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基于生物合成途径的Holoferritin高效制备工艺优化及其结构表征
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作者 虎梦吉 凌耀 +2 位作者 谭晓怡 张宇昊 陈海 《食品与发酵工业》 北大核心 2026年第4期77-83,共7页
Holoferritin富含丰富的铁元素,被认为是优良的潜在补铁因子,然而,其制备过程存在工艺繁杂、损失率高等问题,该研究基于铁离子胁迫诱导微生物细胞生物合成Holoferritin体系,优化并建立了Holoferritin高效制备的工艺,并探讨该工艺对Holof... Holoferritin富含丰富的铁元素,被认为是优良的潜在补铁因子,然而,其制备过程存在工艺繁杂、损失率高等问题,该研究基于铁离子胁迫诱导微生物细胞生物合成Holoferritin体系,优化并建立了Holoferritin高效制备的工艺,并探讨该工艺对Holoferritin结构、性质的影响。琼脂糖凝胶电泳、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,0.005%核酸酶处理即可有效去除宿主核酸残留,联合加热处理和硫酸铵沉淀处理,即可高效制备高纯度Holoferritin。通过紫外光谱、圆二色谱、傅里叶变换红外光谱、马尔文粒度仪、透射电子显微镜等方法表征Holoferritin的结构,发现该纯化工艺能够维持Holoferritin天然的铁蛋白纳米笼-铁芯完整构象和典型的α-螺旋二级结构。此外,该工艺能够在保证Holoferritin结构完整性的前提下,将蛋白纯化周期由72 h缩短至48 h,为Holoferritin的规模化制备和其在生物医药、食品等领域的应用提供了可靠的技术支撑。 展开更多
关键词 核酸酶 holoferritin 核酸残留 生物合成 蛋白结构
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铁蛋白脱铁机制的建立及脱铁前后光谱变化的研究 被引量：2
2
作者 刘文营 张建 +1 位作者 童军茂 赵广华 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第9期2552-2554,共3页
建立了一套可以实现铁蛋白脱铁的机制并对脱铁前后铁蛋白的光谱进行了分析。应用连二亚硫酸钠(Sodium Hyposulfite)为还原剂与铁蛋白发生还原反应,促使铁蛋白矿化铁的还原释放,此过程中使用2,2-联吡啶(2,2-Dipyridyl)实时监测脱铁状况... 建立了一套可以实现铁蛋白脱铁的机制并对脱铁前后铁蛋白的光谱进行了分析。应用连二亚硫酸钠(Sodium Hyposulfite)为还原剂与铁蛋白发生还原反应,促使铁蛋白矿化铁的还原释放,此过程中使用2,2-联吡啶(2,2-Dipyridyl)实时监测脱铁状况。通过ICP-MS检测显示,脱铁铁蛋白制备成功。紫外分析结果表明铁蛋白在脱铁之前没有吸收峰,而在脱铁后在280 nm处具有明显的吸收峰。荧光分析结果表明,铁蛋白脱铁前没有荧光发射光谱,而在脱铁后则具有荧光发射光谱。 展开更多
关键词 铁蛋白 脱铁铁蛋白 ICP-MS 荧光光谱 紫外光谱
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