【目的】探究黑龙江林蛙(Rana amurensis)热休克蛋白90α家族B类成员1(heat shock protein 90 alpha class B member 1,HSP90AB1)基因的序列特征,了解其组织表达特性和脂多糖(LPS)诱导下的表达变化。【方法】以黑龙江林蛙脾脏组织cDNA...【目的】探究黑龙江林蛙(Rana amurensis)热休克蛋白90α家族B类成员1(heat shock protein 90 alpha class B member 1,HSP90AB1)基因的序列特征,了解其组织表达特性和脂多糖(LPS)诱导下的表达变化。【方法】以黑龙江林蛙脾脏组织cDNA为模板,通过PCR扩增HSP90AB1基因完整编码区(CDS)序列,使用在线软件对其编码蛋白进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR和Western blotting检测生理状态下HSP90AB1基因在黑龙江林蛙皮肤、肌肉、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和胃等组织器官中的表达量,同时对LPS诱导下不同时间点HSP90AB1基因在不同组织器官的转录水平进行检测。【结果】黑龙江林蛙HSP90AB1基因CDS长2178 bp,共编码725个氨基酸。生物信息学分析显示,HSP90AB1蛋白不存在信号肽且无跨膜信号,属于非跨膜蛋白,存在62个潜在磷酸化位点(含33个丝氨酸、19个苏氨酸及10个酪氨酸位点),其二级结构以α-螺旋为主(占47.03%),其次为无规则卷曲(占39.59%)和延伸链(占13.38%)。系统进化树结果显示,黑龙江林蛙与欧洲林蛙亲缘关系最近。在生理状态下,HSP90AB1基因在黑龙江林蛙胃中表达量最高,且显著高于其他组织(P<0.05);在肌肉组织中表达量最低,且显著低于其他组织(P<0.05)。Western blotting结果显示,HSP90AB1蛋白在黑龙江林蛙胃中表达量最高;在心脏中表达量最低,且显著低于其他组织(P<0.05)。LPS诱导后,黑龙江林蛙各组织中HSP90AB1基因表达量随诱导时间延长而呈降低趋势,其中诱导72和96 h表达量均显著低于其他时间点(P<0.05);诱导12、72 h时脾脏中HSP90AB1基因表达量显著高于其他组织(P<0.05);24 h时肌肉和脾脏中HSP90AB1基因表达量显著高于其他组织(P<0.05)。【结论】本研究成功克隆了黑龙江林蛙HSP90AB1基因CDS区序列,并明确了其在不同组织中的表达规律,其中在胃中表达量最高,肌肉组织中表达量最低。LPS诱导可明显抑制HSP90AB1基因在黑龙江林蛙不同组织中的转录水平。本试验结果为深入探究HSP90AB1基因在林蛙生理及应激过程中的功能机制提供了理论依据。展开更多
近日,北京大学药学院天然药物及仿生药物全国重点实验室王坚成教授团队在药剂学领域顶刊Journal of Controlled Release在线发表了题为“Nintedanib-amplified Effects of HSP47 siRNA on Liver Fibrosis Therapy by Inhibiting Collage...近日,北京大学药学院天然药物及仿生药物全国重点实验室王坚成教授团队在药剂学领域顶刊Journal of Controlled Release在线发表了题为“Nintedanib-amplified Effects of HSP47 siRNA on Liver Fibrosis Therapy by Inhibiting Collagen Secretion”的研究论文。该研究开发了一种尼达尼布(Nintedanib, NDNB)与HSP47 siRNA共递送的脂质纳米颗粒系统(LNP-siHSP47/NDNB),实现了通过“双通路抑制胶原分泌”协同增强肝纤维化治疗的策略。展开更多
文摘【目的】探究黑龙江林蛙(Rana amurensis)热休克蛋白90α家族B类成员1(heat shock protein 90 alpha class B member 1,HSP90AB1)基因的序列特征,了解其组织表达特性和脂多糖(LPS)诱导下的表达变化。【方法】以黑龙江林蛙脾脏组织cDNA为模板,通过PCR扩增HSP90AB1基因完整编码区(CDS)序列,使用在线软件对其编码蛋白进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR和Western blotting检测生理状态下HSP90AB1基因在黑龙江林蛙皮肤、肌肉、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和胃等组织器官中的表达量,同时对LPS诱导下不同时间点HSP90AB1基因在不同组织器官的转录水平进行检测。【结果】黑龙江林蛙HSP90AB1基因CDS长2178 bp,共编码725个氨基酸。生物信息学分析显示,HSP90AB1蛋白不存在信号肽且无跨膜信号,属于非跨膜蛋白,存在62个潜在磷酸化位点(含33个丝氨酸、19个苏氨酸及10个酪氨酸位点),其二级结构以α-螺旋为主(占47.03%),其次为无规则卷曲(占39.59%)和延伸链(占13.38%)。系统进化树结果显示,黑龙江林蛙与欧洲林蛙亲缘关系最近。在生理状态下,HSP90AB1基因在黑龙江林蛙胃中表达量最高,且显著高于其他组织(P<0.05);在肌肉组织中表达量最低,且显著低于其他组织(P<0.05)。Western blotting结果显示,HSP90AB1蛋白在黑龙江林蛙胃中表达量最高;在心脏中表达量最低,且显著低于其他组织(P<0.05)。LPS诱导后,黑龙江林蛙各组织中HSP90AB1基因表达量随诱导时间延长而呈降低趋势,其中诱导72和96 h表达量均显著低于其他时间点(P<0.05);诱导12、72 h时脾脏中HSP90AB1基因表达量显著高于其他组织(P<0.05);24 h时肌肉和脾脏中HSP90AB1基因表达量显著高于其他组织(P<0.05)。【结论】本研究成功克隆了黑龙江林蛙HSP90AB1基因CDS区序列,并明确了其在不同组织中的表达规律,其中在胃中表达量最高,肌肉组织中表达量最低。LPS诱导可明显抑制HSP90AB1基因在黑龙江林蛙不同组织中的转录水平。本试验结果为深入探究HSP90AB1基因在林蛙生理及应激过程中的功能机制提供了理论依据。
文摘近日,北京大学药学院天然药物及仿生药物全国重点实验室王坚成教授团队在药剂学领域顶刊Journal of Controlled Release在线发表了题为“Nintedanib-amplified Effects of HSP47 siRNA on Liver Fibrosis Therapy by Inhibiting Collagen Secretion”的研究论文。该研究开发了一种尼达尼布(Nintedanib, NDNB)与HSP47 siRNA共递送的脂质纳米颗粒系统(LNP-siHSP47/NDNB),实现了通过“双通路抑制胶原分泌”协同增强肝纤维化治疗的策略。
