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HSPA2在牦牛不同组织器官中的表达差异 被引量:5
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作者 温泽星 余四九 +4 位作者 翟羽佳 杨琨 刘鹏刚 何俊峰 崔燕 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期3475-3482,共8页
【目的】探索热休克蛋白70-2(heat shock 70kD protein-2,HSPA2)在牦牛不同组织器官中的表达差异。【方法】选取3头1岁龄的健康青海高原雄性牦牛为研究对象,在正常生理条件下,于2013年9月中旬采集不同组织器官(心脏、肝脏、脾脏、肺脏... 【目的】探索热休克蛋白70-2(heat shock 70kD protein-2,HSPA2)在牦牛不同组织器官中的表达差异。【方法】选取3头1岁龄的健康青海高原雄性牦牛为研究对象,在正常生理条件下,于2013年9月中旬采集不同组织器官(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑和睾丸)样本。(1)从牦牛不同组织器官中提取RNA,将RNA反转录成第一链cDNA,参照牦牛HSPA2和β-actin基因序列(登录号为KC790105.1和DQ838049.1)设计特异性引物,首先采用RT-PCR来验证实时荧光定量PCR(RT-qPCR)是否能应用于牦牛不同组织器官中HSPA2表达差异的测定;然后采用RT-qPCR测定牦牛不同组织器官中HSPA2相对表达量的差异。(2)将牦牛不同组织器官样本4%多聚甲醛固定,制成石蜡切片,免疫组织化学法测定HSPA2在不同组织器官中的分布。采用Image-Pro Plus 6.0软件进行免疫组化图像分析,测定HSPA2阳性反应物的积分光密度,进行吸光度分析;通过SPSS 19.0统计软件,用单因素方差分析进行差异显著性测定。【结果】(1)RT-PCR结果表明RT-qPCR法可用于牦牛不同组织器官中HSPA2表达差异的测定。实时荧光定量PCR结果表明,HSPA2在睾丸中的相对表达量,分别是在脑、肾脏、心脏、脾脏、肺脏和肝脏中的83.33、97.09、111.11、133.33、222.22和285.71倍。(2)免疫组织化学结果显示,牦牛睾丸、肾脏、脑、心脏、肺脏、肝脏和脾脏中均有HSPA2的阳性表达。其中,在牦牛肾脏皮质肾小管、髓质肾小管,大脑皮质海马CA1区、小脑皮质,心肌细胞,肺泡上皮细胞,肝细胞,脾脏边缘区和红髓中有HSPA2阳性反应,着色深浅不等,大部分阳性反应位于细胞质,细胞核阳性反应极少;而在睾丸曲精小管中生精细胞细胞质和细胞核中均有HSPA2阳性反应,着色深浅不等;阴性对照组未观察到阳性反应。根据积分光密度值比较得出,HSPA2蛋白的阳性表达量在睾丸中最高,脑、肾脏、心脏、肺脏和肝脏次之,脾脏最少。【结论】通过基因水平和蛋白水平两个层面的研究,发现HSPA2在牦牛各组织器官中存在表达差异;睾丸中HSPA2基因和蛋白表达量均高于脑、肾脏、心脏、脾脏、肺脏和肝脏,提示HSPA2可能与睾丸的生殖功能密切相关。 展开更多
关键词 hspa2 牦牛 不同组织器官 实时荧光定量PCR 免疫组化
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益肾通络方对少弱精子症大鼠睾丸组织PI3K-AKT-mTOR通路、CatSper-1、HSPA2蛋白及mRNA表达的影响 被引量:24
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作者 孙自学 邱荃 +2 位作者 何鑫 张芳 赵沛沛 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期437-444,共8页
目的:基于PI3K-AKT-mTOR通路研究益肾通络方对少弱精子症模型大鼠睾丸组织的影响及作用机制。方法:将SPF级雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、左卡尼汀组、益肾通络方(YTP)组(高、低剂量组)、Omipalisib抑制剂(OI)组、Omipali... 目的:基于PI3K-AKT-mTOR通路研究益肾通络方对少弱精子症模型大鼠睾丸组织的影响及作用机制。方法:将SPF级雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、左卡尼汀组、益肾通络方(YTP)组(高、低剂量组)、Omipalisib抑制剂(OI)组、Omipalisib抑制剂+益肾通络方高剂量组(OI+YTP高剂量组)、Omripalisib抑制剂+益肾通络方低剂量组(OI+YTP低剂量组),每组各6只。除正常对照组外其余大鼠均在雷公藤多苷灌胃建立少弱精子症模型大鼠基础上给予相对应药物,镜下观察各组大鼠精子参数,HE染色观察各组睾丸组织病理变化,Western印迹和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测PI3K-AKT-mTOR信号通路相关蛋白及mRNA表达情况。结果:与模型组相比,左卡尼汀组、YTP高剂量组、YTP低剂量组在精子浓度和精子活力(PR、PR+NP)方面均显著提高(P<0.001);HE染色结果显示模型组生精细胞排列不整齐,生精小管管腔缩小,间隙变宽等,左卡尼汀组、YTP高剂量组、YTP低剂量组也观察到了与模型组相似的病理改变,但同时也观察到了较为完好的精子细胞且在数量相对模型组较多,OI组、OI+YTP高剂量组、OI+YTP低剂量组的病理改变与模型组相近。Western印迹结果显示:与模型组相比,左卡尼汀组可上调p-AKT、CatSper-1、HSPA2蛋白表达量(P<0.05),YTP低剂量组可上调p-AKT、mTOR、CatSper-1、HSPA2蛋白表达量(P<0.05),YTP高剂量组除可上调上述蛋白表达外,还可上调PI3K蛋白表达量(P<0.05);OI组PI3K、mTOR、CatSper-1的蛋白表达量与模型组对比无差异(P>0.05);OI+YTP高剂量组及OI+YTP低剂量组PI3K、p-AKT、mTOR、CatSper-1、HSPA2的蛋白表达与模型组、OI组对比无差异(P>0.05)。qRT-PCR结果显示:与模型组相比,左卡尼汀组、YTP高、低剂量组均可上调PI3K mRNA、mTOR mRNA、CatSper-1 mRNA、HSPA2 mRNA表达(P<0.05);YTP高剂量组可显著上调CatSper-1 mRNA表达(P<0.001),且与YTP低剂量组对比时,YTP高剂量组可以更有效上调PI3K的mRNA表达(P<0.05)。OI组PI3K、mTOR、CatSper-1、HSPA2的mRNA表达与模型组对比无差异(P>0.05);OI+YTP高剂量组及OI+YTP低剂量组PI3K、mTOR、CatSper-1、HSPA2的mRNA表达与模型组、OI组对比无差异(P>0.05)。结论:益肾通络方可改善雷公藤多苷诱导的少弱精子症SD模型大鼠精子质量及睾丸组织病理形态变化,其机制可能与该方上调了睾丸组织PI3K-AKT-mTOR通路的相关蛋白及mRNA表达有关。 展开更多
关键词 益肾通络方 男性不育 少弱精子症 实验研究 PI3K-AKT-mTOR CatSper-1 hspa2
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牦牛应激型HSPA1A和HSPA2基因的克隆及序列分析 被引量:2
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作者 王树茂 兰道亮 +2 位作者 陈亚冰 黄偲 李键 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期9-14,共6页
为了解牦牛应激型HSPA1A和HSPA2基因的特点,根据GenBank已公布的牛应激型HSPA1A和HSPA2基因序列设计4对引物,每个基因分两段扩增,测序并拼接,首次克隆牦牛应激型HSPA1A和HSPA2基因。序列分析表明,扩增到的牦牛应激型HSPA1A基因全长2 134... 为了解牦牛应激型HSPA1A和HSPA2基因的特点,根据GenBank已公布的牛应激型HSPA1A和HSPA2基因序列设计4对引物,每个基因分两段扩增,测序并拼接,首次克隆牦牛应激型HSPA1A和HSPA2基因。序列分析表明,扩增到的牦牛应激型HSPA1A基因全长2 134bp,开放阅读框全长1 926bp,编码641个氨基酸,分子质量为70.26ku;HSPA2基因全长1 911bp,开放阅读框全长1 911bp,编码636个氨基酸,分子质量为69.85ku。将HSPA1A和HSPA2基因开放阅读框编码的氨基酸序列进行ScanProsite分析,均得到3个HSP70蛋白家族标记。核苷酸序列同源性分析表明,HSPA1A和HSPA2基因具有较高的保守性,牦牛与牛的HSPA1A和HSPA2基因核苷酸序列同源性最高,分别为99.8%和99.1%。遗传进化关系分析表明,牦牛与牛的应激型HSPA1A和HSPA2基因亲缘关系最近。 展开更多
关键词 牦牛 HSPA1A hspa2 序列分析
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牦牛HSPA1A和HSPA2基因组织分布的检测 被引量:1
4
作者 王树茂 兰道亮 +2 位作者 陈亚冰 林宝山 李键 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第12期139-144,共6页
旨在建立一种检测牦牛HSP70家族应激型HSPA1A和HSPA2基因的实时荧光定量PCR方法。采用普通PCR,结合实时荧光定量PCR方法,检测正常情况下应激型HSPA1A和HSPA2基因在牦牛各组织中的表达分布。结果显示,HSPA1A基因在公牦牛与母牦牛中的表... 旨在建立一种检测牦牛HSP70家族应激型HSPA1A和HSPA2基因的实时荧光定量PCR方法。采用普通PCR,结合实时荧光定量PCR方法,检测正常情况下应激型HSPA1A和HSPA2基因在牦牛各组织中的表达分布。结果显示,HSPA1A基因在公牦牛与母牦牛中的表达基本一致,所有组织中均少量表达,肺中最低,肌肉相对表达较高;HSPA2基因在公牦牛与母牦牛中的表达也基本一致,所有组织均少量表达,肺中最低,脑、睾丸和卵巢相对表达较高。该研究结果提示正常情况下HSPA2基因可能在牦牛生殖繁育上发挥一定作用,为进一步研究HSPA1A基因和HSPA2基因在牦牛对环境的适应性方面提供基础资料和研究方法。 展开更多
关键词 牦牛 HSPA1A hspa2 实时荧光定量PCR 组织分布
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HSPA2在人肝癌组织中的表达及临床意义 被引量:2
5
作者 彭兆意 周喜洋 《浙江实用医学》 2015年第3期157-159,163,共4页
目的探讨原发性肝细胞癌(HCC)组织中热休克蛋白70-2(HSPA2)的表达及临床意义。方法利用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和免疫组化法检测120例HCC组织和癌旁组织中的HSPA2 m RNA和蛋白的表达水平,并分析HSPA2蛋白在HCC组织中的表达水平与患... 目的探讨原发性肝细胞癌(HCC)组织中热休克蛋白70-2(HSPA2)的表达及临床意义。方法利用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和免疫组化法检测120例HCC组织和癌旁组织中的HSPA2 m RNA和蛋白的表达水平,并分析HSPA2蛋白在HCC组织中的表达水平与患者临床病理特征之间的关系。结果 RT-q PCR结果显示,HSPA2 m RNA在50例HCC组织中的表达水平明显高于癌旁正常肝脏组织中(2.82±0.19与1.18±0.14,P<0.01);免疫组化结果显示,在120例HCC标本中,HSPA2蛋白高表达有69例(57.5%),低表达有51例(42.5%),HSPA2蛋白高表达与肿瘤长径、病理分化程度和肿瘤分期有关(P<0.05),而与年龄、性别、HBs Ag状态以及血清AFP水平无关(P>0.05)。结论 HSPA2在人HCC中高表达,其高表达可能与HCC的发生、发展密切相关,可能作为HCC早期诊断和预后预测的指标。 展开更多
关键词 肝癌 hspa2 热休克蛋白
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宿主细胞蛋白HSPA2与TGEV Nsp2的相互作用及其对病毒复制的影响 被引量:2
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作者 王亚楠 韩露露 +7 位作者 孙傲颖 姜艳平 崔文 乔薪瑗 唐丽杰 徐义刚 李一经 王丽 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第21期1-6,14,175,共8页
为了探究猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)非结构蛋白2(Nsp2)与宿主细胞热休克蛋白70-2(HSPA2)的相互作用,以及HSPA2表达对TGEV复制的影响,试验利用RT-PCR方法获得猪源HSPA2基因并构建其真核表达载体pCMV-... 为了探究猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)非结构蛋白2(Nsp2)与宿主细胞热休克蛋白70-2(HSPA2)的相互作用,以及HSPA2表达对TGEV复制的影响,试验利用RT-PCR方法获得猪源HSPA2基因并构建其真核表达载体pCMV-Myc-HSPA2,通过Western-blot和间接免疫荧光试验检测真核表达载体pCMV-Myc-HSPA2在IPEC-J2细胞中的表达情况。利用免疫共沉淀(Co-IP)和共定位试验进一步验证TGEV Nsp2和宿主细胞蛋白HSPA2之间是否存在相互作用,利用基因过表达技术在IPEC-J2细胞中过表达HSPA2后接种TGEV,分别测定接种后36,48小时时病毒TCID50。结果表明:真核表达载体pCMV-Myc-HSPA2能够在IPEC-J2细胞中成功表达,HSPA2与Nsp2之间存在相互作用,并且HSPA2表达量升高后TGEV的TCID50略有升高。说明宿主细胞蛋白HSPA2与TGEV Nsp2之间存在相互作用,且HSPA2的表达对TGEV复制具有一定促进作用。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus TGEV) 热休克蛋白70-2(hspa2) 蛋白互作 病毒复制 免疫共沉淀(Co-IP) 真核表达
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HSPA2在食管鳞癌中的表达及其临床意义 被引量:1
7
作者 冯雪莲 梁敏 张航 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期55-60,共6页
目的探讨HSPA2蛋白在食管鳞癌组织中的表达水平及其临床病理意义。方法应用免疫组织化学SABC法检测120例食管鳞癌组织中HSPA2蛋白的表达水平,并分析HSPA2蛋白在食管鳞癌组织中的表达水平与临床病理特征以及患者预后之间的关系。采用实... 目的探讨HSPA2蛋白在食管鳞癌组织中的表达水平及其临床病理意义。方法应用免疫组织化学SABC法检测120例食管鳞癌组织中HSPA2蛋白的表达水平,并分析HSPA2蛋白在食管鳞癌组织中的表达水平与临床病理特征以及患者预后之间的关系。采用实时荧光定量PCR和Western blot检测HSPA2mRNA和蛋白在20例食管鳞癌组织及其配对的癌旁组织和正常组织中的相对表达水平。结果 HSPA2蛋白在120例食管鳞癌组织中的阳性率为75%,其高表达水平与食管鳞癌患者的肿瘤浸润程度、淋巴结转移、TNM分期密切相关(P<0.05);Kaplan-Meier单因素生存分析显示HSPA2蛋白高表达组患者的5年无病生存率(7.8%)和总生存率(18.9%)显著小于低表达组患者的40%和66.7%(P<0.05);Cox回归模型显示HSPA2蛋白表达在无病生存率和总生存率中危险比为2.577和2.899,是食管鳞癌患者的一个独立危险因素(P<0.05)。与正常食管上皮组织和癌旁组织相比,HSPA2在食管鳞癌组织中mRNA表达水平较正常食管上皮组织显著上调8.71倍,较癌旁组织上调2.12倍。HSPA2蛋白在食管鳞癌组织(0.44±0.15)中表达较配对的癌旁组织(0.20±0.06)和正常组织(0.11±0.06)中表达亦明显增高(P<0.05)。结论 HSPA2在人类食管鳞癌中高表达,其在食管鳞癌的发生和发展过程中起重要作用,与肿瘤侵袭及转移密切相关。 展开更多
关键词 hspa2 食管鳞癌 侵袭 转移 预后
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HSPA2和SPATA6在彭波半细毛羊睾丸组织中的细胞定位及表达差异分析 被引量:2
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作者 朱爱文 刘海霞 +5 位作者 德庆卓嘎 韩大勇 格桑加措 闫伟 平措班旦 朱戈辉 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期967-974,共8页
热休克蛋白A2(HSPA2)是热休克蛋白HSP70家族重要成员,能够促进睾丸支持细胞增殖;精子发生相关基因6(SPATA6)能够调控肌球蛋白合成的微丝运输系统,影响精子细胞骨架形成。在雄性哺乳动物生殖过程中,两者均起重要作用。为研究HSPA2和SPATA... 热休克蛋白A2(HSPA2)是热休克蛋白HSP70家族重要成员,能够促进睾丸支持细胞增殖;精子发生相关基因6(SPATA6)能够调控肌球蛋白合成的微丝运输系统,影响精子细胞骨架形成。在雄性哺乳动物生殖过程中,两者均起重要作用。为研究HSPA2和SPATA6在雄性彭波半细毛羊生殖过程中的表达规律和细胞定位,以不同年龄阶段(3月龄、12月龄和3岁龄)彭波半细毛羊睾丸组织为研究对象,运用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,qRT-PCR)、Western blot和免疫组织化学染色法(IHC)从转录和翻译水平检测了HSPA2和SPATA6在不同年龄阶段彭波半细毛羊睾丸组织的表达水平和分布模式,分析预测HSPA2和SPATA6在彭波半细毛羊睾丸发育和精子发生过程中的调控作用。结果表明:12月龄和3岁龄彭波半细毛羊睾丸组织中HSPA2 mRNA的相对表达量以及蛋白表达量极显著高于3月龄(P<0.01);12月龄SPATA6 mRNA的相对表达量以及蛋白表达量极显著高于3月龄(P<0.01),显著高于3岁龄(P<0.05)。不同年龄阶段彭波半细毛羊睾丸组织的支持细胞和间质细胞中HSPA2和SPATA6蛋白均有分布。初步推断,HSPA2和SPATA6的表达水平变化在调控彭波半细毛羊精子发生过程和促进精子成熟中具有重要作用。 展开更多
关键词 彭波半细毛羊 热休克蛋白A2 精子发生相关基因6 睾丸 表达定位 免疫组化 蛋白质免疫印迹
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HSPA2在胰腺癌中的表达及其临床意义 被引量:4
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作者 吴杨 黄强 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第8期1179-1182,共4页
目的检测并对比热休克蛋白A2(HSPA2)在胰腺癌及癌旁胰腺组织中的表达水平,分析HSPA2蛋白在胰腺癌标本中的表达水平与其临床病理参数之间的相关性。方法采用实时定量PCR、Western blot法检测并对比胰腺癌及癌旁胰腺组织中HSPA2蛋白和mRN... 目的检测并对比热休克蛋白A2(HSPA2)在胰腺癌及癌旁胰腺组织中的表达水平,分析HSPA2蛋白在胰腺癌标本中的表达水平与其临床病理参数之间的相关性。方法采用实时定量PCR、Western blot法检测并对比胰腺癌及癌旁胰腺组织中HSPA2蛋白和mRNA的表达水平,采用免疫组织化学染色方法测定胰腺癌患者组织中HSPA2蛋白的表达,并探讨其表达与临床病理特征之间的关系。结果与癌旁胰腺组织相比,胰腺癌组织中HSPA2 mRNA和蛋白表达水平均明显升高。HSPA2蛋白在胰腺癌组织中的阳性表达率为68.8%(55/80)。HSPA2蛋白表达量与胰腺癌的分化程度、血管侵犯、TNM分期差异有统计学意义(P=0.011、0.005、0.012),而与患者性别、年龄、肿块大小及位置、血清CA199水平差异无统计学意义。结论 HSPA2在胰腺癌组织中的表达明显高于与之相应的癌旁胰腺组织,且HSPA2的高表达与胰腺癌的恶性进展、侵袭和转移等事件密切相关。 展开更多
关键词 胰腺癌 热休克蛋白A2 侵袭转移
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精子成熟度与体外受精或胞浆内精子注射的选择:精子HspA2水平降低预测IVF失败
10
作者 王焕英 《国外医学(计划生育分册)》 2003年第1期62-63,共2页
HspA2是继肌酐激酶(CK)之后发现的另一个可能反映精子成熟不足的指标。在CK活性高的精子中HspA2水平降低。该项研究重新衡量了精子HspA2比率降低预测体外受精(IVF)失败的价值,并探索是否还存在其它可预测IVF妊娠结局的因素。 1993年1月... HspA2是继肌酐激酶(CK)之后发现的另一个可能反映精子成熟不足的指标。在CK活性高的精子中HspA2水平降低。该项研究重新衡量了精子HspA2比率降低预测体外受精(IVF)失败的价值,并探索是否还存在其它可预测IVF妊娠结局的因素。 1993年1月~1999年12月间,将精子HspA2比率<10%。 展开更多
关键词 精子成熟度 体外受精 胞浆内 精子注射 hspa2
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HSPA2与恶性肿瘤关系的研究进展
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作者 翟路路 汤志刚 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2021年第5期562-567,共6页
热休克蛋白A2(HSPA2)又名HSP70-2,是HSP70s家族的重要成员之一,最初在雄性生殖细胞中被发现,与精子的生成密切相关。随着研究的深入,越来越多的证据表明,HSPA2在人类多种恶性肿瘤中存在异常高表达,与肿瘤的恶性临床病理特征及不良预后... 热休克蛋白A2(HSPA2)又名HSP70-2,是HSP70s家族的重要成员之一,最初在雄性生殖细胞中被发现,与精子的生成密切相关。随着研究的深入,越来越多的证据表明,HSPA2在人类多种恶性肿瘤中存在异常高表达,与肿瘤的恶性临床病理特征及不良预后紧密关联,在癌细胞的增殖、凋亡、侵袭及迁移过程中扮演着极其重要的作用,是癌症靶向治疗的潜在分子靶标。肿瘤细胞内HSPA2基因的表达受到缺氧应激等多种因素的调控。本文对HSPA2与恶性肿瘤关系及其表达调控机制的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 热休克蛋白 hspa2 肿瘤 研究进展
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Effect of HSPB9 on Apoptosis of DF-1 Cells 被引量:1
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作者 XU Yong Jie HU Mei Ling +3 位作者 ZHOU Liang Hui WANG Qi ZHANG Xi Quan LUO Qing Bin 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2019年第2期107-120,共14页
Objective Our aim was to explore whether heat stress protein(HSP) 9 preferentially expresses under heat stress and affects the expression of other heat stress proteins as well as to explore the effect of HSPB9 overexp... Objective Our aim was to explore whether heat stress protein(HSP) 9 preferentially expresses under heat stress and affects the expression of other heat stress proteins as well as to explore the effect of HSPB9 overexpression and knockdown on apoptosis in DF-1. Methods We used gene cloning to construct an overexpression vector of the target gene, and synthesized the target gene interference fragment to transfect the chicken fibroblast cell line. Gene and protein expression, as well as apoptosis, were detected by RT-qPCR, Western blot, and flow cytometry. Results Chicken DF-1 cells showed an early state of apoptosis in the early stages of HSPB9 overexpression. In the later stages, as HSPB9 expression increased, the cells showed inhibition of apoptosis. When the cells were under heat stress, HSPB9 expression was much higher and earlier than the expression of HSPB1 and HSPA2. In addition, high expression of HSPB9 had a negative effect on HSPB1 and HSPA2 expression. This negative feedback decreased the percentage of early stages of apoptotic cells and promoted cell survival. Conclusion HSPB9 expression, although rapid, is detrimental to cell survival early during its overexpression. In heat stress, HSPB9 overexpression, while inhibiting the expression of HSPA2 and HSPB1, is beneficial to cell survival. 展开更多
关键词 HEAT STRESS HSPB9 HSPB1 hspa2 APOPTOSIS
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