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吡非尼酮与仑伐替尼联合应用对人胆管癌细胞系HuCCT1的增殖克隆抑制作用及其机制 被引量：2
1
作者 李丽萍 蒲诗云 +2 位作者 任常谕 周永杰 周后凤 《山东医药》 CAS 2022年第24期1-5,共5页
目的观察吡非尼酮(PFD)联合仑伐替尼(Len)对人胆管癌HuCCT1细胞增殖、克隆形成、自噬的影响,并探讨其可能机制。方法人胆管癌HuCCT1细胞经PFD、Len或PFD联合Len处理后,CCK-8法检测各组细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能... 目的观察吡非尼酮(PFD)联合仑伐替尼(Len)对人胆管癌HuCCT1细胞增殖、克隆形成、自噬的影响,并探讨其可能机制。方法人胆管癌HuCCT1细胞经PFD、Len或PFD联合Len处理后,CCK-8法检测各组细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,免疫荧光染色检测细胞自噬体数目,蛋白免疫印迹检测AMPK、mTOR、S6蛋白磷酸化水平及自噬标记蛋白LC3-Ⅱ蛋白水平。结果与PFD单药组和Len单药组相比,联合组的细胞增殖活力、克隆形成数目、LC3-Ⅱ表达水平及自噬体形成数目都显著降低,P均<0.05;与PFD单药组和Len单药组相比,联合组的AMPK蛋白磷酸化水平升高,mTOR、S6蛋白磷酸化水平降低,P均<0.05。结论PFD联合Len可抑制HuCCT1细胞增殖、克隆形成,机制可能是其通过上调AMPK磷酸化水平,下调mTOR的磷酸化水平,进而抑制mTOR信号通路,促进细胞自噬。 展开更多
关键词 吡非尼酮 仑伐替尼 胆管癌 hucct1细胞 细胞增殖 细胞克隆形成 细胞自噬
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葫芦素B调控糖酵解抑制HuCCT1细胞增殖的作用机制 被引量：8
2
作者 李励 邓冬杰 +4 位作者 谈相云 孙懿 王楚婷 郑国华 胡俊杰 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第16期74-81,共8页
目的:探究葫芦素B(CuB)抑制细胞增殖和糖酵解的作用机制。方法:采用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测CuB(0、40、80、120、160、200、400、800 nmol·L^(-1))对HuCCT1细胞增殖的影响;采用平板克隆实验检测CuB(50、100、200 nmol&#... 目的:探究葫芦素B(CuB)抑制细胞增殖和糖酵解的作用机制。方法:采用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测CuB(0、40、80、120、160、200、400、800 nmol·L^(-1))对HuCCT1细胞增殖的影响;采用平板克隆实验检测CuB(50、100、200 nmol·L^(-1))对HuCCT1细胞集落形成能力的影响;采用流式细胞术检测CuB(50、100、200 nmol·L^(-1))对HuCCT1细胞周期的影响;采用可见分光光度法检测CuB(50、100、200 nmol·L^(-1))给药后HuCCT1细胞中糖酵解关键酶己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)活性,及葡萄糖消耗量、乳酸生成量和三磷酸腺苷(ATP)生成量的变化;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测CuB对细胞周期相关蛋白、增殖相关蛋白、糖酵解关键蛋白及蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Akt/mTOR)通路相关蛋白表达情况的影响。结果:与空白组比较,给药24 h,160~800 nmol·L^(-1)CuB,给药48 h后80~800 nmol·L^(-1)可以抑制HuCCT1细胞增殖(P<0.05,P<0.01),并呈时间和浓度依赖性,给药48 h半数抑制浓度为200 nmol·L^(-1);CuB可以呈浓度依赖性的抑制HuCCT1细胞集落形成能力(P<0.01);CuB能够将HuCCT1细胞周期阻滞在G2期(P<0.05,P<0.01);CuB(100、200 nmol·L^(-1))可以抑制糖酵解关键酶HK、PK的活性,并降低细胞葡萄糖消耗量及乳酸和ATP的生成量(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,CuB(100、200 nmol·L^(-1))可以抑制周期相关蛋白Cyclin B1、增殖细胞核抗原(PCNA)、己糖激酶1(HK1)、己糖激酶2(HK2)、丙酮酸激酶1(PKM1)、丙酮酸激酶2(PKM2)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化mTOR(p-mTOR)及磷酸化核糖体蛋白(p-RPS6)的蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:CuB可能通过调控Akt/mTOR通路抑制HuCCT1细胞糖酵解进而影响细胞增殖。 展开更多
关键词 葫芦素B 肝内胆管癌 蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Akt/mTOR)通路 糖酵解 hucct1细胞增殖
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胆管癌患者miR-93的表达水平及其临床意义 被引量：4
3
作者 万祎 张映林 +2 位作者 古广强 刘文平 张永川 《现代消化及介入诊疗》 2020年第1期46-50,共5页
目的探讨miR-93在胆管细胞癌(cholangiocarcinoma,CC)中的表达及其临床意义。方法选取我院60例外科行手术的胆管癌患者癌旁组织及癌组织标本以及细胞培养实验检测HIBEC、RBE、HUCCT1等miR-93表达水平;统计胆管癌临床特征与miR-93的表达... 目的探讨miR-93在胆管细胞癌(cholangiocarcinoma,CC)中的表达及其临床意义。方法选取我院60例外科行手术的胆管癌患者癌旁组织及癌组织标本以及细胞培养实验检测HIBEC、RBE、HUCCT1等miR-93表达水平;统计胆管癌临床特征与miR-93的表达水平的相关性;分析胆管癌患者miR-93的表达水平与预后的关系。结果胆管癌细胞株RBE、HUCCT1中miR-93相对表达量显著高于正常细胞株HIBE(P<0.05)。胆管癌患者癌组织中的miR-93相对表达量与癌旁组织相比,显著高于癌旁组织中的表达量(P<0.05)。在miR-93在癌组织表达与临床特征关系中发现,分化程度、淋巴结转移及肿瘤分期均与胆管癌组织中miR-93表达水平有相关性(P<0.05);影响患者预后的独立危险因素为miR-93高表达、TNM分期Ⅲ期及有淋巴结转移等,差异有统计学意义(P均<0.05)。miR-91表达未上升胆管癌患者随访3生存率明显高于miR-91高表达患者(P<0.05)。结论在胆管癌患者中miR-93存在高水平表达,而且胆管癌的发展、发生及预后都可能与其关系密切。 展开更多
关键词 胆管癌 miR-93 HIBEC RBE hucct1
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