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辣根过氧化物酶同功酶C基因克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量：5
1
作者 蒋太交 吉鑫松 +3 位作者 黄艳红 洪民 吴祥甫 袁中一 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期392-397,共6页
无论从应用还是从理论研究角度，辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）是一种非常重要的酶．ＨＲＰ基因克隆与表达将有利于更深入研究ＨＲＰ的结构与功能．利用反转录ＰＣＲ从天然植物辣根中分离和克隆编码辣根过氧化物酶同功酶Ｃ（ＨＲＰ－Ｃ）一... 无论从应用还是从理论研究角度，辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）是一种非常重要的酶．ＨＲＰ基因克隆与表达将有利于更深入研究ＨＲＰ的结构与功能．利用反转录ＰＣＲ从天然植物辣根中分离和克隆编码辣根过氧化物酶同功酶Ｃ（ＨＲＰ－Ｃ）一个ｃＤＮＡ，并测定其序列．结果发现，从基因推导出的氨基酸序列与Ｗｅｌｉｎｄｅｒ报道的辣根过氧化物酶序列有９０．６％的同源性．将该基因连接到表达载体ｐＥＴ－２４ｂ上，利用抗ＨＲＰ多克隆抗体进行Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，检测有少量目标产物表达．在诱导表达过程中。 展开更多
关键词 辣根过氧化物酶 克隆 表达 hrp-c
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基于纳米二氧化钛为载体的新型荧光免疫流动体系测定补体3
2
作者 曹轩 龚福春 +2 位作者 胡舜钦 沈国励 俞汝勤 《化学传感器》 CAS 2004年第1期11-15,共5页
研制了一种新的可更新荧光免疫流动体系用于补体3(C_3)的测定。用纳米TiO_2颗粒为固定抗体的载体,辣根过氧化物酶标记C_3(HRP-C_3),以HRP-C_3与待测C_3发生竞争免疫反应。辣根过氧化物酶(HRP)催化荧光底物3,3’5,5’-四甲基联苯胺(TMB)... 研制了一种新的可更新荧光免疫流动体系用于补体3(C_3)的测定。用纳米TiO_2颗粒为固定抗体的载体,辣根过氧化物酶标记C_3(HRP-C_3),以HRP-C_3与待测C_3发生竞争免疫反应。辣根过氧化物酶(HRP)催化荧光底物3,3’5,5’-四甲基联苯胺(TMB)转化为无荧光物质,待测C_3的浓度可由底物溶液的荧光降低值间接测定。通过简单的处理后,固定抗体的载体表面可以得到有效的再生。荧光响应与C_3补体在6.5μg/L到75 μg/L之间呈准线性关系。该方法检测限较低,重复性好,可满足临床检测的要求。 展开更多
关键词 荧光免疫流动体系 纳米二氧化钛 四甲基联苯胺 hrp-c3 补体第三成分 测定
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基于有机溶剂中的酶促反应测定血清中维生素C含量 被引量：2
3
作者 王燕 《山东科学》 CAS 2005年第4期55-57,共3页
研究了有机溶剂中辣根过氧化物酶催化维生素C的氧化反应的特性。实验发现在异丙醇-水互溶体系中,辣根过氧化物酶催化过氧化氢氧化维生素C的反应速度加快,测定灵敏度提高,基于此反应,用紫外分光光度法测定了人血清中维生素C的含量。
关键词 辣根过氧化物酶 维生素C测定 异丙醇-水互溶体系
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不同强度光照对母鸡离顶盖通路c-fos基因表达的影响
4
作者 胥佳利 胡满 +2 位作者 李慧超 刘春凌 张利卫 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期91-94,共4页
为进一步探究光照对母鸡生产性能影响的神经调节机制,采用神经标记和免疫组化技术相结合的方法,对不同强度光照对母鸡离顶盖通路c-fos基因表达的影响进行了观察研究。将120日龄母鸡右眼遮光5 d后向丘脑圆核引入微量30%HRP,48 h后解除遮... 为进一步探究光照对母鸡生产性能影响的神经调节机制,采用神经标记和免疫组化技术相结合的方法,对不同强度光照对母鸡离顶盖通路c-fos基因表达的影响进行了观察研究。将120日龄母鸡右眼遮光5 d后向丘脑圆核引入微量30%HRP,48 h后解除遮光并给予不同强度的光照刺激1~1.5 h,暗适应1.5 h后灌流固定,取脑制作连续冰冻切片,用TMB法检测离顶盖通路HRP逆行标记神经细胞,通过Fos蛋白免疫组化方法检测c-fos基因在这些部位的表达。结果显示,母鸡离顶盖通路各核团对不同强度的光刺激有不同的反应,SGC层和ROT核对30 lx光照最为敏感,而SP/IPS核对40 lx光照反应较为明显。 展开更多
关键词 HRP逆行标记 光照刺激 C-FOS基因 离顶盖通路 母鸡
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利用腹壁反射建立人工膀胱反射弧的辣根过氧化物酶逆行示踪研究 被引量：2
5
作者 王金武 侯春林 +3 位作者 李继峰 陈爱民 张伟 王诗波 《中华创伤骨科杂志》 CAS CSCD 2004年第4期414-417,共4页
目的研究利用腹壁反射可建立“腹壁反射-脊髓中枢-膀胱”这一新的神经传导通路,通过再生到盆神经的躯体运动神经纤维可实现膀胱的神经再支配,探讨通过刺激下腹壁,该人工膀胱反射弧产生控制性排尿的神经形态学基础。方法选用6只SD大鼠,... 目的研究利用腹壁反射可建立“腹壁反射-脊髓中枢-膀胱”这一新的神经传导通路,通过再生到盆神经的躯体运动神经纤维可实现膀胱的神经再支配,探讨通过刺激下腹壁,该人工膀胱反射弧产生控制性排尿的神经形态学基础。方法选用6只SD大鼠,右侧为实验侧,左侧为对照侧,右侧T13前根近端与右侧S2前根远端通过一段自体移植神经在硬膜囊内行显微缝合,保持T13后根完整,经一段时间轴突再生后,建立“腹壁反射-脊髓中枢-膀胱”这一新的人工膀胱反射弧。神经缝合术后8个月,应用辣根过氧化物酶(peroxidasehorseradish,HRP)逆行追踪标记技术,用微量注射器在双侧膀胱壁上各注射30%HRP5μl,动物存活60h后经升主动脉灌注杀死。切取T11～L1及L4～S4节段脊髓,冰冻切片后利用TMB法进行呈色反应,观察切片内HRP标记细胞形态及分布情况。结果大鼠膀胱平滑肌注射HRP后,实验侧T13脊髓前角及双侧L6～S4节段脊髓中间带外侧核区有HRP标记阳性细胞,而对照侧T13脊髓前角未发现HRP标记细胞。结论腰骶髓截瘫平面以上的躯体运动神经轴突可长入膀胱平滑肌内副交感神经节细胞,并由此传递躯体反射冲动到膀胱平滑肌。利用“腹壁反射-脊髓中枢-膀胱”这一人工反射弧,对实现SCI患者膀胱控制性排尿功能,有一定临床意义。 展开更多
关键词 神经形态学 人工反射弧 脊髓损伤 人工膀胱 副交感神经 辣根过氧化物酶 腰骶髓损伤
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