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五氟利多靶向HSPA6抑制黑色素瘤生长的作用研究
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作者 葛姮 姜盼 +2 位作者 张馨 潘钊海 李德芳 《中国药科大学学报》 北大核心 2026年第1期68-77,共10页
基于药物亲和力反应靶点稳定性(drug affinity responsive target stability,DARTS)技术解析抗精神病药物五氟利多抗黑色素瘤的分子机制,并揭示其通过HSPA6/p53/p21信号轴发挥作用的生物学通路。MTT实验和细胞集落形成能力等实验证实五... 基于药物亲和力反应靶点稳定性(drug affinity responsive target stability,DARTS)技术解析抗精神病药物五氟利多抗黑色素瘤的分子机制,并揭示其通过HSPA6/p53/p21信号轴发挥作用的生物学通路。MTT实验和细胞集落形成能力等实验证实五氟利多可显著下调黑色素瘤A375和B16细胞内cyclin D1和CDK4表达,诱导细胞发生G1期阻滞,进而抑制黑色素瘤细胞增殖。同时,蛋白免疫印迹、Hoechst 33342染色和Annexin V-FITC/PI双染等实验结果发现,五氟利多可显著下调细胞内Bcl-2的表达,上调Bax和cleaved caspase-3的表达,诱导细胞发生凋亡。进一步利用DARTS技术鉴定热休克蛋白A6(HSPA6)为五氟利多结合的关键靶点,五氟利多通过上调HSPA6并激活p53/p21通路;敲低HSPA6不仅可逆转五氟利多介导的p53/p21通路的激活,还可逆转五氟利多介导的周期阻滞和凋亡。荷瘤小鼠动物实验也证实了敲低HSPA6可逆转五氟利多的体内抗肿瘤活性。因此,本研究阐明了五氟利多可通过靶向HSPA6激活p53/p21信号轴来抑制黑色素瘤进展,这为抗精神病药物治疗肿瘤再定位提供了新视角。 展开更多
关键词 黑色素瘤 五氟利多 周期阻滞 凋亡 hspa6
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HSPA5介导的胶质瘤缺氧耐受促进缺氧微环境下M2型巨噬细胞极化
2
《中华神经外科疾病研究杂志》 2026年第3期122-122,共1页
具有缺氧和免疫抑制特征的肿瘤微环境(TME)在多种实体瘤进展中起关键作用,但胶质瘤中肿瘤缺氧与免疫微环境形成的复杂互作机制尚未完全阐明。本研究通过GSEA和IMMPORT数据库分析鉴定与肿瘤缺氧及免疫微环境相关的基因,经交叉分析和多数... 具有缺氧和免疫抑制特征的肿瘤微环境(TME)在多种实体瘤进展中起关键作用,但胶质瘤中肿瘤缺氧与免疫微环境形成的复杂互作机制尚未完全阐明。本研究通过GSEA和IMMPORT数据库分析鉴定与肿瘤缺氧及免疫微环境相关的基因,经交叉分析和多数据库整合确定胶质瘤预后相关的缺氧-免疫基因。最终确立HSPA5作为胶质瘤缺氧微环境及免疫微环境形成的关键靶基因。 展开更多
关键词 M2型巨噬细胞极化 hspa5 缺氧耐受 胶质瘤
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HSPA9基因变异在Even-plus综合征胎儿产前诊断中应用:一个复发性脑积水家系的致病原因分析
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作者 杨春 乔凤昌 +2 位作者 孟露露 张翠平 许争峰 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2022年第6期451-454,461,共5页
目的对1个Even-plus综合征家系进行外显子测序检测,明确该家系连续两次孕早期胎儿严重侧脑室增宽及其他结构异常的致病原因,为该家系的遗传咨询、后续妊娠方式指导及产前诊断提供依据。方法收集该家系两次引产儿及父母亲的DNA,应用二代... 目的对1个Even-plus综合征家系进行外显子测序检测,明确该家系连续两次孕早期胎儿严重侧脑室增宽及其他结构异常的致病原因,为该家系的遗传咨询、后续妊娠方式指导及产前诊断提供依据。方法收集该家系两次引产儿及父母亲的DNA,应用二代测序技术进行家系外显子测序检测,并用Sanger测序对疑似致病变异进行家系验证。结果两个引产胎儿均检测到HSPA9基因存在c.1822-1G>A(NM_004134)和c.1411-3T>G(NM_004134)复合杂合变异,分别遗传自父母。依据美国医学遗传学与基因组学学会变异分类标准与指南,该c.1822-1G>A变异为可能致病变异(PVS1_strong+PM2_supporting+PP1+PP4);c.1411-3T>G变异为可能致病变异(PM2_supporting+PM3+PP1+PP3+PP4)。结论HSPA9基因c.1822-1G>A和c.1411-3T>G复合杂合变异可能是该家系两次不良孕产史的致病原因,该家系可进行针对性植入前遗传学诊断辅助受孕。 展开更多
关键词 Even-plus综合征 hspa9基因 外显子测序
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AICAR下调HSPA6抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭 被引量:1
4
作者 吕洁 孙倩楠 +1 位作者 郭宏鹏 刘雪梅 《解剖科学进展》 2025年第2期157-160,164,共5页
目的探究5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷(AICAR)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法A549细胞分为对照组(Control组)、AICAR组、AICAR+ov-NC组和AICAR+ov-HSPA6组。CCK-8实验检测细胞的增殖活性;Transwell实验... 目的探究5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷(AICAR)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法A549细胞分为对照组(Control组)、AICAR组、AICAR+ov-NC组和AICAR+ov-HSPA6组。CCK-8实验检测细胞的增殖活性;Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。基于GEO数据库分析AICAR处理后肺癌细胞中的差异表达基因;RT-qPCR和Western blot检测细胞中HSPA6表达水平。将A549细胞皮下注射裸鼠,待移植瘤体积达100 mm^(3)时,将裸鼠随机分为对照组和AICAR组,免疫组织化学方法检测移植瘤中Ki-67的表达。结果AICAR处理抑制A549细胞体外增殖、迁移和侵袭,AICAR还抑制A549细胞移植瘤体内肿瘤生长并降低移植瘤中Ki-67表达。HSPA6是基于生物信息学筛选的AICAR处理后肺癌细胞中的差异表达基因。过表达HSPA6部分逆转AICAR对A549细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论AICAR抑制NSCLC A549细胞体外增殖、迁移、侵袭和体内肿瘤生长,其机制可能与下调HSPA6表达有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 AICAR hspa6 增殖 迁移 侵袭
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异牡荆素通过miR-339-5p/HSPA8轴调节胰腺癌细胞的生物学行为 被引量:1
5
作者 闫玲新 李森 +2 位作者 郭改莉 孟婉秋 徐超 《天津医药》 2025年第3期230-235,共6页
目的探究异牡荆素(Isov)对胰腺癌细胞的生物学行为的影响及作用机制。方法采用Isov处理人正常胰腺导管上皮细胞HPDE和PC细胞系;CCK-8检测细胞存活率并计算半数抑制浓度(IC50)。将PC细胞系PANC-1细胞依次分为Control组、Isov组、Isov+in-... 目的探究异牡荆素(Isov)对胰腺癌细胞的生物学行为的影响及作用机制。方法采用Isov处理人正常胰腺导管上皮细胞HPDE和PC细胞系;CCK-8检测细胞存活率并计算半数抑制浓度(IC50)。将PC细胞系PANC-1细胞依次分为Control组、Isov组、Isov+in-miR-NC组、Isov+in-miR-339-5p组、Isov+in-miR-339-5p+si-NC组和Isov+inmiR-339-5p+si-HSPA8组。CCK-8、划痕愈合实验和Transwell实验检测PANC-1细胞存活、迁移和侵袭情况;实时荧光定量PCR检测PANC-1细胞中miR-339-5p和热休克蛋白家族A成员8(HSPA8)mRNA表达情况;Western blot法检测各组细胞中蛋白HSPA8的表达情况;双萤光素酶报告基因检测miR-339-5p与HSPA8的靶向作用;异种移植裸鼠模型验证Isov的体内抗癌作用。结果Isov可抑制PC细胞增殖,但对HPDE细胞几乎没有细胞毒性。Isov可显著降低PANC-1细胞存活率和划痕愈合率,减少侵袭细胞数量,上调miR-339-5p表达,下调HSPA8 mRNA和蛋白水平(P<0.05),而这种作用可被下调miR-339-5p阻断(P<0.05)。HSPA8是miR-339-5p的靶标基因,敲低HSPA8后逆转了Isov对PANC-1细胞恶性生物学行为的调控作用(P<0.05)。体内研究证实,Isov治疗后,裸鼠肿瘤体积和质量减小,且miR-339-5p表达升高,HSPA8 mRNA表达降低(P<0.05)。结论Isov可能通过miR-339-5p/HSPA8轴抑制PC细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 牡荆素 胰腺肿瘤 细胞增殖 hspa8 miR-339-5p
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HSPA8在乳腺癌中的表达及其生物学功能
6
作者 张曼曼 程政 +2 位作者 周静妮 郭欠影 吴正升 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第5期816-824,共9页
目的探讨热休克同源蛋白A8(HSPA8)在乳腺癌中的表达及其对肿瘤生物学行为的影响。方法生物信息学分析和免疫组化实验检测乳腺癌与癌旁非肿瘤乳腺组织中HSPA8的表达,并分析其表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier Plotter数... 目的探讨热休克同源蛋白A8(HSPA8)在乳腺癌中的表达及其对肿瘤生物学行为的影响。方法生物信息学分析和免疫组化实验检测乳腺癌与癌旁非肿瘤乳腺组织中HSPA8的表达,并分析其表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier Plotter数据库分析HSPA8表达与乳腺癌患者预后的相关性;分别构建HSPA8敲低与过表达乳腺癌稳转细胞系;CCK-8、克隆形成、Transwell、细胞划痕、Western blot和免疫荧光实验检测HSPA8对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及其对上皮-间充质转化(EMT)的作用。结果生物信息学分析和免疫组化结果显示,HSPA8在乳腺癌组织中的表达高于癌旁非肿瘤乳腺组织(P<0.05),且其蛋白表达水平与肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移以及Ki-67增殖指数均呈正相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示,HSPA8高表达与乳腺癌患者不良预后相关(P<0.05)。CCK-8、克隆形成、Transwell、细胞划痕、Western blot和免疫荧光实验结果显示,敲低HSPA8表达能够抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移功能和EMT(P<0.05);过表达HSPA8能够促进乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移功能和EMT(P<0.05)。结论HSPA8在乳腺癌组织中高表达,与病情进展密切相关,并且能够促进乳腺癌细胞恶性表型,可能是乳腺癌治疗的潜在生物靶点。 展开更多
关键词 hspa8 乳腺癌 增殖 侵袭 迁移 EMT
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武夷黑猪HSPA5基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究 被引量:1
7
作者 李指全 傅思静 +5 位作者 徐舒平 高萌若 杨涛涛 张志榜 李凯 李鹏成 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期3214-3224,共11页
【目的】对武夷黑猪热休克蛋白A5(heat shock protein family A member 5,HSPA5)进行生物信息学预测与分析,为探究其生物学功能提供参考。【方法】对武夷黑猪HSPA5基因编码区进行克隆并测序,再与不同物种进行相似性比对并构建系统进化树... 【目的】对武夷黑猪热休克蛋白A5(heat shock protein family A member 5,HSPA5)进行生物信息学预测与分析,为探究其生物学功能提供参考。【方法】对武夷黑猪HSPA5基因编码区进行克隆并测序,再与不同物种进行相似性比对并构建系统进化树,利用生物信息学方法预测其蛋白的理化特性、结构及功能,最后测定其在武夷黑猪不同组织中的表达量。【结果】武夷黑猪HSPA5基因编码区长1965 bp,编码654个氨基酸。相似性比对和进化树分析结果表明,武夷黑猪HSPA5氨基酸序列与杜洛克猪转录本变体2和鼠的HSPA5氨基酸序列相似性最高(100%),且与鼠的亲源关系最近,而与大黄花鱼的亲源关系最远。武夷黑猪HSPA5蛋白为酸性亲水蛋白,含有信号肽序列,在内质网中含量最高。主要由α-螺旋构成,且保守基序位于2个重叠的功能结构域内;含有56个磷酸化位点,76个O-糖基化位点,24个化学因子作用位点。同时具有26个抗原决定簇、11个T细胞抗原表位,13个B细胞抗原表位。与热休克蛋白90(heat shock protein member 90,HSP90)、激活转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)等互作关系密切。实时荧光定量PCR结果表明,HSPA5基因在武夷黑猪肝脏和子宫中的表达量显著高于其他组织(P<0.05)。【结论】本研究成功克隆了武夷黑猪HSPA5基因,且与鼠的亲源关系最近。武夷黑猪HSPA5蛋白主要定位于细胞质中,包含磷酸化、O-糖基化修饰位点,含有与T或B细胞抗原表位重叠的抗原决定簇序列,与未折叠蛋白反应通路中相关蛋白互作,在肝脏表达量最高。这些特征可为进一步研究HSPA5蛋白生物学功能提供参考。 展开更多
关键词 武夷黑猪 hspa5基因 生物信息学 功能 组织表达
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基于HSPA的变电站二次设备远程控制策略 被引量:1
8
作者 门凡 董一庆 《灯与照明》 2025年第5期154-156,共3页
随着电力系统的智能化与自动化发展,变电站的远程控制需求正不断上升,作为电力系统重要组成部分的变电站二次设备,其远程控制系统是否稳定、效率如何,直接影响着电力系统运行的安全与可靠。本文对基于HSPA技术的变电站二次设备远程控制... 随着电力系统的智能化与自动化发展,变电站的远程控制需求正不断上升,作为电力系统重要组成部分的变电站二次设备,其远程控制系统是否稳定、效率如何,直接影响着电力系统运行的安全与可靠。本文对基于HSPA技术的变电站二次设备远程控制系统进行设计,着重分析了数据采集、HSPA通信模块接口设计、数据传输协议与远程控制的实现,通过对系统实施全面设计与测试,验证了此系统在实际应用层面的高效性与稳定性,希望为相关研究提供参考。 展开更多
关键词 hspa技术 变电站 二次设备 远程控制
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栀子苷通过Hspa1a通路抑制青光眼视网膜细胞凋亡
9
作者 胡鸣海 王树超 《中南大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第12期2346-2360,共15页
目的:青光眼是全球首位不可逆性致盲眼病,降低患者眼内压是目前最有效的治疗手段之一。然而,降低眼内压并不能完全阻止视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)死亡及其导致的视力丧失。中药在青光眼治疗中的应用已得到广泛论证... 目的:青光眼是全球首位不可逆性致盲眼病,降低患者眼内压是目前最有效的治疗手段之一。然而,降低眼内压并不能完全阻止视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)死亡及其导致的视力丧失。中药在青光眼治疗中的应用已得到广泛论证,本研究拟探究栀子苷对视网膜细胞死亡的保护作用,以明确栀子苷在青光眼治疗中的潜在价值。方法:细胞试验:将视网膜R28细胞分为对照(CTL)组、氧糖剥夺再灌注(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)组、OGD/R+栀子苷(OGD/R+Gen)组、OGD/R+栀子苷+热激蛋白家族A成员1A(heat shock protein family A member 1A,Hspa1a)-小干扰RNA(OGD/R+Gen+H-KD)组。首先采用蛋白质组学技术筛选栀子苷干预后变化的关键分子,继而通过实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR,qPCR)和蛋白质印迹法筛选和检测栀子苷和H-KD干预后相关分子变化。然后通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试验检测栀子苷和H-KD干预后细胞活力和死亡情况,并采用流式细胞术、活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测和原位末端转移酶标记(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)染色检测栀子苷和H-KD干预后细胞凋亡情况。动物造模:将SD大鼠分为假手术对照(CTL)组、急性高眼压(acute high intraocular pressure,aHIOP)组、aHIOP+栀子苷(aHIOP+Gen)组、aHIOP+栀子苷+Hspa1a抑制剂apoptozole(aHIOP+Gen+Apo)组,并采用苏木素-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色、TUNEL染色及闪光视网膜电图(flash electroretinogram,fERG)评估各组大鼠的视网膜结构、细胞凋亡和功能变化。结果:1)蛋白组学技术联合qPCR和蛋白质印迹法筛选出Hspa1a水平在栀子苷干预后明显升高。2)与OGD/R组比较,OGD/R+Gen组细胞活力增强(P<0.05)、死亡细胞减少(P<0.05)、ROS水平降低(P<0.001)、凋亡细胞数减少(P<0.05)。3)与OGD/R+Gen组比较,OGD/R+Gen+H-KD组p-蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)表达降低(P<0.01),同时细胞活力降低(P<0.05)、死亡细胞增加(P<0.05)、ROS水平升高(P<0.01)、凋亡细胞数增加(P<0.05)。4)与CTL组比较,aHIOP组视网膜厚度减少(P<0.01)、凋亡细胞数增多(P<0.001)、fERG b波振幅降低(P<0.001);与aHIOP组比较,aHIOP+Gen组视网膜厚度增加(P<0.05)、凋亡细胞数减少(P<0.05)、fERG b波振幅升高(P<0.05);与aHIOP+Gen组比较,aHIOP+Gen+Apo组视网膜厚度减少(P<0.05)、凋亡细胞数增多(P<0.05)、fERG b波振幅降低(P<0.05)。结论:栀子苷通过Hspa1a-Akt通路抑制OGD/R及aHIOP诱导的视网膜细胞凋亡与组织损伤,为青光眼的中药治疗提供潜在靶点和新策略。 展开更多
关键词 栀子苷 青光眼 视网膜神经节细胞 氧糖剥夺再灌注 细胞凋亡 hspa1a通路
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人类肿瘤中热休克蛋白家族成员HSPA13的作用及研究进展
10
作者 万洁 李晓东 +1 位作者 徐培栋 马斌林 《生命科学仪器》 2025年第1期118-120,共3页
热休克蛋白(Heat shock protein, HSP)作为一种高度功能化的分子伴侣,能使癌细胞内的蛋白质合成和降解之间维持平衡,致使癌细胞在恶劣微环境的持续刺激下依旧可以生存,是癌症发生发展中不可缺少的因子。热休克蛋白13(Heat shock protein... 热休克蛋白(Heat shock protein, HSP)作为一种高度功能化的分子伴侣,能使癌细胞内的蛋白质合成和降解之间维持平衡,致使癌细胞在恶劣微环境的持续刺激下依旧可以生存,是癌症发生发展中不可缺少的因子。热休克蛋白13(Heat shock protein A member 13,HSPA13)是HSP家族的一员。现有研究表明,HSPA13在大多数癌细胞中过表达,能以多种方式推动肿瘤进展。随着医学界对HSPA13在肿瘤中作用机制探索的深入,HSPA13已成为各类癌症治疗的靶标。本文就HSPA13的结构、功能及与人类癌症的关系进行综述。 展开更多
关键词 热休克蛋白 hspa13 肿瘤 研究进展
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HSPA8在恶性肿瘤组织中表达及意义的研究进展
11
作者 张雪艳 《现代临床医学》 2025年第1期71-74,共4页
70kDa热休克蛋白8(HSPA8)是热休克蛋白70中的一员,HSPA8高表达与多种致癌活性和信号通路密切相关,可促进肿瘤细胞的生长,往往预示肿瘤患者预后不良。本文对HSPA8在三阴性乳腺癌、结直肠癌和急性髓系白血病中的表达及意义进行综述,旨在挖... 70kDa热休克蛋白8(HSPA8)是热休克蛋白70中的一员,HSPA8高表达与多种致癌活性和信号通路密切相关,可促进肿瘤细胞的生长,往往预示肿瘤患者预后不良。本文对HSPA8在三阴性乳腺癌、结直肠癌和急性髓系白血病中的表达及意义进行综述,旨在挖掘HSPA8的临床价值,为寻找恶性肿瘤的潜在治疗靶点提供新思路。 展开更多
关键词 hspa8 乳腺癌 结直肠癌 急性髓系白血病
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HSPA2在牦牛不同组织器官中的表达差异 被引量:5
12
作者 温泽星 余四九 +4 位作者 翟羽佳 杨琨 刘鹏刚 何俊峰 崔燕 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期3475-3482,共8页
【目的】探索热休克蛋白70-2(heat shock 70kD protein-2,HSPA2)在牦牛不同组织器官中的表达差异。【方法】选取3头1岁龄的健康青海高原雄性牦牛为研究对象,在正常生理条件下,于2013年9月中旬采集不同组织器官(心脏、肝脏、脾脏、肺脏... 【目的】探索热休克蛋白70-2(heat shock 70kD protein-2,HSPA2)在牦牛不同组织器官中的表达差异。【方法】选取3头1岁龄的健康青海高原雄性牦牛为研究对象,在正常生理条件下,于2013年9月中旬采集不同组织器官(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑和睾丸)样本。(1)从牦牛不同组织器官中提取RNA,将RNA反转录成第一链cDNA,参照牦牛HSPA2和β-actin基因序列(登录号为KC790105.1和DQ838049.1)设计特异性引物,首先采用RT-PCR来验证实时荧光定量PCR(RT-qPCR)是否能应用于牦牛不同组织器官中HSPA2表达差异的测定;然后采用RT-qPCR测定牦牛不同组织器官中HSPA2相对表达量的差异。(2)将牦牛不同组织器官样本4%多聚甲醛固定,制成石蜡切片,免疫组织化学法测定HSPA2在不同组织器官中的分布。采用Image-Pro Plus 6.0软件进行免疫组化图像分析,测定HSPA2阳性反应物的积分光密度,进行吸光度分析;通过SPSS 19.0统计软件,用单因素方差分析进行差异显著性测定。【结果】(1)RT-PCR结果表明RT-qPCR法可用于牦牛不同组织器官中HSPA2表达差异的测定。实时荧光定量PCR结果表明,HSPA2在睾丸中的相对表达量,分别是在脑、肾脏、心脏、脾脏、肺脏和肝脏中的83.33、97.09、111.11、133.33、222.22和285.71倍。(2)免疫组织化学结果显示,牦牛睾丸、肾脏、脑、心脏、肺脏、肝脏和脾脏中均有HSPA2的阳性表达。其中,在牦牛肾脏皮质肾小管、髓质肾小管,大脑皮质海马CA1区、小脑皮质,心肌细胞,肺泡上皮细胞,肝细胞,脾脏边缘区和红髓中有HSPA2阳性反应,着色深浅不等,大部分阳性反应位于细胞质,细胞核阳性反应极少;而在睾丸曲精小管中生精细胞细胞质和细胞核中均有HSPA2阳性反应,着色深浅不等;阴性对照组未观察到阳性反应。根据积分光密度值比较得出,HSPA2蛋白的阳性表达量在睾丸中最高,脑、肾脏、心脏、肺脏和肝脏次之,脾脏最少。【结论】通过基因水平和蛋白水平两个层面的研究,发现HSPA2在牦牛各组织器官中存在表达差异;睾丸中HSPA2基因和蛋白表达量均高于脑、肾脏、心脏、脾脏、肺脏和肝脏,提示HSPA2可能与睾丸的生殖功能密切相关。 展开更多
关键词 hspa2 牦牛 不同组织器官 实时荧光定量PCR 免疫组化
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益肾通络方对少弱精子症大鼠睾丸组织PI3K-AKT-mTOR通路、CatSper-1、HSPA2蛋白及mRNA表达的影响 被引量:25
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作者 孙自学 邱荃 +2 位作者 何鑫 张芳 赵沛沛 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期437-444,共8页
目的:基于PI3K-AKT-mTOR通路研究益肾通络方对少弱精子症模型大鼠睾丸组织的影响及作用机制。方法:将SPF级雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、左卡尼汀组、益肾通络方(YTP)组(高、低剂量组)、Omipalisib抑制剂(OI)组、Omipali... 目的:基于PI3K-AKT-mTOR通路研究益肾通络方对少弱精子症模型大鼠睾丸组织的影响及作用机制。方法:将SPF级雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、左卡尼汀组、益肾通络方(YTP)组(高、低剂量组)、Omipalisib抑制剂(OI)组、Omipalisib抑制剂+益肾通络方高剂量组(OI+YTP高剂量组)、Omripalisib抑制剂+益肾通络方低剂量组(OI+YTP低剂量组),每组各6只。除正常对照组外其余大鼠均在雷公藤多苷灌胃建立少弱精子症模型大鼠基础上给予相对应药物,镜下观察各组大鼠精子参数,HE染色观察各组睾丸组织病理变化,Western印迹和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测PI3K-AKT-mTOR信号通路相关蛋白及mRNA表达情况。结果:与模型组相比,左卡尼汀组、YTP高剂量组、YTP低剂量组在精子浓度和精子活力(PR、PR+NP)方面均显著提高(P<0.001);HE染色结果显示模型组生精细胞排列不整齐,生精小管管腔缩小,间隙变宽等,左卡尼汀组、YTP高剂量组、YTP低剂量组也观察到了与模型组相似的病理改变,但同时也观察到了较为完好的精子细胞且在数量相对模型组较多,OI组、OI+YTP高剂量组、OI+YTP低剂量组的病理改变与模型组相近。Western印迹结果显示:与模型组相比,左卡尼汀组可上调p-AKT、CatSper-1、HSPA2蛋白表达量(P<0.05),YTP低剂量组可上调p-AKT、mTOR、CatSper-1、HSPA2蛋白表达量(P<0.05),YTP高剂量组除可上调上述蛋白表达外,还可上调PI3K蛋白表达量(P<0.05);OI组PI3K、mTOR、CatSper-1的蛋白表达量与模型组对比无差异(P>0.05);OI+YTP高剂量组及OI+YTP低剂量组PI3K、p-AKT、mTOR、CatSper-1、HSPA2的蛋白表达与模型组、OI组对比无差异(P>0.05)。qRT-PCR结果显示:与模型组相比,左卡尼汀组、YTP高、低剂量组均可上调PI3K mRNA、mTOR mRNA、CatSper-1 mRNA、HSPA2 mRNA表达(P<0.05);YTP高剂量组可显著上调CatSper-1 mRNA表达(P<0.001),且与YTP低剂量组对比时,YTP高剂量组可以更有效上调PI3K的mRNA表达(P<0.05)。OI组PI3K、mTOR、CatSper-1、HSPA2的mRNA表达与模型组对比无差异(P>0.05);OI+YTP高剂量组及OI+YTP低剂量组PI3K、mTOR、CatSper-1、HSPA2的mRNA表达与模型组、OI组对比无差异(P>0.05)。结论:益肾通络方可改善雷公藤多苷诱导的少弱精子症SD模型大鼠精子质量及睾丸组织病理形态变化,其机制可能与该方上调了睾丸组织PI3K-AKT-mTOR通路的相关蛋白及mRNA表达有关。 展开更多
关键词 益肾通络方 男性不育 少弱精子症 实验研究 PI3K-AKT-mTOR CatSper-1 hspa2
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TD-SCDMA的长期演进与HSPA+增强技术 被引量:3
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作者 彭木根 洪伟 王文博 《电信科学》 北大核心 2007年第6期45-52,共8页
为了提高TD-SCDMA系统的传输速率,向国际电联IMT-Advanced所提技术指标迈进,TD-SCDMA的演进策略提上了研究议程。鉴于TD-SCDMA的短期演进HSPA(包括HSDPA和HSUPA)无法满足IMT-Advanced的要求,提出了HSPA+和LTE的概念。本文首先介绍了TD-S... 为了提高TD-SCDMA系统的传输速率,向国际电联IMT-Advanced所提技术指标迈进,TD-SCDMA的演进策略提上了研究议程。鉴于TD-SCDMA的短期演进HSPA(包括HSDPA和HSUPA)无法满足IMT-Advanced的要求,提出了HSPA+和LTE的概念。本文首先介绍了TD-SCDMA未来演进和发展的趋势,包括TD-SCDMA的增强、短期演进、中长期演进以及基于IMT-Advanced的4G等。然后重点分析了HSPA+的关键技术和协议架构等,最后对LTE的帧结构和多址方式进行了分析,提出了演进时的关键点和对策。 展开更多
关键词 TD-SCDMA hspa hspa%plus% 长期演进计划 IMT-ADVANCED
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牦牛应激型HSPA1A和HSPA2基因的克隆及序列分析 被引量:2
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作者 王树茂 兰道亮 +2 位作者 陈亚冰 黄偲 李键 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期9-14,共6页
为了解牦牛应激型HSPA1A和HSPA2基因的特点,根据GenBank已公布的牛应激型HSPA1A和HSPA2基因序列设计4对引物,每个基因分两段扩增,测序并拼接,首次克隆牦牛应激型HSPA1A和HSPA2基因。序列分析表明,扩增到的牦牛应激型HSPA1A基因全长2 134... 为了解牦牛应激型HSPA1A和HSPA2基因的特点,根据GenBank已公布的牛应激型HSPA1A和HSPA2基因序列设计4对引物,每个基因分两段扩增,测序并拼接,首次克隆牦牛应激型HSPA1A和HSPA2基因。序列分析表明,扩增到的牦牛应激型HSPA1A基因全长2 134bp,开放阅读框全长1 926bp,编码641个氨基酸,分子质量为70.26ku;HSPA2基因全长1 911bp,开放阅读框全长1 911bp,编码636个氨基酸,分子质量为69.85ku。将HSPA1A和HSPA2基因开放阅读框编码的氨基酸序列进行ScanProsite分析,均得到3个HSP70蛋白家族标记。核苷酸序列同源性分析表明,HSPA1A和HSPA2基因具有较高的保守性,牦牛与牛的HSPA1A和HSPA2基因核苷酸序列同源性最高,分别为99.8%和99.1%。遗传进化关系分析表明,牦牛与牛的应激型HSPA1A和HSPA2基因亲缘关系最近。 展开更多
关键词 牦牛 hspa1A hspa2 序列分析
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猪附红细胞体HspA1与DnaJ相互作用的双分子荧光互补的研究 被引量:1
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作者 胡盼 米荣升 +8 位作者 黄燕 陆珂 贾海燕 程龙 詹婷婷 宋悦 王香平 韩先干 陈兆国 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期635-643,共9页
为研究猪附红细胞体DnaK样蛋白HspA1与DnaJ是否存在相互作用,采用双分子荧光互补技术进行检测。利用生物信息学软件预测HspA1的B细胞抗原表位和功能结构域,选取具有功能结构域且抗原表位富集的第388-609位区域为HspA1表位区。分别对HspA... 为研究猪附红细胞体DnaK样蛋白HspA1与DnaJ是否存在相互作用,采用双分子荧光互补技术进行检测。利用生物信息学软件预测HspA1的B细胞抗原表位和功能结构域,选取具有功能结构域且抗原表位富集的第388-609位区域为HspA1表位区。分别对HspA1编码基因a1、HspA1表位区编码基因a1-epi进行扩增,并克隆到pBiFC-VC155载体中,同时将DnaJ编码基因dnaj克隆到pBiFC-VN155中,分别与上述重组质粒共转染293T细胞。结果显示,成功地构建了含HspA1编码基因a1、HspA1表位区编码基因a1-epi、DnaJ编码基因dnaj的真核重组表达质粒pBiFC-VC155-a1、pBiFC-VC155-a1-epi和pBiFC-VN155-dnaj,共转染的293T细胞在荧光显微镜下均能观察到绿色荧光,表明HspA1和HspA1表位区均与DnaJ存在相互作用。本研究为进一步探讨HspA1的生物学功能和作用机制提供了新的思路。 展开更多
关键词 猪附红细胞体 hspa1 hspa1表位区 DNAJ 蛋白相互作用
原文传递
牦牛HSPA1A和HSPA2基因组织分布的检测 被引量:1
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作者 王树茂 兰道亮 +2 位作者 陈亚冰 林宝山 李键 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第12期139-144,共6页
旨在建立一种检测牦牛HSP70家族应激型HSPA1A和HSPA2基因的实时荧光定量PCR方法。采用普通PCR,结合实时荧光定量PCR方法,检测正常情况下应激型HSPA1A和HSPA2基因在牦牛各组织中的表达分布。结果显示,HSPA1A基因在公牦牛与母牦牛中的表... 旨在建立一种检测牦牛HSP70家族应激型HSPA1A和HSPA2基因的实时荧光定量PCR方法。采用普通PCR,结合实时荧光定量PCR方法,检测正常情况下应激型HSPA1A和HSPA2基因在牦牛各组织中的表达分布。结果显示,HSPA1A基因在公牦牛与母牦牛中的表达基本一致,所有组织中均少量表达,肺中最低,肌肉相对表达较高;HSPA2基因在公牦牛与母牦牛中的表达也基本一致,所有组织均少量表达,肺中最低,脑、睾丸和卵巢相对表达较高。该研究结果提示正常情况下HSPA2基因可能在牦牛生殖繁育上发挥一定作用,为进一步研究HSPA1A基因和HSPA2基因在牦牛对环境的适应性方面提供基础资料和研究方法。 展开更多
关键词 牦牛 hspa1A hspa2 实时荧光定量PCR 组织分布
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幽门螺杆菌UreB和HspA DNA疫苗的构建及免疫评价 被引量:3
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作者 刘秀丽 李淑琴 +3 位作者 刘纯杰 陶好霞 李勣 张兆山 《生物技术通讯》 CAS 2002年第3期161-163,共3页
本研究选择幽门螺杆菌尿素酶B和热休克蛋白A为候选抗原,通过PCR扩增基因,克隆至真核表达质粒pCD-NA3.1(-)His-Myc上,构建成DNA疫苗。通过小鼠免疫效果的评价,获得两株具有免疫源性DNA疫苗。
关键词 幽门螺杆菌 UREB hspa DNA疫苗 构建 免疫评价 尿素酶B 热休克蛋白A 候选抗原
暂未订购
幽门螺杆菌HspA与大肠杆菌LTB基因融合及表达 被引量:2
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作者 郭红 邹全明 +1 位作者 赵哓晏 吴超 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第10期1475-1479,共5页
目的:构建和表达人幽门螺杆菌(Hpylori)热休克蛋白A亚单位(HspA)与E. coli不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的重组融合蛋白,并对其基本的生物学及免疫学特性进行研究.方法:采用PCR技术从人H pylori染色体DNA中扩增出354 bp的HspA基因,并克隆至p... 目的:构建和表达人幽门螺杆菌(Hpylori)热休克蛋白A亚单位(HspA)与E. coli不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的重组融合蛋白,并对其基本的生物学及免疫学特性进行研究.方法:采用PCR技术从人H pylori染色体DNA中扩增出354 bp的HspA基因,并克隆至pPLtB载体中与1tB基因融合,形成含有1tB-H spA融合基因的原核表达载体pPLH,并在工程菌E.coli JM109中诱导表达.结果:经序列分析,1tB-HspA融合基因由684个碱基组成,为编码228个氨基酸残基的多肽.SDS-PAGE和Westernblotting检测发现,融合蛋白的Mr 25×103,并与Hpylori感染的阳性血清发生抗原抗体反应,ELISA检测显示融合蛋白中存在LTB组分,并保持与LT受体-神经节苷脂GM1结合的活性.结论:LTB-HspA融合蛋白有可能用于Hpylori基因工程疫苗的研究. 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 hspa基因 大肠杆菌 LTB基因 重组融合蛋白 免疫学特性 PCR技术 基因融合 基因表达
暂未订购
共沉默Birc5和Hspa5的双干扰siRNA质粒载体构建及鉴定 被引量:1
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作者 王强 潘丽红 +1 位作者 吕丹 朱慧芬 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期170-174,共5页
目的构建共沉默Birc5和Hspa5的双干扰siRNA质粒,为进一步以Birc5和Hspa5作为肿瘤生物治疗靶点研究提供基础。方法使用Ambion Target Finder设计Birc5和Hspa5mRNA的干扰序列;挑取酶切鉴定正确的质粒转化菌液Birc5-siRNA和Hspa5-siRNA测... 目的构建共沉默Birc5和Hspa5的双干扰siRNA质粒,为进一步以Birc5和Hspa5作为肿瘤生物治疗靶点研究提供基础。方法使用Ambion Target Finder设计Birc5和Hspa5mRNA的干扰序列;挑取酶切鉴定正确的质粒转化菌液Birc5-siRNA和Hspa5-siRNA测序鉴定;采用分子克隆技术构建特异性沉默Birc5和Hspa5的双干扰siRNA质粒,命名为pgsiRNA-Birc5+Hspa5,酶切鉴定;将pgsiRNA-Birc5+Hspa5转染HepG2细胞48h后采用Real-time PCR检测Birc5和Hspa5的mRNA表达水平。结果经酶切鉴定正确的质粒转化菌液Birc5-siRNA和Hspa5-siRNA测序结果显示均为插入正确的克隆质粒;经酶切鉴定分析显示pgsiRNA-Birc5+Hspa5符合酶切鉴定结果;转染pgsiRNA-Birc5+Hspa5 48h后HepG2细胞Birc5和Hspa5mRNA表达均显著下降,未转染组Birc5和Hspa5mRNA的相对表达量均为1.0,pgsiRNA-Birc5+Hspa5组Birc5为0.15(P<0.05),Hspa5为0.37(P<0.05),表明双干扰载体构建成功。结论成功构建了Birc5和Hspa5双干扰siRNA质粒,为进一步同时靶向沉默肿瘤Birc5和Hspa5基因研究提供了工具和基础。 展开更多
关键词 Birc5 hspa5 SIRNA
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