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绿色荧光蛋白转基因小鼠用作hprt基因突变试验动物模型的研究 被引量：1
1
作者 李永红 杨录军 +2 位作者 刘文斌 曹佳 刘晋祎 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2013年第4期306-310,共5页
目的:探讨绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转基因小鼠用作hprt基因突变试验动物模型的可能性。方法:用乙基亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱导GFP转基因小鼠和普通小鼠基因突变,比较诱导后两种小鼠的嗜多染红细胞微... 目的:探讨绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转基因小鼠用作hprt基因突变试验动物模型的可能性。方法:用乙基亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱导GFP转基因小鼠和普通小鼠基因突变,比较诱导后两种小鼠的嗜多染红细胞微核率变化情况。再观察GFP小鼠细胞克隆对GFP转基因小鼠hprt基因的DNA和mRNA序列进行验证,并对GFP转基因小鼠hprt突变克隆外显子1和外显子9进行了双向测序。结果:ENU诱导后GFP转基因小鼠和普通小鼠的微核率变化趋势相同。GFP转基因小鼠的微孔培养物比普通小鼠的微孔培养物易于确认,且降低了假阳性率和假阴性率。GFP转基因小鼠的hprt基因是完整的,与普通小鼠相比未见明显差异。GFP转基因小鼠hprt基因6个突变克隆外显子1的序列均与野生型小鼠细胞的序列一致,3个突变克隆外显子9的序列中有2个发生了A∶T→T∶A颠换。结论:ENU诱导的GFP转基因小鼠突变模型良好,GFP转基因小鼠可用作小鼠淋巴细胞hprt基因突变试验的动物模型,准确性高且试验难度低。 展开更多
关键词 GFP转基因小鼠 却—基因突变试验 动物模型 遗传毒性
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Ames试验与HPRT试验两种方法对6种氧化型染发剂的检测 被引量：1
2
作者 陈秀娟 李培宁 +5 位作者 江漪 吴剑辉 黄晓辉 杨云 吴谦 刘香梅 《癌变·畸变·突变》 CAS 2023年第1期57-62,共6页
目的:通过细菌回复突变试验(Ames试验)和体外哺乳动物细胞基因突变试验(HPRT试验)两种方法检测氧化型染发剂,并对其结果进行分析比较,探讨两种方法在检测氧化型染发剂致突变性中的应用。方法:Ames试验采用一组营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌... 目的:通过细菌回复突变试验(Ames试验)和体外哺乳动物细胞基因突变试验(HPRT试验)两种方法检测氧化型染发剂,并对其结果进行分析比较,探讨两种方法在检测氧化型染发剂致突变性中的应用。方法:Ames试验采用一组营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌检测6种氧化型染发剂。各受试物分别设4个可供分析的剂量组,剂量范围从312~10 000μg/皿,通过计算受试物回复突变菌落数,判定受试物的致突变性。HPRT试验采用体外培养的V79细胞,各受试物分别设4个可供分析的剂量组,剂量范围从4.88~5 000μg/mL,研究6种氧化型染发剂致细胞HPRT位点突变的频率,通过计算受试物引起的V79细胞的突变频率,判定其致突变性。结果:在Ames试验中,无论加与不加体外代谢活化系统,受试物在2 500~10 000μg/皿剂量范围均存在回变菌落数超过溶剂对照组两倍的情况,并有剂量-反应关系,表明Ames试验检测6种氧化型染发剂均为阳性结果。而在HPRT试验中,无论加与不加体外代谢活化系统,各受试物在>2 500μg/mL时具有明显毒性作用,在9.75~2 500μg/mL剂量范围细胞突变频率与阴性对照组比较,差异均无统计学意义,表明HPRT试验检测6种氧化型染发剂均为阴性结果。结论:由于氧化型染发剂有明显的细胞毒性,导致HPRT试验无法设计更高的剂量,从而无法反映受试物致突变性的真实水平。而Ames试验具有简单、快速、经济等优点,可作为检测氧化型染发剂致突变性的首选方法。 展开更多
关键词 AMES试验 回复突变 hprt试验 基因突变 氧化型染发剂
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2,4,4′-三氯联苯诱发微核和基因突变作用及其代谢酶依赖性 被引量：1
3
作者 金桂芳 蔡露 +2 位作者 张驰腾 姜浩 刘云岗 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期452-456,共5页
目的本课题组近年报道了非二噁英样多氯联苯化合物对哺乳动物细胞的致突变作用,且作用依赖于人细胞色素P450(CYP)2E1酶的代谢活化;本研究进一步探讨非二噁英样化合物2,4,4′-三氯联苯(PCB28)的致突变作用。方法采用CCK8法、微核实验和H... 目的本课题组近年报道了非二噁英样多氯联苯化合物对哺乳动物细胞的致突变作用,且作用依赖于人细胞色素P450(CYP)2E1酶的代谢活化;本研究进一步探讨非二噁英样化合物2,4,4′-三氯联苯(PCB28)的致突变作用。方法采用CCK8法、微核实验和Hprt致突变实验检测PCB28对中国仓鼠V79和重组表达人和硫酸基转移酶(SULT)1A1的V79衍生细胞(V79-hCYP2E1-hSULT1A1)的细胞毒性和遗传毒性,并利用酶抑制剂观察重组表达的酶对于受试物毒效应的影响。结果PCB28(5~40μmol/L)经12h染毒、12h恢复,对V79-Mz和V79-hCYP2E1-hSULT1A1细胞均无细胞毒作用,1-氨基苯并三唑(60μmol/L,CYP抑制剂)和五氯苯酚(10μmol/L,SULT1抑制剂)的与受试物同时暴露于V79-hCYP2E1-hSULT1A1细胞对细胞活力影响甚微。PCB28在5~20μmol/L对V79-Mz细胞没有诱发微核的作用,但对V79-hCYP2E1-hSUT1A1细胞则明显增加其微核细胞率(P<0.05),且具有浓度依赖效应;此作用可被1-氨基苯并三唑明显降低,而被五氯苯酚明显增强。PCB28(10~40μmol/L)对V79-Mz细胞Hprt基因突变频率无影响,对V79-hCYP2E1-hSUT1A1细胞则诱发基因突变频率增加(P<0.05),其作用呈浓度相关性。结论PCB28可能经CYP2E1酶活化为致突变性代谢物,后者可由人SULT1A1酶代谢减毒;同其他非二噁英样多氯联苯类似,PCB28可能是一个由人CYP2E1酶活化的前致突变物。 展开更多
关键词 中国仓鼠V79细胞系 细胞色素P4502E1 2 4 4-三氯联苯 微核实验 hprt基因突变试验
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卷烟烟气抽提物对细胞遗传毒性及茶多酚干预作用 被引量：6
4
作者 黄波 龙颖 李东阳 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期823-825,共3页
目的探讨卷烟烟气抽提物(CSE)对支气管上皮细胞(BEAS-2B)遗传毒性及茶多酚干预作用。方法以高、中、低3个浓度对支气管上皮细胞进行染毒,同时设立茶多酚干预组和空白对照组;采用彗星实验及γ-H2AX蛋白表达检测DNA损伤,以微核实验检测染... 目的探讨卷烟烟气抽提物(CSE)对支气管上皮细胞(BEAS-2B)遗传毒性及茶多酚干预作用。方法以高、中、低3个浓度对支气管上皮细胞进行染毒,同时设立茶多酚干预组和空白对照组;采用彗星实验及γ-H2AX蛋白表达检测DNA损伤,以微核实验检测染色体损伤,并检测HPRT基因突变率。结果高剂量染毒组BE-AS-2B细胞彗星细胞数(130.5±1.6)个、彗星尾长(134.33±3.56)μm、尾部面积(7 798.43±43.45)μm2,均明显高于空白对照组(P<0.05),并呈剂量—效应关系;CSE低、中、高剂量染毒组BEAS-2B细胞中微核细胞分别为(22.4±3.2)、(38.6±1.8)、(79.6±2.4)个,均明显多于空白对照组的(6.2±1.5)个(P<0.05);CSC中、高剂量染毒组BEAS-2B细胞HPRT基因突变率分别为(0.802±0.040)‰、(1.058±0.002)‰,均明显高于空白对照组的(0.330±0.002)‰(P<0.05)。茶多酚对CSE诱发的DNA链断裂及微核细胞增多有明显抑制作用,并可有效降低HPRT基因突变率。结论 CSE具有细胞遗传毒性,茶多酚对其遗传毒性具有干预作用。 展开更多
关键词 卷烟烟气抽提物(CSE) 支气管上皮细胞(BEAS-2B) 彗星试验 茶多酚 微核 hprt基因
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汞作业所致工人的遗传效应 被引量：4
5
作者 过伟军 赵小颖 +5 位作者 李苏英 陈春华 陈志健 楼建林 郑伟 邓红平 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期84-86,共3页
目的探讨汞作业所致工人的遗传效应。方法选择荧光灯生产厂汞作业工人20名为接触组，无汞接触的其他从业人员20名为对照组，取外周血淋巴细胞，通过微核试验、彗星试验、hprt和TCR基因突变试验进行检测。结果接触组平均微核率（MNR）、... 目的探讨汞作业所致工人的遗传效应。方法选择荧光灯生产厂汞作业工人20名为接触组，无汞接触的其他从业人员20名为对照组，取外周血淋巴细胞，通过微核试验、彗星试验、hprt和TCR基因突变试验进行检测。结果接触组平均微核率（MNR）、平均微核细胞率（MCR）分别为（5．90±0．91）‰和（5130±0．81）‰，对照组的MNR和MCR分别为（1．50±0．47）‰和（1．30±0．31）‰，两组差异有统计学意义（P〈0．01）。接触组和对照组的平均尾长（MTL）分别为（3．16±0．31）和（0．99±0．07）μm，两组平均尾相（MTM）分别为1．63±0．22和0．39±0．03，差异有统计学意义（P〈0．01）。接触组的hprt和TCR平均突变率与对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论汞作业可致工人不良的遗传效应。 展开更多
关键词 汞 微核试验 彗星试验 hprt 突变 TCR基因 突变
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