HRP-SPA ELISA检测猪日本乙型脑炎病毒抗体的研究 被引量：2

1

作者 陈建明 张彦明 李晓成 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2002年第6期38-42,共5页

　将盐析法提纯的、用Hela细胞系增殖的猪日本乙型脑炎病毒JapaneseBencephalitis(JEV)抗原包被酶标板,以HRP-SPA作为第二抗体,建立了检测JEV抗体的ELISA试验方法。结果表明,抗原的最适包被浓度为1∶800,待检血清最适稀释度为1∶50,HRP-... 　将盐析法提纯的、用Hela细胞系增殖的猪日本乙型脑炎病毒JapaneseBencephalitis(JEV)抗原包被酶标板,以HRP-SPA作为第二抗体,建立了检测JEV抗体的ELISA试验方法。结果表明,抗原的最适包被浓度为1∶800,待检血清最适稀释度为1∶50,HRP-SPA最佳工作浓度为1∶1000,各步反应时间确定为5min。交叉试验、阻断试验、重复性试验、敏感性试验证明本实验特异性强,重复性好,敏感性高。包被的病毒抗原经甲醛固定15min即可进行正式试验。确定其测定标准为:S/N≥14.81为阳性,S/N<12.53为阴性,12.53≤S/N<14.81为可疑。 展开更多

关键词 hrp-spa ELISA 检测 猪 乙型脑炎病毒抗体 JEV抗体 兽医诊断

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用HRP-SPA组织化学染色法检测弓形体病实验感染猪器官内病原体的分布 被引量：1

2

作者 魏忠华 张栖鹏 《中国兽医科技》 CSCD 1993年第6期43-44,共2页

用3株弓形体对商品猪人工感染发病,扑杀后取脏器组织,按常 规作冰冻切片和印压片,用辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌蛋白A(HRP-SPA)染色,在低倍显微镜下检查。结果:在132份材料中,制冰冻切片78份,其阳性率100％;54份材料作印压片,其阳性率... 用3株弓形体对商品猪人工感染发病,扑杀后取脏器组织,按常 规作冰冻切片和印压片,用辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌蛋白A(HRP-SPA)染色,在低倍显微镜下检查。结果:在132份材料中,制冰冻切片78份,其阳性率100％;54份材料作印压片,其阳性率96.3％。在冰冻切片的9种组织中,虫体分布以肝脏和胰脏为最多,脾脏、肺脏、肺门淋巴结、肾脏和心肌次之,膈肌和肠系膜淋巴结最少。制印压片的6种组织中,虫体分布也以肝脏最多,肠系膜淋巴结最少。此法有较高的敏感性和特异性,适用于商品猪屠宰加工的快速检测。 展开更多

关键词 猪病 弓形体病 检测 hrp-spa

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IFA技术和HRP-SPA组化法在狂犬病抗体检测中的应用

3

作者 何天来 黄金祥 +2 位作者 姜理平 郑治平 王振海 《浙江预防医学》 1991年第4期35-36,共2页

狂犬病是一种严重危害人民生命安全的传染病,一旦发病,几乎百分之百死亡。地鼠肾细胞狂犬病疫苗(下称肾苗)对狂犬病暴露者的保护作用是显著的,但并非完全,故对肾苗接种的免疫水平检测十分必要。姜兰清等在国内首次用酶标葡萄球菌A蛋白(... 狂犬病是一种严重危害人民生命安全的传染病,一旦发病,几乎百分之百死亡。地鼠肾细胞狂犬病疫苗(下称肾苗)对狂犬病暴露者的保护作用是显著的,但并非完全,故对肾苗接种的免疫水平检测十分必要。姜兰清等在国内首次用酶标葡萄球菌A蛋白(HRP—SPA)组化法作肾苗免疫后抗体测定。 展开更多

关键词 狂犬病疫苗 hrp-spa IFA 免疫水平 组化 兰清 抗体测定 抗原片 鼠肾 人民生命安全

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酶标SpA法在检测小鼠同系抗独特型中的应用 被引量：1

4

作者 王莉 富宁 杨贵贞 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期196-198,共3页

本研究用辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌蛋白A(HRP-SpA)检测同系小鼠抗独特型抗体。主要步骤为:用以低亲合力结合SpA的小鼠免疫球蛋白如IgG1包被,加入待检抗独特型抗体,最后以HRP-SpA显示其反应。本法简便、灵敏、特异性好,而且可用于对... 本研究用辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌蛋白A(HRP-SpA)检测同系小鼠抗独特型抗体。主要步骤为:用以低亲合力结合SpA的小鼠免疫球蛋白如IgG1包被,加入待检抗独特型抗体,最后以HRP-SpA显示其反应。本法简便、灵敏、特异性好,而且可用于对抗原结合部位特异性与非特异性独特型的鉴别。 展开更多

关键词 hrp-spa 抗独特型

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简易过碘酸钠法制备HRP—SpA试剂及其应用

5

作者 孙万邦 董阳达 +1 位作者 张忆雄 代国祥 《合肥医学院学报》 1989年第1期57-58,51,共3页

目前应用较多的辣根过氧化物酶标记SpA 试剂(HRP-SpA),其制备较多用过碘酸钠法,由于经典方法易使 HRP 的自身结合在 pH8.0时 HRP 部分失活以及层析纯化较为繁琐等,近年来不少学者在方法上进行了改良,本文报告用简易过碘酸钠制备 HRP-SpA... 目前应用较多的辣根过氧化物酶标记SpA 试剂(HRP-SpA),其制备较多用过碘酸钠法,由于经典方法易使 HRP 的自身结合在 pH8.0时 HRP 部分失活以及层析纯化较为繁琐等,近年来不少学者在方法上进行了改良,本文报告用简易过碘酸钠制备 HRP-SpA 菌体试剂,并应用于流行性出血热 IgG 抗体检测和观察人血清。 展开更多

关键词 过碘酸钠法 hrp-spa 试剂制备

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用虫体抗原进行斑点酶联免疫吸附试验检测弓形虫抗体的研究 被引量：10

6

作者 万明明 陈艳 毛克强 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1991年第5期18-20,共3页

应用完整弓形虫速殖子为抗原,以HRP-SPA代替酶标第二抗体进行Dot ELISA检测58例兔血清中弓形虫抗体,同时用速殖子可溶性抗原检测比较。两种抗原检测结果一致。阳性反应最高稀释度为1:25600。本法检测阿米巴阳性兔血清、感染球虫的兔血清... 应用完整弓形虫速殖子为抗原,以HRP-SPA代替酶标第二抗体进行Dot ELISA检测58例兔血清中弓形虫抗体,同时用速殖子可溶性抗原检测比较。两种抗原检测结果一致。阳性反应最高稀释度为1:25600。本法检测阿米巴阳性兔血清、感染球虫的兔血清,血吸虫阳性兔血清无交叉反应。阻抑试验显示高抗体滴度的阳性兔血清经抗原吸收后,反应明显抑制。实验表明本法特异性强、敏感性高、重复性好抗原制备简单不需特殊设备。为人畜弓形虫病临床诊断、流行病学现场调查、单克隆抗体杂交瘤细胞的筛选提供了一种较理想的简易可行的方法。 展开更多

关键词 弓形体 抗体 ELISA

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快速ELISA法诊断犬内脏利什曼病及应用价值的研究 被引量：1

7

作者 王秀珍 黎世涛 +3 位作者 尹治成 周肇西 管立人 许永湘 《地方病通报》 1991年第2期51-54,共4页

本研究建立了一种用PVC薄膜作载体、将前鞭毛体可溶性抗原包被在PVC凹板上,采用HRP-SPA作第二抗体及无毒的TMB作底物的快速ELISA方法,该法简便、经济、实用。与经典ELISA平行对照检测24份骨髓穿刺证实的内脏利什曼病犬血清,结果:快速EL... 本研究建立了一种用PVC薄膜作载体、将前鞭毛体可溶性抗原包被在PVC凹板上,采用HRP-SPA作第二抗体及无毒的TMB作底物的快速ELISA方法,该法简便、经济、实用。与经典ELISA平行对照检测24份骨髓穿刺证实的内脏利什曼病犬血清,结果:快速ELISA法阳性符合率为100％(24/24),而经典ELISA法为95.83％(23/24);对47份采自非流行区的正常犬血清,两法均仅有1例呈假阳性反应,占2.13％;用快速ELISA法检测实验感染了旋毛虫、肺吸虫、钩虫、弓形虫等犬血清共26份,均未见交叉反应。用该法又调查了四川汶川县黑热病重流行区的124份犬血清,同时进行骨髓涂片检查,结果快速ELISA查出阳性犬39只,占31.45％(39/124),骨髓涂片查见利什曼原虫者有24只,占19.35％(24/124),这24只犬血清对快速ELISA法均呈阳性反应。 展开更多

关键词 利什曼病 ELISA 诊断

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旋毛虫肌幼虫排泄—分泌抗原诊断猪旋毛虫病的研究与应用 被引量：14

8

作者 许威光 袁文甫 +2 位作者 王家祥 周光悌 马增全 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1989年第4期133-139,共7页

应用“ES”抗原和酶复合物对猪旋毛虫病进行了ELISA的诊断研究,其抗原是对Gamble(1984)的肌幼虫培养方法经过改进研制而成的.应用这种抗原和免疫制剂建立起来的酶联免疫吸附试验诊断方法,具有灵敏度高、特异性强、操作简便、容易判断等... 应用“ES”抗原和酶复合物对猪旋毛虫病进行了ELISA的诊断研究,其抗原是对Gamble(1984)的肌幼虫培养方法经过改进研制而成的.应用这种抗原和免疫制剂建立起来的酶联免疫吸附试验诊断方法,具有灵敏度高、特异性强、操作简便、容易判断等优点,改变了我国过去应用粗制虫体抗原诊断猪旋毛虫病的状况.通过对71头人工感染旋毛虫病猪血清的诊断,可获得100%的阳性检出率.对旋毛虫病流行区120万头猪的检测证明,患猪检出率达93—95%.对250头ELISA阳性猪与宰后检查对照,其诊断符合率为98%左右. 展开更多

关键词 旋毛虫病 抗原 猪

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短膜虫酶联葡萄球菌A蛋白技术检测抗双链DNA...

9

作者 张晓军 王秉鹤 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第5期226-228,共3页

关键词 红斑狼疮 hrp-spa DNA 抗体

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应用HRP—SPA染色法快速检测出口分割肉沙门氏菌

10

作者 保迅 梁余 《肉品卫生》 1990年第9期13-15,共3页

关键词 分割肉 沙门氏菌 hrp-spa 染色法

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辣根过氧化物酶标葡萄球菌A蛋白组化法快速诊断流行性出血热

11

作者 钟性吾 李士雄 《湖南微生物学通讯》 1989年第1期17-18,共2页

关键词 流行性 出血热 hrp-spa 间接组化法

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人胚胎胰腺的组织发生

12

作者 金维哲 李凤华 +5 位作者 张亚茹 成启威 刘月霞 王景霞 孙桂荣 王大江 《佳木斯医学院学报》 1992年第3期15-17,共3页

本文应用45例5—38周龄人胚胎和1例成人胰腺研究人胰腺发生。材料用Bouin固定,用EH、Gomori醛品红和SPA—HRP免疫组织化学法染色,并用立体计量术做定量分析。实验表明,初级胰岛第3个月出现,第6—7个月大部分退化;次级胰岛从第4个月开始... 本文应用45例5—38周龄人胚胎和1例成人胰腺研究人胰腺发生。材料用Bouin固定,用EH、Gomori醛品红和SPA—HRP免疫组织化学法染色,并用立体计量术做定量分析。实验表明,初级胰岛第3个月出现,第6—7个月大部分退化;次级胰岛从第4个月开始出现。第7个月胰腺做为同种异体移植供体较理想。 展开更多

关键词 组织发生 胚胎 胰腺

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用于小鼠及兔源IgG的通用型二抗PA/G-HRP融合蛋白的真核表达及活性检测

13

作者 王鹏举 王依依 +5 位作者 张仪婷 杨甜 宋源 赵晶 阎博 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期590-595,共6页

目的制备可与小鼠及兔来源IgG结合的通用型二抗,并用于多种免疫检测实验。方法全基因合成金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)、链球菌蛋白G(SPG)与辣根过氧化物酶(HRP)融合基因片段,定向克隆至真核表达载体pcDNATM3.1骨架中,瞬时转染入人胚肾HEK2... 目的制备可与小鼠及兔来源IgG结合的通用型二抗,并用于多种免疫检测实验。方法全基因合成金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)、链球菌蛋白G(SPG)与辣根过氧化物酶(HRP)融合基因片段,定向克隆至真核表达载体pcDNATM3.1骨架中,瞬时转染入人胚肾HEK293F细胞进行表达。通过SDS-PAGE、Western blot法鉴定融合蛋白表达情况,通过Western blot法、ELISA、免疫组织化学实验验证其应用。结果酶切鉴定和基因测序显示pPA-HRP、pPG-HRP和pPA/G-HRP表达质粒构建成功。考马斯亮蓝染色和Western blot法结果表明,融合蛋白PA-HRP、PG-HRP和PA/G-HRP在HEK293F细胞中成功表达。Western blot法、ELISA和免疫组织化学结果显示,三种融合蛋白均能识别结合小鼠及兔来源的IgG,其中PA/G-HRP表现出更为灵敏的结合活性。结论成功制备了具有高亲和力、通用型二抗功能的融合蛋白,PA/G-HRP能够替代传统抗小鼠IgG及抗兔IgG,可用于多种免疫检测实验。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA) 链球菌蛋白G(SPG) 辣根过氧化物酶(HRP) 融合蛋白 真核表达

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猪瘟免疫程序的研究 被引量：7

14

作者 刘劲松 房德兴 +3 位作者 周宗安 顾志香 王元伦 肖元庭 《兽医大学学报》 CSCD 1991年第3期215-219,共5页

采用HRP—SPA—ELISA方法,在同一猪场相同的饲养条件下,对5种常用猪瘟免疫程序免疫后不同时间的猪瘟免疫抗体水平进行了研究.结果表明:超前免疫,1月龄1次免疫,2月龄1次免疫和1月龄、2月龄2次免疫猪均有良好的免疫应答,90日龄检测80倍稀... 采用HRP—SPA—ELISA方法,在同一猪场相同的饲养条件下,对5种常用猪瘟免疫程序免疫后不同时间的猪瘟免疫抗体水平进行了研究.结果表明:超前免疫,1月龄1次免疫,2月龄1次免疫和1月龄、2月龄2次免疫猪均有良好的免疫应答,90日龄检测80倍稀释血清的ELISA OD值均在0.30以上(0.31～0.48),120～240日龄血清ELISA抗体一直保持在较高水乎(OD值0.42～0.66);而超前、2月龄2次免疫猪的免疫应答明显低于前4种免疫程序,120日龄时的ELISA OD值仅为0.25,此后上升也较缓慢,至240日龄时才达0.43.根据本研究结果,综合过去的报道,建议在“猪瘟控制地区”采用1月龄1次免疫或2月龄1次免疫,在“猪瘟未控制地区”采用1月龄1次免疫或超前免疫. 展开更多

关键词 猪瘟 免疫 程序 抗体 猪

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应用HRP—SPA法检测人群疟疾抗体的报告

15

作者 沈镜生 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 1990年第1期41-42,共2页

本文介绍了应用HRP—SPA法在广州口岸部分人群作疟疾抗体血清学调查,共采集702份血清标本,检出阳性数8份,调查结果表明,可以应用HRP—SPA法了解人群疟疾抗体水平及调查输入性病例。

关键词 hrp-spa法 疟疾抗体 血清学调查

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