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雷公藤甲素介导c-MYC/HSP70/NF-κB信号通路调节ILC2激活改善哮喘小鼠气道高反应性和气道炎症
1
作者 王晓艳 程琪 《解剖科学进展》 2025年第3期335-338,342,共5页
目的 探究雷公藤甲素通过介导第2组先天淋巴样细胞(ILC2)激活改善哮喘小鼠气道高反应性和气道炎症。方法 BALB/c小鼠随机分为对照组(Control组)、哮喘组(Asthma组)、雷公藤甲素低剂量组(TP-L组)、雷公藤甲素中剂量组(TP-M组)、雷公藤甲... 目的 探究雷公藤甲素通过介导第2组先天淋巴样细胞(ILC2)激活改善哮喘小鼠气道高反应性和气道炎症。方法 BALB/c小鼠随机分为对照组(Control组)、哮喘组(Asthma组)、雷公藤甲素低剂量组(TP-L组)、雷公藤甲素中剂量组(TP-M组)、雷公藤甲素高剂量组(TP-H组)、雷公藤甲素高剂量+ov-NC组(TP-H+ov-NC组)和雷公藤甲素高剂量+ov-c-MYC组(TP-H+ov-c-MYC组),每组10只。采用卵清蛋白致敏和激发哮喘,末次激发后24 h检测气道高反应性;HE染色观察气道炎症细胞浸润情况;流式细胞术检测肺ILC2比例;Western blot检测流式细胞术分选的肺ILC2中c-MYC、HSP70和p-NF-κB p65蛋白表达情况。结果 雷公藤甲素降低哮喘小鼠RL值并增加Cdyn值,抑制小鼠肺组织炎症细胞浸润,降低哮喘小鼠肺组织ILC2比例,降低哮喘小鼠肺ILC2中c-MYC、HSP70和p-NF-κB p65表达;过表达c-MYC部分逆转雷公藤甲素对哮喘小鼠肺ILC2中HSP70和p-NF-κB p65表达的抑制作用、对哮喘小鼠肺组织ILC2比例的下调作用以及对哮喘小鼠气道高反应性和气道炎症的抑制作用。结论 雷公藤甲素改善哮喘小鼠气道高反应性和气道炎症,其机制可能与抑制c-MYC/HSP70/NF-κB信号通路介导的肺ILC2激活抑制有关。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 哮喘 气道高反应性 ILC2 c-MYC/hsp70/NF-κB信号通路
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Hsp70A-RBCS2融合启动子调控PHB合成酶基因在莱茵衣藻中的表达 被引量：1
2
作者 王潮岗 胡章立 《中国科学（C辑）》 CSCD 北大核心 2009年第8期775-782,共8页
利用Hsp70A-RBCS2融合启动子构建了新型的莱茵衣藻表达载体,并获得了聚-β-羟基丁酸(PHB)合成酶基因(phbC)的衣藻表达载体p105C124和pH105C124.通过"珠磨法"分别将上述两个衣藻表达载体导入细胞壁缺陷的莱茵衣藻CC-849(Chlamy... 利用Hsp70A-RBCS2融合启动子构建了新型的莱茵衣藻表达载体,并获得了聚-β-羟基丁酸(PHB)合成酶基因(phbC)的衣藻表达载体p105C124和pH105C124.通过"珠磨法"分别将上述两个衣藻表达载体导入细胞壁缺陷的莱茵衣藻CC-849(Chlamydomonas reinhardtii CC-849)中,得到了具有Zeomycin抗性的转基因藻株.Hsp70A-RBCS2启动子介导的外源基因遗传转化效率明显高于RBCS2启动子,Southern杂交结果显示,phbC基因以低拷贝数整合进莱茵衣藻的基因组DNA中.在光照下,Hsp70A-RBCS2融合启动子能够有效调控phbC基因在莱茵衣藻中的转录和翻译,得到的蛋白产物具有PHB合成酶活性,40℃热激诱导可使PHB合成酶的酶活性提高到1.8倍.因此,Hsp70A-RBCS2融合启动子可使phbC基因在莱茵衣藻中实现可诱导的表达,该研究对利用衣藻合成PHB具有重要的学术意义,进一步的研究将通过"共转化"法获得二价或三价的转基因藻,最终实现在转基因藻中合成PHB. 展开更多
关键词 转基因衣藻 phbC基因 hsp70a-rbcs2启动子 聚-β-羟基丁酸(PHB)
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榄香烯或热休克对人肝癌细胞HepG_2 HSP70膜表达及多种HSP基因表达的影响 被引量：8
3
作者 高志红 郭连英 +3 位作者 沈杰 黄琳 施广霞 钱振超 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期790-794,共5页
目的 :研究榄香烯或热休克对人肝癌细胞HepG2 HSP70膜表达及多种HSP基因表达的影响。方法 :免疫荧光和FCM观察榄香烯 (5 0 μg ml,1h)或热休克 (42℃ ,1h)处理后肿瘤细胞HSP70的膜表达 ,放线菌素D阻断基因转录。应用人类基因表达谱芯片... 目的 :研究榄香烯或热休克对人肝癌细胞HepG2 HSP70膜表达及多种HSP基因表达的影响。方法 :免疫荧光和FCM观察榄香烯 (5 0 μg ml,1h)或热休克 (42℃ ,1h)处理后肿瘤细胞HSP70的膜表达 ,放线菌素D阻断基因转录。应用人类基因表达谱芯片分析经榄香烯或热休克处理的人肝癌细胞HepG2 多种热休克蛋白基因及与热休克蛋白调控相关基因表达谱的改变。结果 :榄香烯或热休克处理 1h后 ,肿瘤细胞膜表面HSP70的表达均有增高 ,而以榄香烯处理为明显 ,放线菌素D的加入在两种处理中均增高了HSP70膜表达的阳性率。两种处理均使细胞的HSP70HP(EnhancerProtein)基因表达增高 ,而以热休克处理为更明显 ,HSPA2的表达均有所下降 ,也以热休克处理更明显 ,HSF1基因在热休克处理为上调 ,而在榄香烯处理则为下调 ,与肿瘤免疫密切相关的HSP70、HSP72、HSP75及HSP90、gp96基因的表达则没有变化。结论 :榄香烯较热休克处理早期能更多地促进HepG2 细胞HSP70的膜表达 ,其机制可能是与其改变胞内已存在的HSP70的分布 ,和 或促进HSP70mRNA的翻译有关。两种处理均能改变与HSPs调控相关基因的表达 ,并可引起HSPA2基因表达下调。 展开更多
关键词 榄香烯 热休克 人肝癌细胞 HepG2hsp70膜 hsp 基因表达
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低浓度Pb^(2+)、Cd^(2+)对鲫鱼肝脏组织中HSP70诱导的影响 被引量：8
4
作者 沈骅 王晓蓉 +2 位作者 张景飞 刘晓华 赵永娟 《环境污染与防治》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期244-246,共3页
以鲫鱼 ( Carassius auratus)作为实验对象 ,经过 40 d Pb2 +、Cd2 +不同浓度的暴露后 ,运用 SDS-PAGE和 Western Blot-ting方法检测鱼肝脏组织内应激蛋白 HSP70的诱导表达情况。结果表明 ,在实验浓度下 ,与对照组相比 ,Pb2 + 、Cd2 + ... 以鲫鱼 ( Carassius auratus)作为实验对象 ,经过 40 d Pb2 +、Cd2 +不同浓度的暴露后 ,运用 SDS-PAGE和 Western Blot-ting方法检测鱼肝脏组织内应激蛋白 HSP70的诱导表达情况。结果表明 ,在实验浓度下 ,与对照组相比 ,Pb2 + 、Cd2 + 对鱼肝脏内HSP70有显著的诱导 ( P<0 .0 5 ) ,但在 Cd2 +浓度为 0 .2 mg/ L 有停止表达 HSP70的现象 ,可能是由于浓度过高造成了组织病理损伤而破坏了诱导表达机制。实验还发现 ,在实验浓度低于国家渔业用水标准时 ,HSP70仍然表现为明显诱导 ( P<0 .0 5 ) ,充分说明运用分子生物学指标要比传统的环境检测指标敏感 。 展开更多
关键词 hsp70 诱导 肝脏组织 实验 鱼肝 暴露后 对照组 CD^2+ PB^2+ 污染物
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HSP70抑制H_2O_2所致C2C12肌原细胞Smac从线粒体的释放及细胞凋亡 被引量：4
5
作者 蒋碧梅 肖卫民 +2 位作者 石永忠 刘梅冬 肖献忠 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期32-37,共6页
目的:阐明HSP70对H2O2所致C2C12肌原细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:采用基因瞬间转 染技术使细胞HSP70或/和Smac高表达,采用Hoechst33258染色观察H2O2(0.5mmol/L)处理转基因C2C12肌原 细胞不同时间后细胞核形态学改变并计算凋... 目的:阐明HSP70对H2O2所致C2C12肌原细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:采用基因瞬间转 染技术使细胞HSP70或/和Smac高表达,采用Hoechst33258染色观察H2O2(0.5mmol/L)处理转基因C2C12肌原 细胞不同时间后细胞核形态学改变并计算凋亡核百分率。DNA抽提及琼脂糖电泳观察凋亡特征性梯带。采用 caspase活性定量检测试剂盒及蛋白质印迹分析caspase 9和caspase 3的活化。利用免疫荧光分析HSP70对H2O2 所致Smac从线粒体释放的影响。结果:HSP70对H2O2及Smac所致C2C12肌原细胞凋亡具有明显的抑制作用,凋 亡核百分率明显降低,DNA电泳未出现明显“梯状”条带;caspase 9和caspase 3的活化明显受到抑制;并进一步发 现HSP70可抑制H2O2所致C2C12肌原细胞Smac从线粒体释放。结论:HSP70可通过抑制Smac从线粒体释放来 展开更多
关键词 hsp70 SMAC 细胞凋亡 H2O2 C2C12肌原细胞
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HSP70-肿瘤肽复合物的纯化及其对肝癌细胞株HepG-2增殖的作用 被引量：5
6
作者 隋春阳 李航宇 +3 位作者 胡勇 宗志红 李洪秀 郭仁宣 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第18期1775-1779,共5页
目的:应用快速蛋白液相色谱(FPLC)系统从肝癌组织中分离和纯4EHSP70-肽复合物,并研究其对肝癌细胞系HepG-2增殖的影响．方法:将组织进行匀浆、高速离心提取总蛋白后依次进行ConA-Sepharose亲和层析和 DEAE-Sephacel子交换层析分离纯化,... 目的:应用快速蛋白液相色谱(FPLC)系统从肝癌组织中分离和纯4EHSP70-肽复合物,并研究其对肝癌细胞系HepG-2增殖的影响．方法:将组织进行匀浆、高速离心提取总蛋白后依次进行ConA-Sepharose亲和层析和 DEAE-Sephacel子交换层析分离纯化,所得蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot进行蛋白分子质量及性质鉴定,Bradford 法测定蛋白浓度;利用MTT方法检测HSP70- 肽复合物对HepG-2细胞增长的情况．结果:分离、纯化得到的蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、考马斯量蓝鉴定为单一带, 分子质量为70 kDa;Western blot结果证实为 HSP70,每10 g组织最终获得1．5 mg的HSP70; HSP70刺激组12,48,72 h与对照组的A值之间有显著差异(0．1 mg／L:t=-0．2500,P=0．00; t=-0．1777,P=0．001:t=-0．3094,P=0．001; 0．5 mg／L:t=-0．2878,P=0．00;t=-0．2044,P= 0．00;t=-0．3285,P=0．00;1 mg／L:t=-0．3118, P=0．00;t=-0．2592,P=0．00;t=-0．1994, P=0．025;5 mg／L:t=-0．4007,P=0．00;t= -0．1302,P=0．016;t=-0．2537,P=0．005),细胞存活率明显高于对照组(P<0．01)．结论:使用本分离纯化方法可获得高纯度 HSP70肽复合物;HSP70肽复合物可以促进 HepG-2细胞的生长． 展开更多
关键词 hsp70-肿瘤肽复合物 纯化 肝癌 HepG-2细胞系 WESTERN BLOT MTT
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抑制HSP70-2基因表达诱导肝癌细胞G_2/M期阻滞的机制研究 被引量：4
7
作者 夏丽敏 田德安 +5 位作者 张琼 晏维 周珍珍 朱倩 罗敏 张全乐 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2008年第12期966-970,共5页
目的探讨HSP70-2在肝癌组织中的表达,以及抑制HSP70-2表达对肝癌细胞生长和周期影响的详细作用机制。方法免疫组织化学检测HSP70-2在45例肝癌组织和癌旁组织中的表达,Western blot检测HSP70-2在5种肝癌细胞株中的表达。设计合成针对HSP7... 目的探讨HSP70-2在肝癌组织中的表达,以及抑制HSP70-2表达对肝癌细胞生长和周期影响的详细作用机制。方法免疫组织化学检测HSP70-2在45例肝癌组织和癌旁组织中的表达,Western blot检测HSP70-2在5种肝癌细胞株中的表达。设计合成针对HSP70-2基因的特异性shRNA,构建真核表达载体HSP70-2 shRNA1和HSP70-2 shRNA2。转染肝癌细胞后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测HSP70-2表达及细胞周期相关蛋白p-Cdc2(Tyr15)、Cdc25C、Cdc2和cyclinB1的表达变化。结果免疫组织化学检测显示,45例肝癌组织中有33例(73.3%)HSP70-2蛋白表达阳性,45例癌旁组织中仅4例(8.9%)表达阳性,表达差异有显著性(P<0.05)。HSP70-2蛋白在HepG2、Bel-7402、Huh-7、Hep3B、SMMC-7721肝癌细胞中的表达明显高于其在L02细胞中的表达。HSP70-2 shRNA1和shRNA2均能有效抑制肝癌细胞HepG2和Bel-7402中HSP70-2的表达。与control shRNA组相比,转染HSP70-2 shRNA1和shRNA2组HepG2和Bel-7402细胞生长增殖速度均明显减慢,细胞周期表现为处于G2/M期的细胞比例显著增加。Western blot检测发现,转染HSP70-2 shRNA1和shRNA2后肝癌细胞中磷酸化的p-Cdc2(Tyr15)表达增加,Cdc25C、Cdc2和cyclinB1表达显著减少。结论HSP70-2在肝癌中过表达,抑制HSP70-2表达可以显著抑制肝癌细胞的增殖,诱导细胞周期阻滞,其诱导G2/M期阻滞的机制是通过影响Cdc25C-Cdc2/cyclinB1通路来实现的。 展开更多
关键词 hsp70-2 肝癌 RNA干扰 细胞周期
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TNF-α和HSP70-2基因多态性与急性胰腺炎的相关性研究 被引量：3
8
作者 胡家平 庄建新 +4 位作者 李勇 余永欢 胡庆红 赖银英 吴安涛 《天津医药》 CAS 2015年第1期57-60,共4页
目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)-α和热休克蛋白(HSP)70-2基因多态性与急性胰腺炎(AP)的相关性。方法运用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RLFP)检测72例AP患者(AP组)和71例正常人(对照组)的TNF-α及HSP70-2基因多态性。结果 AP组... 目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)-α和热休克蛋白(HSP)70-2基因多态性与急性胰腺炎(AP)的相关性。方法运用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RLFP)检测72例AP患者(AP组)和71例正常人(对照组)的TNF-α及HSP70-2基因多态性。结果 AP组与对照组的TNF-α基因型和等位基因比例间差异无统计学意义;AP组中,重型胰腺炎(SAP)和轻型胰腺炎(MAP)的TNF-α基因型和等位基因间差异无统计学意义。TNF-α和HSP70-2基因AA型与GA+GG型患者的白细胞、C反应蛋白(CRP)、淀粉酶、三酰甘油、血糖差异均无统计学意义;AP组的HSP70-2基因GA+GG型患者比例高于对照组(69.4%vs 49.3%),AP组携带的G等位基因比例高于对照组(46.5%vs 31.7%),差异均有统计学意义。AP组中,SAP的GA+GG型比例高于MAP(81.0%vs 53.3%),差异有统计学意义;而G等位基因在SAP和MAP间无明显差异(P>0.05)。结论 TNF-α基因多态性与AP不相关,HSP70-2基因多态性与AP相关,携带G等位基因发生重症AP的可能性增大,可能是重症AP的易感因素之一。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子Α hsp70热休克蛋白质类 胰腺炎 基因多态性 hsp70—2 多态性 限制性片断长度 聚合酶链反应
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促红细胞生成素对缺血再灌注心肌HSP70及ERK1/2表达的影响 被引量：5
9
作者 王娜娜 王文生 刘鑫璐 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期788-790,794,共4页
目的探讨促红细胞生成素(EPO)预处理对缺血再灌注的大鼠心肌组织热休克蛋白70(HSP70)及细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)表达的影响及其可能的机制。方法建立大鼠在体缺血再灌注模型,结扎左前降支动脉30 min,松解2 h。24只大鼠随机分为3... 目的探讨促红细胞生成素(EPO)预处理对缺血再灌注的大鼠心肌组织热休克蛋白70(HSP70)及细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)表达的影响及其可能的机制。方法建立大鼠在体缺血再灌注模型,结扎左前降支动脉30 min,松解2 h。24只大鼠随机分为3组,每组8只。假手术组:建模前24 h腹腔注射生理盐2 mL;对照组:建模前24 h腹腔注射生理盐水2 mL;EPO组:建模前24 h腹腔注射EPO(5 000 U/kg)。假手术组开胸手术,左前降支动脉下只穿线不结扎。RT-PCR方法分析左心室心肌组织HSP70和ERK1/2 mRNA的表达,并分析HSP70 mRNA和ERK1/2 mRNA表达量的关系。结果 EPO组HSP70mRNA表达(0.850±0.066)较盐水对照组(0.355±0.043)显著升高(P<0.01);EPO组ERK1/2 mRNA(1.150±0.125)较盐水对照组(0.576±0.116)表达水平显著升高(P<0.01);EPO预处理组大鼠的心肌组织HSP70与ERK1/2 mRNA表达量呈显著正相关(r=0.965,P<0.01)。结论 EPO预处理能够促进缺血再灌注心肌组织HSP70及ERK1/2 mRNA的表达,HSP70表达量与ERK1/2mRNA表达量呈显著正相关。 展开更多
关键词 促红细胞生成素 hsp70 ERK1/2 心肌缺血再灌注损伤
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肝癌及癌旁组织中HSP70和bcl-2表达及意义 被引量：2
10
作者 崔彦 董家鸿 +3 位作者 周金莲 张铭 吴继华 张建中 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1610-1613,共4页
目的探讨肝癌及癌旁组织中HSP70和bcl-2表达及意义。方法应用免疫组织化学Elivision法检测58例肝细胞癌及癌旁组织HSP70和bcl-2表达,并作HE染色,进行肝癌组织学分级(I-IV级,Edmond-son-Kondo标准)。结果58例肝癌中I级7例,II级28例,III... 目的探讨肝癌及癌旁组织中HSP70和bcl-2表达及意义。方法应用免疫组织化学Elivision法检测58例肝细胞癌及癌旁组织HSP70和bcl-2表达,并作HE染色,进行肝癌组织学分级(I-IV级,Edmond-son-Kondo标准)。结果58例肝癌中I级7例,II级28例,III级18例,IV级5例,癌旁有肝硬化改变者47例(81.0%);HSP70阳性反应产物呈棕黄色颗粒状,主要定位于胞质,部分细胞同时出现核及胞膜着色。癌组织HSP70阳性率(70.7%)及阳性强度明显高于癌旁肝组织(37.9%),肝癌分化越差,HSP70表达越强。另外,癌旁肝硬化组织中增生的小胆管上皮细胞内HSP70呈普遍中度阳性表达;癌旁肝组织的bcl-2阳性率为77.6%,呈簇状和/或片状分布,癌组织中bcl-2阳性率为19.0%,且阳性细胞数明显少于癌旁组织,多呈碎点状。结论HSP70表达水平可反映肝癌细胞的增殖及恶性程度,有一定诊断和预后价值;肝癌和癌旁组织bcl-2染色对比显示肝癌细胞发生发展过程中抑凋亡机制减弱;HSP70可能参与肝癌及癌旁细胞的凋亡调控。 展开更多
关键词 肝细胞癌 癌旁肝组织 hsp70 BCL-2
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吐温80合并温热诱导BGC-823胃癌细胞凋亡及对Hsp70,Bcl-2和Bax表达的影响 被引量：3
11
作者 杨耀琴 陈斌 +1 位作者 陶惠红 杨虎川 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期306-309,359,共5页
目的　观察膜活化剂吐温 80合并温热作用对BGC 82 3人胃癌细胞生长、凋亡及对Hsp70、Bcl 2、Bax表达的影响。方法　应用MTT法、荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳 ,测定 0 1%吐温 80与 4 2℃ 10 0min合并作用对BGC 82 3细胞的抑制效应和诱... 目的　观察膜活化剂吐温 80合并温热作用对BGC 82 3人胃癌细胞生长、凋亡及对Hsp70、Bcl 2、Bax表达的影响。方法　应用MTT法、荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳 ,测定 0 1%吐温 80与 4 2℃ 10 0min合并作用对BGC 82 3细胞的抑制效应和诱导细胞凋亡的影响 ;应用免疫细胞化学染色 ,观察合并作用后不同时间 (0h、 8h、 16h、 2 4h)BGC 82 3细胞Hsp70、Bcl 2、Bax的表达改变。结果　①吐温 80合并 4 2℃温热作用对细胞具有明显的抑制效应 (P <0 0 0 1)。②合并作用后 2 4h ,可见大量肿瘤细胞凋亡。③合并作用可明显抑制BGC 82 3细胞Hsp70的表达 ;Bcl 2、Bax的表达均增加 ,且Bax的表达强于Bcl 2 ,并全部分布在胞浆。结论　吐温 80合并 4 2℃温热可通过诱导细胞凋亡来抑制肿瘤细胞生长 ,其对细胞Hsp70表达的抑制和对Bcl 2。 展开更多
关键词 叶温80 温热诱导 BGC-823胃癌细胞凋亡 hsp70 BCL-2 BAX 表达
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毛细管电泳-激光诱导荧光法检测HSP70-2基因多态性研究 被引量：2
12
作者 阮佳 李永儒 +2 位作者 孙成均 周琛 李永新 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1135-1138,共4页
建立了HSP70-2基因多态性的毛细管电泳-激光诱导荧光（CE-LIF）检测方法。采用试剂盒法提取人血清标本中全基因组DNA作为模板,选择特异引物进行PCR扩增反应,产物用Pst I限制性内切酶酶切;酶切产物用高灵敏度的SYBR Gold荧光染料标记后,... 建立了HSP70-2基因多态性的毛细管电泳-激光诱导荧光（CE-LIF）检测方法。采用试剂盒法提取人血清标本中全基因组DNA作为模板,选择特异引物进行PCR扩增反应,产物用Pst I限制性内切酶酶切;酶切产物用高灵敏度的SYBR Gold荧光染料标记后,用毛细管电泳-激光诱导荧光法检测。在优化的毛细管电泳-激光诱导荧光条件下,酶切产物在25 min内即可完成检测。GeneRular 100bp DNA ladder在同一天内连续测定6次,迁移时间和峰面积的RSD分别为1.8%~2.9%和2.8%~7.9%;连续6日测定迁移时间与峰面积的RSD分别为2.1%~4.3%和3.5%~9.3%。本研究共检测200份样品,其中G/G分型3份,A/G分型25份,A/A分型172份,检测结果与凝胶电泳结果一致。CE-LIF检测方法具有电泳时间短、试样消耗少、绿色环保等优点,能用于HSP70-2基因多态性的检测。 展开更多
关键词 hsp70-2基因 基因多态性检测 毛细管电泳-激光诱导荧光检测
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高血压病、2型糖尿病血瘀证与非血瘀证患者白细胞HSP70基因表达研究 被引量：7
13
作者 陈利国 马民 +4 位作者 屈援 张春玲 苗俊英 孙兆贵 张庆祥 《山东中医药大学学报》 2005年第1期21-23,共3页
目的 :研究高血压病和 2型糖尿病血瘀证与非血瘀证患者白细胞中HSP70基因表达的变化及意义。方法 :应用流式细胞技术 ,观察了 10 0例血瘀证 (高血压病 4 9例 ,2型糖尿病 5 1例 )与 6 0例非血瘀证 (高血压病 31例 ,2型糖尿病 2 9例 )患者... 目的 :研究高血压病和 2型糖尿病血瘀证与非血瘀证患者白细胞中HSP70基因表达的变化及意义。方法 :应用流式细胞技术 ,观察了 10 0例血瘀证 (高血压病 4 9例 ,2型糖尿病 5 1例 )与 6 0例非血瘀证 (高血压病 31例 ,2型糖尿病 2 9例 )患者和 15例健康人 (正常对照组 )白细胞中HSP70基因表达的变化情况 ,并进行了血瘀证各分型之间的比较。结果 :高血压病与 2型糖尿病患者HSP70基因表达高于对照组 (P <0 .0 1) ;血瘀证组高于非血瘀证组 (P <0 .0 1) ;血瘀证各型中气滞血瘀型高于其他型 (P <0 .0 1)。结论 :①高血压病与 2型糖尿病患者HSP70基因异常表达 ;②提示血瘀证形成过程中存在HSP70基因的高水平表达 ;③气滞血瘀型明显高于其他各型 ,有关机制有待进一步探讨。 展开更多
关键词 血瘀证 高血压病 2型糖尿病 hsp70
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非小细胞肺癌HSP70、p27、bcl-2蛋白的表达水平及其临床意义 被引量：8
14
作者 陈亮 齐协飞 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2004年第4期247-251,共5页
目的　探讨HSP70、p2 7、bcl- 2蛋白在非小细胞肺癌组织中表达水平及其临床意义。方法　用S -P免疫组化法检测 6 0例非小细胞肺癌组织和 2 0例癌旁正常组织中的HSP70、p2 7、bcl- 2的表达水平。结果　HSP70、bcl- 2在肺癌组织中呈高表... 目的　探讨HSP70、p2 7、bcl- 2蛋白在非小细胞肺癌组织中表达水平及其临床意义。方法　用S -P免疫组化法检测 6 0例非小细胞肺癌组织和 2 0例癌旁正常组织中的HSP70、p2 7、bcl- 2的表达水平。结果　HSP70、bcl- 2在肺癌组织中呈高表达 ,表达率分别为 81.6 7%、73.33% ;p2 7蛋白呈低表达 ,为 2 1.6 7% ,三者与癌旁正常组织 (分别为 2 0 %、2 5 %、70 % )比较具有显著性差异(P <0 .0 5 )。在与肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移、TNM分期等关系中 ,p2 7在有淋巴结转移者表达明显低下 ,bcl- 2表达与TNM分期相关 ,而HSP70与它们均无关系。在HSP70表达阳性的肺癌组织中 ,bcl - 2亦有较高的阳性表达率 ,两者呈正相关 ,而与p2 7表达无明显关系。结论　HSP70、p2 7、bcl- 2蛋白作为细胞调控因子参与非小细胞肺癌的发生、发展 ,其中HSP70、bcl- 2可能起促进作用 ,而p2 7则起抑制作用 ;HSP70和bcl- 2表达呈正相关 ,提示两者共同或协同促进肺癌的形成。通过该三项指标的检测有助于非小细胞肺癌的临床诊断 ,并为肺癌的生物治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 hsp70 P27 BCL-2蛋白 表达
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HSP70、P53、Bcl-2在宫颈癌组织中的表达及其与人乳头瘤病毒感染的关系 被引量：2
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作者 陈向敏 夏克栋 +4 位作者 董海艳 林巧爱 陈韶 胡芸 董缪武 《温州医学院学报》 CAS 2004年第4期288-289,共2页
关键词 官颈癌 hsp70 P53 BCL-2 人乳头瘤病毒
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Hsp70、bcl-2在涎腺腺样囊性癌中的表达及意义 被引量：3
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作者 尹万忠 王宝明 +1 位作者 宋文植 祝威 《中国实验诊断学》 2006年第6期580-582,共3页
目的研究热休克蛋白70(Hsp70)和肿瘤抗凋亡蛋白bcl-2在涎腺腺样囊性癌(Salivary adenoid cystic carcino-ma,SACC)中的表达,并探讨与SACC发生、发展之间的关系及临床意义。方法采用免疫组化通用型二步法检测36例SACC中Hsp70及bcl-2的表... 目的研究热休克蛋白70(Hsp70)和肿瘤抗凋亡蛋白bcl-2在涎腺腺样囊性癌(Salivary adenoid cystic carcino-ma,SACC)中的表达,并探讨与SACC发生、发展之间的关系及临床意义。方法采用免疫组化通用型二步法检测36例SACC中Hsp70及bcl-2的表达,并选用10例多形性腺瘤(plemorphic adenomas,PAS)作对照。结果Hsp70表达为细胞核及胞浆中棕黄色染色,在SACC中的阳性表达为86.1%,与对照组PAS比较差异显著(P<0.01)。而bcl-2的表达为细胞浆着色,染色呈棕黄色或棕褐色,在SACC中的阳性表达为75%,与对照组PAS比较差异显著(P<0.05)。Hsp70表达与肿瘤临床分期、组织学分型及远处转移呈正相关(P<0.05),但与局部复发无相关性(P>0.05)。bcl-2表达与临床分期呈正相关(P<0.05),但与组织学分型、局部复发及远处转移无相关性(P>0.05)。结论Hsp70可作为判断患者预后的指标。Hsp70与bcl-2在SACC中的表达,经统计学分析认为无相关性(P>0.05),Hsp70与bcl-2并未见有显著的协同关系,二者可能通过不同的途径抑制细胞的凋亡。 展开更多
关键词 涎腺 腺样囊性癌 hsp70 BCL-2
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拟南芥HSP70基因启动子表达载体的构建及在烟草BY2细胞中的应用 被引量：2
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作者 郑帮 陈燕 +6 位作者 褚艳霞 孙虎林 郑亚洁 孙恒吉 司英语 周树敏 张卫 《上海师范大学学报（自然科学版）》 2013年第5期492-498,共7页
探讨了拟南芥的HSP70基因在液体悬浮培养的烟草BY2细胞中的表达及应用.用PCR扩增的方法从拟南芥col生态型基因组中扩增获得HSP70基因启动子序列,将其连入p1300表达载体且以GFP为报告基因,将该表达载体采用农杆菌转基因转入液体悬浮培养... 探讨了拟南芥的HSP70基因在液体悬浮培养的烟草BY2细胞中的表达及应用.用PCR扩增的方法从拟南芥col生态型基因组中扩增获得HSP70基因启动子序列,将其连入p1300表达载体且以GFP为报告基因,将该表达载体采用农杆菌转基因转入液体悬浮培养的烟草BY2细胞中,观察转基因细胞中报告基因GFP的表达情况.结果显示:HSP70:GFP转基因液体悬浮培养的烟草BY2细胞中有GFP的表达.该表达载体可在液体悬浮培养的BY2细胞中正常表达,且可在较短时间内获得大量实验材料,对拟南芥的HSP70基因启动子的进一步研究提供理论依据和丰富的实验材料,且可明显缩短实验周期. 展开更多
关键词 拟南芥 hsp70基因启动子 GFP 烟草BY2细胞
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褐黄血蜱HSP70-b2及其类14-Mer肽的作用研究 被引量：3
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作者 程天印 吴聪颖 +1 位作者 刘雨珂 段德勇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2570-2580,共11页
褐黄血蜱(Haemaphysalis flava,H.flava)热休克蛋白70-b2(heat shock protein 70-b2,HSP70-b2)属于HSP70家族。为评估褐黄血蜱HSP70-b2的抗凝血活性、免疫原性及其类14-Mer肽的作用,本研究通过RACE技术扩增褐黄血蜱HSP70-b 2基因全长;... 褐黄血蜱(Haemaphysalis flava,H.flava)热休克蛋白70-b2(heat shock protein 70-b2,HSP70-b2)属于HSP70家族。为评估褐黄血蜱HSP70-b2的抗凝血活性、免疫原性及其类14-Mer肽的作用,本研究通过RACE技术扩增褐黄血蜱HSP70-b 2基因全长;定点突变其编码类14-Mer肽段序列获得HSP70-b2^(M)基因全长;分别构建原核表达质粒,经原核表达、镍柱层析纯化获得可溶性重组蛋白,体外凝血四项试验评估rHSP70-b2与rHSP70-b2^(M)的抗凝血活性;将重组蛋白与弗氏(不)完全佐剂按推荐剂量乳化,皮下免疫Sprague Dawley(SD)大鼠,间接ELISA检测血清抗体效价,探究rHSP70-b2与rHSP70-b2^(M)的免疫原性。结果显示:HSP70-b 2基因全长2413 bp,开放阅读框长1905 bp,编码蛋白中具有HSP70蛋白家族标签。成功将HSP70-b 2中编码类14-Mer肽段的核酸序列突变为编码14-Mer肽段的核酸序列。与对照组相比,rHSP70-b2和rHSP70-b2^(M)对凝血酶原时间(prothrombin time,PT)和活化部分凝血酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)无显著作用(P>0.05),但均可延长凝血酶时间(thrombin time,TT)和纤维蛋白原(FIB)凝血时间(P<0.05),且rHSP70-b2^(M)与rHSP70-b2的抗血凝效果相近(P>0.05)。大鼠血清中抗体效价随免疫次数的增加而提升,且rHSP70-b2诱导产生的抗体水平极显著高于rHSP70-b2^(M)(P<0.01)。综上表明:rHSP70-b2和rHSP70-b2^(M)在体外可通过延长凝血酶时间和降低纤维蛋白原含量发挥抗凝血作用;rHSP70-b2和rHSP70-b2^(M)均具有良好的免疫原性,可诱发体液免疫。 展开更多
关键词 褐黄血蜱 hsp70-b2 定点突变 原核表达 抗凝活性 免疫原性
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兔肺VX2肿瘤经皮射频消融术前后HSP70表达的改变 被引量：2
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作者 杜铭祥 程庆书 +2 位作者 王云杰 马连君 张卫强 《实用癌症杂志》 2003年第6期577-579,共3页
目的　明确肺肿瘤经皮射频消融 (PRFA)术前后热休克蛋白 70 (HSP70 )表达的差异 ,探讨肺肿瘤PRFA治疗与机体免疫功能变化的关系。方法　采用VX 2肿瘤细胞悬液种植法建立兔肺肿瘤模型 ,进行PRFA后 ,观察原发灶及肿瘤的转移情况 ,并将肿... 目的　明确肺肿瘤经皮射频消融 (PRFA)术前后热休克蛋白 70 (HSP70 )表达的差异 ,探讨肺肿瘤PRFA治疗与机体免疫功能变化的关系。方法　采用VX 2肿瘤细胞悬液种植法建立兔肺肿瘤模型 ,进行PRFA后 ,观察原发灶及肿瘤的转移情况 ,并将肿瘤组织进行免疫组化染色 ,观察PRFA前后HSP70表达的变化。结果　PRFA后的VX 2肿瘤原发灶生长缓慢 ,腹腔淋巴结转移率低于对照组 ,7天时VX2肿瘤HSP70表达较对照组增加 ( 61.3 6%± 9.5 8%vs2 2 .13 %± 8.92 % ,P <0 .0 5 )。结论　PRFA后 ,肺VX 2肿瘤组织HSP70表达增加 。 展开更多
关键词 VX2肿瘤 经皮射频消融术 hsp70 表达 治疗 免疫功能
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谷氨酰胺对高温应激奶牛乳腺上皮细胞凋亡及Bcl-2、HSP70表达的影响 被引量：1
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作者 张响英 唐现文 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第10期111-115,共5页
为探讨谷氨酰胺预处理抗高温应激损伤的作用,以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,取对数生长期的奶牛乳腺上皮细胞,分为对照组、谷氨酰胺组、高温组、谷氨酰胺+高温组,采用MTT法检测细胞存活率、Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡、荧光... 为探讨谷氨酰胺预处理抗高温应激损伤的作用,以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,取对数生长期的奶牛乳腺上皮细胞,分为对照组、谷氨酰胺组、高温组、谷氨酰胺+高温组,采用MTT法检测细胞存活率、Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡、荧光定量PCR检测Bcl-2基因和HSP70基因的表达水平、比色法分析Caspase-3活性。结果显示,奶牛乳腺上皮细胞经谷氨酰胺预处理后,HSP70 mRNA表达量极显著增加(P <0. 01),提高了热应激状态下细胞的热耐受性和存活力;与高温组相比,谷氨酰胺+高温处理组Bcl-2 mRNA表达量在热恢复0、6、12 h分别提高3. 23倍(P <0. 05)、2. 49倍(P <0. 05)、1. 89倍(P> 0. 05),Caspase-3活性分别下降68. 04%(P <0. 01)、40. 89%(P <0. 05)、52. 06%(P <0. 01)。综上,谷氨酰胺预处理促进了奶牛乳腺上皮细胞Bcl-2和HSP70表达,缓解了高温应激引起的Caspase-3活性上升,抑制了热应激所致的奶牛乳腺上皮细胞凋亡。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 谷氨酰胺 热应激 hsp 70基因 Bcl-2基因 CASPASE-3活性
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