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新型肝癌相关性抗原HCA519及其变异体HCA90的基因克隆和表达 被引量：4
1
作者 王歈 韩克军 +1 位作者 屈伟 陈慰峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期46-52,共7页
通过利用肝癌病人体内血清中所含的对肿瘤抗原产生的特异性抗体筛选肝癌组织cDNA表达文库的方法 (SEREX) ,筛选得到了可以诱导肝癌病人抗体免疫应答的两个新抗原HCA5 19基因(GenBankAF14 6 731)及其变异体HCA90基因 (GenBankAF 2 872 6 ... 通过利用肝癌病人体内血清中所含的对肿瘤抗原产生的特异性抗体筛选肝癌组织cDNA表达文库的方法 (SEREX) ,筛选得到了可以诱导肝癌病人抗体免疫应答的两个新抗原HCA5 19基因(GenBankAF14 6 731)及其变异体HCA90基因 (GenBankAF 2 872 6 5 ) .它们定位于染色体 2 0q11 2 ,HCA5 19含 18个外显子 ,HCA90含 19个外显子 .其中HCA90所特有的外显子序列长 10 8bp ,属Alu重复序列片段 ,插入于HCA5 19外显子 10和 11之间 ,原为HCA5 19内含子序列 .该插入片段位于HCA5 19开放阅读框架之内 ,不改变HCA5 19的读码框 ,使HCA5 19编码的 74 7个氨基酸增长至HCA90的 783个氨基酸 .通过Northern杂交和RT PCR分析发现 ,HCA5 19和HCA90基因分别在 9 9例和 6 9例肝癌组织中高表达 ,RT PCR显示 ,它们在正常肝组织和其它正常组织中有极低水平转录本表达 .而这种低表达转录本在Northern杂交中不能被检测到 .HCA5 19蛋白被首次发现在肿瘤病人中能够诱导机体的抗体免疫应答 ,为一个新的肿瘤相关性抗原分子 .其变异体HCA90抗原基因为首次发现的新基因 .其功能可能与细胞的恶性增殖相关 。 展开更多
关键词 肝细胞癌 hca519 hca90 SEREX 基因克隆 基因表达
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PPy/Hca修饰电极的制备及其电化学传感性能
2
作者 彭涛 黄怡萱 +1 位作者 王珍高 姚梓锋 《广东化工》 2025年第10期1-3,10,共4页
通过电化学法在钛片表面制备了纳米锥结构的聚吡咯/高磺基丙氨酸(PPy/Hca)复合涂层,用于构建电化学传感器,以实现对葡萄糖的电化学检测。利用扫描电子显微镜(SEM)、全反射傅立叶变换红外光谱(FTIR)、X射线光电子能谱仪(XPS)表征其表面... 通过电化学法在钛片表面制备了纳米锥结构的聚吡咯/高磺基丙氨酸(PPy/Hca)复合涂层,用于构建电化学传感器,以实现对葡萄糖的电化学检测。利用扫描电子显微镜(SEM)、全反射傅立叶变换红外光谱(FTIR)、X射线光电子能谱仪(XPS)表征其表面形貌与化学成分,通过循环伏安(CV)、电化学交流阻抗(EIS)分析其电化学性能,通过计时电流曲线(I-t)研究其在修饰电极上的电化学行为。结果表明:通过电化学法,吡咯和高磺基丙氨酸在钛片表面发生电化学聚合,生成PPy/Hca复合涂层,PPy/Hca涂层具有纳米锥结构;用其组装的修饰电极具有良好的导电性和优异的电催化性能,对低浓度(0.1 mmol/L)的葡萄糖能够快速响应,表现出较好的电化学响应性能。 展开更多
关键词 聚吡咯(PPy) 高磺基丙氨酸(hca) 纳米锥 葡萄糖 电化学传感器
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小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞系HCa-P/L_6细胞模型的建立及其药物敏感性的评价 被引量：2
3
作者 张宏颖 唐建武 +2 位作者 朱文婷 胡春秀 许国旺 《大连医科大学学报》 CAS 2008年第4期297-304,共8页
[目的]建立小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞系HCa-P/L6细胞模型并应用姜黄素对该模型的药物敏感性进行评价。[方法]将小鼠腹水型肝癌淋巴道低转移细胞株（HCa-P）经615小鼠腹中线皮下接种的方法获得淋巴结转移瘤1代细胞HCa-P/L1,再经小... [目的]建立小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞系HCa-P/L6细胞模型并应用姜黄素对该模型的药物敏感性进行评价。[方法]将小鼠腹水型肝癌淋巴道低转移细胞株（HCa-P）经615小鼠腹中线皮下接种的方法获得淋巴结转移瘤1代细胞HCa-P/L1,再经小鼠淋巴系统筛选5次,筛选高转移细胞系HCa-P/L6。用15～240μmol·L^-1姜黄素（Curcumin,Cur）分别处理人肝癌细胞系（SMC7721和HepG2）和小鼠腹水型肝癌细胞（HCa-P/L6和HCa-P）48h,以MTT法考察4种细胞的药物敏感性。以非细胞毒性最大剂量Cur作用于HCa-P/L6和HCa-P,以生长曲线和群体倍增时间评估药物对细胞生长的影响,以流式细胞仪检 测药物对细胞周期分布的影响,考察两株小鼠腹水型肝癌细胞与姜黄素作用敏感性的差异。[结果]从HCa-P中筛选出具有多部位转移特性的淋巴道高转移细胞系HCa-P/L6,转移率为100%。Cur明显抑制小鼠腹水型肝癌和人肝癌细胞的增殖,并呈 剂量依赖性（方差分析P〈0.05）。在30～120μmol·L^-1,Cur对小鼠肝癌的抑制作用强于对人肝癌的抑制作用;在60～240μmol·L^-1范围内,Cur对HCa-P/L6的抑制作用强于对HCa-P。在非细胞毒性最大剂量15μmol·L^-1 Cur作用下,HCa-P/L6和HCa-P的生长受到抑制（t检验P〈0.05）,并且呈时间依赖性（方差分析P〈0.01）,HCa-P/L6和HCa-P的群体倍增时间延长（卡方检验P〈0.01）,Cur对HCa-P/L6的抑制作用大于对HCa-P;细胞周期被重新分布,HCa-P/L6被阻滞在S期,HCa-P被阻滞于S期和G2/M期。[结论]从HCa-P中筛选出了淋巴道高转移细胞系HCa-P/L6。小鼠腹水型肝癌比人肝癌对姜黄素作用敏感,而且高转移细胞株系HCa-P/L6较低转移细胞株HCa-P对Cur更为敏感。HCa-P/L6为肿瘤淋巴道转移机制和中药活性成分筛选的研究提供了一个新的敏感模型。 展开更多
关键词 hca-P hca-P/L6细胞模型 姜黄素 细胞周期
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空心圆柱仪(HCA)模拟恒定围压下主应力轴循环旋转应力路径能力分析 被引量：28
4
作者 沈扬 周建 龚晓南 《岩土工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第3期281-287,共7页
针对国际上大多数HCA仪在主应力轴循环旋转试验中只能提供轴力和扭矩两个加载变量的现状,指出了这种变载方式在模拟主应力轴循环旋转应力路径方面存在的局限性。通过详细的数学推导提出了三种切实可行,且能模拟实际工程中土体经历主应... 针对国际上大多数HCA仪在主应力轴循环旋转试验中只能提供轴力和扭矩两个加载变量的现状,指出了这种变载方式在模拟主应力轴循环旋转应力路径方面存在的局限性。通过详细的数学推导提出了三种切实可行,且能模拟实际工程中土体经历主应力轴循环旋转的应力加载方式:①在满足轴力W等于3πrori(pi-po)的前提下,仅变化扭矩MT可实现围压p不变,中主应力参数b恒定(0.5),而剪应力q随大主应力轴转角α有规律循环变化的应力路径;②在保持b不变的前提下(此时b可以设定为不等于0.5的任意合理值),只要W和MT能满足一定的三角函数关系式,同时以p—q形式的临界状态线为准绳,通过控制轴力的加载范围限制试验中允许出现的q的峰值,就可以实现p、q之间保持恒定线性关系而α有规律循环变化的应力路径;③若不考虑中主应力对于土体性状影响,则可通过对W和MT采用较为简单的三角函数关系来实现保持q不变,而(σ1+σ3)/2随α单调递减的应力变化方式。研究成果不仅给后继的试验方案提供了理论基础,也为HCA仪器功能的完善提供了很好的依据。 展开更多
关键词 主应力轴循环旋转 试验研究 hca仪 应力路径
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姜黄素对小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移细胞株(HCa-F)生物学行为的影响 被引量：13
5
作者 张宏颖 刘春平 +1 位作者 唐建武 许国旺 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1663-1667,共5页
目的研究姜黄素对小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移细胞株(HCa-F)生长和转移行为的影响.方法体外实验中用15～250 μmol/L姜黄素分别处理HCa-F细胞48 h,以MTT法检测HCa-F细胞的生长活性;以生长曲线评估姜黄素对细胞增殖的影响;以流式细胞仪... 目的研究姜黄素对小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移细胞株(HCa-F)生长和转移行为的影响.方法体外实验中用15～250 μmol/L姜黄素分别处理HCa-F细胞48 h,以MTT法检测HCa-F细胞的生长活性;以生长曲线评估姜黄素对细胞增殖的影响;以流式细胞仪检测姜黄素对细胞周期分布的影响.体内实验中,于615小鼠腹腔、足垫接种HCa-F细胞,通过ip给药的方法,观察姜黄素对腹腔接种HCa-F细胞的615小鼠生存率的影响和对HCa-F细胞在615小鼠淋巴道转移的影响.结果姜黄素可抑制HCa-F细胞的生长,对HCa-F细胞生长抑制率为7.23%～82.23%,呈剂量依赖性,IC50为51.48 μmol/L.以非细胞毒性最大剂量15 μmol/L姜黄素作用48 h后,HCa-F细胞的群体倍增时间增加,生长速度受到抑制,细胞周期被重新分布,阻滞于S期.姜黄素ip给药50mg/kg抑制小鼠腹水瘤的生长,延长荷瘤小鼠的生存期,使瘤细胞淋巴道转移率从70%下降到40%.结论姜黄素可抑制小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移细胞株(HCa-F)的增殖与转移. 展开更多
关键词 姜黄素 小鼠腹水型肝癌细胞株(hca—F) 转移
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肿瘤相关抗原基因HCA520重组蛋白的表达纯化及其肝癌患者血清中相应抗体的分析 被引量：7
6
作者 韩克军 杨美香 +2 位作者 王歈 李燕 陈慰峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期31-35,共5页
HCA5 2 0是用SEREX(serologicalidentificationofrecombinantcDNAexpressingcloning)方法 ,即用肝癌病人血清从肝癌组织cDNA表达文库中筛选得到的肝癌相关性抗原编码基因 .利用RT PCR技术检测了HCA5 2 0mRNA在各种组织中的分布情况 ,构... HCA5 2 0是用SEREX(serologicalidentificationofrecombinantcDNAexpressingcloning)方法 ,即用肝癌病人血清从肝癌组织cDNA表达文库中筛选得到的肝癌相关性抗原编码基因 .利用RT PCR技术检测了HCA5 2 0mRNA在各种组织中的分布情况 ,构建了GST融合表达载体并且用亲和层析的方法纯化表达的融合蛋白 .最后用Western印迹检测了重组蛋白的免疫反应性 ,用斑点印迹检测了肝癌病人血清中HCA5 2 0的天然抗体的存在情况 .结果表明 ,HCA5 2 0在各种组织中呈丰度差异分布 ,构建好的pGEX 4T 3重组载体经IPTG诱导后高效表达GST HCA5 2 0融合蛋白 ,其分子量约 4 9kD .经GST Agarose亲和层析 ,重组蛋白得到高度纯化 .Western印迹证实 ,纯化蛋白为目的重组蛋白 ,重组蛋白具有与天然蛋白相同或相似的免疫反应性 .斑点印迹分析表明 ,2 0份肝癌病人血清中有 1份HCA5 2 0抗体阳性 ,而 4份正常人均为阴性 .HCA5 2 0的足量提供 ,可用以研究其在致癌中的作用 ,并可以免疫动物制备抗体 .它作为抗原 ,分析其抗体在不同肿瘤病人中的表达情况 。 展开更多
关键词 hca520 肿瘤相关性抗原 重组融合蛋白 免疫反应性
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大鼠脑皮质星形胶质细胞的原代培养、纯化及采用HCA技术进行GFAP鉴定 被引量：15
7
作者 刘检 王宇红 +2 位作者 徐雅岚 杨蕙 李薇 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期581-587,共7页
目的探索大鼠脑皮质星形胶质细胞(astrocyte,AS)的分离、原代培养及纯化方法,采用高内涵细胞成像分析技术(high content analysis,HCA)对其进行胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)鉴定。方法取2、3 d的新生SD大鼠... 目的探索大鼠脑皮质星形胶质细胞(astrocyte,AS)的分离、原代培养及纯化方法,采用高内涵细胞成像分析技术(high content analysis,HCA)对其进行胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)鉴定。方法取2、3 d的新生SD大鼠,体视显微镜下获取大脑皮质,机械分离成1 mm3组织碎块,采用质量分数为0.25%的胰蛋白酶和0.2%的胶原酶(体积比为1∶1)消化后进行体外培养,分别观察接种1 h、3 d、5 d后原代AS基本形态结构,酶消化3 min后,接种30 min,5 d后传代AS基本形态结构;采用多次、多阶段的差速贴壁和震荡相结合的方法纯化细胞;采用HCA技术对AS进行GFAP免疫细胞化学鉴定。结果采用本法培养的大鼠脑皮质星形胶质细胞,数量多、活性佳、纯度高,胞突丰富且细长,并相互交织成网,呈现典型而良好的生长状态;经本法纯化后的星形胶质细胞,细胞纯度明显提高;经HCA技术进行GFAP鉴定,AS纯度质量分数达98%以上,且图片质量佳。结论建立了一种大鼠脑皮质星形胶质细胞原代培养及纯化方法,采用高内涵细胞成像分析技术进行GFAP鉴定的图片质量明显优于传统方法,该技术值得推广和应用。 展开更多
关键词 脑皮质 星形胶质细胞 原代培养 纯化 高内涵细胞成像分析技术(hca) 鉴定 胶质纤维酸性蛋白(GFAP)
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L-选择蛋白可能介导小鼠肝癌HCa-F细胞经淋巴道转移的研究 被引量：18
8
作者 刘敏 王莉芬 +2 位作者 朱杰 杨佩满 张嘉宁 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期502-508,共7页
目的　观察L 选择蛋白是否介导小鼠肝癌HCa F细胞与淋巴结黏附 ,探讨HCa F细胞特异性向周围淋巴结转移的分子机制。　方法　应用免疫细胞化学方法验证小鼠肝癌HCa F细胞为非淋巴细胞来源 ;用免疫印迹分析、RT PCR及流式细胞术检测L 选... 目的　观察L 选择蛋白是否介导小鼠肝癌HCa F细胞与淋巴结黏附 ,探讨HCa F细胞特异性向周围淋巴结转移的分子机制。　方法　应用免疫细胞化学方法验证小鼠肝癌HCa F细胞为非淋巴细胞来源 ;用免疫印迹分析、RT PCR及流式细胞术检测L 选择蛋白在HCa F细胞的表达 ;并用L 选择蛋白的抗体抑制HCa F细胞与冰冻淋巴结切片间的黏附实验 (Stamper Woodruffmethod)检测L 选择蛋白的功能。　结果　HCa F细胞为非淋巴细胞来源的肝癌细胞 ,在其表面有L 选择蛋白的表达 ,且HCa F细胞与淋巴结之间的黏附可被L 选择蛋白的抗体抑制。结论　非淋巴细胞来源的HCa F细胞表面表达功能性L 选择蛋白分子 ,并可协助其与淋巴结黏附 ,从而可能介导HCa F细胞向淋巴道转移。 展开更多
关键词 L-选择蛋白 肿瘤转移 hca-F细胞 615小鼠
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榄香烯诱导肝癌腹水瘤细胞系Hca-F_(25)/CL-16A_3凋亡的实验研究 被引量：22
9
作者 左云飞 魏巍 +4 位作者 张耀铮 唐永伟 鲁颖 张红 张立秋 《中药药理与临床》 CAS CSCD 1998年第2期20-22,共3页
研究了榄香烯诱导肝癌腹水瘤细胞系ＨｃａＦ２５／ＣＬ１６Ａ３凋亡的作用。结果表明：凋亡抑制基因ｂｃｌ２在对照组呈高度表达，榄香烯作用后，可使强表达ｂｃｌ２细胞数显著减少（Ｐ＜０．０１）；ＤＮＡ凝胶电泳结果表明榄... 研究了榄香烯诱导肝癌腹水瘤细胞系ＨｃａＦ２５／ＣＬ１６Ａ３凋亡的作用。结果表明：凋亡抑制基因ｂｃｌ２在对照组呈高度表达，榄香烯作用后，可使强表达ｂｃｌ２细胞数显著减少（Ｐ＜０．０１）；ＤＮＡ凝胶电泳结果表明榄香烯可使ＨｃａＦ２５／ＣＬ１６Ａ３ＤＮＡ出现凋亡特征（呈慧星状或梯形条带）。提示榄香烯可能通过使ＤＮＡ断裂及抑制ｂｃｌ２表达而诱导该细胞株凋亡，榄香烯诱导细胞凋亡可能是其抗肿瘤作用机制的重要方面之一。 展开更多
关键词 榄香烯 细胞凋亡 BCL-2 免疫组化 肝癌腹水瘤细胞系hca-F25/CL-16A3 抗肿瘤作用
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改良HCA肾保存液对肾脏低温保存效果的动物实验研究 被引量：7
10
作者 鲁可权 朱有华 +2 位作者 张纯 王亚伟 杨军昌 《山东医药》 CAS 北大核心 2004年第29期7-9,共3页
目的 探讨改良高渗枸橼酸盐嘌呤肾保存液(HCA)对离体肾脏的低温保存效果。方法 将36只雄性草犬随机分为6组,分别用改良HCA(mHCA)液、UW液(University Wiscosin器官保存液)、HCA液对其离体肾脏进行保存,并于24、48小时后观察肾脏皮质线... 目的 探讨改良高渗枸橼酸盐嘌呤肾保存液(HCA)对离体肾脏的低温保存效果。方法 将36只雄性草犬随机分为6组,分别用改良HCA(mHCA)液、UW液(University Wiscosin器官保存液)、HCA液对其离体肾脏进行保存,并于24、48小时后观察肾脏皮质线粒体呼吸控制率(RCR)、细胞内ATP含量、pH值以及丙二醛(MDA)含量;比较肾脏移植前后血肌酐变化。结果 肾脏保存24小时后,各项检测指标与移植前比较无明显差异,48小时后,mHCA液组与UW液组血肌酐差异无显著性,但均明显低于HCA液组;肾脏细胞RCR、ATP含量,mHCA液组与UW液组差异无显著性,但均高于HCA液组,mHCA液组与UW液组MDA明显降低,mHCA液组pH最高。结论 mHCA液能明显提高肾脏的低温保存效果,延长肾脏保存时间。 展开更多
关键词 肾脏 UW液 低温保存 动物实验研究 离体肾 血肌酐 含量 hca 降低 pH值
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巨噬细胞在榄香烯复合瘤苗对HCa-F的免疫效应中的作用 被引量：3
11
作者 沈洁 高诗娟 +2 位作者 郭连英 施广霞 钱振超 《大连医科大学学报》 CAS 2002年第1期5-6,共2页
目的 :研究巨噬细胞 (Mφ)在榄香烯复合瘤苗 (EC -TCV)对小鼠肝癌HCa-F的免疫保护效应中的应用。方法 :榄香烯复合瘤苗主动免疫 3次 ,体内用多聚甲醛固定的HCa-F致敏后 3d检测腹腔巨噬细胞 (Mφ)的抗肿瘤细胞毒活性、一氧化氮 (NO)、细... 目的 :研究巨噬细胞 (Mφ)在榄香烯复合瘤苗 (EC -TCV)对小鼠肝癌HCa-F的免疫保护效应中的应用。方法 :榄香烯复合瘤苗主动免疫 3次 ,体内用多聚甲醛固定的HCa-F致敏后 3d检测腹腔巨噬细胞 (Mφ)的抗肿瘤细胞毒活性、一氧化氮 (NO)、细胞增殖活性的功能变化。结果 :与对照组比较 ,腹腔巨噬细胞(PEMφ)对HCa -F的细胞毒活性增强 ,而在NO产生和细胞增殖方面无明显差异。结论 展开更多
关键词 巨噬细胞 榄香烯复合瘤苗 hca-F 多聚甲醛 肿瘤 免疫
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肿瘤相关抗原基因HCA519在昆虫细胞中的表达和纯化 被引量：4
12
作者 王歈 李燕 陈慰峰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期50-54,共5页
为进行肿瘤细胞免疫应答的研究及制备肿瘤诊断用抗体 ,利用昆虫细胞表达系统表达了肿瘤相关性抗原HCA5 19的重组蛋白 ,并进行了纯化 .所表达的重组蛋白分子量约 10 0kD ,含 75 5个氨基酸残基 ,在HCA5 19cDNA3′端接入FLAG序列 ,则在重... 为进行肿瘤细胞免疫应答的研究及制备肿瘤诊断用抗体 ,利用昆虫细胞表达系统表达了肿瘤相关性抗原HCA5 19的重组蛋白 ,并进行了纯化 .所表达的重组蛋白分子量约 10 0kD ,含 75 5个氨基酸残基 ,在HCA5 19cDNA3′端接入FLAG序列 ,则在重组蛋白C端接入 1个 8肽的FLAG尾 .利用其特异性抗体可以有效地纯化重组蛋白 .该FLAGTAG不影响整个重组蛋白的免疫反应性 .纯化的重组蛋白与天然蛋白具有相同或相似的免疫反应性 .它可与识别天然蛋白的血清抗体发生同样的阳性反应 .HCA5 19的足量提供 ,可以免疫动物 ,制备抗体 ;可作为抗原 ,分析其诱导肿瘤病人CTL的特异应答 。 展开更多
关键词 hca519 肿瘤相关性抗原 重组蛋白 免疫反应性 昆虫细胞 表达 纯化
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基于HCA587的HLA-A2限制性表位肽的体内免疫原性研究 被引量：3
13
作者 张丽洁 陈娟娟 +5 位作者 徐翠香 李艳春 韩秀蕊 杨娣娣 魏绪仓 尹艳慧 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期25-28,共4页
目的检测来源于HCA587的HLA-A2限制性表位肽免疫HLA-A2转基因小鼠后产生细胞应答的水平,筛选出体内具有免疫原性的HLA-A2限制性表位肽。方法将来源于HCA587的候选HLA-A2限制性肽与MHC-Ⅱ类限制性肽HBV-core128-140、不完全弗氏佐剂、Cp ... 目的检测来源于HCA587的HLA-A2限制性表位肽免疫HLA-A2转基因小鼠后产生细胞应答的水平,筛选出体内具有免疫原性的HLA-A2限制性表位肽。方法将来源于HCA587的候选HLA-A2限制性肽与MHC-Ⅱ类限制性肽HBV-core128-140、不完全弗氏佐剂、Cp G ODN1826联合应用皮下免疫HLA-A2转基因小鼠,用酶联免疫斑点实验(ELISpot)检测小鼠脾细胞表位肽特异性细胞免疫应答的水平,流式细胞术检测表位肽特异性的CD8+T细胞比例。结果在检测的4个表位肽中,p248-256诱导HLA-A2转基因小鼠产生的细胞免疫应答最强,HLA-A2-H-2Kb-p248-256四聚体染色进一步表明p248-256免疫后可产生p248-256特异性的CD8+T细胞。结论来源于HCA587的HLA-A2限制性表位肽中,p248-256具有较强的体内免疫原性。 展开更多
关键词 hca587 HLA-A2限制性表位肽 体内免疫原性
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雷公藤甲素通过下调HCA66的表达抑制非小细胞肺癌 被引量：5
14
作者 王娟 李芳琼 +1 位作者 张枝倩 王伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期934-939,共6页
目的从核糖体生物合成的角度探讨雷公藤甲素(triptolide,TP)抑制肺癌细胞的分子机制。方法以不同浓度的TP作用肺癌A549细胞后,利用免疫印迹检测HCA66的表达;RT-PCR检测18S RNA的表达;流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果TP能明显降低HC... 目的从核糖体生物合成的角度探讨雷公藤甲素(triptolide,TP)抑制肺癌细胞的分子机制。方法以不同浓度的TP作用肺癌A549细胞后,利用免疫印迹检测HCA66的表达;RT-PCR检测18S RNA的表达;流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果TP能明显降低HCA66蛋白的表达以及18S RNA的合成。HCA66的表达被干扰后,18S RNA的合成降低;过表达HCA66能部分逆转TP对18S RNA的抑制作用,并减弱TP对肺癌细胞的凋亡诱导和周期阻滞作用。结论TP通过降低HCA66的表达来干扰核糖体18S RNA合成,进而诱导细胞凋亡和周期阻滞。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 hca66 18S RNA 核糖体 非小细胞肺癌 细胞周期 细胞凋亡
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HCA587蛋白疫苗诱导的抗体与抗肿瘤相关性的研究 被引量：2
15
作者 陈娟娟 张卫恒 +5 位作者 张丽洁 樊有龙 李华 蔡利励 谭立明 尹艳慧 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期420-423,共4页
目的检测HCA587蛋白疫苗在小鼠体内诱导的抗体水平,并分析抗体效价与抗肿瘤作用的相关性。方法按照不同的免疫方案以液体形式尾根部皮下注射给小鼠,将肿瘤细胞在小鼠左侧胁腹部皮下接种以建立肿瘤模型。用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法... 目的检测HCA587蛋白疫苗在小鼠体内诱导的抗体水平,并分析抗体效价与抗肿瘤作用的相关性。方法按照不同的免疫方案以液体形式尾根部皮下注射给小鼠,将肿瘤细胞在小鼠左侧胁腹部皮下接种以建立肿瘤模型。用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法检测抗体总IgG或IgG各亚型的水平,并用游标卡尺测量肿瘤大小。结果 HCA587蛋白疫苗诱导的抗HCA587抗体总IgG效价高于1∶1 024×104,其水平与肿瘤大小呈显著负相关。γ-干扰素(IFN-γ)敲除后,该疫苗的抗肿瘤效果完全消失,同时抗HCA587的IgG2a亚型效价显著下降。结论 HCA587蛋白疫苗诱导的IgG抗体效价很高,具有一定的抗肿瘤作用,其中IgG2a可能与抗肿瘤关系密切。 展开更多
关键词 抗体 hca587蛋白疫苗 抗肿瘤作用 相关性
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肝细胞癌相关抗原编码基因HCA520与钙离子的结合分析 被引量：2
16
作者 杨美香 韩克军 +2 位作者 曲迅 马道新 陈慰峰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期145-147,共3页
目的 :分析肝细胞癌相关抗原编码基因HCA52 0与钙离子的关系。方法 :通过PCR获得目的基因 ,构建至原核表达载体pGEX 4T 3中。在大肠杆菌中诱导表达后 ,用亲和层析法进行纯化。Westernblot对所获蛋白进行鉴定 ,Dotblot分析GST HCA52 0融... 目的 :分析肝细胞癌相关抗原编码基因HCA52 0与钙离子的关系。方法 :通过PCR获得目的基因 ,构建至原核表达载体pGEX 4T 3中。在大肠杆菌中诱导表达后 ,用亲和层析法进行纯化。Westernblot对所获蛋白进行鉴定 ,Dotblot分析GST HCA52 0融合蛋白与钙离子的关系。结果 :琼脂糖凝胶电泳及测序鉴定表明 ,重组原核表达载体pGEX 4T 3中 ,HCA52 0基因的插入方向及序列完全正确。Westernblot分析显示 ,纯化的蛋白均含有GST部分 ,是所需的目的蛋白。HCA52 0融合蛋白能够以剂量依赖的方式与钙离子结合。结论 :HCA52 0基因原核表达的蛋白能够与钙离子结合 。 展开更多
关键词 hca520 原核表达载体 钙离子结合蛋白
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生物信息学在新基因HCA520研究中的作用 被引量：2
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作者 杨美香 曲迅 +2 位作者 韩克军 冯进波 陈慰峰 《药物生物技术》 CAS CSCD 2004年第4期216-220,共5页
利用生物信息学对新基因HCA5 2 0的基因和蛋白序列进行分析 ,探讨生物信息学在新基因研究中的作用。以人类基因组数据库为基础 ,利用电子PCR和SAGE对HCA5 2 0进行染色体定位和组织表达分布分析 ;BLAST程序进行HCA5 2 0的基因结构分析和... 利用生物信息学对新基因HCA5 2 0的基因和蛋白序列进行分析 ,探讨生物信息学在新基因研究中的作用。以人类基因组数据库为基础 ,利用电子PCR和SAGE对HCA5 2 0进行染色体定位和组织表达分布分析 ;BLAST程序进行HCA5 2 0的基因结构分析和相似序列搜索 ;ORFfinder和GeneRunner3.0 5程序对HCA5 2 0编码蛋白进行序列预测和功能分析。RT PCR检测HCA5 2 0的组织表达谱。通过以上分析得出HCA5 2 0的全长cDNA为 2 396bp ,定位于染色体 16 p12 .2 ,其最长的开放读码框架为 5 91bp ,编码 196个氨基酸。编码氨基酸含有典型的EF hand保守序列 ,与CHP具有很高的同源性 ,为一胞内蛋白。在多种组织中有表达。提示HCA5 2 0可能是新的钙离子结合蛋白家族成员 ,可能通过调节Na+ /H+ 交换子的活性影响细胞的生物学功能。 展开更多
关键词 生物信息学 功能研究 hca520
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榄香烯对肝癌腹水瘤细胞系Hca-F_(25)/CL-16A_3抗肿瘤作用机理的实验研究　Ⅲ.榄香烯对小鼠血清脂肪酸组分相对百分浓度变化的影响 被引量：4
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作者 左云飞 张耀铮 +3 位作者 魏巍 李玉中 张红 张立秋 《中药药理与临床》 CAS CSCD 1997年第1期17-19,共3页
用气相色谱法测定了正常及荷瘤小鼠血清脂肪酸组分的相对百分浓度，同时研究了榄香烯对荷瘤小鼠血清脂肪酸的影响。结果表明，荷瘤小鼠血清中十六碳一烯酸、十八碳二烯酸、十八碳三烯酸、二十碳五烯酸相对百分浓度均显著低于正常小鼠，... 用气相色谱法测定了正常及荷瘤小鼠血清脂肪酸组分的相对百分浓度，同时研究了榄香烯对荷瘤小鼠血清脂肪酸的影响。结果表明，荷瘤小鼠血清中十六碳一烯酸、十八碳二烯酸、十八碳三烯酸、二十碳五烯酸相对百分浓度均显著低于正常小鼠，榄香烯腹腔注射可使荷瘤小鼠血清中十八碳三烯酸含量显著增高，提示榄香烯可能通过影响血清中脂肪酸成分比例而影响肿瘤的生长。 展开更多
关键词 榄香烯 肝癌腹水瘤细胞系hca-F25/CL-16A3 血清游离脂肪酸 抗肿瘤作用 药理学
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肿瘤相关抗原HCA520真核表达载体的构建及细胞内表达的定位分析 被引量：2
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作者 杨美香 曲迅 +2 位作者 韩克军 马道新 陈慰峰 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2004年第2期193-196,共4页
应用PCR技术获得肿瘤相关抗原HCA520编码基因,构建至pGEM-T Easy载体,测序正确后,亚克隆至pEGFP-N1载体,1％的琼脂糖电泳得到两条带,与预期结果相同;鉴定正确的基因一过性转染至CHO细胞,共聚焦显微镜观察HCA520基因编码蛋白主要位于胞... 应用PCR技术获得肿瘤相关抗原HCA520编码基因,构建至pGEM-T Easy载体,测序正确后,亚克隆至pEGFP-N1载体,1％的琼脂糖电泳得到两条带,与预期结果相同;鉴定正确的基因一过性转染至CHO细胞,共聚焦显微镜观察HCA520基因编码蛋白主要位于胞浆靠近胞膜处,为HCA520功能的进一步研究打下了基础。 展开更多
关键词 肿瘤 抗原 hca520 真核表达载体 细胞定位
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HCA材料的制备与应用（英文） 被引量：2
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作者 阳超琴 王亚明 +1 位作者 吴乐刚 李文松 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第9期2423-2427,共5页
为满足越来越严格的汽车尾气排放标准且有效降低冷启动时碳氢化合物(HC)排放以及解决神龙、奇瑞车型在冷启动时钯基催化剂的碳氢吸附(HCA)性能消失的缺点,重点探究了所制备的HCA催化剂在发动机台架上的催化性能、HC吸附性能以及其在整... 为满足越来越严格的汽车尾气排放标准且有效降低冷启动时碳氢化合物(HC)排放以及解决神龙、奇瑞车型在冷启动时钯基催化剂的碳氢吸附(HCA)性能消失的缺点,重点探究了所制备的HCA催化剂在发动机台架上的催化性能、HC吸附性能以及其在整车上的应用。在本研究中,采用沸石和贵金属连接体的Pd/I-Ce-HZSM-5为HCA材料的主要组分,对神龙和奇瑞车型而言,其排放结果表明:冷启动时,Pd/I-Ce-HZSM-5型HCA催化剂对HC捕集效果明显优于传统方式制备的催化剂,由于钯基催化剂具有良好的起燃特性,碳氢吸附的连接体及低起燃性使得Pd/I-Ce-HZSM-5催化剂的碳氢排放进一步减少。冷启动20~30 s时,沸石负载钯基催化剂的碳氢吸附量最大。HCA材料对于满足高标准的低温HC排放质量方面具有很大的研究潜力。 展开更多
关键词 尾气净化 hca催化剂 分子筛 HC 天然气车
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