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油葵三个HaLPAAT2基因的克隆、序列分析及活性鉴定
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作者 王岚 达红玉 +3 位作者 周至铭 张程 杨佳宝 孙黎 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期2208-2215,共8页
溶血磷脂酸酰基转移酶基因(lysophosphatideacid acyltransferases gene,LPAAT)是油脂合成的关键基因之一,其催化溶血磷脂酸合成磷脂酸,是高等植物Kennedy途径中的关键酶。本研究从油葵(Helianthus annuus)中克隆得到3个HaLPAAT2基因,... 溶血磷脂酸酰基转移酶基因(lysophosphatideacid acyltransferases gene,LPAAT)是油脂合成的关键基因之一,其催化溶血磷脂酸合成磷脂酸,是高等植物Kennedy途径中的关键酶。本研究从油葵(Helianthus annuus)中克隆得到3个HaLPAAT2基因,分别命名为HaLPAAT2.1,HaLPAAT2.2和HaLPAAT2.3。对这3个HaLPAAT2进行了生物信息分析并将其转入SM2-1大肠杆菌突变体中验证LPAAT活性。结果表明:HaLPAAT2.1、HaLPAAT2.2和HaLPAAT2.3基因全长分别为1158、1137、1149 bp,分别编码385、378、382个氨基酸。预测3个基因的编码蛋白都含有LPLAT superfamily酰基转移酶结构域。跨膜结构分析显示这3个HaLPAAT2蛋白都含有3个跨膜结构域。亚细胞定位预测这3个蛋白都位于内质网上。对其理化性质分析表明这3个HaLPAAT2均为不稳定性蛋白。构建了HaLPAAT2.1、HaLPAAT2.2和HaLPAAT2.3基因的原核表达载体,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)功能缺失突变体SM2-1进行功能验证。互补试验表明,3个HaLPAAT2基因都具有大肠杆菌LPAAT活性,可以互补大肠杆菌LPAAT突变体SM2-1菌株的活性。 展开更多
关键词 油葵 HaLPAAT 生物信息学 SM2-1突变体
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