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心肌梗死进程中巨噬细胞时间特异性分子表达模式的动态变化 被引量：1
1
作者 吴懋 孙佳 +1 位作者 周挺 牛超 《温州医科大学学报》 2025年第4期259-266,共8页
目的:探究小鼠心肌梗死(MI)后巨噬细胞随疾病进展的时间特异性分子表达模式。方法:构建MI动物模型,设5组:假手术组、MI组(3、7、14 d)、MI+anti-OPN组。HE染色评估心脏组织的炎症水平;马松染色评估心脏纤维化程度;心脏超声检测心功能变... 目的:探究小鼠心肌梗死(MI)后巨噬细胞随疾病进展的时间特异性分子表达模式。方法:构建MI动物模型,设5组:假手术组、MI组(3、7、14 d)、MI+anti-OPN组。HE染色评估心脏组织的炎症水平;马松染色评估心脏纤维化程度;心脏超声检测心功能变化。在单细胞水平上,采用CN(Cluster Network)单细胞差异基因分析探究巨噬亚群的差异表达特征,并通过免疫荧光染色(IF)验证巨噬亚群的时空特异性。结果:HE染色结果表明,与假手术组比,MI早期(MI 3 d)以炎症反应为主,而晚期(MI 7 d和14 d)则逐渐转向纤维化修复过程。单细胞RNA测序(scRNA-seq)鉴定出13个异质性巨噬亚群,这些亚群在MI进程中表现出显著的动态演变。其中,Spp1^(hi)Mac和Fn1^(hi)Mac分别作为MI 3 d(炎症期)和14 d(纤维化期)的关键浸润亚群,其时空特异性分布特征通过IF染色得到验证。给予OPN中和抗体(Spp1)干预后,Spp1^(hi)Mac数量减少,心脏超声结果显示,与MI组(3 d)相比,MI+anti-OPN组左心室射血分数和左心室短轴缩短率升高(P<0.05)。结论:巨噬亚群在MI进程中表现出显著的动态演变,其中Spp1^(hi)Mac和Fn1^(hi)Mac分别作为MI 3 d和14 d的关键浸润亚群,在调控白细胞外渗过程和心脏重构机制中发挥重要作用。通过OPN中和抗体干预可特异性减少Spp1^(hi)Mac的数量,从而显著改善心功能。 展开更多
关键词 心肌梗死 巨噬细胞 Spp1^(hi)Mac 单细胞RNA测序
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假定调控蛋白STM14_3514可降低鼠伤寒沙门菌对上皮细胞的侵袭力 被引量：2
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作者 蒋玲艳 周启星 +2 位作者 王培胜 江小涵 冯露 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期500-512,共13页
【目的】研究鼠伤寒沙门菌致病岛1(SPI-1)内部的假定调控蛋白STM14_3514的功能及其作用机制。【方法】以鼠伤寒沙门菌模式菌株ATCC 14028为亲本株,构建了STM14_3514基因的缺失突变体及互补菌株,通过小鼠实验、细胞侵袭实验、Western blo... 【目的】研究鼠伤寒沙门菌致病岛1(SPI-1)内部的假定调控蛋白STM14_3514的功能及其作用机制。【方法】以鼠伤寒沙门菌模式菌株ATCC 14028为亲本株,构建了STM14_3514基因的缺失突变体及互补菌株,通过小鼠实验、细胞侵袭实验、Western blot及实时荧光定量PCR(q RT-PCR)等实验技术,深入研究了STM14_3514基因对鼠伤寒沙门菌致病过程的影响。【结果】STM14_3514突变提高了细菌对小鼠的致病能力,突变体在小鼠肠道、肝和脾中的定殖能力均增强;细胞实验揭示,突变体致病力提升主要由于STM14_3514突变能显著增强细菌对上皮细胞的侵袭力(>2倍,P<0.05)。q RT-PCR及Western blot分析表明,STM14_3514显著抑制SPI-1内部主要调控因子hil A及侵袭相关基因的表达。此外,STM14_3514对hil A的抑制由Hil C介导。【结论】STM14_3514是鼠伤寒沙门菌SPI-1内部的负调控因子,能通过Hil C抑制hil A及SPI-1其他入侵基因的表达,该基因的生物学意义可能与细菌进入细胞后对SPI-1的负调控相关。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 STM14_3514 侵袭力 hi1a Hi1C
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