白阳性有关,HuR蛋白和COX-2蛋白可作为宫颈癌患者预测预后的指标之一。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 外科手术 hur COX-2 预后
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线粒体基于HUR/PIM1信号通路在高血压血管内皮细胞损伤中的机制 被引量:6
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作者 尹磊 蒋志明 +2 位作者 杨慧琼 刘燕飞 郑学斌 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第24期3043-3048,共6页
目的基于HUR/PIM1信号通路探讨线粒体在高血压血管内皮细胞损伤中的机制。方法AngⅡ处理人脐血管内皮细胞(HUVCE)分为3组:control组、AngⅡ组和Mdivi-1组。CCK-8、流式细胞术和transwell检测细胞活力、凋亡及迁移率。线粒体选择性探针... 目的基于HUR/PIM1信号通路探讨线粒体在高血压血管内皮细胞损伤中的机制。方法AngⅡ处理人脐血管内皮细胞(HUVCE)分为3组:control组、AngⅡ组和Mdivi-1组。CCK-8、流式细胞术和transwell检测细胞活力、凋亡及迁移率。线粒体选择性探针检测线粒体形态,JC-1染料测量线粒体膜电位。qPCR和Western blot检测细胞中Drp-1、ROS、HUR/PIM1 mRNA和蛋白含量,体外血管形成验证血管生成。结果与control组比较,AngⅡ组细胞活力降低、Drp-1和ROS蛋白表达升高和线粒体形态改变及膜电位降低,HUR/PIM1信号通路mRNA和蛋白含量升高,血管生成增加,Mdivi-1组效果相反。结论Mdivi-1降低线粒体的表达和AngⅡ诱导的细胞的HUR/PIM1通路的表达,可抑制AngⅡ诱导的细胞的凋亡、迁移及血管生成。 展开更多
关键词 线粒体 高血压 hur/PIM1 血管内皮细胞
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MiR-519通过调节HuR表达抑制胃癌细胞活力 被引量:2
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作者 周宁 周洋 +1 位作者 唐勇 于文燕 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期19-23,共5页
目的:探讨mi R-519参与调节胃癌细胞活力的机制。方法:q PCR检测胃癌细胞中mi R-519表达,Western印迹法检测胃癌细胞中Hu R蛋白表达,M法研究肿瘤细胞的活力,脂质体转染法分别转染Hu R真核表达质粒及干扰片段、转染mi R-519。结果:胃癌... 目的:探讨mi R-519参与调节胃癌细胞活力的机制。方法:q PCR检测胃癌细胞中mi R-519表达,Western印迹法检测胃癌细胞中Hu R蛋白表达,M法研究肿瘤细胞的活力,脂质体转染法分别转染Hu R真核表达质粒及干扰片段、转染mi R-519。结果:胃癌细胞株中Hu R蛋白表达高于对照组细胞,过表达Hu R可增加细胞活力(P<0.001),干扰Hu R表达后,细胞活力降低(P=0.001);胃癌组织中mi R-519表达低于对照组(P=0.001),过表达mi R-519可抑制Hu R蛋白表达并降低胃癌细胞活力。结论:Mi R-519可能通过下调Hu R蛋白表达而降低胃癌细胞活力。 展开更多
关键词 miR-519 hur 胃癌
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RNA结合蛋白HuR在肿瘤耐药及药物敏感性中的作用 被引量:4
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作者 楚慧丽 关雅萍 王俊 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期707-711,共5页
人抗原R(human antigen R,HuR)属于果蝇胚胎致死异常视觉(embryonic lethal abnormal vision,ELAV)家族的RNA结合蛋白(RNA-binding protein,RBP),1996年克隆成功,随后发现其在神经发育和细胞分化中具有重要作用。近年发现,HuR通过增强... 人抗原R(human antigen R,HuR)属于果蝇胚胎致死异常视觉(embryonic lethal abnormal vision,ELAV)家族的RNA结合蛋白(RNA-binding protein,RBP),1996年克隆成功,随后发现其在神经发育和细胞分化中具有重要作用。近年发现,HuR通过增强肿瘤相关RNA的稳定性而参与了肿瘤发生、发展、转移和血管生成,具有类似原癌基因的功能;但也有研究显示HuR具有双重作用,既能促进肿瘤细胞对化疗药物多柔比星、吉西他滨的敏感性,又与肿瘤细胞对顺铂、紫杉醇类药物耐药相关。本文结合笔者所在课题组前期对HuR的研究基础,就HuR在肿瘤多药耐药及药物敏感性中的作用简要作一综述。 展开更多
关键词 hur 多药耐药 药物敏感性
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RNA结合蛋白HuR在肿瘤中的作用 被引量:5
9
作者 王俊 王宝成 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期97-100,共4页
RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBPs)是近年来发现的具有多种生物学作用的分子家族,其中,HuR属于胚胎致死异常视觉家族的RBPs,表达广泛。最初发现HuR与神经分化相关,通过与靶mRNA3'UTR的ARE结合,在转录后水平调控RNA的稳定性和... RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBPs)是近年来发现的具有多种生物学作用的分子家族,其中,HuR属于胚胎致死异常视觉家族的RBPs,表达广泛。最初发现HuR与神经分化相关,通过与靶mRNA3'UTR的ARE结合,在转录后水平调控RNA的稳定性和蛋白表达。近年发现,HuR与细胞增殖、肿瘤相关的炎症和血管生成密切相关,提示HuR可能参与了肿瘤发生、发展和转移过程。因此,以HuR为靶点的抗肿瘤策略可能为将来的肿瘤治疗带来希望。 展开更多
关键词 hur 肿瘤 转移 MRNA稳定性 ARE
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ARHI基因与HuR蛋白在胰腺癌PANC-1细胞中的表达 被引量:4
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作者 杨红 胡珊珊 +2 位作者 阮戈冲 杨晓鸥 钱家鸣 《协和医学杂志》 2017年第1期39-42,共4页
目的观察ARHI基因转染胰腺癌PANC-1细胞后对HuR蛋白的影响。方法采用脂质体法将表达ARHI基因的质粒p LNCX2-ARHI-EGFP和空载体p LNCX2-EGFP转染胰腺癌PANC-1细胞,细胞分为3组:实验组(p LNCX2-ARHIEGFP)、空载体转染组(p LNCX2-EGFP)和PA... 目的观察ARHI基因转染胰腺癌PANC-1细胞后对HuR蛋白的影响。方法采用脂质体法将表达ARHI基因的质粒p LNCX2-ARHI-EGFP和空载体p LNCX2-EGFP转染胰腺癌PANC-1细胞,细胞分为3组:实验组(p LNCX2-ARHIEGFP)、空载体转染组(p LNCX2-EGFP)和PANC-1细胞空白对照组,用G418筛选稳定转染的细胞株;采用PCR和Western blot方法检测ARHI基因表达,采用Western blot方法检测HuR蛋白表达。结果稳定转染ARHI基因组可检测到ARHI基因mRNA和蛋白的表达。根据图像灰度计算蛋白条带相对表达量,稳定转染ARHI基因组HuR蛋白表达(0.2226±0.0644)较空载体对照转染组(0.4063±0.0925,P=0.029)和PANC-1细胞空白对照组(0.4178±0.1319,P=0.022)显著降低。结论 ARHI基因可以导致胰腺癌细胞株中HuR蛋白表达降低。 展开更多
关键词 胰腺癌 ARHI基因 hur
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HuR基因的慢病毒干扰载体构建及其病毒包装 被引量:2
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作者 孙达权 罗福丽 +5 位作者 廖美 石松 薛殿婷 徐莹莹 秦龙燕 徐国强 《贵州医药》 CAS 2017年第6期563-565,F0003,共4页
目的构建人HuR基因慢病毒干扰载体和基因敲低细胞株,为揭示C/EBPβ3’UTR RNA与HuR蛋白相互作用抑制肝癌细胞增殖的分子机制奠定基础。方法根据shRNA设计原则设计人HuR基因的shRNA序列,用化学合成法合成shDNA序列,以LV10(pGLVU6/RFP/Pu... 目的构建人HuR基因慢病毒干扰载体和基因敲低细胞株,为揭示C/EBPβ3’UTR RNA与HuR蛋白相互作用抑制肝癌细胞增殖的分子机制奠定基础。方法根据shRNA设计原则设计人HuR基因的shRNA序列,用化学合成法合成shDNA序列,以LV10(pGLVU6/RFP/Puro)为载体骨架,构建慢病毒干扰载体LV10-HuR,并与慢病毒包装辅助载体(pLP1、pLP2和pLP/VSVG)共转染HEK293T细胞,收集病毒液纯化后感染SMMC-7721细胞并用嘌呤霉素杀死未感染的肝癌细胞,荧光显微镜下挑取单克隆红色荧光细胞集落,扩大培养后通过Western blot验证肝癌细胞内源性HuR蛋白表达。结果经DNA测序鉴定,LV10-HuR正是所需的慢病毒干扰载体。通过共转染获得的重组慢病毒颗粒感染的肝癌细胞在荧光显微镜下显示红色荧光。嘌呤霉素筛选和单克隆细胞集落挑取获得显示红色荧光细胞株,western blot证明稳转细胞内源性HuR基因表达下降,证明LV10-HuR慢病毒干扰载体可以抑制肝癌细胞内源性HuR基因表达。结论成功构建慢病毒干扰载体LV10-HuR,包装出有活性的重组慢病毒颗粒,建立HuR基因敲低肝癌细胞株。 展开更多
关键词 hur基因 慢病毒干扰载体 RNAI 脂质体转染 肝癌细胞
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HuR与肿瘤发生发展及预后关系的研究进展 被引量:3
12
作者 胡跃云 辛彦 《现代肿瘤医学》 CAS 2010年第7期1445-1448,共4页
HuR蛋白是mRNA结合蛋白之一,可与多种肿瘤调控因子的mRNAs相连接,调节其稳定性和翻译过程。近年来研究发现HuR与多种恶性肿瘤的发生过程密切相关,现就HuR与肿瘤发生发展及预后关系的研究进展加以综述。
关键词 hur mRNA结合蛋白 肿瘤发生发展 预后
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HuR蛋白在胸腺瘤组织中的表达及意义 被引量:1
13
作者 张明明 李晓晗 姜卫国 《现代肿瘤医学》 CAS 2012年第10期2051-2053,共3页
目的:检测HuR蛋白在胸腺瘤组织中的表达,分析其与胸腺瘤是否发生侵袭邻近器官及组织学分型的关系及意义。方法:采用免疫组织化学方法检测HuR在50例胸腺瘤组织中的表达。结果:HuR的表达与胸腺瘤是否发生侵袭相关(P<0.05),无侵袭及有... 目的:检测HuR蛋白在胸腺瘤组织中的表达,分析其与胸腺瘤是否发生侵袭邻近器官及组织学分型的关系及意义。方法:采用免疫组织化学方法检测HuR在50例胸腺瘤组织中的表达。结果:HuR的表达与胸腺瘤是否发生侵袭相关(P<0.05),无侵袭及有侵袭阳性率分别为40.91%及78.57%。HuR的表达与胸腺瘤的组织学分型相关(P<0.05)。结论:HuR在胸腺瘤细胞核中高表达可能参与了胸腺瘤的发生发展过程,有望影响胸腺瘤的术后治疗。 展开更多
关键词 胸腺瘤 免疫组织化学 类胚胎致死异常视觉基因1(hur蛋白)
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HuR和p120在结直肠癌中的表达及意义 被引量:1
14
作者 章辉 杨朝晖 +3 位作者 曹学全 卢洪胜 顾华敏 陶芳芳 《浙江临床医学》 2016年第2期214-215,218,共3页
目的检测HuR和p120在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法(IHC)检测HuR和p120在454例结直肠癌组织中的表达。结果结直肠癌组织中HuR表达高于正常结直肠组织(P〈0.05),而p120表达则低于正常结直肠组织(P〈O... 目的检测HuR和p120在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法(IHC)检测HuR和p120在454例结直肠癌组织中的表达。结果结直肠癌组织中HuR表达高于正常结直肠组织(P〈0.05),而p120表达则低于正常结直肠组织(P〈O.05)。45例结直肠癌组织中,HuR、p120阳性表达率均与肿瘤的组织学分级、浸润程度及临床TNM分期有关(P〈0.05);而与年龄、性别、肿块大小无关(P均〉0.05);P120在有、无淋巴结转移组中表达差异有统计学意义(P〈0.05),HuR蛋白表达差异无统计学意义(P〉0.05);HuR和p120表达呈负相关(r=-0.343,P〈0.05)。结论结直肠癌中HuR高表达可能参与了肿瘤发生与增殖,而p1204R,表达可能与肿瘤浸润及淋巴结转移有关。 展开更多
关键词 结直肠癌 免疫组织化学 hur P120
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喉癌组织中HuR基因和survivin基因的表达及临床意义 被引量:5
15
作者 任远 沈志森 +1 位作者 丁华新 甘永莉 《现代实用医学》 2011年第8期855-858,862,F0002,共6页
目的探讨HuR基因和survivin基因在喉癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化法对42例喉癌组织及36例正常的切缘喉黏膜组织中HuR基因和survivin基因的表达进行检测,分析两者的表达与临床病理参数的关系,以及两者之间的相关性。结果 ... 目的探讨HuR基因和survivin基因在喉癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化法对42例喉癌组织及36例正常的切缘喉黏膜组织中HuR基因和survivin基因的表达进行检测,分析两者的表达与临床病理参数的关系,以及两者之间的相关性。结果 HuR基因和survivin基因在喉癌组织中的阳性表达率均高于正常的切缘喉黏膜组织(<0.05);HuR基因和survivin基因的表达均与淋巴结转移无相关性(=0.024、0.057,>0.05),而均与T分期和临床分期有相关性(=0.339、0.375、0.294、0.302,<0.05)。此外HuR基因的表达还与喉癌细胞的病理分化程度有关(=0.323,<0.05)。喉癌组织中HuR基因与sur-vivin基因表达呈正相关(=0.526)。结论喉癌中HuR基因和survivin基因两者的表达均增高,两者的表达产物呈正相关。HuR基因的表达产物可能通过对survivin基因的表达进行调控促进喉癌的发生与发展。 展开更多
关键词 喉肿瘤 hurs urvivin 免疫组织化学
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HuR蛋白在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其意义 被引量:1
16
作者 王晓娜 成丽 《河北医药》 CAS 2010年第15期2006-2007,共2页
目的探讨人抗原R(human antigen R,HuR)在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法利用免疫组化法和图像分析技术检测10例正常卵巢组织,20例卵巢浆液性瘤,32例卵巢浆液性癌中HuR蛋白的表达。结果正常卵巢组织、卵巢浆液性肿瘤组... 目的探讨人抗原R(human antigen R,HuR)在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法利用免疫组化法和图像分析技术检测10例正常卵巢组织,20例卵巢浆液性瘤,32例卵巢浆液性癌中HuR蛋白的表达。结果正常卵巢组织、卵巢浆液性肿瘤组织中均有HuR蛋白表达,HuR蛋白在卵巢癌中的表达较卵巢瘤及正常组织中增强,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移的卵巢浆液性癌中HuR蛋白表达高于无淋巴结转移(P<0.05)。结论卵巢浆液性肿瘤的发生发展与HuR的过表达密切相关。 展开更多
关键词 hur蛋白 卵巢肿瘤 肿瘤基因表达调控
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SND1蛋白与HuR蛋白相互结合作用
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作者 高星杰 张毅 +7 位作者 宋娟 付雪 苏超 张桂敏 张春燕 于林 姚智 杨洁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期874-881,共8页
人源SND1(staphylococcal nuclease domain containing 1)蛋白由N端的SN(staphylococcal nucleases)结构域和C端的TSN(Tudor-SN5)结构域组成,其中SN结构域又包含SN1~SN4四个重复的功能片段.本课题组前期研究结果表明,SND1蛋白可... 人源SND1(staphylococcal nuclease domain containing 1)蛋白由N端的SN(staphylococcal nucleases)结构域和C端的TSN(Tudor-SN5)结构域组成,其中SN结构域又包含SN1~SN4四个重复的功能片段.本课题组前期研究结果表明,SND1蛋白可以通过SN结构域与G3BP(Ras-GAP SH3 domain-binding protein)蛋白相互结合,共同参与细胞应激颗粒(stress granules,SGs)的形成.SGs是真核细胞在受到氧化应激、病毒感染等外界刺激时在胞浆内形成的与RNA代谢相关的颗粒状结构.对于SGs的成分鉴定及相互作用的分析一直是学者们研究的热点.本研究中,免疫共沉淀实验结果表明,以抗SND1抗体可以共沉淀出HeLa细胞内另一个重要的应激相关人类抗原R(human antigen R,HuR)蛋白.另外,利用脂质体转染法将pcDNA3-FLAG-HuR重组质粒瞬时转染入HeLa细胞,成功过表达外源性的FLAG-HuR融合蛋白,再以抗FLAG标签抗体又可以反向共沉淀出内源性SND1蛋白,证明SND1与HuR之间存在蛋白质间的相互结合作用.细胞免疫荧光实验结果表明,当给予HeLa细胞0.5 mmol/L亚砷酸钠氧化应激时,SND1与HuR蛋白共同定位于胞浆中的SGs结构中.GST-pulldown实验结果进一步表明截短的SN结构域可以结合HuR蛋白,其中以SN1功能片段的结合能力最强,表明SND1蛋白是通过SN结构域与HuR蛋白形成应激复合物,参与SGs的胞浆组装.并不定位于SGs的TSN结构域亦可结合HuR蛋白,提示SND1-HuR的蛋白相互作用可能并不局限于SGs,具有其它方面的功能意义. 展开更多
关键词 SND1蛋白 hur蛋白 应激颗粒 免疫共沉淀 结构域
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RNA结合蛋白HuR通过其RNA识别模体调节hsa-let-7c表达(英文)
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作者 宋峣 冯伟 +2 位作者 施国敏 陈超 张幼怡 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-8,共8页
微小RNA(microRNAs,miRNA)是一种短链的非编码RNA,它通过抑制RNA的翻译或促进RNA的降解调控多种细胞活动和机体的发育。机体主要通过转录和转录后两个层面对miRNA的表达进行调控,其中对miRNA转录水平的调控决定了miRNA表达的特异性,而... 微小RNA(microRNAs,miRNA)是一种短链的非编码RNA,它通过抑制RNA的翻译或促进RNA的降解调控多种细胞活动和机体的发育。机体主要通过转录和转录后两个层面对miRNA的表达进行调控,其中对miRNA转录水平的调控决定了miRNA表达的特异性,而目前我们对其转录后调控的机制还知之甚少。本研究旨在证实RNA结合蛋白HuR是否通过与pri-miRNA中富含AU的序列相结合调节miRNA的表达。利用生物信息学方法对pri-miRNA中的AUUUA模体进行筛查,发现在hsa-let-7c下游富含AUUUA模体,而hsa-miR-21则不具备这一模体。通过转染HuR质粒到HEK293T细胞构建过表达模型,然后用Western blot和real-time PCR分别检测HuR蛋白和miRNAs表达水平。结果显示,过表达HuR能够促进成熟hsa-let-7c而非hsa-miR-21表达。而过表达缺失RNA识别模体3(RNA recognition motif,RRM3)的突变体HuR则不能促进hsa-let-7c的表达。以上结果提示RRM3是HuR介导成熟hsa-let-7c表达的关键序列,而HuR在调控miRNA生物合成中可能扮演了一种新的角色,即在转录后水平调节miRNA的表达。 展开更多
关键词 微小RNA hur let-7c 转录后调节
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活细胞内以光漂白荧光损失(FLIP)技术分析HuR蛋白的应激动力学行为
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作者 高星杰 张毅 +7 位作者 付雪 苏超 张春燕 张桂敏 尹洁 王鑫廷 姚智 杨洁 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1235-1240,共6页
人类抗原R(human antigen R,HuR)是一种多功能RNA结合蛋白,参与细胞应激颗粒(stress granules,SGs)的构成。SGs是细胞在受到外界环境刺激时在胞浆中形成的颗粒状结构。该研究是利用光漂白荧光损失(fl uorescence loss in photobleaching... 人类抗原R(human antigen R,HuR)是一种多功能RNA结合蛋白,参与细胞应激颗粒(stress granules,SGs)的构成。SGs是细胞在受到外界环境刺激时在胞浆中形成的颗粒状结构。该研究是利用光漂白荧光损失(fl uorescence loss in photobleaching,FLIP)技术对活细胞内的HuR蛋白颗粒进行应激动力学分析。首先,利用脂质体将RFP-HuR重组质粒瞬时转染入HeLa细胞,以Western blot和细胞免疫荧光实验确定是否实现对于HuR蛋白的红色荧光蛋白(red fl uorecent protein,RFP)标记;然后以405 nm激光束脉冲式重复光漂白HuR应激颗粒,分别监测同一漂白细胞内的其他HuR颗粒以及核内荧光信号,并以邻近的未漂白细胞作为对照组。实验结果表明,转染重组质粒后可有效表达RFP-HuR融合蛋白,且与SGs标记蛋白G3BP存在共定位关系。在第一个光漂白循环,漂白区荧光密度便从2 500 a.u.降低至0 a.u.;而经过约12个漂白循环(240 s)后,邻近HuR颗粒的荧光密度从漂白前的1 800 a.u.左右降低并维持在200 a.u.左右,表明活细胞内的HuR颗粒呈现高度的动态性;而胞核区荧光密度亦从4 400 a.u.降低至2 000 a.u.左右,表明HuR蛋白是一种核浆穿梭蛋白,在SGs、胞浆及胞核之间存在一定的动态平衡。利用FLIP技术可以分析并比较SGs不同成分的应激动力学属性,有助于进行SGs相关临床疾病的分子机制探讨。 展开更多
关键词 hur蛋白 光漂白荧光损失 应激颗粒 活细胞 荧光标记
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小鼠HuR真核表达载体构建及对Lewis肺癌细胞增殖和侵袭的影响
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作者 王俊 郭燕 +2 位作者 章必成 关华军 陈正堂 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第20期2029-2031,共3页
目的构建小鼠同源的人抗原R(HuR)基因真核表达载体,观察HuR过表达对Lewis肺癌(LLC)细胞增殖和侵袭的影响。方法从LLC细胞中抽提总RNA,RT-PCR扩增HuR cDNA,基因工程方法将PCR片断克隆至真核表达载体pEGFP-N1的多克隆位点。重组质粒经EcoR... 目的构建小鼠同源的人抗原R(HuR)基因真核表达载体,观察HuR过表达对Lewis肺癌(LLC)细胞增殖和侵袭的影响。方法从LLC细胞中抽提总RNA,RT-PCR扩增HuR cDNA,基因工程方法将PCR片断克隆至真核表达载体pEGFP-N1的多克隆位点。重组质粒经EcoRI和SmaI双酶切鉴定和测序后,使用LipofectamineTM2000转染LLC细胞。Western blot-ting检测HuR在细胞中的表达。MTT和Transwell系统分别检测细胞增殖和侵袭能力。结果经酶切、测序鉴定,小鼠HuR基因正确插入到pEGFP-N1的多克隆位点,获得pEGFP-HuR;Western blotting显示转染组与未转染组比较,HuR蛋白表达、LLC细胞增殖能力和侵袭能力均显著增强。结论HuR过表达可提高肿瘤细胞的增殖和侵袭能力。 展开更多
关键词 hur LEWIS肺癌 表达载体 增殖 侵袭
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