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脊尾白虾热休克转录因子(HSF-1)基因鉴定、表达及在高温胁迫中的功能
1
作者 夏金岐 刘进 +5 位作者 杨宇 王慕远 张伟竣 王敏敏 畅孟阳 史鲲鹏 《渔业科学进展》 北大核心 2026年第1期48-59,共12页
夏季极端高温频发,对我国特有的经济虾类脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)养殖业造成严重影响。热休克转录因子1(heat shock transcription factor 1,HSF-1)是调控热休克反应的关键因子,但其在脊尾白虾中的功能尚不明确。为了探究Echs... 夏季极端高温频发,对我国特有的经济虾类脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)养殖业造成严重影响。热休克转录因子1(heat shock transcription factor 1,HSF-1)是调控热休克反应的关键因子,但其在脊尾白虾中的功能尚不明确。为了探究Echsf-1在脊尾白虾高温胁迫中的功能,本研究利用生物信息学、qPCR、RNAi和转录组测序等方法,解析了Echsf-1在脊尾白虾高温胁迫中的表达及功能。结果显示,Echsf-1编码668个氨基酸,与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的氨基酸序列相似性最高。Echsf-1基因在脊尾白虾的鳃、胃、肝胰腺、肌肉及眼柄等组织中均有表达,其中,肝胰腺和鳃组织中的表达量在高温胁迫48 h后达到峰值,72 h后开始下降。敲降Echsf-1后,高温干扰组脊尾白虾的存活率显著降低,肝胰腺和鳃组织损伤加剧。转录组分析发现,与高温组相比,高温干扰组脊尾白虾在糖胺聚糖降解、淀粉和蔗糖代谢等通路中显著富集。其中,与硫酸乙酰肝素分解相关基因(如gusb、hspe和naglu)表达普遍上调,磷酸葡萄糖变位酶2基因(pgm2)表达下调。这些基因的表达变化可能影响组织修复和DNA损伤修复过程,进而加重组织损伤。本研究揭示了Echsf-1在脊尾白虾高温应激中的重要作用,为耐高温品种的选育提供了基础数据和理论支撑。 展开更多
关键词 热休克转录因子1 脊尾白虾 高温胁迫 RNAI
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基于PacBio平台的扇穗茅全长转录组测序及热激转录因子家族(HSFs)分析 被引量：1
2
作者 曲荣举 刘玉萍 +7 位作者 苏旭 富贵 靳佳瑞 杨倩 张朋辉 余明君 孙成林 毛轩睿 《草地学报》 北大核心 2025年第2期370-381,共12页
为了明晰扇穗茅(Littledalea racemosa)的转录组特征和热激转录因子家族(HSFs)的功能与系统位置,本研究基于PacBio平台对扇穗茅全长转录组进行了测序和生物信息学分析。结果表明:测序获得高质量的Unigenes 62016条,平均长度为2752 bp,N5... 为了明晰扇穗茅(Littledalea racemosa)的转录组特征和热激转录因子家族(HSFs)的功能与系统位置,本研究基于PacBio平台对扇穗茅全长转录组进行了测序和生物信息学分析。结果表明:测序获得高质量的Unigenes 62016条,平均长度为2752 bp,N50长度为2971 bp,蛋白编码区序列(CDS)48127个,简单重复序列(SSR)8858个;扇穗茅Unigenes在5大公共数据库中的注释量分别为27566(NR)、17961(GO)、18300(KOG)、17381(KEGG)和23737(SwissProt),有7663条Unigenes在5个数据库中均得到注释;扇穗茅转录本鉴定到1165个转录因子,隶属于48个转录因子家族,大多与高原极端环境适应有关;其中包含17个热激转录因子(HSF),大部分位于细胞核,为亲水蛋白,cDNA常包含5~10个保守结构域;系统发育研究表明扇穗茅和拟南芥(Arabidopsis thaliana)HSF转录因子聚为9个分支(CladeA-I),扇穗茅的11个HSF与HSFA2聚为一支,彼此具有较近的亲缘关系,可能具有相似的功能。本研究丰富了扇穗茅属物种的遗传信息,为后续关键功能基因的挖掘提供了理论依据。 展开更多
关键词 扇穗茅 全长转录组 功能注释 转录因子 hsfs
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IGF-1对HSF细胞分泌近视相关因子的影响及机制探索 被引量：2
3
作者 晁荣荣 丁芝祥 +1 位作者 范晶 郑柳 《国际眼科杂志》 2025年第2期198-205,共8页
目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对人巩膜成纤维细胞(HSF)分泌转化生长因子-β2(TGF-β2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响及其机制。方法:分别使用IGF-1和PI3K/AKT通路抑制剂LY294002培养细胞,采用CCK-... 目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对人巩膜成纤维细胞(HSF)分泌转化生长因子-β2(TGF-β2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响及其机制。方法:分别使用IGF-1和PI3K/AKT通路抑制剂LY294002培养细胞,采用CCK-8法检测细胞活力,确定药物的最佳作用浓度和时间。采用细胞划痕法观察细胞迁移活性。为明确IGF-1对HSF细胞的影响以及PI3K/AKT通路在其中的调控作用,将细胞分为对照组(不含药物)、IGF-1(80μg/L)组、IGF-1+LY294002(80μg/L+5 mmol/L)组、LY294002(5 mmol/L)组,培养24 h;Western blot检测细胞中TGF-β2、MMP-2、HIF-1α、PI3K、AKT的蛋白表达水平;细胞免疫荧光检测TGF-β2、MMP-2、HIF-1α的荧光表达。结果:CCK-8结果显示不同浓度IGF-1培养的细胞活力以80μg/L IGF-1组最高(均P<0.05),且在不同培养时间下,以24 h时80μg/L IGF-1组细胞活力最高,因此确定后续实验中IGF-1的浓度为80μg/L,作用时间为24 h。不同浓度LY294002培养的细胞活力从6 h起逐渐降低(均P<0.05),根据IC50值确定后续实验中LY294002浓度为5 mmol/L,作用时间为24 h。细胞划痕结果显示,与对照组相比40、80μg/L IGF-1组细胞迁移率均升高(均P<0.05)。与对照组相比2.5、5 mmol/L LY294002组细胞迁移率均降低(均P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,IGF-1组细胞TGF-β2、MMP-2、HIF-1α、PI3K、AKT的蛋白表达量均升高,LY294002组的蛋白表达量均下降(均P<0.05);与IGF-1组比较,IGF-1+LY294002组的TGF-β2、MMP-2、HIF-1α、PI3K、AKT蛋白表达量表达均下降(均P<0.05)。细胞免疫荧光结果显示,与对照组相比,IGF-1组细胞TGF-β2、MMP-2、HIF-1α的荧光表达均升高,LY294002组的荧光表达均下降(均P<0.05);与IGF-1组比较,IGF-1+LY294002组的TGF-β2、MMP-2、HIF-1α荧光表达均显著下降(均P<0.05)。结论:IGF-1促进了人HSF细胞增殖与迁移;IGF-1可能通过PI3K/AKT信号通路上调人HSF细胞中TGF-β2、MMP-2、HIF-1α的表达,参与近视的发生与发展。 展开更多
关键词 近视 人巩膜成纤维细胞(hsf) 胰岛素生长因子-1(IGF-1) 转化生长因子-β2(TGF-β2) 基质金属蛋白酶-2(MMP-2) 缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)
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花苜蓿HSF基因家族鉴定及其对干旱胁迫的响应分析
4
作者 贺诗淼 李彭真 +2 位作者 王召明 刘志鹏 周强 《中国草地学报》 北大核心 2025年第11期1-14,共14页
HSF转录因子(Heat shock transcription factors)被称为热休克转录因子或热激转录因子,其在植物生长发育过程中具有重要作用,也参与生物和非生物胁迫响应。本研究基于花苜蓿(Medicago ruthenica)基因组数据,进行MruHSF基因鉴定和生物信... HSF转录因子(Heat shock transcription factors)被称为热休克转录因子或热激转录因子,其在植物生长发育过程中具有重要作用,也参与生物和非生物胁迫响应。本研究基于花苜蓿(Medicago ruthenica)基因组数据,进行MruHSF基因鉴定和生物信息学分析,并通过转录组数据和荧光定量PCR综合分析MruHSF基因在干旱胁迫下的表达模式,初步探讨MruHSF基因在干旱胁迫中的作用。结果表明,MruHSF基因家族共27个成员,基因编码的氨基酸数量在97~505 aa之间,等电点范围4.64~8.72,分子量范围10998.3~55296.45 Da。该基因家族成员中,有3个基因未装配到染色体上,其余基因分布在8条染色体上。系统发育分析显示,MruHSF基因可分为3个进化分支。保守基序分析显示,除MruHSF02、MruHSF03和MruHSF27蛋白外,其余MruHSF均同时含有Motif 1、2、4,Motif 1、2、4在花苜蓿HSF蛋白序列中高度保守。在MruHSF基因的启动子区域,鉴定出多种与激素响应、光响应及非生物胁迫相关的顺式作用元件。表达模式分析结果表明,MruHSF01、MruHSF08、MruHSF13、MruHSF16和MruHSF22在干旱胁迫下显著差异表达,可能在花苜蓿的干旱响应机制中具有重要作用。 展开更多
关键词 花苜蓿 hsf基因家族 干旱胁迫 基因表达分析
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火龙果热激转录因子HSF基因家族鉴定及生物信息学分析
5
作者 邓健炜 孙清明 +1 位作者 申迎宾 李俊成 《福建农业学报》 北大核心 2025年第3期280-290,共11页
【目的】探究火龙果(Selenicereus spp.)热激转录因子(heat shock transcription factors, HSF)基因家族的生物学特性,为探明火龙果抵抗高温胁迫反应机制提供依据。【方法】运用生物信息学手段,对火龙果HSF基因家族进行理化性质、Motif... 【目的】探究火龙果(Selenicereus spp.)热激转录因子(heat shock transcription factors, HSF)基因家族的生物学特性,为探明火龙果抵抗高温胁迫反应机制提供依据。【方法】运用生物信息学手段,对火龙果HSF基因家族进行理化性质、Motif分析、基因结构分析、基因结构域的预测、染色体定位、启动子分析和系统进化树分析等。并通过转录组数据和qPCR技术分析基因家族各成员在逆境胁迫的表达情况。【结果】从火龙果基因组中鉴定出13个HSF基因家族成员。理化性质分析结果表明,其编码的热转录因子均为不稳定蛋白;基因结构分析显示,火龙果HSF基因家族大部分成员仅含一个内含子;系统进化树分析结果表明,火龙果HSF基因家族根据亲缘关系分为4类,Motif分析结果也从侧面印证同一分支的基因具有相似或相同的保守基序;HSF基因家族成员随机分布在火龙果的6条染色体中;其启动子中包含激素响应、逆境胁迫、植物生长发育调控和光响应等多种元件;基因结构域预测分析发现,火龙果HSF基因家族成员均含有特定的HSF结构域。基因表达分析表明,火龙果HSF基因的表达具有较强的时间与空间特异性;其中仅5个成员在枝条表达且表达趋势不同,HU05G00210.1和HU05G01887.1的表达量在24 h和48 h均显著升高,HU02G02398.1和HU10G01257.1在经过48 h高温处理后表达量才显著升高,而HU04G00163.1表达量则没有显著变化,体现了HSF基因对热胁迫的响应。【结论】初步鉴定并验证了HSF基因家族成员参与了火龙果热胁迫反应过程,为进一步探究HSF基因家族成员在火龙果高温响应机制提供参考。 展开更多
关键词 火龙果 hsf基因家族 热激转录因子 生物信息学
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苋菜Hsf家族基因全基因组鉴定及其在高温胁迫下的表达分析
6
作者 张爱冬 田梓萌 +3 位作者 肖凯 颜丽美 查丁石 吴雪霞 《安徽农业科学》 2025年第21期91-99,共9页
以苋菜全基因组数据为基础,共鉴定出21个Hsf基因家族成员,分布在14条染色体上,其氨基酸残基数256~535个,分子量为29.71~59.73 kD,等电点为4.69~9.22,19个酸性蛋白,2个碱性蛋白,20个亲水性不稳定蛋白,1个亲水性稳定蛋白,定位于细胞核上。... 以苋菜全基因组数据为基础,共鉴定出21个Hsf基因家族成员,分布在14条染色体上,其氨基酸残基数256~535个,分子量为29.71~59.73 kD,等电点为4.69~9.22,19个酸性蛋白,2个碱性蛋白,20个亲水性不稳定蛋白,1个亲水性稳定蛋白,定位于细胞核上。AtrHsf基因家族成员结构较为保守,启动子区具有大量环境及激素响应元件,成员间具有明显的共线性。高温转录组数据表明,大部分AtrHsf基因受高温诱导,表现出不同的表达模式,qRT-PCR结果与转录组结果基本一致。该研究为苋菜高温胁迫下Hsf基因的调控机制分析奠定了基础,为耐高温种质资源创制及新品种选育提供了重要基因资源和理论基础。 展开更多
关键词 苋菜 hsf基因家族 高温胁迫 表达分析
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大麦HSF基因家族成员的鉴定与表达分析
7
作者 石明玉 冯浩 李柱刚 《麦类作物学报》 北大核心 2025年第7期922-931,共10页
热激转录因子(heat shock transcription factor,HSF)家族与植物生长发育、胁迫响应密切相关。为了解大麦HSF家族成员的功能,本研究利用生物信息学方法在大麦全基因组水平进行HSF家族成员鉴定,并对其理化性质、亚细胞定位、进化关系和... 热激转录因子(heat shock transcription factor,HSF)家族与植物生长发育、胁迫响应密切相关。为了解大麦HSF家族成员的功能,本研究利用生物信息学方法在大麦全基因组水平进行HSF家族成员鉴定,并对其理化性质、亚细胞定位、进化关系和共线性关系及基因结构、启动子顺式作用元件、蛋白互作网络进行了分析。结果发现,在大麦中共鉴定到的29个HSF基因,HvHSF蛋白的分子量介于10.24~56.59 kDa之间,属于稳定性较差的亲水蛋白,均预测定位于细胞核。进化树将大麦HvHSF基因分为A、B、C三类;共线性分析显示,HvHSF5d和HvHSF7b为共线基因对。结构域和基因结构分析发现,亲缘关系较近的HvHSF具有相似的结构域和基因结构。启动子顺式作用元件分析发现,HvHSF启动子含有多种与生长发育以及抗逆相关的顺式作用元件。蛋白互作网络预测表明,HvHSF可能参与植物胁迫响应调节和H_(2)O_(2)的清除。通过大麦地下部盐、碱胁迫转录组测序结合qRT-PCR验证发现,HvHSF在盐、碱胁迫下表达存在差异。盐、碱胁迫下,HvHSF1a、HvHSF1b、HvHSF2a、HvHSF3c、HvHSF5b表达量均有所增加;HvHSF6在盐胁迫下表达量增加,碱胁迫下降低。综上,HSF家族成员可能参与大麦耐盐、碱调控。 展开更多
关键词 大麦 热激转录因子(hsf) 生物信息学 基因表达 系统进化发育
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甜樱桃HSF基因家族的鉴定及温度胁迫下表达模式分析
8
作者 王雨青 侯黔东 +2 位作者 陈发利 乔光 文晓鹏 《华中农业大学学报》 北大核心 2025年第6期195-209,共15页
为探究甜樱桃热休克转录因子(heat shock transcription factors,HSF)在非生物胁迫中的功能,对甜樱桃HSF基因家族成员进行全基因组特征分析,利用qRT-PCR技术分析了HSF基因家族成员在甜樱桃不同器官/组织中的表达谱,以及在高低温胁迫下... 为探究甜樱桃热休克转录因子(heat shock transcription factors,HSF)在非生物胁迫中的功能,对甜樱桃HSF基因家族成员进行全基因组特征分析,利用qRT-PCR技术分析了HSF基因家族成员在甜樱桃不同器官/组织中的表达谱,以及在高低温胁迫下的应答情况。结果显示,甜樱桃基因组中共有17个HSF,根据在染色体上的位置,依次命名为PavHSF1~PavHSF17,所有成员均为亲水蛋白,且均定位在细胞核中。除6号和8号染色体外,其余染色体均有分布。启动子区域中存在低温等胁迫响应元件,暗示PavHSF可能参与非生物胁迫响应。PavHSF在进化上分为3类和13个亚类,有2对共线性基因对;与单子叶植物的共线性基因对最少。组织特异性表达分析显示,PavHSF在休眠花芽及叶芽中表达量最高,PavHSF3在甜樱桃所有组织中均呈现较高表达水平。在高温胁迫下,PavHSF11、PavHSF13、PavHSF15、PavHSF16表达量显著升高,为主要响应高温的基因;低温胁迫时,PavHSF13、PavHSF15、PavHSF17表达量上升最显著,暗示PavHSF13和PavHSF15为温度胁迫响应转录因子。以上结果表明,PavHSF转录因子广泛参与了甜樱桃的生长发育,且与温度胁迫关系密切。 展开更多
关键词 甜樱桃 hsf转录因子 基因家族分析 高温胁迫 低温胁迫 表达分析
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胰腺癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平与其对术后早期复发的预测价值
9
作者 吴永融 揭毅 +2 位作者 陈义林 宋俊荣 覃远浩 《检验医学与临床》 2025年第13期1746-1751,1756,共7页
目的探讨胰腺癌组织微小RNA-340-5p(miR-340-5p)、线粒体精氨酸-tRNA合成酶(RARS2)基因、热休克转录因子1(HSF1)mRNA的表达水平,及其对胰腺癌患者术后早期复发的预测价值。方法选择该院2020年7月至2023年8月收治的行根治性R0切除术的19... 目的探讨胰腺癌组织微小RNA-340-5p(miR-340-5p)、线粒体精氨酸-tRNA合成酶(RARS2)基因、热休克转录因子1(HSF1)mRNA的表达水平,及其对胰腺癌患者术后早期复发的预测价值。方法选择该院2020年7月至2023年8月收治的行根治性R0切除术的195例胰腺癌患者作为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平。根据术后1年内复发情况,将患者分为复发组和未复发组。比较2组一般资料及癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平。采用多因素Logistic回归分析腺癌患者术后复发的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA对腺癌患者术后复发的预测价值,采用DeLong检验比较曲线下面积(AUC)。结果随访结果显示,复发组有107例,未复发组有88例。复发组肿瘤最大径、T分期、N分期高于未复发组,差异均有统计学意义(P<0.05)。复发组miR-340-5p表达水平低于未复发组,RARS2 mRNA和HSF1 mRNA表达水平高于未复发组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,miR-340-5p表达水平升高是胰腺癌患者术后复发的独立保护因素(P<0.05),而RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平升高均是胰腺癌患者术后复发的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA单独及联合预测胰腺癌患者术后复发的AUC分别为0.794、0.790、0.765、0.949,且三者联合预测的AUC明显大于各指标单独预测(P<0.05)。结论癌组织miR-340-5p、RARS2 mRNA、HSF1 mRNA表达水平与胰腺癌术后的早期复发有关,均可作为复发的候选标志物,且三者联合应用时能进一步提高预测价值,可为临床个性化、精准化的预防干预提供重要的参考依据。 展开更多
关键词 miR-340-5p RARS2 hsf1 胰腺癌 术后早期复发 预测价值
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天然椰子油提取物对H_2O_2诱导的HSF细胞氧化损伤的保护作用 被引量：13
10
作者 宋菲 王挥 +3 位作者 唐敏敏 沈晓君 张玉锋 邓福明 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期517-521,共5页
采用倒置生物显微镜观察人皮肤成纤维细胞(HSF)的形态,通过MTT法检测细胞存活率,并通过检测细胞内活性氧(ROS)水平、总抗氧化能力和抗氧化酶活性探讨天然椰子油提取物对H_2O_2诱导的HSF细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,天然椰子油提... 采用倒置生物显微镜观察人皮肤成纤维细胞(HSF)的形态,通过MTT法检测细胞存活率,并通过检测细胞内活性氧(ROS)水平、总抗氧化能力和抗氧化酶活性探讨天然椰子油提取物对H_2O_2诱导的HSF细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,天然椰子油提取物在质量浓度为12.5~50 mg/L范围内对H_2O_2诱导的HSF细胞氧化损伤具有保护作用,且呈浓度依赖性。天然椰子油提取物可以抑制H_2O_2引起的细胞形态损伤,提高细胞存活率,还可以通过降低细胞内ROS水平、提高细胞总抗氧化能力以及提高细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,进而起到保护HSF细胞氧化应激损伤的作用。 展开更多
关键词 化妆品原料 天然椰子油 hsf细胞 抗氧化 抗衰老
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中国荷斯坦牛HSF1基因microRNA SNPs与耐热性能的相关性研究 被引量：9
11
作者 李秋玲 鞠志花 +6 位作者 贾祥捷 黄金明 李建斌 李荣岭 李芳 王长法 仲跻峰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期570-578,共9页
【目的】分析638头中国荷斯坦牛HSF1基因多态性与耐热性的关系,以期为中国耐热奶牛分子育种提供参考依据。【方法】设计引物扩增HSF1基因,通过DNA测序、PCR-SSCP和PCR-RFLP技术筛查SNPs并分型,利用miRBASE数据库定位microRNA SNPs,利用S... 【目的】分析638头中国荷斯坦牛HSF1基因多态性与耐热性的关系,以期为中国耐热奶牛分子育种提供参考依据。【方法】设计引物扩增HSF1基因,通过DNA测序、PCR-SSCP和PCR-RFLP技术筛查SNPs并分型,利用miRBASE数据库定位microRNA SNPs,利用SHEsis软件进行配对连锁不平衡分析和单倍型构建,利用SAS软件对不同基因型和单倍型组合个体耐热指标包括红细胞钾浓度、产奶量下降率、直肠温度和耐热系数进行相关分析。应用荧光定量RT-PCR技术研究热应激状态下HSF1 mRNA的转录水平。【结果】发现2个microRNA种子序列新SNPs,T909C和G4693T。其中909位碱基距离microRNA种子序列5'端3 bp,4 693位突变直接使microRNA种子序列破坏。909位点CC、CT基因型奶牛耐热性能显著高于TT基因型(P<0.05);4693位点TT基因型奶牛耐热性能显著高于GG基因型(P<0.05)。共构建出4种单倍型、发现10种单倍型组合。其中H2H4单倍型组合红细胞钾浓度和直肠温度显著低于H1H3单倍型组合(P<0.05),耐热系数显著高于H1H3组合(P<0.05),H2H4组合个体产奶量下降率显著低于H1H1组合个体(P<0.05),H2H4为耐热单倍型组合。热应激状态下HSF1 mRNA的转录水平在不同组织中存在差异,在心脏中最高,是肌肉中的11.24倍(P<0.05)。【结论】HSF1基因microRNA SNPs可作为奶牛抗热应激的候选分子标记应用于育种实践。 展开更多
关键词 中国荷斯坦牛 hsf1 耐热性能 MICRORNA 多态性
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GmHSFA1基因克隆及其过量表达提高转基因大豆的耐热性 被引量：23
12
作者 陈晓军 叶春江 +6 位作者 吕慧颖 徐民新 李葳 张利明 王超 罗淑萍 朱保葛 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1411-1420,共10页
热激转录因子在调节植物对逆境胁迫应答和热激蛋白基因表达方面起重要作用。采用生物信息学和比较基因组学方法结合RACE技术从大豆基因组中克隆到一个新的热激转录因子基因GmHsfA1,其cDNA全长1 781 bp,包含1个1 533 bp的开放阅读框,编... 热激转录因子在调节植物对逆境胁迫应答和热激蛋白基因表达方面起重要作用。采用生物信息学和比较基因组学方法结合RACE技术从大豆基因组中克隆到一个新的热激转录因子基因GmHsfA1,其cDNA全长1 781 bp,包含1个1 533 bp的开放阅读框,编码含有510个氨基酸残基的蛋白质(GenBank登录号为AY458843)。与其他转录因子的分子结构相似,GmHSFA1也含有4个典型的结构功能域-DNA结合域、寡聚域、核定位信号和C端激活域。BLAST分析表明,GmHSFA1与其同源性最高的番茄热激转录因子LpHSFA1之间的氨基酸序列相似性为52．46％。RT-PCR、Northern和遗传转化结果显示:1)GmHsfA1在大豆的不同组织中呈现组成型表达模式;2)常温下转基因大豆植株的GmHsfA1表达水平明显高于非转基因对照;3)GmHsfA1的过量表达激活了转基因大豆植株中热激蛋白基因GmHsp22在非诱导条件下的转录,并加强了高温胁迫下另2个热激蛋白基因GmHsp23和GmHsp70的表达;4)转GmHsfA1大豆植株的耐热温度(达52℃)明显高于非转基因植株。上述结果说明,GmHsfA1的过量表达激活或促进其下游3个热激蛋白基因的转录或表达,明显提高了转基因大豆植株的耐热能力。 展开更多
关键词 大豆 热激转录因子A1(hsfA1) 转基因 热胁迫 过量表达 耐热性
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HSF1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞的永生化 被引量：6
13
作者 刘梅冬 张华莉 +4 位作者 龚环宇 陈广文 王慷慨 鄂顺梅 肖献忠 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期174-177,共4页
目的:建立HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为HSF1的功能研究提供实验模型。方法:用脂质体介导的基因转染法将pSV 3 neo质粒导入HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞,经G 4 1 8筛选,抗性克隆扩大培养,建... 目的:建立HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为HSF1的功能研究提供实验模型。方法:用脂质体介导的基因转染法将pSV 3 neo质粒导入HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞,经G 4 1 8筛选,抗性克隆扩大培养,建立永生化细胞系;用PCR检测两种细胞株中目的基因的整合,用RT-PCR法鉴定SV 4 0T基因在转染细胞中的表达;用W estern b lot检测所建细胞株的诱导型热休克蛋白7 0的表达情况。结果:有3个细胞克隆已扩大培养稳定传代达6个月,经鉴定SV 4 0 T抗原已整合到两种细胞中且稳定表达,HSF1-/-胚胎成纤维细胞热休克蛋白7 0的诱导表达消失。结论:成功建立永生化HSF1-/-,HSF1+/+两种基因型小鼠胚胎成纤维细胞。 展开更多
关键词 hsf1 基因敲除 胚胎成纤维细胞 永生化 SV40 T抗原
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白藜芦醇通过HSF1介导的铁死亡改善糖尿病心肌细胞损伤的机制研究 被引量：14
14
作者 马振旺 姜德友 +5 位作者 胡丙成 袁星星 王梅 李海龙 蔡绍杰 郭婧 《海南医学院学报》 CAS 2022年第6期406-411,419,共7页
目的:观察白藜芦醇对糖尿病心肌细胞损伤的作用及其对热休克因子(HSF1)介导的铁死亡的影响。方法:通过高糖诱导H9c2构建糖尿病心肌损伤体外模型,并以暴露于正常葡萄糖浓度的H9c2作为对照,然后加入相应的药物进行干预。采用CCK8法检测细... 目的:观察白藜芦醇对糖尿病心肌细胞损伤的作用及其对热休克因子(HSF1)介导的铁死亡的影响。方法:通过高糖诱导H9c2构建糖尿病心肌损伤体外模型,并以暴露于正常葡萄糖浓度的H9c2作为对照,然后加入相应的药物进行干预。采用CCK8法检测细胞增殖水平,试剂盒法检测细胞中乳酸盐脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和铁离子浓度,Western blot法检测细胞中HSF1、凋亡蛋白(Bax和Bcl-2)及铁死亡标记蛋白(ACSL4、GPX4和SLC7A11)的表达水平。结果:与空白组相比,模型组细胞活性、SOD的活性、HSF1、Bcl-2、GPX4和SLC7A11蛋白的表达显著降低,LDH活性、MDA的含量、Bax及ACSL4蛋白的表达、Bax/Bcl-2的比值和Fe;的含量显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,白藜芦醇组H9c2细胞活性、SOD的活性、HSF1、Bcl-2、GPX4和SLC7A11蛋白的表达显著增加,LDH活性、MDA的含量、Bax及ACSL4蛋白的表达、Bax/Bcl-2的比值和Fe2+的含量显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.01)。si-HSF1组干预后H9c2细胞活性、SOD的活性、HSF1、Bcl-2、GPX4和SLC7A11蛋白的表达显著降低,LDH活性、MDA的含量、Bax及ACSL4蛋白的表达、Bax/Bcl-2的比值和Fe2+的含量显著增加,与模型组比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:白藜芦醇通过上调HSF1的表达进而抑制细胞铁死亡改善高糖诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 白藜芦醇 糖尿病心肌病 心肌损伤 hsf1 铁死亡
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槟榔花中酚类物质对HSF细胞氧化损伤的保护作用 被引量：3
15
作者 宋菲 王齐齐 +3 位作者 王挥 黄玉林 陈卫军 赵松林 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2015年第23期10-13,46,共5页
为了探讨槟榔花中3种主要酚类物质（表儿茶素、没食子酸、香豆酸）对人皮肤成纤维细胞（HSF）氧化损伤的保护作用,以H_2O_2（150μmol/L）处理HSF细胞24 h,建立氧化损伤模型,MTT法测定细胞存活率分光光度法检测细胞内总抗氧化能力和线... 为了探讨槟榔花中3种主要酚类物质（表儿茶素、没食子酸、香豆酸）对人皮肤成纤维细胞（HSF）氧化损伤的保护作用,以H_2O_2（150μmol/L）处理HSF细胞24 h,建立氧化损伤模型,MTT法测定细胞存活率分光光度法检测细胞内总抗氧化能力和线粒体膜肿胀度,DCFH-DA染色法测定细胞内活性氧的含量。结果表明表儿茶素和没食子酸均能改善H_2O_2引起的HSF细胞的氧化损伤而香豆酸却没有保护作用。与H_2O_2模型组相比表儿茶素和没食子酸均能提高氧化损伤细胞的存活率,并将细胞内总抗氧化能力提高了4.73%-31.66%,细胞内活性氧和线粒体膜肿胀度也明显降低。表明槟榔花中2种主要的酚类物质表儿茶素和没食子酸对HSF细胞氧化损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 槟榔花 酚类物质 hsf细胞 氧化损伤
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拟南芥热激因子HSF1的表达与纯化 被引量：8
16
作者 郭丽红 王定康 +2 位作者 袁燕 刘开庆 张乐民 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第24期11444-11445,共2页
[目的]表达和纯化拟南芥热激因子HSF1。[方法]以构建的能表达热激因子HSF1的大肠杆菌Escherichia coliM15(pQE32/His6-HSF1,pREP4)为材料,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达HSF1,再通过镍亲和层析纯化表达的HSF1,通过变性的聚... [目的]表达和纯化拟南芥热激因子HSF1。[方法]以构建的能表达热激因子HSF1的大肠杆菌Escherichia coliM15(pQE32/His6-HSF1,pREP4)为材料,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达HSF1,再通过镍亲和层析纯化表达的HSF1,通过变性的聚丙酰胺(SDS-PAGE)电泳分析表达蛋白和纯化蛋白。[结果]试验获得了表达的HSF1,并且进一步获得了纯化的HSF1。[结论]该研究为探讨拟南芥HSF1在基因组的结合位点提供了试验材料,为全面认识HSF1作用机理和生理功能奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥热激因子hsf1 表达 纯化
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HSF1与XAF1基因在胃肠肿瘤中表达的研究 被引量：4
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作者 李霆 陈村龙 +3 位作者 王继德 崔生达 崔丹瑜 郭文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期487-490,共4页
目的探讨X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)与热休克转录因子1(HSF1)在胃肠癌中的表达情况及其相互关系。方法应用免疫印迹分析法检测胃癌、大肠癌组织以及胃肠道肿瘤细胞株中的XAF1及HSF1蛋白表达;用含有HSF1的真核表达载体转染... 目的探讨X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)与热休克转录因子1(HSF1)在胃肠癌中的表达情况及其相互关系。方法应用免疫印迹分析法检测胃癌、大肠癌组织以及胃肠道肿瘤细胞株中的XAF1及HSF1蛋白表达;用含有HSF1的真核表达载体转染胃肠道肿瘤细胞株或用RNA干扰的方法上调或下调HSF1表达,同步检测对XAF1表达的影响;用应激原(stressstimuli)刺激诱导HSF1表达,观察对XAF1表达的作用。结果在胃肠癌组织中HSF1的表达高于正常组织;在胃肠癌细胞株中XAF1与HSF1的表达呈负相关,应激刺激上调HSF1的同时下调XAF1表达。结论胃肠道肿瘤细胞高表达HSF1,其结果是抑制XAF1表达,这种机制应该是XAF1在(胃肠道)肿瘤细胞中低表达并导致肿瘤细胞凋亡缺失的原因之一。 展开更多
关键词 hsf1 XAF1 胃肠道肿瘤 基因表达
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木薯MeHSF7基因克隆及表达分析 被引量：2
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作者 曾坚 廖凤凤 +1 位作者 吴春来 胡伟 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1256-1264,共9页
【目的】克隆木薯热激转录因子(HSF)基因MeHSF7并分析其在抗逆响应和采后生理性变质(PPD)过程中的表达情况,为研究MeHSF7基因在响应干旱胁迫及延缓生理性变质的调控机制提供理论参考。【方法】通过同源克隆从木薯叶片克隆MeHSF7基因,对... 【目的】克隆木薯热激转录因子(HSF)基因MeHSF7并分析其在抗逆响应和采后生理性变质(PPD)过程中的表达情况,为研究MeHSF7基因在响应干旱胁迫及延缓生理性变质的调控机制提供理论参考。【方法】通过同源克隆从木薯叶片克隆MeHSF7基因,对其生物信息学和组织表达特性进行分析,并明确其在干旱和脱落酸(ABA)处理下及PPD过程中的表达模式。【结果】克隆获得的MeHSF7基因开放阅读框(ORF)为1206 bp,编码401个氨基酸残基,与参考序列(Manes.02G087400.1)仅存在2个碱基差异,位于第2染色体上,含有1个内含子和2个外显子。MeHSF7蛋白理论分子量46.1 kD,理论等电点(pI)5.95,为不稳定蛋白,定位于细胞核,无跨膜区域,含有HSF蛋白的保守结构域DBD(DNA结合功能域)、HR-A Core和HR-B Core,属于HSFA亚家族,与橡胶树和麻疯树HSF蛋白的氨基酸序列同源性最高,分别为79.20%和64.95%,在系统发育进化树上与橡胶树HSF蛋白聚在同一小分支,表明二者亲缘关系较近。MeHSF7基因在不同组织中的表达量均较低,但不同组织间存在明显差异,在松散性胚性愈伤组织、分化胚组织、须根和根顶端分生组织中的表达量相对较高,在叶柄中的表达水平最低。MeHSF7基因启动子区域含有ABA响应元件(ABRE)、干旱诱导元件(MBS)和光响应元件(ACE、Box 4)等。干旱处理下,MeHSF7基因表达量随处理时间的增加整体上呈升高趋势,在处理7 d后达峰值;在ABA处理下,处理5和7 d后MeHSF7基因表达量较处理0和3 d后明显上调,尤其在处理5 d后达峰值,表明MeHSF7基因表达受干旱和ABA处理的诱导。在木薯块根的PPD过程中,MeHSF7基因表达量随暗培养时间的增加而升高,处理6、12和48 h的表达量分别是处理0 h的2.1、2.2和3.2倍。【结论】MeHSF7基因可能在转录水平通过依赖于ABA信号通路的途径响应干旱胁迫及木薯块根的氧化胁迫,可作为候选基因用于研究其在木薯抗逆和采后储存中的调控功能。 展开更多
关键词 木薯 热激转录因子(hsf) Mehsf7基因 克隆 干旱胁迫 采后生理性变质(PPD) 表达分析
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HSF2 mRNA在热应激和大剂量11酸睾酮诱导恒河猴生精细胞凋亡中的表达变化 被引量：4
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作者 周新昌 胡召元 +1 位作者 邹如金 刘以训 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期648-653,共6页
为了探讨HSF2mRNA在热应激和超生理剂量睾酮诱导恒河猴生精细胞凋亡中的表达变化 ,我们建立了手术诱导单侧隐睾和注射大剂量 11酸睾酮 (TU)恒河猴动物模型 ,应用 3′末端标记分析 (TUNEL)和原位杂交方法 ,检测睾丸细胞的凋亡信号和HSF2... 为了探讨HSF2mRNA在热应激和超生理剂量睾酮诱导恒河猴生精细胞凋亡中的表达变化 ,我们建立了手术诱导单侧隐睾和注射大剂量 11酸睾酮 (TU)恒河猴动物模型 ,应用 3′末端标记分析 (TUNEL)和原位杂交方法 ,检测睾丸细胞的凋亡信号和HSF2的表达变化。TUNEL结果显示热应激和超生理剂量睾酮能够诱导生精细胞出现凋亡信号 ,它分别于处理后第 5天和第 30天达到最强 ,表明热应激和睾酮干扰精子发生可能是通过生精细胞凋亡的方式来实现的。HSF2mRNA水平在生精细胞凋亡早期 (凋亡信号达到最强以前 )略有降低 ,而在凋亡高峰期之后其表达急剧下降。Hsf2基因与我们以前研究的Hsp70 2基因的表达具有时间上的相关性 ,表明HSF2蛋白可能调控Hsp70 2基因的表达 ,而且HSF2可能通过多种方式影响精子的发生以及抑制生精细胞的凋亡。 展开更多
关键词 hsf2 MRNA 热应激 大剂量11酸睾酮 诱导 恒河猴 生精细胞凋亡 表达变化
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热休克基因转录的调节:热休克转录因子(HSF)的结构与功能 被引量：13
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作者 张伟 王登高 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期198-200,共3页
关键词 4热应激反应 热休克转录因子 hsf 基因转录
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