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脊尾白虾热休克转录因子(HSF-1)基因鉴定、表达及在高温胁迫中的功能
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作者 夏金岐 刘进 +5 位作者 杨宇 王慕远 张伟竣 王敏敏 畅孟阳 史鲲鹏 《渔业科学进展》 北大核心 2026年第1期48-59,共12页
夏季极端高温频发,对我国特有的经济虾类脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)养殖业造成严重影响。热休克转录因子1(heat shock transcription factor 1,HSF-1)是调控热休克反应的关键因子,但其在脊尾白虾中的功能尚不明确。为了探究Echs... 夏季极端高温频发,对我国特有的经济虾类脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)养殖业造成严重影响。热休克转录因子1(heat shock transcription factor 1,HSF-1)是调控热休克反应的关键因子,但其在脊尾白虾中的功能尚不明确。为了探究Echsf-1在脊尾白虾高温胁迫中的功能,本研究利用生物信息学、qPCR、RNAi和转录组测序等方法,解析了Echsf-1在脊尾白虾高温胁迫中的表达及功能。结果显示,Echsf-1编码668个氨基酸,与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的氨基酸序列相似性最高。Echsf-1基因在脊尾白虾的鳃、胃、肝胰腺、肌肉及眼柄等组织中均有表达,其中,肝胰腺和鳃组织中的表达量在高温胁迫48 h后达到峰值,72 h后开始下降。敲降Echsf-1后,高温干扰组脊尾白虾的存活率显著降低,肝胰腺和鳃组织损伤加剧。转录组分析发现,与高温组相比,高温干扰组脊尾白虾在糖胺聚糖降解、淀粉和蔗糖代谢等通路中显著富集。其中,与硫酸乙酰肝素分解相关基因(如gusb、hspe和naglu)表达普遍上调,磷酸葡萄糖变位酶2基因(pgm2)表达下调。这些基因的表达变化可能影响组织修复和DNA损伤修复过程,进而加重组织损伤。本研究揭示了Echsf-1在脊尾白虾高温应激中的重要作用,为耐高温品种的选育提供了基础数据和理论支撑。 展开更多
关键词 热休克转录因子1 脊尾白虾 高温胁迫 RNAI
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IGF-1对HSF细胞分泌近视相关因子的影响及机制探索 被引量:2
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作者 晁荣荣 丁芝祥 +1 位作者 范晶 郑柳 《国际眼科杂志》 2025年第2期198-205,共8页
目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对人巩膜成纤维细胞(HSF)分泌转化生长因子-β2(TGF-β2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响及其机制。方法:分别使用IGF-1和PI3K/AKT通路抑制剂LY294002培养细胞,采用CCK-... 目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对人巩膜成纤维细胞(HSF)分泌转化生长因子-β2(TGF-β2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响及其机制。方法:分别使用IGF-1和PI3K/AKT通路抑制剂LY294002培养细胞,采用CCK-8法检测细胞活力,确定药物的最佳作用浓度和时间。采用细胞划痕法观察细胞迁移活性。为明确IGF-1对HSF细胞的影响以及PI3K/AKT通路在其中的调控作用,将细胞分为对照组(不含药物)、IGF-1(80μg/L)组、IGF-1+LY294002(80μg/L+5 mmol/L)组、LY294002(5 mmol/L)组,培养24 h;Western blot检测细胞中TGF-β2、MMP-2、HIF-1α、PI3K、AKT的蛋白表达水平;细胞免疫荧光检测TGF-β2、MMP-2、HIF-1α的荧光表达。结果:CCK-8结果显示不同浓度IGF-1培养的细胞活力以80μg/L IGF-1组最高(均P<0.05),且在不同培养时间下,以24 h时80μg/L IGF-1组细胞活力最高,因此确定后续实验中IGF-1的浓度为80μg/L,作用时间为24 h。不同浓度LY294002培养的细胞活力从6 h起逐渐降低(均P<0.05),根据IC50值确定后续实验中LY294002浓度为5 mmol/L,作用时间为24 h。细胞划痕结果显示,与对照组相比40、80μg/L IGF-1组细胞迁移率均升高(均P<0.05)。与对照组相比2.5、5 mmol/L LY294002组细胞迁移率均降低(均P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,IGF-1组细胞TGF-β2、MMP-2、HIF-1α、PI3K、AKT的蛋白表达量均升高,LY294002组的蛋白表达量均下降(均P<0.05);与IGF-1组比较,IGF-1+LY294002组的TGF-β2、MMP-2、HIF-1α、PI3K、AKT蛋白表达量表达均下降(均P<0.05)。细胞免疫荧光结果显示,与对照组相比,IGF-1组细胞TGF-β2、MMP-2、HIF-1α的荧光表达均升高,LY294002组的荧光表达均下降(均P<0.05);与IGF-1组比较,IGF-1+LY294002组的TGF-β2、MMP-2、HIF-1α荧光表达均显著下降(均P<0.05)。结论:IGF-1促进了人HSF细胞增殖与迁移;IGF-1可能通过PI3K/AKT信号通路上调人HSF细胞中TGF-β2、MMP-2、HIF-1α的表达,参与近视的发生与发展。 展开更多
关键词 近视 人巩膜成纤维细胞(hsf) 胰岛素生长因子-1(IGF-1) 转化生长因子-β2(TGF-β2) 基质金属蛋白酶-2(MMP-2) 缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)
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抑制HSF-1增强PS-341诱导胶质瘤细胞凋亡 被引量:1
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作者 王宏瑜 毕云科 +3 位作者 刘耀华 徐龙庆 王瑞恒 赵世光 《临床神经外科杂志》 CAS 2014年第4期257-261,共5页
目的探索HSF1是否能诱导HSPs的高表达,以及抑制HSF1是否能够增强PS-341诱导胶质瘤细胞凋亡。方法 Western检测HSP70、HSF1的表达,以及JNK的磷酸化。转染siRNA敲除HSF1,胎盘蓝染色及sub-G1检测细胞凋亡。结果胶质瘤细胞中HSP70及HSF1的... 目的探索HSF1是否能诱导HSPs的高表达,以及抑制HSF1是否能够增强PS-341诱导胶质瘤细胞凋亡。方法 Western检测HSP70、HSF1的表达,以及JNK的磷酸化。转染siRNA敲除HSF1,胎盘蓝染色及sub-G1检测细胞凋亡。结果胶质瘤细胞中HSP70及HSF1的表达明显高于正常脑组织。敲除HSF1能通过抑制HSP70明显增强PS-341诱导的胶质瘤细凋亡,并能增强及延长JNK通路的活化。在HSF1+/+细胞中,PS-341能够强烈诱导HSP70的表达;而在HSF1–/–细胞中,PS-341诱导并延长了JNK通路的激活。热休克预处理对两种细胞活性都没明显影响,但能明显增强HSF1+/+细胞对抗PS-341诱导凋亡的能力。结论胶质瘤细胞中,HSF1的激活能促进HSPs的表达,进而对抗PS-341诱导的细胞凋亡。抑制HSF-1能增强PS-341诱导胶质瘤细胞凋亡,这有望成为一种新的胶质瘤治疗途径。 展开更多
关键词 胶质瘤 热休克转录因子(hsf1) 热休克蛋白 PS-341
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胰腺癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平与其对术后早期复发的预测价值
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作者 吴永融 揭毅 +2 位作者 陈义林 宋俊荣 覃远浩 《检验医学与临床》 2025年第13期1746-1751,1756,共7页
目的探讨胰腺癌组织微小RNA-340-5p(miR-340-5p)、线粒体精氨酸-tRNA合成酶(RARS2)基因、热休克转录因子1(HSF1)mRNA的表达水平,及其对胰腺癌患者术后早期复发的预测价值。方法选择该院2020年7月至2023年8月收治的行根治性R0切除术的19... 目的探讨胰腺癌组织微小RNA-340-5p(miR-340-5p)、线粒体精氨酸-tRNA合成酶(RARS2)基因、热休克转录因子1(HSF1)mRNA的表达水平,及其对胰腺癌患者术后早期复发的预测价值。方法选择该院2020年7月至2023年8月收治的行根治性R0切除术的195例胰腺癌患者作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平。根据术后1年内复发情况,将患者分为复发组和未复发组。比较2组一般资料及癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平。采用多因素Logistic回归分析腺癌患者术后复发的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA对腺癌患者术后复发的预测价值,采用DeLong检验比较曲线下面积(AUC)。结果随访结果显示,复发组有107例,未复发组有88例。复发组肿瘤最大径、T分期、N分期高于未复发组,差异均有统计学意义(P<0.05)。复发组miR-340-5p表达水平低于未复发组,RARS2 mRNA和HSF1 mRNA表达水平高于未复发组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,miR-340-5p表达水平升高是胰腺癌患者术后复发的独立保护因素(P<0.05),而RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平升高均是胰腺癌患者术后复发的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA单独及联合预测胰腺癌患者术后复发的AUC分别为0.794、0.790、0.765、0.949,且三者联合预测的AUC明显大于各指标单独预测(P<0.05)。结论癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平与胰腺癌术后的早期复发有关,均可作为复发的候选标志物,且三者联合应用时能进一步提高预测价值,可为临床个性化、精准化的预防干预提供重要的参考依据。 展开更多
关键词 miR-340-5p RARS2 hsf1 胰腺癌 术后早期复发 预测价值
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shRNA抑制HSF-1表达增强17-aag抗结肠癌疗效的体外实验研究
5
作者 吕波 周厚民 +4 位作者 董涛涛 陈志强 赵红超 冯波 郑民华 《外科理论与实践》 2011年第2期155-159,共5页
目的:探讨热休克蛋白HSP90拮抗剂17-烯丙胺基-17-脱甲氧基格尔德霉素(17-aag)对体外结肠癌细胞株SW1116增值的抑制作用及其作用方式,并分析热休克因子-1(HSF-1)对17-aag诱导凋亡的影响。方法:将不同浓度的17-aag作用于野生型SW1116细胞... 目的:探讨热休克蛋白HSP90拮抗剂17-烯丙胺基-17-脱甲氧基格尔德霉素(17-aag)对体外结肠癌细胞株SW1116增值的抑制作用及其作用方式,并分析热休克因子-1(HSF-1)对17-aag诱导凋亡的影响。方法:将不同浓度的17-aag作用于野生型SW1116细胞株24、48、72 h,应用CCK-8法测定各处理组细胞的活性,计算增值抑制效应,应用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期变化及细胞凋亡比例。构建针对HSF-1的shRNA质粒,通过瞬转质粒及药物干预的不同将肿瘤细胞分为4组,即HSF-1(-)17-aag(-)组、HSF-1(-)17-aag(+)组、HSF-1(+)17-aag(-)组、HSF-1(+)17-aag(+)组。注:HSF-1(-)代表转染了含目的干扰片段质粒,HSF-1(+)代表转染了空载质粒,17-aag(-)代表未受17-aag干预,17-aag(+)代表受17-aag干预。每组细胞经相应处理后,通过FCM测定各组在处理后的细胞凋亡比例,比较各处理因素对结肠癌细胞株SW1116的杀伤作用。通过Western印迹检测各组中HSP90、HSP70、HSP27的表达量,评价细胞凋亡比例的高低与热休克蛋白的表达量是否有关。结果:17-aag对野生型SW1116细胞增殖具有明显的抑制作用,可诱导G2/M期周期阻滞和细胞凋亡。转染组细胞后,HSF-1(-)17-aag(-)组与HSF-1(+)17-aag(-)组间细胞凋亡比例差异无统计学意义;HSF-1(-)17-aag(+)组较HSF-1(+)17-aag(+)组细胞凋亡比例高,而细胞内HSP90、HSP70、HSP27表达量均较HSF-1(+)17-aag(+)组降低。结论:17-aag可诱导体外结肠癌SW1116细胞发生凋亡和周期阻滞。在干扰HSF-1表达后,17-aag诱导细胞凋亡的作用明显增强。 展开更多
关键词 结肠癌 17-烯丙胺基-17-脱甲氧基格尔德霉素 热休克因子-1 热休克蛋白 RNA干扰
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中国荷斯坦牛HSF1基因microRNA SNPs与耐热性能的相关性研究 被引量:9
6
作者 李秋玲 鞠志花 +6 位作者 贾祥捷 黄金明 李建斌 李荣岭 李芳 王长法 仲跻峰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期570-578,共9页
【目的】分析638头中国荷斯坦牛HSF1基因多态性与耐热性的关系,以期为中国耐热奶牛分子育种提供参考依据。【方法】设计引物扩增HSF1基因,通过DNA测序、PCR-SSCP和PCR-RFLP技术筛查SNPs并分型,利用miRBASE数据库定位microRNA SNPs,利用S... 【目的】分析638头中国荷斯坦牛HSF1基因多态性与耐热性的关系,以期为中国耐热奶牛分子育种提供参考依据。【方法】设计引物扩增HSF1基因,通过DNA测序、PCR-SSCP和PCR-RFLP技术筛查SNPs并分型,利用miRBASE数据库定位microRNA SNPs,利用SHEsis软件进行配对连锁不平衡分析和单倍型构建,利用SAS软件对不同基因型和单倍型组合个体耐热指标包括红细胞钾浓度、产奶量下降率、直肠温度和耐热系数进行相关分析。应用荧光定量RT-PCR技术研究热应激状态下HSF1 mRNA的转录水平。【结果】发现2个microRNA种子序列新SNPs,T909C和G4693T。其中909位碱基距离microRNA种子序列5'端3 bp,4 693位突变直接使microRNA种子序列破坏。909位点CC、CT基因型奶牛耐热性能显著高于TT基因型(P<0.05);4693位点TT基因型奶牛耐热性能显著高于GG基因型(P<0.05)。共构建出4种单倍型、发现10种单倍型组合。其中H2H4单倍型组合红细胞钾浓度和直肠温度显著低于H1H3单倍型组合(P<0.05),耐热系数显著高于H1H3组合(P<0.05),H2H4组合个体产奶量下降率显著低于H1H1组合个体(P<0.05),H2H4为耐热单倍型组合。热应激状态下HSF1 mRNA的转录水平在不同组织中存在差异,在心脏中最高,是肌肉中的11.24倍(P<0.05)。【结论】HSF1基因microRNA SNPs可作为奶牛抗热应激的候选分子标记应用于育种实践。 展开更多
关键词 中国荷斯坦牛 hsf1 耐热性能 MICRORNA 多态性
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HSF1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞的永生化 被引量:6
7
作者 刘梅冬 张华莉 +4 位作者 龚环宇 陈广文 王慷慨 鄂顺梅 肖献忠 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期174-177,共4页
目的:建立HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为HSF1的功能研究提供实验模型。方法:用脂质体介导的基因转染法将pSV 3 neo质粒导入HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞,经G 4 1 8筛选,抗性克隆扩大培养,建... 目的:建立HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为HSF1的功能研究提供实验模型。方法:用脂质体介导的基因转染法将pSV 3 neo质粒导入HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞,经G 4 1 8筛选,抗性克隆扩大培养,建立永生化细胞系;用PCR检测两种细胞株中目的基因的整合,用RT-PCR法鉴定SV 4 0T基因在转染细胞中的表达;用W estern b lot检测所建细胞株的诱导型热休克蛋白7 0的表达情况。结果:有3个细胞克隆已扩大培养稳定传代达6个月,经鉴定SV 4 0 T抗原已整合到两种细胞中且稳定表达,HSF1-/-胚胎成纤维细胞热休克蛋白7 0的诱导表达消失。结论:成功建立永生化HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞。 展开更多
关键词 hsf1 基因敲除 胚胎成纤维细胞 永生化 SV40 T抗原
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HSF1与XAF1基因在胃肠肿瘤中表达的研究 被引量:4
8
作者 李霆 陈村龙 +3 位作者 王继德 崔生达 崔丹瑜 郭文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期487-490,共4页
目的探讨X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)与热休克转录因子1(HSF1)在胃肠癌中的表达情况及其相互关系。方法应用免疫印迹分析法检测胃癌、大肠癌组织以及胃肠道肿瘤细胞株中的XAF1及HSF1蛋白表达;用含有HSF1的真核表达载体转染... 目的探讨X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)与热休克转录因子1(HSF1)在胃肠癌中的表达情况及其相互关系。方法应用免疫印迹分析法检测胃癌、大肠癌组织以及胃肠道肿瘤细胞株中的XAF1及HSF1蛋白表达;用含有HSF1的真核表达载体转染胃肠道肿瘤细胞株或用RNA干扰的方法上调或下调HSF1表达,同步检测对XAF1表达的影响;用应激原(stressstimuli)刺激诱导HSF1表达,观察对XAF1表达的作用。结果在胃肠癌组织中HSF1的表达高于正常组织;在胃肠癌细胞株中XAF1与HSF1的表达呈负相关,应激刺激上调HSF1的同时下调XAF1表达。结论胃肠道肿瘤细胞高表达HSF1,其结果是抑制XAF1表达,这种机制应该是XAF1在(胃肠道)肿瘤细胞中低表达并导致肿瘤细胞凋亡缺失的原因之一。 展开更多
关键词 hsf1 XAF1 胃肠道肿瘤 基因表达
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拟南芥热激因子HSF1的表达与纯化 被引量:8
9
作者 郭丽红 王定康 +2 位作者 袁燕 刘开庆 张乐民 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第24期11444-11445,共2页
[目的]表达和纯化拟南芥热激因子HSF1。[方法]以构建的能表达热激因子HSF1的大肠杆菌Escherichia coliM15(pQE32/His6-HSF1,pREP4)为材料,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达HSF1,再通过镍亲和层析纯化表达的HSF1,通过变性的聚... [目的]表达和纯化拟南芥热激因子HSF1。[方法]以构建的能表达热激因子HSF1的大肠杆菌Escherichia coliM15(pQE32/His6-HSF1,pREP4)为材料,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达HSF1,再通过镍亲和层析纯化表达的HSF1,通过变性的聚丙酰胺(SDS-PAGE)电泳分析表达蛋白和纯化蛋白。[结果]试验获得了表达的HSF1,并且进一步获得了纯化的HSF1。[结论]该研究为探讨拟南芥HSF1在基因组的结合位点提供了试验材料,为全面认识HSF1作用机理和生理功能奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥热激因子hsf1 表达 纯化
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白藜芦醇通过HSF1介导的铁死亡改善糖尿病心肌细胞损伤的机制研究 被引量:14
10
作者 马振旺 姜德友 +5 位作者 胡丙成 袁星星 王梅 李海龙 蔡绍杰 郭婧 《海南医学院学报》 CAS 2022年第6期406-411,419,共7页
目的:观察白藜芦醇对糖尿病心肌细胞损伤的作用及其对热休克因子(HSF1)介导的铁死亡的影响。方法:通过高糖诱导H9c2构建糖尿病心肌损伤体外模型,并以暴露于正常葡萄糖浓度的H9c2作为对照,然后加入相应的药物进行干预。采用CCK8法检测细... 目的:观察白藜芦醇对糖尿病心肌细胞损伤的作用及其对热休克因子(HSF1)介导的铁死亡的影响。方法:通过高糖诱导H9c2构建糖尿病心肌损伤体外模型,并以暴露于正常葡萄糖浓度的H9c2作为对照,然后加入相应的药物进行干预。采用CCK8法检测细胞增殖水平,试剂盒法检测细胞中乳酸盐脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和铁离子浓度,Western blot法检测细胞中HSF1、凋亡蛋白(Bax和Bcl-2)及铁死亡标记蛋白(ACSL4、GPX4和SLC7A11)的表达水平。结果:与空白组相比,模型组细胞活性、SOD的活性、HSF1、Bcl-2、GPX4和SLC7A11蛋白的表达显著降低,LDH活性、MDA的含量、Bax及ACSL4蛋白的表达、Bax/Bcl-2的比值和Fe;的含量显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,白藜芦醇组H9c2细胞活性、SOD的活性、HSF1、Bcl-2、GPX4和SLC7A11蛋白的表达显著增加,LDH活性、MDA的含量、Bax及ACSL4蛋白的表达、Bax/Bcl-2的比值和Fe2+的含量显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.01)。si-HSF1组干预后H9c2细胞活性、SOD的活性、HSF1、Bcl-2、GPX4和SLC7A11蛋白的表达显著降低,LDH活性、MDA的含量、Bax及ACSL4蛋白的表达、Bax/Bcl-2的比值和Fe2+的含量显著增加,与模型组比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:白藜芦醇通过上调HSF1的表达进而抑制细胞铁死亡改善高糖诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 白藜芦醇 糖尿病心肌病 心肌损伤 hsf1 铁死亡
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HSF1与XAF1基因在胃肠肿瘤中表达的研究 被引量:2
11
作者 李霆 陈村龙 +3 位作者 王继德 崔生达 崔丹瑜 郭文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1447-1450,共4页
目的已知X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)在胃肠癌细胞中低表达,本研究的目的在于探讨XAF1与热休克转录因子1(HSF1)在胃肠癌中的表达情况及其相互关系。方法应用免疫印迹分析法检测胃癌、大肠癌组织以及胃肠道肿瘤细胞株中的XAF... 目的已知X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)在胃肠癌细胞中低表达,本研究的目的在于探讨XAF1与热休克转录因子1(HSF1)在胃肠癌中的表达情况及其相互关系。方法应用免疫印迹分析法检测胃癌、大肠癌组织以及胃肠道肿瘤细胞株中的XAF1及HSF1蛋白表达;用含有HSF1的真核表达载体转染胃肠道肿瘤细胞株或用RNA干扰的方法上调或下调HSF1表达,同步检测对XAF1表达的影响;用应激原刺激诱导HSF1表达,观察对XAF1表达的作用。结果在胃肠癌组织中HSF1的表达高于正常组织;在胃肠癌细胞株中XAF1与HSF1的表达呈负相关,应激刺激上调HSF1的同时下调XAF1表达。结论胃肠道肿瘤细胞高表达HSF1,其结果是抑制XAF1表达,这种机制应该是XAF1在(胃肠道)肿瘤细胞中低表达并导致肿瘤细胞凋亡缺失的原因之一。 展开更多
关键词 hsf1 XAF1 胃肠道肿瘤 基因表达
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PCR方法在HSF1基因敲除小鼠基因型分析中的应用 被引量:5
12
作者 陈广文 刘喜玲 肖献忠 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第2期73-76,共4页
目的 为HSF1基因敲除鼠探索快速、简单的基因型PCR检测方法。方法 设计两对引物扩增野生型HSF1基因和HSF1缺陷突变基因的DNA片段 ,用PCR仪梯度方案测试最佳退火温度 ,并将所得基因型结果与经典的Southernblot方法比较。结果 野生型仅... 目的 为HSF1基因敲除鼠探索快速、简单的基因型PCR检测方法。方法 设计两对引物扩增野生型HSF1基因和HSF1缺陷突变基因的DNA片段 ,用PCR仪梯度方案测试最佳退火温度 ,并将所得基因型结果与经典的Southernblot方法比较。结果 野生型仅在 5 6 2bp处有一条条带 ,突变纯合子仅在 377bp处有一条条带 ,杂合子则在377bp和 5 6 2bp处出现两条条带。用PCR方法获得的HSF1基因分析结果与经典的Southernblot方法获得的结果完全一致。结论 用PCR方法分析HSF1基因敲除鼠的基因型具有快速、简单。 展开更多
关键词 PCR方法 hsf1基因敲除小鼠 基因型分析 应用
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基于HSF1高表达H9c2细胞的参芎葡萄糖注射液抗氧化损伤作用探讨 被引量:3
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作者 刘亭 宋菲 +4 位作者 杨健 陆定艳 林村勇 薛维娜 孙佳 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期85-90,共6页
目的:建立热休克转录因子1(HSF1)高表达的H9c2细胞系,考察在HSF1高表达的情况下参芎葡萄糖注射液(SGI)对过氧化氢(H2O2)诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用。方法:构建GV1422-HSF1的重组质粒,并利用Fu GENE 6转染试剂将重组质粒... 目的:建立热休克转录因子1(HSF1)高表达的H9c2细胞系,考察在HSF1高表达的情况下参芎葡萄糖注射液(SGI)对过氧化氢(H2O2)诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用。方法:构建GV1422-HSF1的重组质粒,并利用Fu GENE 6转染试剂将重组质粒转染至H9c2细胞中,用遗传霉素(G418)来筛选稳定转染细胞株,并用实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HSF1和热休克蛋白70(HSP70)mRNA和蛋白的表达情况,来鉴定HSF1高表达的H9c2细胞系(H9c2-HSF1)是否建立成功。用H2O2(300μmol·L-1)处理H9c2-HSF1细胞0.5 h构建氧化损伤模型,考察HSF1高表达的情况下参芎葡萄糖注射液预处理对细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)漏出量、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响,同时Western blot检测HSF1和HSP70蛋白表达情况。结果:Real-time PCR和Western blot实验结果显示:筛选出来的稳定转染细胞的HSF1和HSP70蛋白表达显著上调(P〈0.01),表明H9c2-HSF1细胞系构建成功。经参芎葡萄糖注射液预处理6 h,H2O2损伤0.5 h后,与H9c2+H2O2组和H9c2-HSF1+H2O2组比较,对应给药组细胞的HSF1和HSP70蛋白表达显著上调(P〈0.01),细胞存活率显著增高(P〈0.01),LDH,CK释放量和MDA含量显著减少(P〈0.01);ROS含量显著降低,GSH-Px和SOD活性明显升高。结论:本研究成功构建了HSF1高表达H9c2细胞系,并发现HSF1高表达能明显增强参芎葡萄糖注射液抗氧化损伤作用,其机制可能不在于增加细胞清除ROS能力,但可能与上调HSP70表达相关,需要进一步研究。 展开更多
关键词 热休克转录因子1(hsf1) 参芎葡萄糖注射液 过氧化氢(H2O2) H9c2细胞系 抗氧化损伤作用
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雄性HSF1基因缺陷小鼠的行为改变 被引量:1
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作者 朱熊兆 程明 +1 位作者 彭敏 姚树桥 《心理学报》 CSSCI CSCD 北大核心 2007年第2期306-310,共5页
为研究HSF1基因缺陷小鼠的行为特征,探索HSF1基因在小鼠行为表现中的作用。选取6~7个月大雄性HSFI基因缺陷小鼠39只及野生型小鼠36只进行情绪性评分、旷场实验、高架十字迷宫实验、简易迷津实验、T-CAT实验、独木桥实验和悬挂实验以... 为研究HSF1基因缺陷小鼠的行为特征,探索HSF1基因在小鼠行为表现中的作用。选取6~7个月大雄性HSFI基因缺陷小鼠39只及野生型小鼠36只进行情绪性评分、旷场实验、高架十字迷宫实验、简易迷津实验、T-CAT实验、独木桥实验和悬挂实验以观察其情绪性唤醒水平、焦虑水平、探索行为、工作记忆能力和运动能力。结果表明HSFI基因缺陷小鼠的情绪唤醒水平和焦虑水平较低、探索行为减少、T—CAT中转换率较低,提示小鼠的情绪、探索动机和工作记忆受HSFI基因的调控。 展开更多
关键词 hsf1 小鼠 基因 行为
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Hsf1—潜在的睾丸支持细胞雄激素受体靶基因 被引量:1
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作者 王亚东 叶炯贤 +3 位作者 牟丽莎 来永庆 李贤新 桂耀庭 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第6期587-589,共3页
目的探讨雄激素受体(AR)对睾丸支持细胞中热休克转录因子1(Hsf1)基因表达的影响及其分子机制。方法采用PCR法及Western blot法检测,AR特异性敲除(S-AR-/y)小鼠和野生型(WT)小鼠睾丸组织中Hsf1的表达,观察雄激素对TM4细胞系中Hsf1和热休... 目的探讨雄激素受体(AR)对睾丸支持细胞中热休克转录因子1(Hsf1)基因表达的影响及其分子机制。方法采用PCR法及Western blot法检测,AR特异性敲除(S-AR-/y)小鼠和野生型(WT)小鼠睾丸组织中Hsf1的表达,观察雄激素对TM4细胞系中Hsf1和热休克蛋白(HSPs)表达的影响。结果与WT小鼠比较,S-AR-/y小鼠睾丸组织中Hsf1表达水平升高(P<0.05);雄激素显著降低TM4细胞中热休克转录因子-1(HSF1)表达(P<0.05),并且HSF1能够升高热休克蛋白105(HSP105)和HSP60水平。结论Hsf1可能是睾丸支持细胞中AR调控的靶基因。 展开更多
关键词 AR hsf1 HSPS 精子发生 雄性不育
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海南黄牛HSF1 cDNA全长的克隆与序列分析 被引量:1
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作者 成鹰 李治深 +10 位作者 杜丽 王凤阳 刘涛 申明霞 张莉娜 张巍 吴科榜 林杰材 满初日嘎 米华存 祁超 《生物技术》 CAS CSCD 2008年第5期1-7,共7页
目的:根据人、小鼠HSF1cDNA保守区序列设计引物,通过PCR方法扩增海南黄牛HSF1cDNA,并进行序列分析。方法:利用RT-PCR、半巢式PCR以及3'-RACE技术分段扩增得到了海南黄牛HSF1cDNA序列,测序正确后进行拼接。用DNAMAN 生物信息学软件... 目的:根据人、小鼠HSF1cDNA保守区序列设计引物,通过PCR方法扩增海南黄牛HSF1cDNA,并进行序列分析。方法:利用RT-PCR、半巢式PCR以及3'-RACE技术分段扩增得到了海南黄牛HSF1cDNA序列,测序正确后进行拼接。用DNAMAN 生物信息学软件分析海南黄牛HSF1 cDNA与赫里福德牛、人、小鼠同源性和海南黄牛HSF1蛋白的氨基酸组成、等电点、亲/疏水区等蛋白质性质,并根据各种动物HSF1蛋白绘制进化树。结果:(1)海南黄牛的HSF1 cDNA序列全长为1 993bp,包括150bp的5'非翻译区,1 578bp的开放阅读框以及264bp(不含poly(A)尾)的3'非翻译区,编码524个氨基酸,分子量为56.42 kD,等电点(pI)为 4.79。(2)海南黄牛的HSF1 cDNA与赫里福德牛、小鼠和人HSF1 cDNA的同源性分别为98.99 %、81.78 %、87.82 %,相应编码蛋白氨基酸序列的同源性分别为98.86 %、83.84 %、89.06 %,其中N-末端和C-末端高度保守,而中间区域存在缺失或替换。(3)根据氨基酸序列构建不同动物HSF1蛋白的进化树,与采用经典遗传分类法构建的进化树基本一致。结论:首次克隆了海南黄牛 HSF1 cDNA全长,分析表明:海南黄牛HSF1蛋白是亲水性蛋白,在8种动物中,其同源性大于73 %,高度保守。海南黄牛与赫里福德牛HSF1蛋白同源性高达98.86 %,在三聚体化区域、转录调节域和激活域存在6个位点的单氨基酸突变,这些发现为进一步揭示海南黄牛抗热性状形成的分子机制提供了重要依据。 展开更多
关键词 海南黄牛 hsf1 CDNA 克隆 序列分析
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HSF1及HSP70对全身炎症反应综合征的多靶点抑制作用及其机制 被引量:1
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作者 肖献忠 张华莉 +3 位作者 刘瑛 唐道林 陈广文 陈淑华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期1948-1949,共2页
关键词 hsf1 抑制作用 内源性保护机制 全身炎症反应 热休克反应 危重病症 生物机体 内毒素血症模型 微血管通透性 基因敲除小鼠
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BALB/c-HSF_1 Knockout小鼠的主要脏器重量、脏器系数及主要血液生化指标的测定 被引量:35
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作者 汤百争 刘惺 马亚东 《中国实验动物学杂志》 2002年第3期153-156,共4页
目的 提供HSF1 Knockout小鼠的脏器重量 ,脏器系数的生物学特性指标。方法 选用成年HSF1Knockout小鼠 5 0只 (雄性 2 1只 ,雌性 2 9只 ) ,分别测定体重和 8个主要脏器重量 ,计算脏器系数 ,测定其主要血液生化指标 ,并对雌雄鼠脏器重... 目的 提供HSF1 Knockout小鼠的脏器重量 ,脏器系数的生物学特性指标。方法 选用成年HSF1Knockout小鼠 5 0只 (雄性 2 1只 ,雌性 2 9只 ) ,分别测定体重和 8个主要脏器重量 ,计算脏器系数 ,测定其主要血液生化指标 ,并对雌雄鼠脏器重量 ,脏器系数进行比较 ,对血液生化指标进行统计。结果 雌雄鼠脾脏系数、肾脏系数差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,胃系数、脑系数差异有显著性 (P <0 0 1) ,心脏、肺系数差异不显著 (P >0 0 1)。结论 应注意HSF1 Knockout小鼠实验时的雌雄鼠胃系数、脑系数的显著性差异 ;脾脏系数、肾脏系数的明显差异。 展开更多
关键词 BALB/c-hsf1Knockout小鼠 脏器重量 脏器系数 血液生化指标 测定
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不同hsf1基因型对小鼠心肌组成型αBC表达的影响
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作者 刘莉 张红慧 +3 位作者 丁国宪 程蕴琳 晏良军 Benjamin I J 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期30-33,T002,共5页
目的 :了解热休克转录因子 1(heatshocktranscriptionfactor 1,HSF1)基因对小鼠心肌组成型 (B晶体蛋白(αB Crystallin ,αBC)表达的影响。 方法 :用WesternBlot和免疫组织化学方法 ,测定组成型αBC在HSF1基因野生型(hsf1+/+)和HSF1基... 目的 :了解热休克转录因子 1(heatshocktranscriptionfactor 1,HSF1)基因对小鼠心肌组成型 (B晶体蛋白(αB Crystallin ,αBC)表达的影响。 方法 :用WesternBlot和免疫组织化学方法 ,测定组成型αBC在HSF1基因野生型(hsf1+/+)和HSF1基因敲除型 (hsf 1- /- )小鼠心肌中的表达。 结果 :αBC在hsf 1- /-和hsf 1+/+小鼠心肌表达量分别为 6 8.4 2 %± 4 .16 %和 10 0 %± 7.5 8% (心肌可溶性组分 ,P <0 .0 5 ) ,2 0 .5 3%± 1.0 1%和 37.5 5 %±1.91% (心肌不可溶性组分 ,P <0 .0 5 ) ;免疫组化显示αBC在hsf 1- /-心肌细胞内的表达信号较hsf1+/+明显减弱。结论 :hsf1基因是介导组成型αBC基因表达重要的、但不是唯一的因子。 展开更多
关键词 hsf1基因型 小鼠 心肌组成型 αBC 表达 基因敲除
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Prokaryotic Expression and Purification of Heat Shock Factor HSF1 in Arabidopsis thaliana
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作者 郭丽红 王定康 +3 位作者 袁燕 刘开庆 陈雪 陈善娜 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2009年第4期41-42,145,共3页
[ Objective ] This study was to express and purify Arabidopsis thaliana heat shock factor HSF1. [ Method ] Using Escherichia coli M15 harboring HSF1 (pQE32/His6-HSF1, pREP4) as experimental materials, HSF1 was induc... [ Objective ] This study was to express and purify Arabidopsis thaliana heat shock factor HSF1. [ Method ] Using Escherichia coli M15 harboring HSF1 (pQE32/His6-HSF1, pREP4) as experimental materials, HSF1 was induced to express with isopropyl-β-D-galactoside (IPTG) ; then the expression product was purified using Ni-NTA-agarose affinity chromatography and analyzed by SDS-PAGE. [Result] HSF1 of Arabidopsis thaliana was successfully expressed and purified. [ Conclusion] This study provides materials for understanding the blinding site of HSF1 on Arabidopsis thaliana chromosome, further laying a good foundation for revealing the regulatory mechanism and physiological function of HSF1. 展开更多
关键词 Heat Shock Factor hsf1 EXPRESSION PURIFICATION
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