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特异种质烟草全长cDNA文库的构建及质量分析 被引量:15
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作者 高健 许晓风 +2 位作者 乌慧玲 陈学平 周家昊 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期22-25,共4页
采用SMART(switchingmechanismat5′endofRNAtranscript)技术构建了我国特有地方烟草品种HZNH的全长cDNA基因文库。大肠杆菌XL1-Blue平皿测定和PCR快速鉴定表明,文库的库容量为2 47×106pfu·mL-1,重组率为98 4%,所构建的文库... 采用SMART(switchingmechanismat5′endofRNAtranscript)技术构建了我国特有地方烟草品种HZNH的全长cDNA基因文库。大肠杆菌XL1-Blue平皿测定和PCR快速鉴定表明,文库的库容量为2 47×106pfu·mL-1,重组率为98 4%,所构建的文库达到了用于目的基因的分离筛选和克隆表达的建库要求。 展开更多
关键词 烟草 地方品种 cDNA文库 SMART技术 库容量 重组率 系统获得抗性 hznh种质
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烟草双特异性激酶基因(NtDSK2)的克隆与表达分析
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作者 熊腾飞 张改云 +3 位作者 郭家明 徐兆师 马有志 陈学平 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2007年第2期38-42,共5页
利用对表达序列标签(expressed sequence tag,EST)数据库进行比对和搜索分析,并通过RT-PCR的方法从烟草中克隆到一个包含1218bp开放阅读框的新基因NtDSK2。NtDSK2编码了具有典型的双特异性激酶特征的蛋白。此蛋白与花生的STY激酶属于双... 利用对表达序列标签(expressed sequence tag,EST)数据库进行比对和搜索分析,并通过RT-PCR的方法从烟草中克隆到一个包含1218bp开放阅读框的新基因NtDSK2。NtDSK2编码了具有典型的双特异性激酶特征的蛋白。此蛋白与花生的STY激酶属于双特异性激酶的同一个亚家族。基于EST的数字化组织表达特征分析推测NtDSK2在烟草组织中广泛表达。运用半定量RT-PCR方法检测了烟草受烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)侵染后的表达特征。结果表明NtDSK2的表达量在TMV处理后随时间稳步上升,并在48h达到最大。推测NtDSK2是参与烟草抗胁迫调控的重要激酶基因。 展开更多
关键词 hznh 烟草花叶病毒 双特异性激酶
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