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小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞系HCa-P/L_6细胞模型的建立及其药物敏感性的评价 被引量:2
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作者 张宏颖 唐建武 +2 位作者 朱文婷 胡春秀 许国旺 《大连医科大学学报》 CAS 2008年第4期297-304,共8页
[目的]建立小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞系HCa-P/L6细胞模型并应用姜黄素对该模型的药物敏感性进行评价。[方法]将小鼠腹水型肝癌淋巴道低转移细胞株(HCa-P)经615小鼠腹中线皮下接种的方法获得淋巴结转移瘤1代细胞HCa-P/L1,再经小... [目的]建立小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞系HCa-P/L6细胞模型并应用姜黄素对该模型的药物敏感性进行评价。[方法]将小鼠腹水型肝癌淋巴道低转移细胞株(HCa-P)经615小鼠腹中线皮下接种的方法获得淋巴结转移瘤1代细胞HCa-P/L1,再经小鼠淋巴系统筛选5次,筛选高转移细胞系HCa-P/L6。用15~240μmol·L^-1姜黄素(Curcumin,Cur)分别处理人肝癌细胞系(SMC7721和HepG2)和小鼠腹水型肝癌细胞(HCa-P/L6和HCa-P)48h,以MTT法考察4种细胞的药物敏感性。以非细胞毒性最大剂量Cur作用于HCa-P/L6和HCa-P,以生长曲线和群体倍增时间评估药物对细胞生长的影响,以流式细胞仪检 测药物对细胞周期分布的影响,考察两株小鼠腹水型肝癌细胞与姜黄素作用敏感性的差异。[结果]从HCa-P中筛选出具有多部位转移特性的淋巴道高转移细胞系HCa-P/L6,转移率为100%。Cur明显抑制小鼠腹水型肝癌和人肝癌细胞的增殖,并呈 剂量依赖性(方差分析P〈0.05)。在30~120μmol·L^-1,Cur对小鼠肝癌的抑制作用强于对人肝癌的抑制作用;在60~240μmol·L^-1范围内,Cur对HCa-P/L6的抑制作用强于对HCa-P。在非细胞毒性最大剂量15μmol·L^-1 Cur作用下,HCa-P/L6和HCa-P的生长受到抑制(t检验P〈0.05),并且呈时间依赖性(方差分析P〈0.01),HCa-P/L6和HCa-P的群体倍增时间延长(卡方检验P〈0.01),Cur对HCa-P/L6的抑制作用大于对HCa-P;细胞周期被重新分布,HCa-P/L6被阻滞在S期,HCa-P被阻滞于S期和G2/M期。[结论]从HCa-P中筛选出了淋巴道高转移细胞系HCa-P/L6。小鼠腹水型肝癌比人肝癌对姜黄素作用敏感,而且高转移细胞株系HCa-P/L6较低转移细胞株HCa-P对Cur更为敏感。HCa-P/L6为肿瘤淋巴道转移机制和中药活性成分筛选的研究提供了一个新的敏感模型。 展开更多
关键词 hca-p hca-p/L6细胞模型 姜黄素 细胞周期
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L-选择蛋白在小鼠肝癌细胞高低转移株HCa-F、HCa-P的表达及与肿瘤转移潜能的相关性 被引量:9
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作者 刘敏 朱杰 +1 位作者 杨佩满 张嘉宁 《解剖科学进展》 CAS 2003年第2期100-104,共5页
目的 探讨经淋巴道转移的小鼠肝癌细胞高低转移株HCa F、HCa P淋巴道转移能力及与淋巴细胞归巢受体L 选择蛋白的相关性。方法 应用免疫印迹分析、RT PCR及流式细胞术检测小鼠肝癌HCa F、HCa P细胞表面L 选择蛋白的表达情况 ,再通过E ... 目的 探讨经淋巴道转移的小鼠肝癌细胞高低转移株HCa F、HCa P淋巴道转移能力及与淋巴细胞归巢受体L 选择蛋白的相关性。方法 应用免疫印迹分析、RT PCR及流式细胞术检测小鼠肝癌HCa F、HCa P细胞表面L 选择蛋白的表达情况 ,再通过E 、P 、L 选择蛋白的抗体对细胞粘附实验的影响检测HCa F、HCa P细胞淋巴道转移潜能与L 选择蛋白的相关性。结果 L 选择蛋白在HCa F、HCa P细胞表面均有表达 ,且HCa F细胞的表达量明显高于HCa P细胞 (P <0 .0 1) ,HCa F细胞与淋巴结之间的粘附可被抗L 选择蛋白的抗体所阻断。结论 小鼠肝癌细胞高低转移株HCa F、HCa P细胞均表达L 选择蛋白 。 展开更多
关键词 L-选择蛋白 小鼠 肝癌 肿瘤转移 相关性 免疫印迹分析 RT-PCR 流式细胞术
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应用表达芯片筛选小鼠肝癌淋巴道转移相关基因 被引量:2
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作者 宋波 王波 +5 位作者 崔晓楠 侯力 周春辉 郑仁恕 李晓枫 唐建武 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期701-706,共6页
目的采用表达芯片比较高、低淋巴道转移力小鼠肝癌腹水型细胞株Hca-F和Hca-P的基因表达谱,以筛选出与肿瘤淋巴道转移相关的基因。方法分别提取Hca-F和Hca-P细胞的总RNA,反转录合成生物素标记的cRNA探针,并与A ffy-m etrix GeneCh ip MOE... 目的采用表达芯片比较高、低淋巴道转移力小鼠肝癌腹水型细胞株Hca-F和Hca-P的基因表达谱,以筛选出与肿瘤淋巴道转移相关的基因。方法分别提取Hca-F和Hca-P细胞的总RNA,反转录合成生物素标记的cRNA探针,并与A ffy-m etrix GeneCh ip MOE430A(包括22 690个转录本,对应于约14 500个小鼠已知基因和4 371个EST)杂交,检测结果利用生物信息学进行分析。结果Hca-F和Hca-P相比,在14 500个已知基因中,有901个(6.2%)表达上调幅度≥2倍;在4 371个EST中,有129个(3%)上调幅度≥2倍。公布了差异表达≥8倍的37个基因并根据Gene Ontology(GO)分类和TreeV iew分析,按照其参与的生物学过程和具有的分子功能进行了功能分类。其中有19个基因参与了组织发生、细胞黏附、信号转导、细胞生长、分化及代谢等的生物学过程,29个基因分别具有转运、移动、蛋白激酶、蛋白结合及受体活性等分子功能,7个基因的生物学功能尚不清楚。结论表达芯片检测与肿瘤淋巴道转移模型相结合,为肿瘤转移研究提供新方法、新思路,一些过量表达的基因将为肿瘤转移机制的研究提供新线索。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肿瘤转移 Hca—F Hca—P 基因芯片 小鼠
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Identify lymphatic metastasis-associated genes in mouse hepatocarcinoma cell lines using gene chip 被引量:19
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作者 BoSong Jian-WuTang +10 位作者 BoWang Xiao-NanCui LiHou LuSun Li-MinMao Chun-HuiZhou YueDu Li-HuiWang Hua-XinWang Ren-ShuZheng LeiSun 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第10期1463-1472,共10页
AIM: In order to obtain lymphogenous metastasisassociated genes, we compared the transcriptional profiles of mouse hepatocarcinoma cell lines Hca-F with highly lymphatic metastasis potential and Hca-P with low lymphat... AIM: In order to obtain lymphogenous metastasisassociated genes, we compared the transcriptional profiles of mouse hepatocarcinoma cell lines Hca-F with highly lymphatic metastasis potential and Hca-P with low lymphatic metastasis potential.METHODS: Total RNA was isolated from Hca-F and Hca-P cells and synthesized into double-stranded cDNA. In vitro transcription double-stranded cDNA was labeled with biotin (i.e. biotin-labeled cRNA, used as the probe). The cRNA probes hybridized with Affymetrix GeneChip() MOE430A (containing 22 690 transcripts, including 14 500 known mouse genes and 4 371 ESTs) respectively and the signals were scanned by the GeneArray Scanner. The results were then analyzed by bioinformatics.RESULTS: Out of the 14 500 known genes investigated,110 (0.8%) were up regulated at least 23 fold. Among the total 4 371 ESTs, 17 ESTs (0.4%) (data were not presented) were up regulated at least 23 fold. According to the Gene Ontology and TreeView analysis, the 110genes were further classified into two groups: differential biological process profile and molecular function profile.CONCLUSION: Using high-throughput gene chip method,a large number of genes and their cellular functions about angiogenesis, cell adhesion, signal transduction, cell motility, transport, microtubule-based process, cytoskeleton organization and biogenesis, cell cycle, transcription,chaperone activity, motor activity, protein kinase activity,receptor binding and protein binding might be involved in the process of lymphatic metastasis and deserve to be used as potential candidates for further investigation.Cyclin D1, Fosl1, Hsp47, EGFR and AR, and Cav-1 are selected as the possible candidate genes of the metastatic phenotype, which need to be validated in later experiments.ESTs (data were not presented) might indicate novel genes associated with lymphatic metastasis. Validating the function of these genes is helpful to identify the key or candidate gene/pathway responsible for lymphatic metastasis, which might be used as the diagnostic markers and the therapeutic targets for lymphatic metastasis. 展开更多
关键词 HEPATOCARCINOMA Lymphatic metastasis Cell lines Hca-F and hca-p Gene chip
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小鼠转移性肝癌细胞系基因组不稳定性的比较研究
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作者 张树辉 丛文铭 +1 位作者 史景泉 魏泓 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期448-451,共4页
目的 观察小鼠高、低转移性肝癌细胞系Hca/16A3-F(F)和Hca/A2-P(P)发生基因组不稳定性的情况,探讨它们与肝癌发生及转移之间的关系。方法 随机选择42个微卫星多态标记,采用聚合酶链式反应-简单重复序列多态性(SSLP)法对F和P细胞进行... 目的 观察小鼠高、低转移性肝癌细胞系Hca/16A3-F(F)和Hca/A2-P(P)发生基因组不稳定性的情况,探讨它们与肝癌发生及转移之间的关系。方法 随机选择42个微卫星多态标记,采用聚合酶链式反应-简单重复序列多态性(SSLP)法对F和P细胞进行分析。结果 小鼠高、低转移性肝癌细胞系的微卫星基因座表型与近交系C3H小鼠等位基因相比,在P细胞有30个基因座与近交系C3H小鼠相同,8个基因座丢失等位基因,5个基因座出现额外条带,4个基因座发生带移位。F细胞有28个微卫星基因座与近交系C3H相同,12个基因座发生等位基因丢失,4个基因座出现额外条带,1个基因座发生带移位。P和F细胞的等位基因条带存在明显差异。结论 小鼠高、低转移性肝癌细胞系存在基因组不稳定性,并在小鼠肝癌的发生发展中起重要作用,源自纯合性小鼠的一个肿瘤的两个亚克隆细胞系存在不同的遗传学特征。 展开更多
关键词 肝肿瘤 小鼠 近交C3H 微卫星DNA 基因组不稳定性 Hca/16A3-F细胞 Hca/A2-P细胞
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小鼠腹水型肝癌高低转移细胞株DARS2蛋白表达的差异 被引量:2
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作者 吴学标 胡军 +1 位作者 宋阳 宫琳琳 《大连医科大学学报》 CAS 2011年第6期533-535,共3页
[目的]研究具有高、低转移潜能的小鼠腹水型肝癌细胞株Hca-F与Hca-P中线粒体的天门冬氨酰转移核糖核酸合成酶(DARS2)蛋白表达的差异。[方法]将Hca-F细胞与Hca-P细胞分别接种于615小鼠腹腔,抽取腹水,培养后收集细胞;用免疫印迹分析及免... [目的]研究具有高、低转移潜能的小鼠腹水型肝癌细胞株Hca-F与Hca-P中线粒体的天门冬氨酰转移核糖核酸合成酶(DARS2)蛋白表达的差异。[方法]将Hca-F细胞与Hca-P细胞分别接种于615小鼠腹腔,抽取腹水,培养后收集细胞;用免疫印迹分析及免疫细胞化学方法检测Hca-F与Hca-P细胞的DARS2蛋白表达。[结果]DARS2在高转移细胞株Hca-F与低转移细胞株Hca-P表达量分别为(0.219±0.016)与(0.473±0.043),二者比较差异有显著性意义(P=0.01)。[结论]DARS2蛋白表达降低可能与小鼠肝癌转移相关。 展开更多
关键词 DARS2蛋白 Hca—F细胞株 Hca—P细胞株 转移
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